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不同症状类型苜蓿病毒病AMV病原检测及其寄主范围测定
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作者 周建玲 梁巧兰 +5 位作者 魏列新 周其宇 田龙 陈应娥 王存颖 张国印 《草业学报》 CSCD 北大核心 2024年第1期126-137,共12页
为明确采自田间不同症状类型苜蓿病毒病病样中苜蓿花叶病毒(alfalfa mosaic virus,AMV)的带毒情况、症状表现与叶绿素含量的相关性及AMV的寄主范围,本试验通过田间调查采样、症状归类、丙酮乙醇混合液法和双抗体夹心酶联免疫吸附测定(DA... 为明确采自田间不同症状类型苜蓿病毒病病样中苜蓿花叶病毒(alfalfa mosaic virus,AMV)的带毒情况、症状表现与叶绿素含量的相关性及AMV的寄主范围,本试验通过田间调查采样、症状归类、丙酮乙醇混合液法和双抗体夹心酶联免疫吸附测定(DAS-ELISA)法对不同病样的叶绿素和AMV含量进行测定和检测,并对提纯至不同症状类型病样中AMV对9科32种植物的致病性进行测定。结果表明田间苜蓿病毒病病样有轻花叶、重花叶、叶片边缘褪绿黄化型和叶片畸形皱缩花叶矮化型4种症状类型,均带有AMV,且叶绿素含量、AMV含量与症状表现之间具有正相关性,症状表现最严重的叶片畸形皱缩花叶矮化型病样的叶绿素a、b、总叶绿素含量均比对照低58.00%以上,类胡萝卜素含量比对照高134.06%,AMV含量最高,为252.96 pg·mL^(-1);寄主范围测定表明AMV可侵染7科27种植物,对西葫芦致病性最强,症状表现为局部枯斑,30 d时AMV浓度为316.19 pg·mL^(-1)。 展开更多
关键词 苜蓿 病毒病 苜蓿Detection of AMV pathogen of alfalfa virus diseases with different symptom types and its host ranges花叶病毒 寄主植物 叶绿素 致病性 症状表现
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Remote Monitoring of Wheat Streak Mosaic Progression Using Sub-Pixel Classification of Landsat 5 TM Imagery for Site Specific Disease Management in Winter Wheat 被引量:3
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作者 Mustafa Mirik R. James Ansley +2 位作者 Jacob A. Price Fekede Workneh Charles M. Rush 《Advances in Remote Sensing》 2013年第1期16-28,共13页
Wheat streak mosaic (WSM), caused by Wheat streak mosaic virus is a viral disease that affects wheat (Triticum aestivum L.), other grains, and numerous grasses over large geographical areas around the world. To improv... Wheat streak mosaic (WSM), caused by Wheat streak mosaic virus is a viral disease that affects wheat (Triticum aestivum L.), other grains, and numerous grasses over large geographical areas around the world. To improve disease management and crop production, it is essential to have adequate methods for monitoring disease epidemics at various scales and multiple times. Remote sensing has become an essential tool for monitoring and quantifying crop stress due to biotic and abiotic factors. The objective of our study was to explore the utility of Landsat 5 TM imagery for detecting, quantifying, and mapping the occurrence of WSM in irrigated commercial wheat fields. The infection and progression of WSM was biweekly assessed in the Texas Panhandle during the 2007-2008 crop years. Diseased-wheat was separated from uninfected wheat on the images using a sub-pixel classifier. The overall classification accuracies were >91% with kappa coefficient between 0.80 and 0.94 for disease detection were achieved. Omission errors varied between 2% and 14%, while commission errors ranged from 1% to 21%. These results indicate that the TM image can be used to accurately detect and quantify disease for site-specific WSM management. Remote detection of WSM using geospatial imagery may substantially improve monitoring, planning, and management practices by overcoming some of the shortcomings of the ground-based surveys such as observer bias and inaccessibility. Remote sensing techniques for accurate disease mapping offer a unique set of advantages including repeatability, large area coverage, and cost-effectiveness over the ground-based methods. Hence, remote detection is particularly and practically critical for repeated disease mo- nitoring and mapping over time and space during the course of a growing season. 展开更多
关键词 WHEAT STREAK mosaic Virus viral DISEASE Remote Sensing of DISEASE DISEASE Mapping WHEAT DISEASE SITE-SPECIFIC DISEASE Management
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基于VIGS技术干扰病毒RNA防控烟草黄瓜花叶病毒病 被引量:4
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作者 郭玉鸽 张倩 +6 位作者 杨惠娟 李俊营 常栋 张富生 武兆云 阎海涛 杨铁钊 《山东农业科学》 北大核心 2023年第6期136-142,共7页
黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)引起的花叶病是烟草上的重要病害。本试验通过病毒诱导基因沉默技术(virus induced gene silencing,VIGS)构建靶向沉默CMV-1a、CMV-2a、CMV-MP和CMV-CP的VIGS载体,测定基因沉默后CMV相对表达量... 黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)引起的花叶病是烟草上的重要病害。本试验通过病毒诱导基因沉默技术(virus induced gene silencing,VIGS)构建靶向沉默CMV-1a、CMV-2a、CMV-MP和CMV-CP的VIGS载体,测定基因沉默后CMV相对表达量、CMV病毒浓度和TRV相对表达量,并对VIGS载体对CMV的防治效果进行评价。结果表明,试验建立的VIGS载体能够有效导入烟株;沉默CMV-2a的处理CMV相对表达量最低,基因沉默效率最高,为46.25%;接种病毒30 d后CMV-2a处理的病毒浓度最低,仅为对照的72.8%,TRV载体的相对表达量显著高于其他处理;沉默CMV-2a的处理发病时间推迟,病情指数最低,防治效果最好。本研究建立的CMV-2a VIGS体系能够有效沉默外源侵入的CMV基因表达,抑制CMV在烟株内的传播,为防治烟草黄瓜花叶病毒病提供了新的思路与方法。 展开更多
关键词 VIGS 技术 干扰病毒 RNA 烟草 黄瓜花叶病毒病
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α-羟基-γ-丁内酯类衍生物的设计、合成及抗植物病毒活性
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作者 贺宏伟 徐丹 徐功 《农药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1261-1269,共9页
为寻找具有高活性抗病毒化合物,开发绿色抗植物病毒剂,设计合成了21个α-羟基-γ-丁内酯类化合物,其结构经过核磁共振氢谱、碳谱以及高分辨质谱确认,并初步测定了它们对烟草花叶病毒(TMV)的钝化活性、保护活性和治疗活性。结果表明:该... 为寻找具有高活性抗病毒化合物,开发绿色抗植物病毒剂,设计合成了21个α-羟基-γ-丁内酯类化合物,其结构经过核磁共振氢谱、碳谱以及高分辨质谱确认,并初步测定了它们对烟草花叶病毒(TMV)的钝化活性、保护活性和治疗活性。结果表明:该类化合物具有较好的抗TMV活性,其中化合物8o表现出显著的钝化活性,其EC_(50)值为226.2μg/mL,优于对照药剂病毒唑(EC_(50)值308.4μg/mL)。 展开更多
关键词 天然产物 Γ-丁内酯 合成 抗植物病毒活性 烟草花叶病毒
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西藏部分地区紫花苜蓿病毒病病原鉴定
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作者 常峰华 钟志明 +4 位作者 李凡 朱新强 王明涛 陈功 兰平秀 《草业科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期2091-2098,共8页
对西藏自治区扎囊县、达孜县和林芝市部分地区紫花苜蓿(Medicago sativa)病毒病进行调查,发现病毒病在以上地区均有发生,症状表现为花叶、小叶、斑驳、皱缩、红化、黄化等。利用深度测序技术结合RT-PCR,对2020年8月和2021年7月采自扎囊... 对西藏自治区扎囊县、达孜县和林芝市部分地区紫花苜蓿(Medicago sativa)病毒病进行调查,发现病毒病在以上地区均有发生,症状表现为花叶、小叶、斑驳、皱缩、红化、黄化等。利用深度测序技术结合RT-PCR,对2020年8月和2021年7月采自扎囊县、达孜县和林芝市的211份疑似病毒病的紫花苜蓿样品进行检测,发现侵染西藏紫花苜蓿的病毒有苜蓿花叶病毒(AMV)、苜蓿混合病毒1(MsAV1)、苜蓿暂时性线条病毒(LTSV)和黄瓜花叶病毒(CMV)4种,病毒总检出率为31.8%,AMV、MsAV1、LTSV和CMV的检出率分别为17.1%、10.4%、3.3%和5.7%。存在两种病毒复合侵染的现象,检出率分别为AMV+MsAV11.4%、AMV+LSTV 2.4%、CMV+MsAV10.5%、AMV+CMV0.5%。这是MsAV1、AMV和LTSV在西藏地区的首次报道,也是CMV在中国苜蓿上的首次报道,研究结果将为西藏地区紫花苜蓿病毒病的防控提供参考。 展开更多
关键词 紫花苜蓿病毒病 病害调查 病毒鉴定 苜蓿花叶病毒 苜蓿混合病毒1 苜蓿暂时性线条病毒 黄瓜花叶病毒
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陕西烟田主要病害种类调查与病毒分子检测 被引量:9
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作者 吴宽 陈伟 +1 位作者 成巨龙 康振生 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期933-938,共6页
为明确陕西烟田病害种类,于2013-2015年对陕西烟田病害开展系统调查,鉴定出9种病害,分别是赤星病、白粉病、黑胫病、灰霉病、青枯病、角斑病、野火病、根结线虫病和病毒病,其中,赤星病、白粉病、灰霉病、黑胫病和病毒病发病普遍,危害严... 为明确陕西烟田病害种类,于2013-2015年对陕西烟田病害开展系统调查,鉴定出9种病害,分别是赤星病、白粉病、黑胫病、灰霉病、青枯病、角斑病、野火病、根结线虫病和病毒病,其中,赤星病、白粉病、灰霉病、黑胫病和病毒病发病普遍,危害严重;野火病、青枯病、角斑病和线虫病仅在个别烟田发生。烟草感染病毒的种类包括烟草花叶病毒(TMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)、马铃薯Y病毒(PVY)、烟草蚀纹病毒(TEV)和烟草脉带花叶病毒(TVBMV),其中,CMV、TMV、TEV和PVY检出率分别为23.6%、34.7%、21.3%和18.4%,TMV+CMV、CMV+TEV和CMV+PVY检出率分别为27.4%、24.9%和20.9%,烟田病毒复合感染普遍,造成损失较大。 展开更多
关键词 烟草 赤星病 白粉病 黑胫病 花叶病毒病 多重PCR
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山东葫芦科蔬菜上病毒病种类检测及黄瓜花叶病毒分离物的亚组鉴定 被引量:11
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作者 孙晓辉 王树森 +4 位作者 高利利 乔宁 刘永光 赵静 竺晓平 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2016年第2期211-217,共7页
为了检测和鉴定山东地区葫芦科蔬菜上病毒病种类,从山东诸地11个蔬菜种植区采集了867个葫芦科蔬菜疑似感病样品。利用黄瓜花叶病毒、黄瓜绿斑驳花叶病毒、西瓜花叶病毒、烟草花叶病毒、小西葫芦黄花叶病毒、南瓜花叶病毒、甜瓜黄斑病毒... 为了检测和鉴定山东地区葫芦科蔬菜上病毒病种类,从山东诸地11个蔬菜种植区采集了867个葫芦科蔬菜疑似感病样品。利用黄瓜花叶病毒、黄瓜绿斑驳花叶病毒、西瓜花叶病毒、烟草花叶病毒、小西葫芦黄花叶病毒、南瓜花叶病毒、甜瓜黄斑病毒、瓜类褪绿黄化病毒、李属坏死环斑病毒及甜瓜坏死斑点病毒等特异性引物对疑似感病样品分别进行RT-PCR检测,各病毒检出率分别为34.8%,10.4%,20.0%,41.7%,27.0%,7.8%,2.6%,1.7%,0,0.9%。表明除PNRSV外,其他9种病毒在山东各地均有发生,且CMV和TMV发病率较高,2种或2种以上病毒复合侵染也很普遍。同时为明确山东地区CMV分离物的株系分化状况,选取11个地区有代表性的CMV阳性样品,测定其外壳蛋白(Coat protein,CP)和RNA3核苷酸序列并进行序列比对和进化分析,结果显示侵染山东地区葫芦科蔬菜的CMV分离物均属于IB亚组,与韩国分离物As(AF013291)相似性最高,未发现其他株系。 展开更多
关键词 瓜类病毒病 黄瓜花叶病毒 RT-PCR 亚组
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小麦黄花叶病对不同类型小麦品种生物学性状及籽粒产量的影响 被引量:4
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作者 崔正勇 李鹏 +5 位作者 高国强 阚海礼 杜振翠 张凤云 孙明柱 李新华 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期1175-1180,共6页
为了给小麦科学防病和抗(耐)病品种的筛选提供参考依据,在小麦黄花叶病重发区,以当地种植品种和黄淮冬麦区主推品种为试验材料,研究了小麦黄花叶病对不同小麦品种叶片SPAD(Soil and Plant Analyzer Development)值、春季总茎数、干物质... 为了给小麦科学防病和抗(耐)病品种的筛选提供参考依据,在小麦黄花叶病重发区,以当地种植品种和黄淮冬麦区主推品种为试验材料,研究了小麦黄花叶病对不同小麦品种叶片SPAD(Soil and Plant Analyzer Development)值、春季总茎数、干物质积累量以及成熟期产量性状的影响。结果表明,感病小麦品种临麦4号和矮抗58于起身期(3月11日)开始出现症状,与无症状的临麦4号植株(LM4-N)相比,发病的临麦4号植株(LM4-S)的叶片SPAD值由52.4降至37.3;拔节后期(4月10日)所有品种SPAD值之间均无显著差异。然而,与LM4-N相比,拔节后期LM4-S单位面积总茎数减少51.4%,干物质积累量降低42.2%;成熟期LM4-S单位面积穗数降低21.2%,穗粒数降低24.5%,籽粒产量降低2 944.3kg·hm-2,降幅38.3%。而该病对本研究中的其他抗病表现较好的品种鲁原502、济麦22、良星99和烟农24均未产生显著影响。结合各品种的产量表现,建议在小麦黄花叶病发病地区种植推广鲁原502、济麦22等高产、抗(耐)病性较好的品种。 展开更多
关键词 SPAD值 小麦黄花叶病 品种 产量
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植物源抗病毒制剂VA对烟草花叶病毒(TMV)体外钝化作用的初步研究 被引量:9
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作者 李红霞 康绍兰 +1 位作者 李兴红 耿同茹 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期67-70,共4页
用植物源抗病毒制剂VA与烟草花叶病毒 (TMV)混合 ,经枯斑半叶法接种 ,结果证明 ,VA对TMV有较强的体外钝化作用 ,体外钝化后的枯斑抑制率为 80 .0 % ;用苯酚氯仿法提取TMV的核酸后 ,按一定的比例与VA混合 ,经枯斑半叶法接种测得枯斑抑制... 用植物源抗病毒制剂VA与烟草花叶病毒 (TMV)混合 ,经枯斑半叶法接种 ,结果证明 ,VA对TMV有较强的体外钝化作用 ,体外钝化后的枯斑抑制率为 80 .0 % ;用苯酚氯仿法提取TMV的核酸后 ,按一定的比例与VA混合 ,经枯斑半叶法接种测得枯斑抑制率为 43.8%~ 77.9% ;TMV与VA混合后用RNase处理 ,测得侵染率为 78.6 % ,比未用RNase处理的对照降低了 2 1.4% ,由此说明VA具有一定的体外脱衣壳作用 ;又经电镜观察发现VA可使部分TMV粒体发生断裂或粗细不均、略变弯曲等畸变现象。 展开更多
关键词 植物源抗病毒制剂VA 烟草花叶病毒 体外钝化作用
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文心兰病毒病病原鉴定 被引量:3
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作者 王钰丽 李凡 +2 位作者 李正跃 赵瑞荣 陈海如 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期72-74,共3页
在云南省昆明市的文心兰栽培基地发现了具有病毒病典型症状的感病文心兰植株。感病样品在电镜下可观察到长460-500 nm的线状病毒粒体和长约300 nm的杆状病毒粒体中的一种或两种,分别与已报道的建兰花叶病毒和齿兰环斑病毒粒体大小一致... 在云南省昆明市的文心兰栽培基地发现了具有病毒病典型症状的感病文心兰植株。感病样品在电镜下可观察到长460-500 nm的线状病毒粒体和长约300 nm的杆状病毒粒体中的一种或两种,分别与已报道的建兰花叶病毒和齿兰环斑病毒粒体大小一致。感病样品可以和建兰花叶病毒和齿兰环斑病毒血清中的一种或两种呈阳性反应。利用建兰花叶病毒和齿兰环斑病毒的特异性引物,运用RT-PCR方法可以扩增到与引物设计预期大小一致的核酸条带。由此证明,云南文心兰病毒病的病原是建兰花叶病毒和齿兰环斑病毒中的一种或两种。 展开更多
关键词 文心兰病毒病 建兰花叶病毒 齿兰环斑病毒 鉴定
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大麦黄花叶病毒(BaYMV)的提纯和生化性质的研究 被引量:3
11
作者 赵小立 吴建华 +2 位作者 黄纯农 翁醒华 龚祖埙 《中国病毒学》 CSCD 1993年第3期296-300,共5页
大麦黄花叶病是由禾谷多粘菌(polymyxa graminis)传布的一类麦类病毒病。是上海市效区及长江中下游及沿海大麦产区的重要病害。大麦黄花叶病毒(BaYMV)在国内外虽已有不少研究,但对国内分离株的生化性质尚未有详细报道。本文报道以上海... 大麦黄花叶病是由禾谷多粘菌(polymyxa graminis)传布的一类麦类病毒病。是上海市效区及长江中下游及沿海大麦产区的重要病害。大麦黄花叶病毒(BaYMV)在国内外虽已有不少研究,但对国内分离株的生化性质尚未有详细报道。本文报道以上海郊区的BaYMV为研究材料,成功地建立了一套分离提纯的方法,并在此基础上,研究了该病毒的结构蛋白和核酸性质,并和国外的一些研究结果进行了比较,从而为今后应用生物技术防治大麦黄花叶病毒打下了基础。 展开更多
关键词 大麦 黄花叶病毒 外壳蛋白 提纯
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中国小麦花叶病毒(CWMV)生物学特性初探 被引量:10
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作者 张巧艳 陈剑平 《浙江农业学报》 CSCD 2005年第3期155-157,共3页
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关键词 中国小麦花叶病毒 寄主范围 病毒粒子形态学
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建兰花叶病毒和齿兰环斑病毒RdRp基因hpRNAi表达载体的构建 被引量:2
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作者 杨玉霞 言燕华 +4 位作者 韦武青 马志虎 李倩中 李淑顺 张昌伟 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2013年第1期76-80,共5页
为了构建建兰花叶病毒(CymMV)和齿兰环斑病毒(ORSV)复制酶RdRp基因hpRNAi的表达载体,根据GenBank中CymMV和ORSV RdRp基因的保守序列设计引物,以蝴蝶兰温室生产中两种病毒的分离物为模板,成功扩增了两种病毒的RdRp基因片段。扩增的这两... 为了构建建兰花叶病毒(CymMV)和齿兰环斑病毒(ORSV)复制酶RdRp基因hpRNAi的表达载体,根据GenBank中CymMV和ORSV RdRp基因的保守序列设计引物,以蝴蝶兰温室生产中两种病毒的分离物为模板,成功扩增了两种病毒的RdRp基因片段。扩增的这两种病毒的RdRp基因与数据库中病毒序列同源性均在98%以上。利用融合PCR将两种病毒片段串联在一起,然后通过Gateway技术的BP反应和LR反应将融合产物插入到基因沉默表达载体pHellsgate12中,成功构建了可同时抗建兰花叶病毒和齿兰环斑病毒的发夹结构RNA干扰载体,为兰花多抗基因工程育种奠定了基础。 展开更多
关键词 建兰花叶病毒 齿兰环斑病毒 抗病毒病 RNA干扰
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人工接种CGMMV的增殖及其对西瓜光合作用的影响
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作者 王艳红 陈平 +3 位作者 王聪慧 毛赫 张孝宗 李立梅 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期28-35,共8页
为明确西瓜感染黄瓜绿斑驳花叶病毒CGMMV后病毒的增殖过程及其对光合作用的影响,本研究以辽宁省田间主栽西瓜品种‘京欣’为试材,测定了人工接种CGMMV后,西瓜植株体内病毒含量、光合色素、光合作用相关指标以及参与光合作用的关键酶活... 为明确西瓜感染黄瓜绿斑驳花叶病毒CGMMV后病毒的增殖过程及其对光合作用的影响,本研究以辽宁省田间主栽西瓜品种‘京欣’为试材,测定了人工接种CGMMV后,西瓜植株体内病毒含量、光合色素、光合作用相关指标以及参与光合作用的关键酶活性的变化,结果显示:接种3d后,即可检测到病毒,24d植株内病毒含量达最高;叶绿素a、叶绿素b及类胡萝卜素的含量均有所降低,叶绿素a在9d后均低于健康对照,而叶绿素b和类胡萝卜素在15d后明显低于健康对照,第18天时,健康对照的叶绿素b含量达接种处理的1.33倍;ALA脱水酶活性除第15天与对照无显著差异外,整个测定期间均低于健康对照,21d时健康对照的ALA脱水酶的活性达29.9U/h,为接种处理的2.18倍;PEP羧化酶的活性显著低于健康对照,测定期间接种处理的PEP羧化酶活性变化不大;乙醇酸氧化酶活性明显升高,测定期间其活性均显著高于健康对照;西瓜叶片的光合速率、气孔导度和蒸腾速率均远小于健康对照,而细胞间隙CO_2浓度却比对照高,本研究为揭示西瓜感染CGMMV后的光合作用变化规律奠定了基础。 展开更多
关键词 西瓜 黄瓜绿斑驳花叶病毒 病毒增殖 光合作用
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广东烟草花叶病毒的提纯,鉴定及外壳蛋白基因扩增 被引量:1
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作者 刘志昕 郑学勤 李乃坚 《热带作物学报》 CSCD 1993年第2期79-85,共7页
从广东烟草病株叶片中提纯获得一种杆状病毒,用几种血清学方法测定该病毒和烟草花叶病毒有血清学关系,SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳表明该病毒外壳蛋白由一种分子量为17500道尔顿的亚基构成。根据粒体形态,血清学及病毒生化特性,该病毒被鉴... 从广东烟草病株叶片中提纯获得一种杆状病毒,用几种血清学方法测定该病毒和烟草花叶病毒有血清学关系,SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳表明该病毒外壳蛋白由一种分子量为17500道尔顿的亚基构成。根据粒体形态,血清学及病毒生化特性,该病毒被鉴定为烟草花叶病毒。从提纯病毒提取RNA,反转录合成cDNA,用人工合成的两段DNA引物通过聚合酶链式反应扩增获得480bp的外壳蛋白基因片断。 展开更多
关键词 烟草花叶病毒 提纯 鉴定 烟草
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湖北及山东地区栽培芋病毒病的田间调查及其病原的分子检测 被引量:1
16
作者 施世明 洪霓 《长江蔬菜》 2011年第16期79-81,共3页
对湖北及山东地区种植的芋调查发现,田间芋病毒病发生普遍,症状表现主要有花叶、羽状斑驳、畸形皱缩、褪绿斑点等。2010年9月30日对武汉蔬菜科学研究所国家种质武汉水生蔬菜资源圃种植的芋进行调查发现,以上4种症状的田间显症率分别为26... 对湖北及山东地区种植的芋调查发现,田间芋病毒病发生普遍,症状表现主要有花叶、羽状斑驳、畸形皱缩、褪绿斑点等。2010年9月30日对武汉蔬菜科学研究所国家种质武汉水生蔬菜资源圃种植的芋进行调查发现,以上4种症状的田间显症率分别为26.92%,16.67%,28.21%和3.85%,田间调查时未发现蚜虫等媒介昆虫。对不同来源的芋叶片样品进行芋花叶病毒(Dasheen mosaic virus,DsMV)的RT-PCR检测,各症状田间检出率为21.1%-42.9%。 展开更多
关键词 病毒病 芋花叶病毒 田间调查 分子检测
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两种桑树病毒的形态观察与检测 被引量:3
17
作者 孙勋勋 周轶楠 +3 位作者 黄吉雷 易辉玉 田铃 刘吉平 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期252-258,共7页
桑树病毒病一直是影响蚕桑产业发展的重要因素之一,但其病原也尚未完全确认。本研究收集全国不同桑园、不同时间和不同品种的皱缩状和花叶状桑叶样品,分离病毒后使用透射电子显微镜观察病毒形态特征。结果在桑病叶中分离获得两种病毒,... 桑树病毒病一直是影响蚕桑产业发展的重要因素之一,但其病原也尚未完全确认。本研究收集全国不同桑园、不同时间和不同品种的皱缩状和花叶状桑叶样品,分离病毒后使用透射电子显微镜观察病毒形态特征。结果在桑病叶中分离获得两种病毒,一种为双联体形态病毒,长(27.84±1.71)nm,宽(17.05±1.13)nm,形态特征与双生病毒属的病毒形态特征一致;另一种为球状体病毒(80~100 nm),形态特征与番茄斑萎病毒属的病毒形态特征一致;桑叶切片观察,发现同一桑叶材料中存在这两种病毒。通过高通量测序发现其存在桑花叶型萎缩病相关病毒Mulberry mosaic dwarf associated virus(MMDaV)和桑脉带相关病毒Mulberry vein banding associated virus(MVBaV)。设计上述病毒的特异引物,对158份桑病叶进行PCR检测,MMDaV的检出率为93.04%;而MVBaV为60.13%,同时检出率为57.59%。结果表明,MMDaV和MVBaV在桑病叶中普遍存在,且同时存在。本研究首次在桑树病叶中同时观察并检测到MMDaV和MVBaV,二者在桑皱缩状和花叶状的桑叶中存在混合感染的现象,研究结果将为今后深入研究桑病毒病及防控奠定了基础。 展开更多
关键词 桑树病毒病 桑花叶型萎缩病相关病毒 桑脉带相关病毒 形态特征 PCR检测
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侵染萝卜的油菜花叶病毒广东分离物分子特征及其致病性分析 被引量:1
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作者 李正刚 汤亚飞 +3 位作者 佘小漫 于琳 蓝国兵 何自福 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第14期2752-2761,共10页
【目的】病毒病是萝卜(Raphanus sativus)生产上的主要病害之一,严重危害萝卜生产安全及产业发展。本研究旨在鉴定侵染广东萝卜的病毒种类,探究侵染萝卜的油菜花叶病毒(youcai mosaic virus,YoMV)分子特征及致病性,为萝卜病毒病的防控... 【目的】病毒病是萝卜(Raphanus sativus)生产上的主要病害之一,严重危害萝卜生产安全及产业发展。本研究旨在鉴定侵染广东萝卜的病毒种类,探究侵染萝卜的油菜花叶病毒(youcai mosaic virus,YoMV)分子特征及致病性,为萝卜病毒病的防控提供科学依据。【方法】从广东省惠州市萝卜种植基地采集了3个疑似病毒病侵染的萝卜病样及1个无症状样品,提取样品总RNA,利用小RNA深度测序初步探明病毒种类,然后根据测序结果设计病毒特异引物进行RT-PCR验证。应用分段克隆方法扩增病原病毒YoMV基因组1—3405 nt片段和3194—6304 nt片段,然后通过同源重组克隆到pCB301双元载体上,得到YoMV-GD分离物基因组全长序列,同时构建该病毒分离物的侵染性克隆。利用MEGA7软件对YoMV-GD及其他分离物全长核苷酸序列进行系统进化分析。通过侵染性克隆人工注射接种本生烟和普通烟,检验pCB301-YoMV-GD的侵染性,然后再注射接种萝卜和菜心,测定YoMV-GD分离物的致病性。【结果】侵染广东萝卜的病毒包含萝卜隐状病毒3(Raphanus sativus cryptic virus 3,RsCV3)、萝卜黄病毒1(Raphanus sativus chrysovirus 1,RasCV1)、芜菁花叶病毒(turnip mosaic virus,TuMV)、YoMV 4种;YoMV-GD分离物全长序列为6304 nt,编码4个蛋白,分别为124.7 kD复制相关蛋白、183 kD复制酶、30 kD运动蛋白MP、17.7 kD外壳蛋白CP,与YoMV英国分离物(GenBank登录号:AY318866)核苷酸相似性最高,为99.18%;YoMV-GD分离物与英国、德国及我国上海、重庆分离物的亲缘关系较近;构建的侵染性克隆pCB301-YoMV-GD可以系统侵染本生烟和普通烟,引起严重的坏死、枯斑等症状,具有较强的侵染性;YoMV-GD可以系统侵染萝卜和菜心,引起轻微的黄化和花叶等症状,致病力较弱。【结论】侵染广东萝卜的病毒包含RsCV3、RasCV1、TuMV和YoMV,且以复合侵染形式存在;YoMV遗传进化并没有明显的地域性;YoMV-GD对烟草致病力较强,而对萝卜和菜心致病力较弱。 展开更多
关键词 萝卜病毒病 油菜花叶病毒 分子特征 侵染性克隆 致病性
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烟草花叶病毒54 kD基因的cDNA克隆及序列分析 被引量:3
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作者 任兵 王春香 +1 位作者 潘乃穟 陈章良 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1992年第11期829-834,共6页
以国内普通株系的烟草花叶病毒(TMV)RNA为模板,人工合成的寡聚核苷酸为引物,合成了cDNA并克隆到Bluescript载体上。通过限制性内切酶图谱分析和DNA全序列测定,证明克隆了完整的烟草花叶病毒的54kD蛋白基因。测定的cDNA序列与国外发表的T... 以国内普通株系的烟草花叶病毒(TMV)RNA为模板,人工合成的寡聚核苷酸为引物,合成了cDNA并克隆到Bluescript载体上。通过限制性内切酶图谱分析和DNA全序列测定,证明克隆了完整的烟草花叶病毒的54kD蛋白基因。测定的cDNA序列与国外发表的TMV U_1株系比较,DNA有很高的同源率,编码的氨基酸序列完全相同。并将该基因转入烟草中,获得了在卡那霉素选择培养基上生长的愈伤组织。 展开更多
关键词 烟草花叶病毒 植物基因工程
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玉米抗病毒基因工程研究进展 被引量:1
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作者 燕照玲 段俊枝 +6 位作者 冯丽丽 陈海燕 齐红志 杨翠苹 施艳 任银玲 刘毓侠 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期2136-2144,共9页
病毒病是导致玉米产量降低和品质下降的主要原因之一。在我国,玉米矮花叶病和粗缩病发生范围最广、危害最严重。基因工程技术可人为将抗性基因或部分片段定向导入植物获得转基因抗病毒植株,具有速度快、效率高等优点,在玉米抗病毒育种... 病毒病是导致玉米产量降低和品质下降的主要原因之一。在我国,玉米矮花叶病和粗缩病发生范围最广、危害最严重。基因工程技术可人为将抗性基因或部分片段定向导入植物获得转基因抗病毒植株,具有速度快、效率高等优点,在玉米抗病毒育种中具有重要的应用价值。文章在总结我国主要玉米病毒病及其病原种类的基础上,论述采用不同策略培育抗病毒玉米植株的研究进展,其中,利用植物病毒基因序列的策略有病毒编码蛋白基因介导的抗病性、RNA干扰(RNAi)介导的抗病性、人工小RNA(amiRNA)介导的抗病性3种,还可利用非植物病毒基因,包括寄主的抗性基因及来自其他植物、动物和微生物的抗病毒基因如核糖体失活蛋白、核酸酶、2-5A体系的基因等;最后分析各种策略的优缺点及抗病毒转基因玉米的安全性问题,为科研工作者优化玉米抗病毒育种工程、培育生产上可推广的抗病毒品种提供参考。 展开更多
关键词 玉米 病毒病 甘蔗花叶病毒 水稻黑条矮缩病毒 基因工程 抗病育种
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