Bacillus Megaterium在Vc二步发酵中伴生活性初步研究

在维生素C二步发酵中,Bacillusmegaterium作为伴生菌能有效促进Gluconobacteroxydans的生长和产VitaminC的前体 2 酮基 L 古龙酸(简称 2 KLG)。实验室利用低能离子对出发菌BP5 2进行诱变选育,获得一株B.megaterium突变体GB82,此突变体与G.oxydans组成的混合体系GAB,比原始混合体系 2 980产酸水平高 1 0个百分点以上。比较研究了GB82与原始B.megateriumBP5 2分泌的生物活性物质对产酸菌G.oxydans产 2 KLG的影响,据此提出此活性物质可能是某种蛋白,且此蛋白在极端条件下会部分失活的观点;并且通过RandomAmplifiedPolymorphicDNA(RAPD)分析揭示了低能离子注入造成的二者基因水平上的差异。

Vc在浓香型大曲发酵酒中的应用

通过研究在不同pH、不同热处理方式、不同乙酸钠加入量条件下,己酸菌发酵液中己酸产量变化,得到培养液的最优条件为:pH 6.5,菌种经80℃热处理6 min,乙酸钠添加量为15 g/L。通过与添加Vc对照组对比,发现在己酸菌的培养液中加入Vc可增加己酸的产量,提高浓香型大曲发酵酒中香气成分的含量,提高出酒率,提高白酒品质。

猕猴桃酒酿造过程中VC含量变化的研究

研究了在猕猴桃酒酿造过程中VC含量的变化及不同因素对其VC含量的影响,根据试验结果将工艺进一步优化,最大程度的保存VC。本实验得出最优工艺条件是:接种量为3%,温度为20℃,pH值为6,发酵时间为5d。

以掷孢酵母作为伴生菌产生VC前体KGA的研究

以掷孢酵母作为伴生菌与氧化葡萄糖酸杆菌组成新混菌体系 ,通过测定生长代谢曲线 ,对其产酸性能和特点进行了研究。结果显示 :相同条件下 ,新菌系产酸能力高于现有菌系 ,酸量增加 5 - 7mg/ml,发酵周期缩短 6 - 8h,酸转化率提高 3- 4 % ,最高产酸点pH值下降约 0 5个单位 ,表现出较大的产酸潜力和可修饰性。

Vc二步发酵新组合菌系B_(15-14)的筛选及其条件优化

筛选出了一组Vc二步发酵的新组合菌系（命名为B15-14），研究了环境因子对新菌系产酸的影响。结果显示：新组合菌系的最适底糖浓度为7％；温度为29～33℃，31℃为最适；适当增加通气量（20-30mL装液量，250mL三角瓶）有利于产酸；起始pH值范围为6．0—7．5；以Bt菌做伴生菌时，发酵40h就已达到终点。明显缩短了发酵时间。

VC二步发酵产酸菌氧化葡萄糖酸杆菌的选育

实验通过紫外线两轮诱变的方法诱变选育氧化葡萄糖酸杆菌(Gluconobacteroxydans),以实现提高2-酮基-L-古龙酸(2-KLG)产量的目的,获得1株高产2-KLG的菌株G5。结果证明该突变菌株在pH6.5-6.7的发酵培养基中与蜡质芽孢杆菌(Bcilluscereus)混合发酵,G5的平均糖酸转化率提高了13.49%,酸量达到83.6mgmL,发酵周期缩短了2-3h。经连续10代转接发酵实验,证明其产酸稳定性较好。结论:氧化葡萄糖酸杆菌(Gluconobacteroxydans)的突变体G5提高了糖酸转化率,缩短了发酵周期。

VC二步发酵种液质量判定

研究了影响种子质量的各个参数与提高种子质量的途径。结果显示 :在苏云金杆菌 (俗称“大菌”)与氧化葡萄糖酸杆菌 (俗称“小菌”)组成一新组合菌系中 ,种液中菌的浓度对发酵影响较大 ,种液中的 (大菌OD值 - 1 6×小菌OD值 )与发酵速度成正相关 ,可作为种子质量的判定指数。同时对种液的配方进行均匀设计实验 ,结果显示 :适当提高玉米浆。

环境因子对新组合菌系产生Vc前体KGA的影响

通过测定氧化葡萄糖酸杆菌产酸变化 ,研究了环境因子对新菌系产酸的影响。结果显示 :新混菌体系产酸温度范围为2 4 - 33℃ ,2 8℃左右为最适 ,适当增加通气量 (2 5 - 35ml装液量 ,30 0ml三角瓶 )有利于掷孢酵母和氧化葡萄酸杆菌协调 ,通气量过大、过小都会破坏二菌比例 ,进而破坏而二菌间协调性 ,不利于 2 -酮基 -L -古龙酸的积累。

应用Vc发酵弃渣防治保护地病害

The prevention and control of tomato plant diseases were conducted in protective ground using Vc fermentation waste residue treated by enzymolysis and ultrasonic wave. The results showed that the seedlings planted for 3 weeks on the protective ground soil continuously cropped tomato plant for 9 years and fertilized 75, 150 and 300 kg·hm -2 grew well. Their biomass were increased by 123%, 164% and 182%, and the disease incidence rates were decreased by 59%, 78% and 85%, respectively. Under application of 300 kg·hm -2 Vc fermentation waste residue, the products of tomato grown for 10 weeks on the soil continuously cropped tomato plant for 9, 6 and 2 years were increased by 60%, 43% and 14%, respectively, and the disease incidence rates were all decreased by 50%.

基于VC++的地表水环境预测评价系统开发——河流模块的设计与应用

以我国地表水中的河流水质预测评价为例,采用VC++设计开发了适用范围较广具有可操作性的决策系统。结合水环境预测方法和导则标准,对本系统可操作的污染因子进行了选取,设计了持久性污染物、非持久性污染物、酸碱污染物的预测模块;采用综合水质评价方法中的水质质量系数法模型,设计了水质质量系数评价模块;根据最新的农村饮用水安全卫生评价标准,设计了系统的特色模块,感官性状及一般化学指标评价模块和毒理学指标评价模块。利用湖南常德澧县环境监测站所提供的数据,用模块计算值与实测值进行了对比检验,结果表明,本系统功能基本可实现,预测及评价数据可信,为完善环境决策管理软件做了新的研究尝试。

VC二步发酵伴生菌苏云金芽孢杆菌的选育

苏云金芽孢杆菌经紫外线（UV）、亚硝基胍（NTG）及两者的复合诱变，获得1株高效伴生菌株UN-366．在pH6．5～6．8的发酵培养基中与氧化葡萄糖酸杆菌混合发酵，UN-366的平均糖酸转化率提高了6．32％，古龙酸的质量浓度达到了83．7g／L，经连续5代转接发酵实验，性状稳定．

Vc二步发酵伴生菌巨大芽孢杆菌的选育

巨大芽孢杆菌经紫外线诱变，获得2株耐低pH、抗KGA的菌株：Bn，B5。在pH6.7～7．0的发酵培养基中与氧化葡萄糖酸杆菌发酵，Bn和B5的平均糖酸转化率分别提高3.5％，3．3％.在pH6．2的发酵培养基中，平均糖酸转化率提高11．4％，12．3％。在pH6．2和pH7．0含3％KGA的培养基中，2菌提前3～6h到达对数生长期，稳定期延长3～6h.经连续30代转接，特性稳定。

Vc生产菌“神舟七号”搭载育种

选取3株性状不同的Vc二步发酵生产菌搭载于"神舟七号"飞船进行空间诱变,返回地面后,经富集培养和分离,获得近12000株诱变菌株。采用试管微量培养并监测pH值法作3次初筛,获300余株优良株,再经摇瓶发酵定酸、糖法作3次复筛,选出12株优良菌株。新菌株摇瓶发酵转化率提高了5%～7%。研究了新菌株生产的最适发酵条件,调整了部分工艺过程,应用于大生产,转化率提高4%～5%。

巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)突变株Bn,B5的生物学特性及在Vc二步发酵中的伴生作用

对选出的巨大芽孢杆菌突变株Bn ,B5进行了生物学特性及发酵条件的研究 ,发现它们具耐低 pH和抗高浓 2KGA特性。可促进氧化葡萄糖酸杆菌生长 ,使其延迟期缩短 ,产酸增加。适宜的通气量下 ,摇瓶糖酸转化率提高 10 %～ 14% ;当发酵 pH为 6 .2～ 6 .6时 ,转化率提高 2 0 %～ 30 %

响应面法优化Vc二步发酵新菌系产2-酮基-L-古龙酸的培养基

以短小芽胞杆菌(Bacillus pumilus)HJ-04作为维生素C二步发酵第2步中的伴生菌,促进产酸菌产维生素C(Vitamin C,Vc)前体2-酮基-L-古龙酸(2-keto-L-gulonic acid,2-KGA)的能力强于工业生产用菌株巨大芽胞杆菌(Bacillus megaterium)B2980。采用单因素试验、Plackett-Burman(PB)试验及Box-Behnken试验对影响新菌系发酵产2-KGA的6个因素进行分析优化。结果表明,L-山梨糖、尿素、玉米浆为显著影响因子。最佳产酸条件为L-山梨糖94.95 g/L,尿素11.99 g/L,玉米浆14.13 g/L。优化后产酸量提高12.31 mg/mL,产酸周期缩短6 h。

可尔必思乳酸菌饮料的研制

以脱脂乳粉、发酵液为原料制备可尔必思乳酸菌饮料。以甜味料(白砂糖、果葡糖浆)、稳定剂(果胶、大豆多糖)、柠檬酸及发酵液添加量为考察因素,以产品感官评定为评价指标,进行单因素及正交试验。试验结果表明,甜味料、稳定剂、柠檬酸、发酵液的添加量分别为90 g·L^(-1)、3.0 g·L^(-1)、2.5 g·L^(-1)、5 g·L^(-1)时,产品口感清爽,酸甜适宜,呈略透明乳白色,状态稳定,在保质期可安全储存。

植物乳杆菌发酵沙棘饮料的研制及其品质评价

为研究植物乳杆菌发酵沙棘饮料的工艺条件,以沙棘原浆为发酵原料,以活菌数和感官评价为指标,经单因素和正交试验进行优化,并对优化后发酵饮料的理化指标及感官品质进行测定。结果表明,植物乳杆菌发酵沙棘饮料的最佳工艺参数为发酵温度37℃、菌种添加量2%、发酵时间18 h。按照此工艺得到的沙棘饮料产品,活菌数为8.79 lg(CFU/mL),感官评分为93分,总糖含量为2.62 g/(100 mL),总酸含量为2.17 g/L,DPPH自由基清除能力由发酵前的45%提高至81%,总抗氧化能力为发酵前的1.92倍。研究为沙棘产业的发展提供借鉴。

发酵乳和乳饮料中乳酸菌活菌数ATP检测方法的开发与应用

乳酸菌活菌数作为发酵乳和乳酸菌饮料的产品质量属性,同时作为国家风险抽检项目,目前的检测方法存在操作烦琐、检测周期长、结果滞后等缺点,无法满足企业产品卖点宣称及质量控制,故针对发酵乳和乳饮料中乳酸菌活菌数的快速检测方法进行开发、研究,旨在提高检测结果准确性、稳定性及缩短检测周期。每种微生物中的腺嘌呤核苷三磷酸(Adenosine Triphosphate,ATP)含量都是基本恒定的,而ATP的相对发光单位(Relative Luminescence Unit,RLU)与ATP含量呈线性关系,通过建立产品中乳酸菌数量与ATP的RLU(相对发光单位)的相关关系开发乳酸菌快速检测方法。通过试验证实该方法与国家标准检测方法具有一致性,能够快速、准确地检测产品中乳酸菌数活菌数,为生产销售流通中的质量监测提供一种快捷方便的方法。

不同饮用水对香椿发酵茶茶汤品质和抗氧化活性的影响

水是茶汤品质呈现的介质,对茶性的发挥至关重要。选用自来水、矿泉水、纯净水冲泡香椿发酵茶,利用紫外分光光度计、电子舌和气相色谱-质谱联用技术分析3种水样茶汤的理化指标、生化成分、抗氧化活性及风味物质,以期阐明水质对香椿发酵茶茶汤品质的影响机理。结果表明,不同饮用水对香椿发酵茶茶汤品质和抗氧化活性具有显著影响(P<0.05)。pH呈弱酸性、电导率接近于1μS/cm的纯净水茶汤的茶多酚(669.45 mg/L)、总黄酮(645.83 mg/L)、可溶性糖(731.91 mg/L)和游离氨基酸(2738.96 mg/L)含量最高,清除DPPH自由基能力(IC_(50)为0.17 mg/mL)和总还原能力最强。自来水茶汤中咖啡碱含量最高(67.98 mg/L),清除羟基自由基能力最强(IC_(50)为12.27 mg/mL)。电子舌能够快速区分不同水样冲泡的香椿发酵茶茶汤,其中纯净水茶汤的味感最为丰富,与苦味、苦味回味、甜味及丰富度相关。利用GC-MS共鉴别出29种挥发性物质,含硫类和醛类是香椿发酵茶茶汤的主体挥发性成分,占50%以上。自来水、矿泉水、纯净水茶汤分别检出24种、17种和16种,其中自来水茶汤的香气组成最为丰富,纯净水茶汤花果香明显。综合分析纯净水最适宜冲泡香椿发酵茶,茶汤整体品质最优。本研究初步明确了水质对香椿发酵茶茶汤生化成分、抗氧化活性及风味物质的影响,为香椿发酵茶的科学冲泡及香椿发酵茶饮品的开发提供理论依据。

罗定市城乡生活饮用水水质微生物检测方法研究

目的:评估罗定市城乡生活饮用水水质微生物安全性,并比较多管发酵法与酶底物法在水质微生物检测中的应用效果。方法:分别于枯水期和丰水期,在城市和乡村各采集40份出厂水水样和40份末梢水水样,合计320份水样。采用多管发酵法和酶底物法检测样品中总大肠菌群、大肠埃希氏菌。结果:对于城乡枯水期和丰水期饮用水中总大肠菌群和大肠埃希氏菌的检出率,酶底物法均高于多管发酵法,但差异无统计学意义(P> 0.05);对于城乡出厂水及末梢水饮用水中总大肠菌群和大肠埃希氏菌的检出率,酶底物法也高于多管发酵法,但差异无统计学意义(P> 0.05)。结论:酶底物法在检测饮用水中总大肠菌群和大肠埃希氏菌方面具有较高的灵敏度,且其操作便捷、高效,适合推广使用。但酶底物法的检测成本较高,在实际应用中还需要权衡成本与效率之间的关系。