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SARS病毒刺突蛋白与TAP标签在Vero细胞内的融合表达研究
被引量:
1
1
作者
郭岚
王健伟
+2 位作者
韩金祥
于修平
洪涛
《山东大学学报(医学版)》
CAS
北大核心
2005年第8期661-666,共6页
目的:探讨SARS冠状病毒(SARS-CoV)刺突蛋白(Spikeprotein,S蛋白)与钙调蛋白结合肽(calmodulinbindingpeptide,CBP)-蛋白A串连亲和纯化(tandemaffinitypurification,TAP)标签在Vero细胞内的融合表达及亚细胞定位,为其细胞结合蛋白的筛选...
目的:探讨SARS冠状病毒(SARS-CoV)刺突蛋白(Spikeprotein,S蛋白)与钙调蛋白结合肽(calmodulinbindingpeptide,CBP)-蛋白A串连亲和纯化(tandemaffinitypurification,TAP)标签在Vero细胞内的融合表达及亚细胞定位,为其细胞结合蛋白的筛选奠定基础。方法:从质粒pGEM-4Z-S中扩增S片段,在5'端加入Kozak序列,并与TAP标签基因共同插入pcDNA3.1(-)中,构建出真核表达载体pcDNA3.1-S-TAP(C)。将构建好的质粒瞬时转染Vero细胞,并共感染重组痘苗病毒vTF7-3,用间接免疫荧光及Western-blotting技术检测融合蛋白的表达及亚细胞定位。结果:成功构建出真核表达载体pcD-NA3.1-S-TAP(C),瞬时转染Vero细胞后S-CBP-蛋白A融合蛋白[S-TAP(C)]得到表达,重组痘苗病毒vTF7-3可有效增强该融合蛋白的表达水平,且检测到S-TAP(C)融合蛋白表达于细胞膜上。结论:S蛋白与TAP标签融合蛋白表达于细胞膜上,且vTF7-3的感染有助于靶蛋白表达水平的提高。
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关键词
SARS冠状病毒
刺突蛋白
TAP标签
vero
细胞
表达
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职称材料
题名
SARS病毒刺突蛋白与TAP标签在Vero细胞内的融合表达研究
被引量:
1
1
作者
郭岚
王健伟
韩金祥
于修平
洪涛
机构
山东大学医学院病原生物学研究所
中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所
山东省病毒学研究所/山东省医学病毒学重点实验室暨卫生部生物技术药物重点实验室
出处
《山东大学学报(医学版)》
CAS
北大核心
2005年第8期661-666,共6页
基金
国家自然科学基金资助课题(30340025)
国家863计划SARS专项课题(2003AA208209)资助项目。
文摘
目的:探讨SARS冠状病毒(SARS-CoV)刺突蛋白(Spikeprotein,S蛋白)与钙调蛋白结合肽(calmodulinbindingpeptide,CBP)-蛋白A串连亲和纯化(tandemaffinitypurification,TAP)标签在Vero细胞内的融合表达及亚细胞定位,为其细胞结合蛋白的筛选奠定基础。方法:从质粒pGEM-4Z-S中扩增S片段,在5'端加入Kozak序列,并与TAP标签基因共同插入pcDNA3.1(-)中,构建出真核表达载体pcDNA3.1-S-TAP(C)。将构建好的质粒瞬时转染Vero细胞,并共感染重组痘苗病毒vTF7-3,用间接免疫荧光及Western-blotting技术检测融合蛋白的表达及亚细胞定位。结果:成功构建出真核表达载体pcD-NA3.1-S-TAP(C),瞬时转染Vero细胞后S-CBP-蛋白A融合蛋白[S-TAP(C)]得到表达,重组痘苗病毒vTF7-3可有效增强该融合蛋白的表达水平,且检测到S-TAP(C)融合蛋白表达于细胞膜上。结论:S蛋白与TAP标签融合蛋白表达于细胞膜上,且vTF7-3的感染有助于靶蛋白表达水平的提高。
关键词
SARS冠状病毒
刺突蛋白
TAP标签
vero
细胞
表达
Keywords
SARS-associated coronavirus
Spike protein
Tandem affinity purification
vero celsl
Expression
分类号
R373.1 [医药卫生—病原生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
SARS病毒刺突蛋白与TAP标签在Vero细胞内的融合表达研究
郭岚
王健伟
韩金祥
于修平
洪涛
《山东大学学报(医学版)》
CAS
北大核心
2005
1
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