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Cloning and Expression Analysis of Violaxanthin De-Epoxidase (VDE) cDNA in Wheat 被引量:1
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作者 张吉军 英加 +2 位作者 常胜合 李滨 李振声 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2003年第8期981-985,共5页
Violaxanthin de-epoxidase (VDE) is the key enzyme in the xanthophyll cycle and protects plant photosynthetic apparatus from the damage of excessive light. A wheat (Triticum aestivum L cv. Xiaoyan 54) VDE cDNA was obta... Violaxanthin de-epoxidase (VDE) is the key enzyme in the xanthophyll cycle and protects plant photosynthetic apparatus from the damage of excessive light. A wheat (Triticum aestivum L cv. Xiaoyan 54) VDE cDNA was obtained using RT-PCR method. Its deduced protein sequence shares high identity with that of Arabidopsis and rice. Southern blot revealed that there are three copies of VDE gene per haploid genome of wheat. VDE transcript levels were higher in green leaf than in root, seed and etiolated leaf. Northern blotting analysis indicated that VDE mRNA level is induced during greening process of etiolated wheat seedling and increased by intense light illumination. 展开更多
关键词 violaxanthin de-epoxidase xanthophylls cycle PHOTOPROTECTION Triticum aestivum
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Changes in Violaxanthin Deepoxidase Activity and Unsaturation of Thylakoid Membrane Lipids in Indica and Japonica Rice Under Chilling Condition and Strong Light 被引量:1
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作者 季本华 曹云英 +3 位作者 谢焕松 朱素琴 马强 焦德茂 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2003年第9期1063-1070,共8页
To explore the differences of sensitivities to chilling and strong light in indica and japonica rice (Oryza sativa L), the changes in unsaturation of thylakoid membrane lipids and xanthophyll cycle were studied under ... To explore the differences of sensitivities to chilling and strong light in indica and japonica rice (Oryza sativa L), the changes in unsaturation of thylakoid membrane lipids and xanthophyll cycle were studied under chilling condition and strong light. The contents of unsaturated fatty acids of thylakoid membrane lipids decreased and that of the saturated ones increased with the time of chilling and strong light treatment, resulting in the reduction of the index of unsaturation of fatty acids (IUFA). The activity of violaxanthin deepoxidase (VDE), a key enzyme of xanthophyll cycle, also reduced. The content of violaxanthin (V) increased, and the contents of antheraxanthin (A) and zeaxanthin M decreased, the ratio of (A+Z)/ (A+Z+V) decreased correspondingly. Arrhenius analysis showed that VDE was sensitive to both chilling and unsaturation level of thylakoid membrane lipids. Correlation analysis showed that there was distinctly positive relationships between IUFA of thylakoid membrane lipids and the activity of VDE, Fv/Fm, and D, protein content. Lower IUFA values, less fluidity and stability of thylakoid membrane lipids, lower VDE activity and (A+Z)/(A+Z+V) ratio were found in indica rice cv. Shanyou 63 than in japonica rice cv. 9516 under chilling and strong light. 展开更多
关键词 thylakoid membrane lipids xanthophyll cycle violaxanthin deepoxidase Arrhenius plotting RICE
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Photosynthetic Excitation Pressure Causes Violaxanthin De-epoxidation in Aging Cabbage (Brassica Oleracea L.) Leaves 被引量:1
3
作者 Amarendra Narayan Misra Dariusz Latowski Kazimierz Strzalka 《Journal of Life Sciences》 2011年第3期182-191,共10页
The purpose of the present studies was analysis of the age induced changes in photochemical efficiency and xanthophyils cycle pigments of the primary cabbage (Brassica oleracea L. cv. Capitata f. alba) leaves. Photo... The purpose of the present studies was analysis of the age induced changes in photochemical efficiency and xanthophyils cycle pigments of the primary cabbage (Brassica oleracea L. cv. Capitata f. alba) leaves. Photochemical efficiency of photosystem Ⅱ (PS Ⅱ) was studied by a pulse amplitude modulated chlorophyll fluorescence apparatus, chlorophyll concentration was analysis spectrophotometrically and xanthophyll cycle pigments were estimated by high-pressure liquid chromatography (HPLC). Leaf senescence was accompanied with a decrease both in chlorophylls concentration, the photochemical efficiency and rate constant for PS Ⅱ photochemistry whereas non-photochemical parameters increased. Excitation pressure (1-qP) which is a measure of relative lumen acidification increased by 1.2x in aging leaves. The maximum quantum yield of PS Ⅱ showed no significant change. The level of de-epoxidised xanthophylls increased but the concentration of mono- and di-epoxy xanthophylls decreased in aging leaves. A linear relationship between the excitation pressure and the depoxidation state of the xanthophyll cycle pigments and lutein, during the onset of senescence suggests that excitation pressure can be used as a sensor for monitoring the onset of senescence as well for the de-epoxidation state of the xanthophylls responsible for non-photochemical quenching in stressed leaves. 展开更多
关键词 Cabbage (Brassica oleracea L.) violaxanthin cycle excitation pressure senescence photosynthetic parameters.
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烟草Orange蛋白突变体的转录组和代谢组分析
4
作者 曾婉俐 向海英 +5 位作者 刘德水 周会娜 高茜 潘帮珍 李雪梅 李晶 《云南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期40-47,共8页
【目的】分析烟草Orange蛋白突变体的转录组和代谢组,为培育高类胡萝卜素含量的烟草提供理论依据。【方法】通过CRISPR/Cas9基因编辑技术,获得带有3个碱基缺失的NtOR基因突变株系208。采用转录组测序、液相色谱—质谱联用的非靶向方法... 【目的】分析烟草Orange蛋白突变体的转录组和代谢组,为培育高类胡萝卜素含量的烟草提供理论依据。【方法】通过CRISPR/Cas9基因编辑技术,获得带有3个碱基缺失的NtOR基因突变株系208。采用转录组测序、液相色谱—质谱联用的非靶向方法、气相色谱—质谱联用的衍生化方法和顶空进样技术,对突变株系的差异基因和差异代谢物进行分析。【结果】突变株系208叶片中的β-胡萝卜素和紫黄质含量显著下降。转录组分析显示:突变株系208中有10369个差异表达基因,其中4178个基因上调,6191个基因下调。代谢组分析显示:突变株系208与对照相比有160个差异代谢物。【结论】突变株系208中的类胡萝卜素含量下降,色素代谢途径中玉米黄素环氧化酶基因下调,有机酸和二萜类代谢物含量显著升高。 展开更多
关键词 烟草 类胡萝卜素 Orange蛋白 Β-胡萝卜素 紫黄质
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Xanthophyll Cycle and Its Molecular Mechanism in Photoprotection 被引量:10
5
作者 林荣呈 许长成 +1 位作者 李良璧 匡廷云 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2002年第4期379-383,共5页
When plants absorb more light than that can be used for photosynthesis, the excessive energy can cause photoinhibition and even photooxidation of photosynthetic apparatus. Xanthophyll cycle-dependent photo-protection ... When plants absorb more light than that can be used for photosynthesis, the excessive energy can cause photoinhibition and even photooxidation of photosynthetic apparatus. Xanthophyll cycle-dependent photo-protection is believed to be the main mechanism for plants to deal with excessive light energy. This review focuses on molecular biological aspects and regulations of violaxanthin de-epoxidase and zeaxanthin epoxidase involved in xanthophyll cycle. We will summarize the functions of xanthophyll cycle, especially recent advances in its thermal dissipation mechanism of photoprotection. Some interesting issues deserving further study will be discussed. 展开更多
关键词 xanthophyll cycle violaxanthin de-epoxidase thermal dissipation PHOTOPROTECTION
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光温交叉处理对小麦紫黄质脱环氧化酶活性及其热耗散能力的影响 被引量:14
6
作者 陈华新 陈玮 +2 位作者 姜闯道 高辉远 邹琦 《植物生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期1015-1022,共8页
为了探讨温度和光强是如何影响离体紫黄质脱环氧化酶(VDE)活性,阐明依赖叶黄素循环的热耗散与VDE活性关系,该文以小麦(Triticum aestivum)为材料,研究了不同光强(200、500、900和1200μmol·m–2·s–1)和不同温度(4、25、38和4... 为了探讨温度和光强是如何影响离体紫黄质脱环氧化酶(VDE)活性,阐明依赖叶黄素循环的热耗散与VDE活性关系,该文以小麦(Triticum aestivum)为材料,研究了不同光强(200、500、900和1200μmol·m–2·s–1)和不同温度(4、25、38和45℃)交叉处理对小麦叶片VDE活性以及依赖叶黄素循环热耗散能力的影响。结果表明:小麦叶片VDE活性在30℃最高,说明30℃是小麦叶片VDE体外条件下的最适温度;不同光强处理下小麦叶片VDE活性基本一致。与室温(25℃)处理的叶片相比,低温(4℃)处理的叶片VDE活力没有明显下降,而高温(45℃)处理则导致了叶片VDE活性急剧下降。小麦叶片热耗散(NPQ)以及依赖叶黄素循环的热耗散(qE)均随着处理光强的增加不断上升,而qE/NPQ则随光强增加略微下降,在1200μmol·m–2·s–1光强条件下qE/NPQ则急剧下降。该研究揭示VDE活性与依赖叶黄素循环热耗散能力的指标qE/NPQ的变化有一定的相关性,但不完全一致。并针对此问题进行了讨论。 展开更多
关键词 叶黄素循环 紫黄质脱环氧化酶 光抑制 热耗散
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叶片类胡萝卜素在光氧化水稻品种间的差异 被引量:4
7
作者 傅春霞 刘震 +2 位作者 邵红宁 谭秀云 邹琦 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 1994年第3期140-144,共5页
以水稻叶片为材料,研究了光对类胡萝卜素组分的影响及其在遭受光氧化的水稻品种间的差异。结果表明,用薄层层析(TLC)法可从水稻叶片中分离出各自具有不同颜色和独特吸收光谱的14个组分.不同作物和不同叶龄叶片的类胡萝卜素组... 以水稻叶片为材料,研究了光对类胡萝卜素组分的影响及其在遭受光氧化的水稻品种间的差异。结果表明,用薄层层析(TLC)法可从水稻叶片中分离出各自具有不同颜色和独特吸收光谱的14个组分.不同作物和不同叶龄叶片的类胡萝卜素组分有差异.照光可使第8条带由绿转黄,其最大吸收峰移向长波方向.这是由于紫黄质(violaxanthin)向玉米黄质(zeaxanthin)转变的结果.对光抑制敏感性不同的8个籼稻品种在低温、强光下培育15d,表现类胡萝卜素组分降解不一样,不敏感品种的玉米黄质吸收峰值比敏感品种高出43.3%.这说明对光抑制的敏感性大小与处理期间叶片内玉米黄质形成的量有关. 展开更多
关键词 类胡萝卜素 光氧化 水稻 品种
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植物紫黄素脱环氧化酶结构特征的生物信息学分析 被引量:4
8
作者 韦朝领 江昌俊 +1 位作者 陶汉之 宛晓春 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期250-255,共6页
利用国际互联网上的生物学数据库 (Gen Bank,Swiss-Prot和 Prosite)所提供的信息资源和工具(PHDsec和 Signal P)及软件技术 (DNAstar) ,从生物信息学角度对植物紫黄素脱环氧化酶 (VDE)进行序列的比较分析和结构预测 ,得出了其转运肽特... 利用国际互联网上的生物学数据库 (Gen Bank,Swiss-Prot和 Prosite)所提供的信息资源和工具(PHDsec和 Signal P)及软件技术 (DNAstar) ,从生物信息学角度对植物紫黄素脱环氧化酶 (VDE)进行序列的比较分析和结构预测 ,得出了其转运肽特征、相关保守位点和特殊结构域以及序列的二级结构特征 。 展开更多
关键词 紫黄素脱环氧化酶 生物信息学 序列分析 结构域 叶黄素循环 植物光保护机制
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叶黄素循环组分的分离鉴定及紫黄质的大量制备 被引量:3
9
作者 费美娟 赵世杰 +3 位作者 王晓云 孟庆伟 许长成 邹琦 《西北植物学报》 CAS CSCD 2004年第2期210-214,共5页
以薄层层析法 TLC 分离鉴定植物组织中叶黄素循环组分,建立了大量制备紫黄质的方法.此法所需时间短,分离效果好,检出灵敏度高,既适于少量样品的分离,也适于大样品的提纯制备,因此适合用于紫黄质的提取及大量制备.
关键词 薄层层析 分离鉴定 叶黄素循环 紫黄质 制备
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茶树紫黄素脱环氧化酶基因的体外定点突变及其突变体的表达和活性鉴定 被引量:6
10
作者 韦朝领 江昌俊 +1 位作者 陶汉之 宛晓春 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期73-78,共6页
经Swiss Prot蛋白质数据库中查询发现茶树紫黄素脱环氧化酶 (VDE)蛋白结构中含有lipocalin特征区 ,利用重叠延伸法把该特征区中最保守的Gly(GGG)和Trp(TGG)分别定点突变为Leu(TTG)和Tyr(TAG) .构建了表达载体pET 32a G→L和pET 32a W→... 经Swiss Prot蛋白质数据库中查询发现茶树紫黄素脱环氧化酶 (VDE)蛋白结构中含有lipocalin特征区 ,利用重叠延伸法把该特征区中最保守的Gly(GGG)和Trp(TGG)分别定点突变为Leu(TTG)和Tyr(TAG) .构建了表达载体pET 32a G→L和pET 32a W→Y ,在E .coliBL2 1trxB(DE3)进行了诱导表达 ,并对表达蛋白进行His Tag亲和纯化 .结果表明 ,表达蛋白的分子量和预计的相等 ,为 5 8 9kD ,表达量占菌体总蛋白的 4 5 % .体外酶促反应分析得出 ,G→L或W→Y突变都能导致茶树VDE生物活性大幅度降低 ,证明了lipocalin特征区是VDE的主要活性中心之一 . 展开更多
关键词 茶树 紫黄素脱环氧化酶 定点突变 表达 生物活性
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天线蛋白和类囊体膜脂对光合系统紫黄质循环的调节作用研究进展 被引量:2
11
作者 朱素琴 夏树林 +3 位作者 许献 卢颖 季本华 梁建生 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期197-209,共13页
紫黄质循环是紫黄质(V)经过中间物单环氧玉米黄质(A)形成玉米黄质(Z)的可逆转换,是光合系统聚光复合体在低光下的聚光状态与高光下的能量耗散状态之间的转换开关。叶黄素中的玉米黄质可钝化(去激发)激发三线态叶绿素(3 Chl*)和激发单线... 紫黄质循环是紫黄质(V)经过中间物单环氧玉米黄质(A)形成玉米黄质(Z)的可逆转换,是光合系统聚光复合体在低光下的聚光状态与高光下的能量耗散状态之间的转换开关。叶黄素中的玉米黄质可钝化(去激发)激发三线态叶绿素(3 Chl*)和激发单线态氧(1 O2*),紫黄质循环可直接或间接地通过非光化学淬灭(NPQ)耗散PSⅡ天线蛋白中的过量光能。天线蛋白被认为是依赖玉米黄质(Z)耗散过量光能的部位,天线蛋白通过结合紫黄质循环组分(V,A和Z)来调节紫黄质循环。类囊体膜脂的性质和结构影响紫黄质循环组分(V,A和Z)间的转换,V的脱环氧化速率依赖于V在类囊体膜脂上侧向扩散的速率,紫黄质脱环氧化作用第一步(由V到A的转换)的速度常数是第二步(由A到Z的转换)速度常数的4~6倍。现有的结果表明,天线蛋白和类囊体膜脂是紫黄质循环最基本的调节器。该文对近年来国内外关于紫黄质循环的基本反应及其功能、紫黄质循环酶结构性质和辅因子以及天线蛋白和类囊体膜脂对紫黄质循环的调节作用及其机理等方面的研究进展进行了综述。 展开更多
关键词 紫黄质循环 天线蛋白 类囊体膜脂 紫黄质脱环氧化酶 玉米黄质环氧化酶
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茶树紫黄素脱环氧化酶基因的cDNA克隆及其生物信息学分析 被引量:11
12
作者 韦朝领 江昌俊 +1 位作者 陶汉之 宛晓春 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期14-19,共6页
根据GenBank中已登录的植物紫黄素脱环氧化酶 (VDE)基因序列 ,以其高度保守的氨基酸序列设计一对简并引物 ,采用RT PCR与 3′/ 5′RACE相结合的方法 ,从茶树 (Camelliasinensi)中克隆出VDE的全长cDNA ,长度为 16 32bp。分析表明 ,该序列... 根据GenBank中已登录的植物紫黄素脱环氧化酶 (VDE)基因序列 ,以其高度保守的氨基酸序列设计一对简并引物 ,采用RT PCR与 3′/ 5′RACE相结合的方法 ,从茶树 (Camelliasinensi)中克隆出VDE的全长cDNA ,长度为 16 32bp。分析表明 ,该序列的 5′端和 3′端的非编码序列长度分别为 6 1bp和 14 0bp ,开放阅读框为 14 2 2bp ,编码 4 73个氨基酸 ,其转运肽长度为 132个氨基酸。成熟蛋白的氨基酸序列与拟南芥、莴苣、菠菜及烟草的同源性分别为 83 5 % ,82 7% ,82 1%和 83 6 % ,且有 3个特殊的结构域 :半胱氨酸富集区、脂肪结合蛋白特征区和由谷氨酸富集的高电荷区。分析表明 ,茶树VDE具有热稳定性。 展开更多
关键词 茶树 紫黄素 脱环氧化酶 基因 CDNA克隆 生物信息学
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低温强光下水稻类囊体膜脂不饱和度和叶黄素循环组分的变化 被引量:5
13
作者 季本华 朱素琴 +1 位作者 谢焕松 焦德茂 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期140-146,共7页
为了阐明籼稻、粳稻对低温强光敏感性的差异 ,着重研究了低温强光下水稻类囊体膜脂不饱和度与紫黄质脱环氧化酶 (VDE)活性的变化。随着低温强光处理时间的延长 ,类囊体膜脂不饱和脂肪酸含量降低、饱和脂肪酸含量增加 ,因而膜脂不饱和指... 为了阐明籼稻、粳稻对低温强光敏感性的差异 ,着重研究了低温强光下水稻类囊体膜脂不饱和度与紫黄质脱环氧化酶 (VDE)活性的变化。随着低温强光处理时间的延长 ,类囊体膜脂不饱和脂肪酸含量降低、饱和脂肪酸含量增加 ,因而膜脂不饱和指数 (IUFA)下降。同时 ,叶黄素循环的关键酶———VDE活性降低 ,叶黄素循环组分中紫黄质 (V)含量增加 ,而单环氧玉米黄质 (A)和玉米黄质 (Z)的含量减少 ,表现为 (A +Z) / (A +Z +V)比值下降。Arrhenius分析证明 ,VDE对低温和膜脂不饱和度都敏感。相关分析表明 ,类囊体IUFA分别与VDE活性、(A +Z) / (A +Z +V)和D1 蛋白量呈显著的正相关。与粳稻 95 16相比 ,籼稻汕优 6 3类囊体膜的IUFA较低 ,低温下类囊体膜脂流动性和稳定性较差 ,VDE活性和 (A +Z) / (A +Z+V)比值较低。 展开更多
关键词 水稻 温度 光照 类囊体 膜脂 叶黄素循环 紫黄质脱环氧化酶 低温胁迫 光抑制
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叶黄素循环酶 被引量:3
14
作者 阳成伟 陈贻竹 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期264-267,共4页
依赖叶黄素循环的热耗散是一种主要防御光破坏的机制。参与叶黄素循环的酶是紫黄质脱环氧化酶和玉米黄质环氧化酶 ,紫黄质脱环氧化酶已分离纯化 ,其 c DNA已被克隆 ,其活性主要受跨类囊体膜的 p H梯度和抗坏血酸浓度的调节 ;玉米黄质环... 依赖叶黄素循环的热耗散是一种主要防御光破坏的机制。参与叶黄素循环的酶是紫黄质脱环氧化酶和玉米黄质环氧化酶 ,紫黄质脱环氧化酶已分离纯化 ,其 c DNA已被克隆 ,其活性主要受跨类囊体膜的 p H梯度和抗坏血酸浓度的调节 ;玉米黄质环氧化酶还没有被分离出来 ,但其 c DNA也已被克隆 ;其活性主要与NADPH的浓度、O2 及光等有关。 展开更多
关键词 叶黄素循环酶 紫黄质脱环氧化酶 NADPH 光破坏
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植物叶黄素循环及其光保护作用的研究进展 被引量:8
15
作者 李瑾瑾 张强 方炎明 《安徽农业科学》 CAS 2016年第5期1-3,17,共4页
当植物吸收过量光能时会产生光抑制,引起光合器官的破坏,甚至导致植物死亡。叶黄素循环是植物应对过量光能时主要的光保护机制,可以有效清除并阻止有害副产物三线态的叶绿素分子和单线态氧的积累。因此,植物叶黄素循环相关机理的研究具... 当植物吸收过量光能时会产生光抑制,引起光合器官的破坏,甚至导致植物死亡。叶黄素循环是植物应对过量光能时主要的光保护机制,可以有效清除并阻止有害副产物三线态的叶绿素分子和单线态氧的积累。因此,植物叶黄素循环相关机理的研究具有重要的理论和实际意义。综述了植物叶黄素循环的组成、关键酶的功能与调节及其在光保护中的作用。 展开更多
关键词 叶黄素循环 紫黄质脱环氧化酶 玉米黄质环氧化酶 热耗散 光保护
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VDE基因在植物抗逆响应中的功能
16
作者 宋兴舜 孙丽娜 +1 位作者 张秋艳 王瑞芳 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期85-90,99,共7页
叶黄素循环存在于高等植物和绿色藻类,是保护植物光合机构免受过剩光能破坏的重要机制。作为叶黄素循环关键酶,紫黄质脱环氧化酶(VDE)可催化双脱氧紫黄质(V)脱环氧化成单环氧玉米黄质(A)进而生成玉米黄质(Z),保护光合器官免受过剩光能... 叶黄素循环存在于高等植物和绿色藻类,是保护植物光合机构免受过剩光能破坏的重要机制。作为叶黄素循环关键酶,紫黄质脱环氧化酶(VDE)可催化双脱氧紫黄质(V)脱环氧化成单环氧玉米黄质(A)进而生成玉米黄质(Z),保护光合器官免受过剩光能破坏。VDE活性受多种因素调节,在非生物胁迫下,植物多种叶绿素荧光等指标均受影响,近期利用过表达、突变体与野生型植株对比研究进一步揭示VDE基因在植物生长中的重要作用。文章综述近年来有关VDE在植物抗逆生理中的功能研究进展。 展开更多
关键词 VDE 紫黄质脱环氧化酶 非生物胁迫 光合参数 荧光参数
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植物叶黄素循环的组成、功能和调节(综述) 被引量:8
17
作者 王仁雷 刘友良 华春 《亚热带植物科学》 2000年第4期59-66,共8页
对近几年来植物体内叶黄素循环的组成、功能、堇菜黄素脱环氧化酶和玉米黄素环氧化酶的结构、生化性质和调节,以及叶黄素的可转变性、定位等方面的研究进展作了综述。
关键词 环氧玉米黄素 堇菜苏素 玉米黄素 堇菜黄素脱环氧化酶 光合作用 植物 研究进展 叶黄素循环
全文增补中
岩藻黄质关键前体新黄质的代谢工程合成 被引量:4
18
作者 张桂林 张亚亭 +2 位作者 姜宏 刘振 毛相朝 《南方水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期57-65,共9页
岩藻黄质是海洋藻类中常见的叶黄素之一,尤其在褐藻中含量较高,具有抑菌、抗炎、抗肥胖、抗糖尿病、抗肿瘤、调节肠道菌群和抗器官纤维化等多种生理活性。新黄质是岩藻黄质的可能前体物质,首次在大肠杆菌(Escherichia coli)中构建新黄... 岩藻黄质是海洋藻类中常见的叶黄素之一,尤其在褐藻中含量较高,具有抑菌、抗炎、抗肥胖、抗糖尿病、抗肿瘤、调节肠道菌群和抗器官纤维化等多种生理活性。新黄质是岩藻黄质的可能前体物质,首次在大肠杆菌(Escherichia coli)中构建新黄质合成途径,首先构建了pTrc99a-crt EBIYZ质粒,该质粒携带5个来自于菠萝泛菌(Pantoea ananatis)的基因crt E、crt B、crt I、crt Y和crt Z,编码的蛋白分别是牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶、八氢番茄红素合成酶、八氢番茄红素脱氢酶、番茄红素环化酶和β-胡萝卜素羟化酶。将该质粒转入大肠杆菌中,得到了产玉米黄质的工程菌E.coli BL21 pTrc99a-crt EBIYZ,玉米黄质产量(细胞干质量,下同)为0.70 mg·g^(-1)。以产玉米黄质工程菌为宿主,将来自三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum)的ZEP3基因去信号肽之后转入,得到产紫黄质的工程菌E.coli BL21 pTrc99a-crt EBIYZ p ACYCDuet-1-QZEP3。在紫黄质工程菌E.coli BL21 p Trc99a-crt EBIYZ p ACYCDuet-1-QZEP3的基础上转入新黄质合酶基因NSY,成功获得了产新黄质的工程菌E.coli BL21 NEO,新黄质产量为99.27μg·g^(-1),紫黄质产量为150.30μg·g^(-1),玉米黄质产量为119.77μg·g^(-1)。 展开更多
关键词 大肠杆菌 岩藻黄质 玉米黄质 紫黄质 新黄质 代谢工程
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Molecular cloning,in vitro expression and enzyme activity analysis of violaxan-thin de-epoxidase from Oryza sativa L. 被引量:1
19
作者 Lin, RC Li, LB Kuang, TY 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2002年第11期915-917,共3页
The violaxanthin de-epoxidase gene was cloned from rice (Oryza sativa subsp. japonica). The full length of the cDNA is 1887 bp, encoding a 446-amino acids protein with the transit peptide of 98 amino acids. The bacter... The violaxanthin de-epoxidase gene was cloned from rice (Oryza sativa subsp. japonica). The full length of the cDNA is 1887 bp, encoding a 446-amino acids protein with the transit peptide of 98 amino acids. The bacterial expression vector pET-Rvde was constructed and the expression quantity of the exogenous protein increased with the induction time by 0.4 mmol/L IPTG. Its molecular weight was similar with that of the native VDE. Western blotting indicated that the expressed protein has immu-nological reaction with the VDE polyclonal antibody. The absorbance spectrum together with xanthophyll pigments quantification by HPLC demonstrated that the expressed VDE has its enzyme activity, which can de-epoxidate violaxanthin into antheraxanthin and zeaxanthin in vitro. 展开更多
关键词 Oryza SALIVA L. violaxanthin de-epoxidase CLONE ex-pression enzyme activity.
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辣椒叶片中新黄质、紫黄质组分分离及含量的测定方法 被引量:1
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作者 王小龙 郁继华 +1 位作者 吴天珍 颉建明 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期307-312,共6页
为建立辣椒叶片中新黄质和紫黄质组分分离及含量测定的高效液相色谱检测方法,为辣椒品种耐性的研究提供方法依据。以KOH-甲醇溶液为皂化液,对其质量浓度、体积、皂化温度、皂化时间进行筛选,对提取溶剂、提取溶剂用量以及流动相、柱温... 为建立辣椒叶片中新黄质和紫黄质组分分离及含量测定的高效液相色谱检测方法,为辣椒品种耐性的研究提供方法依据。以KOH-甲醇溶液为皂化液,对其质量浓度、体积、皂化温度、皂化时间进行筛选,对提取溶剂、提取溶剂用量以及流动相、柱温、流速等色谱条件进行筛选,确定最佳提取工艺及检测条件。结果表明:建立以10 m L 80%丙酮为提取溶剂、以6 m L 200 g/L的KOH-甲醇溶液为皂化液,50℃皂化30 min为皂化条件的提取工艺;以C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为A.乙腈,B.乙酸乙酯,C.水,波长440nm,流速1 m L/min,柱温35℃为色谱检测条件的高效液相色谱检测方法。外标法进行定量,新黄质、紫黄质标准曲线线性关系良好,相关系数为0.998 9和0.998 7,方法平均回收率>70%,方法符合色谱检测要求,可用于辣椒叶片中新黄质、紫黄质含量检测。 展开更多
关键词 辣椒叶片 新黄质 紫黄质 反相高效液相色谱法
原文传递
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