胃癌组织中Vav3表达与肿瘤侵袭转移的关系及临床意义研究

目的探讨胃癌组织中Vav3表达与肿瘤侵袭转移的关系及其临床意义。方法选取2014年5月—2015年5月于河北医科大学第四医院外三科住院并行肿瘤切除的胃癌患者92例。收集患者胃癌组织及癌旁正常组织（距肿瘤边缘〉3 cm,镜检无癌细胞）的石蜡标本,采用免疫组化法检测Vav3、Rel A、增殖细胞核抗原（PCNA）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）在胃癌组织及癌旁正常组织中的表达;分析胃癌组织中Vav3表达强度与临床病理特征的关系;Vav3、Rel A、PCNA、MMP-2表达之间的关系采用Spearman秩相关分析。结果胃癌组织中Vav3的阳性表达率为78.3%（72/92）,高于癌旁正常组织的40.2%（37/92）（χ^2=27.572,P〈0.001）;胃癌组织中Rel A的阳性表达率为88.0%（81/92）,高于癌旁正常组织的52.2%（48/92）（χ^2=28.242,P〈0.001）;胃癌组织中PCNA的阳性表达率为73.9%（68/92）,高于癌旁正常组织的47.8%（44/92）（χ^2=13.143,P〈0.001）;胃癌组中MMP-2的阳性表达率为69.6%（64/92）,高于癌旁正常组织的48.9%（45/92）（χ^2=8.125,P=0.004）。Vav3强表达患者性别、年龄、浸润深度、远处转移情况与Vav3弱表达比较,差异无统计学意义（P〉0.05）;Vav3强表达患者肿瘤分化程度、肿瘤直径、淋巴结转移程度与Vav3弱表达比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。Vav3表达与Rel A、PCNA、MMP-2表达均呈正相关（r_s=0.338,P〈0.001;r_s=0.225,P=0.031;r_s=0.267,P=0.010）;Rel A表达与PCNA表达呈正相关（r_s=0.336,P=0.001）;Rel A表达与MMP-2表达无直线相关关系（r_s=0.176,P=0.094）;PCNA表达与MMP-2表达无直线相关关系（r_s=0.188,P=0.072）。结论胃癌组织中Vav3存在过表达现象,Vav3表达增强与肿瘤转移及进展有关。Vav3可能通过调节Rel A、PCNA、MMP-2表达而参与胃癌侵袭转移。

抑制Vav3基因表达对胃癌细胞凋亡抑制蛋白及肿瘤多药耐药性的影响

目的探讨Vav3基因在胃癌多药耐药性(MDR)中的作用及可能机制。方法采用荧光定量反转录聚合酶链(QRT-PCR)及蛋白印迹技术检测Vav3在胃癌、癌旁组织及人胃癌细胞株SGC7901、胃上皮细胞GES-1中的表达;合成针对Vav3的siRNA,并转染SGC7901;MTT法检测氟尿嘧啶(5-FU)、奥沙利铂(L-OHP)对转染前后胃癌细胞的抑制率;荧光定量RT-PCR和蛋白质印迹法检测转染前后凋亡抑制蛋白家族成员xIAP、Survivin、Livin表达,并检测Caspase-3、Caspase-8表达及活性。结果 Vav3在胃癌组织及细胞株的表达高于癌旁组织及胃上皮细胞株(P<0.05);Vav3-siRNA转染SGC7901后Vav3表达明显受到抑制(P<0.01);Vav3-siRNA转染SGC7901 48h后5-FU、L-OHP对肿瘤细胞的抑制作用均明显增强(P<0.05);转染后SGC7901中xIAP、Survivin的表达均较转染前降低(P<0.05),Livin表达在转染前后无明显变化;转染后Caspase-3、Caspase-8表达及活性升高(P<0.05)。结论 Vav3可通过调控胃癌细胞凋亡抑制途径参与胃癌多药耐药,抑制Vav3表达可能有助于逆转胃癌细胞的化疗耐药。

Vav3蛋白的调控机制及其生物学功能

Vav家族蛋白是Rho家族GTPase的鸟嘌呤核苷酸转移因子.Vav3作为Vav家族蛋白的成员之一,由8个结构域组成,其结构的复杂性赋予其功能的多样性.它可通过调节Rho家族不同成员的活性参与对MAPK、PI3K-Akt、NF-κB等信号转导通路的调控,在维持细胞形态、细胞黏附、血管生成、免疫功能的调节和细胞分化等过程中发挥重要作用.最近的研究发现,Vav3表达的失调与肿瘤发生密切相关,提示Vav3具有原癌基因的活性.本文对Vav3蛋白的结构、功能及其上下游的信号调节通路等进行了综述.

VAV_3蛋白在喉鳞状细胞癌中的表达及作用机制

目的研究VAV_3蛋白在喉鳞状细胞癌组织中的表达情况,及其对喉癌临床分型、淋巴转移等影响,分析其可能的机制。方法利用免疫组织化学方法检查VAV_3蛋白在喉鳞状细胞癌组织及喉部非癌组织中的表达,检测VAV_3蛋白对喉鳞状细胞癌侵袭,淋巴转移等影响。结果 VAV_3蛋白在喉鳞状细胞癌组织中表达为69.76%,在喉部非癌组织中的表达为10%,前者明显高于后者,差异有统计学意义(x^2=11.937,P=0.001)。它的表达与临床分型、T分型及淋巴结转移有统计学意义(P<0.05),与性别、年龄、吸烟、分型之间无统计学意义(P>0.05)。结论 VAV_3蛋白在喉癌组织中高表达,且可促进喉癌组织侵袭、转移能力。VAV_3蛋白高表达,可作为判断喉癌及预后的一种新的分子标志。

Vav3对人胃癌细胞株BGC823凋亡抑制蛋白的调节及机制

目的 探讨Vav3在胃癌组织中的表达以及抑制Vav3表达对人胃癌细胞株BGC823凋亡的影响及机制.方法 检测Vav3在胃癌组织、癌旁组织和人胃癌细胞株BGC823、正常胃上皮细胞株GES-1中的表达.设计合成针对Vav3的小干扰RNA（siRNA）并转染BGC823细胞株.噻唑蓝（MTT）法检测细胞活性;流式细胞术检测Vav3-siRNA转染BGC823胃癌细胞后对凋亡率的影响;检测转染前后凋亡抑制蛋白家族中生存素（Survivin）、细胞凋亡抑制蛋白1（c-IAP1）、细胞凋亡抑制蛋白2 （c-IAP2）、X连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）、黑色素瘤凋亡抑制蛋白（Livin）及半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-3表达.结果 Vav3蛋白水平在胃癌组织（0.727±0.101）和BGC823（0.850±0.140）中显著高于癌旁组织（0.173±0.025）和GES-1细胞株（0.250±0.036,P＜0.05）.利用特异性siRNA抑制内源性Vav3的表达后,胃癌细胞株BGC823中Vav3表达明显受到抑制（P＜0.05）.MTT结果显示,Vav3-siRNA介导的基因沉默抑制了胃癌细胞BGC823的活性（P＜0.05）.流式细胞术显示,Vav3-siRNA转染后胃癌细胞的凋亡率[（40.4±5.53）％]明显高于对照组[（15.93±2.33）％];转染Vav3-siRNA的胃癌细胞Go/G1期比例[（57.93±3.17）％]明显高于对照组[（37.37±4.61）％],而转染组S期细胞的比例[（17.63±1.71）％]明显低于对照组[（34.52±4.60）％,P＜0.05].Vav3-siRNA介导的基因沉默下调了Survivin、c-IAP1、c-IAP2、XIAP的表达（P＜0.05）,Livin表达变化不明显（P＞0.05）;同时Caspase-3的表达和活性都明显升高（P＜0.05）.结论 胃癌细胞中Vav3过表达,而Vav3的基因沉默可以明显促进细胞凋亡.Vav3的这一作用可能是通过调节部分凋亡抑制蛋白家族成员表达而实现的.