鳗弧菌感染对脊尾白虾鳃组织抗氧化酶系统的影响

为研究鳗弧菌感染对脊尾白虾鳃组织抗氧化酶系统的影响,分别对脊尾白虾注射生理盐水和鳗弧菌,注射后分别于0、3、6、12、24、48、72h测定了鳃中总抗氧化能力活性和谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶、过氧化物还原酶、谷胱甘肽S-转移酶基因表达量的变化。试验结果显示,与对照组相比,感染鳗弧菌后,鳃中总抗氧化能力活性于6h达到最大值,48h显著低于对照组（P〈0.05）;谷胱甘肽过氧化物酶基因表达量于12h达到最大值（P〈0.05）,48h逐渐降低至对照组水平;过氧化氢酶基因表达量在感染初期无显著变化,12h开始显著上升,并于24h达到最大值（P〈0.05）;超氧化物歧化酶和过氧化物还原酶基因表达变化基本一致,均于3h显著上升至最大值（P〈0.05）,6~72h始终保持较低水平;谷胱甘肽S-转移酶基因表达量从3h开始上升,并于6h达到最大值。研究表明,鳗弧菌感染对脊尾白虾鳃组织抗氧化酶系统影响显著,有明显的破坏作用;本研究所用免疫指标均可作为弧菌病诱发的监测指标。

抗菌渔药筛选中最佳参数的选择与论证

采用二倍稀释法测定8种常用抗菌药对致病性鳗弧菌的最低抑菌浓度(MIC)。以MIC为单位,采用1,5,10,20倍MIC下抑菌圈直径为参数,分别比较8种常用抗菌药抑杀菌效果,通过分析比较优化最佳参数。利用优化出的最佳参数,比较8种常用抗菌渔药单独用药与联合用药对鳗弧菌的抑杀菌效果。结果表明:5倍MIC下抑菌圈直径是本实验筛选抗菌药的最佳参数。在此参数下,鳗弧菌对庆大霉素和氟哌酸高度敏感;对链霉素、土霉素、盐酸诺氟沙星、氟甲砜霉素和甲砜霉素中度敏感。盐酸诺氟沙星与甲砜霉素的联合效果最好。

大菱鲆源鳗弧菌毒力基因的检测及序列分析

采用PCR方法,对分离于大菱鲆的30株致病性鳗弧菌进行了溶血素vah1基因、鞭毛蛋白flaA基因、金属蛋白酶empA基因及外膜蛋白ompU基因的检测,选取3个代表菌株的相应基因序列通过Blast与GenBank中公布的参考菌株进行核苷酸同源性比较分析。结果表明,所检测的30株鳗弧菌均携带vah1、flaA、empA、ompU基因,携带率为100%;所测代表菌株的vah1、flaA、empA基因同参考菌株间均具有较高的同源性(93.9%～99.9%),而外膜蛋白ompU基因,3株代表菌间存在较大差异(86.0%～95.9%),其中的S010610-1株与其他2株代表菌及参考菌株均存在较大差异,在进化树中单独聚为一支。3株代表菌的其他基因(vah1、flaA、empA)均具有较高的同源性(94.2%～99.5%),但均存在一定的差异性。