基于网络调控分析筛选非小细胞肺癌PD-L1阴性患者的免疫治疗标志物及辅助药物

目的:基于加权基因共表达网络筛选PD-L1阴性非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)患者的潜在免疫治疗靶点并筛选相应小分子药物提高免疫应答效率。方法:分别从TGCA数据库筛选出1 037例NSCLC数据和108例正常数据,以及GEO数据库中的60例NSCLC数据和9例正常数据。在数据标准化后,将PD-L1表达水平后五分位的患者定义为PD-L1阴性患者,两个数据集中的差异基因作为加权基因共表达网络分析的输入。同时,构建风险比例回归模型预测高风险基因对于预后的影响。最后在DrugBank数据库中筛选以风险基因为靶点的小分子药物并进行模拟对接。结果:风险比例回归模型通过六个风险基因(CXCL12、GBP1、TGM2、HMOX1、GBP3、C1QB)的表达将数据分为高风险组和低风险组,两组间患者的生存时间、生存状态、免疫细胞比例、基质细胞比例和基因表达均存在极大的差异(P<0.05),模型在测试集和验证集中的AUC分别达到了0.860和0.752。此外,高表达GBP1和TGM2患者预后更差,因此被确定为最终的生物标志物。以GBP1和TGM2为靶点,药物数据库共筛选到4个靶向基因的小分子药物,并达到有效结合。结论:GBP1和TGM2可能是NSCLC免疫治疗的潜在标志物,且与小分子药物的联药治疗有可能提高免疫应答效率。

大气总悬浮颗粒物的肺毒性及抗毒性实验研究

为探讨大气总悬浮颗粒物的肺毒性和抗毒性物质，采用支气管直接注入染毒的方式和食物强化ＶＡ、ＶＥ、ＶＣ、Ｚｎ和Ｓｅ的方法进行实验研究，结果表明染毒后大鼠脏体比发生变化，肺体比、肝体比和脾体比阳性对照组高于阴性对照组和各强化组并具有统计学意义，而各强化组与阴性组相比差别无显著性。同样大鼠肺灌洗液中ＬＤＨ、ＡＣＰ和ＮＡ的变化也显示阳性组高于阴性对照组和各强化组，而各强化组与阴性对照组相比差别无显著性。肺组织匀浆中ＬＰＯ、ＧＳＨ－Ｐｘ测定结果表明阳性组ＬＰＯ增高、ＧＳＨ－Ｐｘ下降，各强化组变化不明显。说明大气颗粒物可诱发体内产生脂质过氧化并引起肺部损伤，ＶＡ、ＶＥ、ＶＣ、Ｚｎ和Ｓｅ具有减轻大气颗粒物致肺部的损伤作用。

微小RNA-21-5p对大鼠高氧性急性肺损伤的影响

目的：探讨微小RNA-21-5p（miR-21-5p）对大鼠高氧性急性肺损伤（HALI）的影响，为HALI的基因治疗提供理论依据。方法按随机数字表法将160只SD大鼠分为高氧对照组、磷酸盐缓冲液（PBS）组、空病毒组及miR-21-5p组4组，每组40只。高氧对照组大鼠直接置于高氧箱（氧浓度＞90%）中饲养，其余3组分别经鼻腔滴入PBS、慢病毒及miR-21-5p慢病毒各200μL，然后置于高氧箱中饲养。各组分别在高氧放置0、24、48及72 h时随机取10只大鼠进行动脉血气分析，并计算氧合指数（OI）和呼吸指数（RI）；随后颈动脉放血处死大鼠取肺组织，测量左肺湿/干质量（W/D）比值，行苏木素-伊红（HE）染色，光镜下观察右肺组织病理学改变并进行病理学评分。结果高氧损伤0 h时，各组大鼠OI、RI、肺组织病理学评分、肺W/D比值差异均无统计学意义（均P＞0.05）；随着高氧损伤时间的延长，各组OI逐渐降低，RI、肺组织病理学评分、肺W/D比值逐渐升高。与高氧对照组比较，miR-21-5p组高氧损伤24、48、72 h时OI明显增加〔mmHg（1 mmHg＝0.133 kPa）：24 h 时358.10±29.25比306.19±37.23，48 h 时336.67±29.27比269.70±29.00，72 h 时323.81±19.05比203.81±43.40，均P＜0.05〕，RI明显减少（24 h时0.23±0.05比0.31±0.06，48 h时0.28±0.07比0.38±0.06，72 h时0.30±0.04比0.46±0.07，均P＜0.05），肺组织病理学评分明显降低（分：24 h时0.60±0.52比0.90±0.74，48 h时1.30±0.95比2.90±1.20，72 h时1.90±0.88比4.70±1.57，均P＜0.05），肺W/D比值明显下降（24 h时3.77±0.38比4.14±0.46，48 h时3.83±0.31比4.56±0.34，72 h时3.89±0.31比5.32±0.27，均P＜0.05）。PBS组、空病毒组高氧损伤后各指标与高氧对照组比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）。光镜下观察可见，随着高氧损伤时间的延长，各组大鼠肺泡结构逐渐紊乱，肺泡壁断裂破坏，肺泡间隔逐渐增宽、水肿、炎性细胞浸润，部分大鼠可见少量红细胞渗出；但miR-21-5p组肺组织病理损伤程度较其他各组明显减轻。结论持续高浓度氧暴露24 h后可成功建立HALI模型；miR-21-5p对HALI大鼠肺组织具有一定的保护作用。

血管生成素-1对脓毒症小鼠肺血管通透性的影响

目的探讨外源性血管生成素-1（Ang-1）对脓毒症小鼠肺血管通透性的影响。方法腹腔注射脂多糖（LPS）制作脓毒症小鼠模型。64只BALB／c小鼠随机分为Ns组、Ang-1组、LPS组和LPS＋Ang-1组（n=16）。各组经处理12h后，分别收集血浆、肺泡灌洗液及肺组织标本。ELISA法测定血浆Ang-1、Ang-2浓度并计算Ang-2／Ang-1比值，测定血浆、肺泡灌洗液的总蛋白浓度并计算肺通透指数（LPI），测定肺组织湿干比及观察肺组织病理变化。结果Ang-1组血浆Ang-1浓度较Ns组明显升高（P〈0．05）。LPS组和LPS＋Ang-1组血浆Ang-1浓度较Ns组均明显降低（P〈0．01），而血浆Ang-2浓度及Ang-2／Ang-1比值较Ns组均明显升高（P〈0．01）。LPS＋Ang-1组血浆Ang-1浓度较LPS组明显升高（P〈0．01）。且血浆Ang-2浓度及Ang-2／Ang-1比值较LPS组明显降低（P〈0．01）。Ang-2／Ang-1比值与小鼠肺湿干比呈明显正相关（r=0．76，P〈0．01）。LPS组肺湿干比、肺通透指数较NS组明显升高（P〈0．01），LPS＋Ang-1组肺湿干比、肺通透指数较LPS组明显降低（P〈0．01），且肺组织病理渗出水肿较LPS组明显好转。结论外源性Ang-1通过调节脓毒症小鼠Ang-2／Ang-1失平衡而发挥降低肺血管通透性及改善肺水肿作用。

肺部孤立性实性病变的磁共振DWI技术优选

目的:比较快速自旋回波扩散加权成像(TSE-DWI)与平面回波(EPI)DWI对肺部孤立性实性病灶的成像质量,探讨TSE-DWI在肺部孤立性病灶中的临床应用价值。方法:对40例肺孤立性实性病变患者分别行TSE-DWI及EPI-DWI扫描(b=600s/mm^2),测量并比较两个序列图像上病灶的信噪比、病灶及脊髓的ADC值、变形率、成像效率及图像质量的主观评分。结果:TSE-DWI序列的病灶成像效率为100%(40/40);EPI-DWI的成像效率为90%(36/40),4例病灶的图像变形严重,无法测量其ADC值。TSE-DWI序列上脊髓的ADC值高于EPI-DWI序列(P<0.01)。病灶在TSE-DWI上的ADC值高于EPI-DWI序列(P=0.007)。病灶在TSE-DWI上的变形率明显低于EPI-DWI序列(P<0.01)。图像质量的主观评分,TSE-DWI序列中39例为3分、1例为2分,EPI序列中主观评分19例为3分、17例为2分、4例为1分(图像变形无法测量),两组间图像质量主观评分的差异具有统计学意义(P<0.001)。结论:TSE-DWI的病灶变形率、成像效率及主观评分均较EPI-DWI序列高,可作为胸部孤立性病变的常规扫描序列。

碳酸缓冲液对大鼠光气肺损伤影响的研究

目的 探讨光气肺水肿形成机理及碳酸缓冲液对大鼠光气中毒的影响。方法 4 0只SD大鼠被随机分为阴性对照组、阳性对照组、0 2ml碳酸缓冲液治疗组、0 5ml碳酸缓冲液治疗组。光气染毒后 5min ,阳性对照组注射 0 5ml生理盐水 ,两个治疗组分别注射碳酸盐缓冲液 (碳酸缓冲液 :Na2 CO3 /NaHCO3 pH :7 6 ,0 1mmol/L) 0 2和0 5ml,3h后处死采血并开胸取肺 ,用荧光分光法检测脂质过氧化产物丙二醛 (MDA)、还原型谷胱甘肽 (GSH)和氧化型谷胱甘肽 (GSSG) ,测量并计算肺湿干比。结果 与阴性对照组相比 ,光气染毒大鼠血清MDA含量显著升高 (P <0 0 1) ,血清GSH显著降低 (P <0 0 1) ,肝脏GSSG显著升高 (P <0 0 5 ) ,肺湿干比增大 (P <0 0 5 )。与阳性对照组相比 ,给予碳酸缓冲液治疗组血清MDA均显著降低 ,0 5ml碳酸缓冲液对血清MDA的抑制作用更强 (P <0 0 5 ) ;两个碳酸缓冲液治疗组血清GSH升高显著 (P <0 0 5 ) ;治疗组的肺湿干比有所降低 ,但无显著性差异 (P <0 0 5 )。结论 光气中毒后出现氧化损伤 ,抗氧化剂GSH损耗严重 ;给予碳酸缓冲液可以缓解光气中毒肺损伤。

1.5T DWI在肺内良、恶性病变鉴别诊断中最适b值的探讨

目的:探讨1.5TDWI对肺内良、恶性病变的鉴别诊断价值及b值的优化。方法:搜集40例经病理/临床证实的肺内良、恶性病变患者(恶性病变23例,良性病变17例)的影像及临床资料,40例均经MSCT检查发现肺部病变,并行常规T1WI、T2WI以及多b值DWI(b=0,300,600,1000s/mm2)检查,测量3组b值测得的ADC值,分析不同b值对图像质量、信噪比(SNR)、对比噪声比(CNR)的影响,根据受试者工作特征(ROC)曲线评价不同b值下ADC值鉴别肺部良、恶性病变的诊断效能;并比较同一b值下良、恶性病变ADC值的差异。结果:随着b值的增加,DWI图像信号逐渐增高,ADC、SNR及CNR值逐渐下降;b值为300和600s/mm2两组图像SNR值差异无统计学意义(P>0.05),b值为300与1000s/mm2以及600与1000s/mm2两组SNR值差异均具有统计学意义(P均<0.05);CNR值在两两组间的差异均具有统计学意义(P均<0.05)。b值为300、600和1000s/mm2时,ROC的曲线下面积(AUC)分别为0.78、0.83和0.81,且均具有诊断意义(AUC均>0.5),当b=600s/mm2时,诊断效能最高。在同一b值下,恶性病变图像信号高于良性病变,且ADC值低于良性病变(P均<0.05)。结论:1.5T DWI多b值胸部扫描有助于鉴别肺内良、恶性病变,当b=600s/mm2时,对肺良、恶性病变的鉴别诊断效能最高。

高压氧预处理对高原肺水肿大鼠肺水通道蛋白-5的影响

目的观察高压氧预处理(hyperbaric oxygen preconditioning,HBO-PC)对高原肺水肿(high-altitude pulmonaryedema,HAPE)大鼠肺水通道蛋白-5(AQP5)的影响。方法 38只Wistar大鼠,分对照组、HAPE模型组(HAPE组)及高压氧预处理组(HBO组)。制作HAPE模型后,分别以Western Blot法及Real-Time PCR法观察各组大鼠肺AQP5蛋白、基因表达,同时观察肺水含量及病理变化。结果 HAPE组肺湿/干比明显高于Control组;HBO组肺损伤积分明显低于HAPE组;HAPE组AQP5及AQP5mRNA较Control组显著降低,HBO组AQP5及AQP5mRNA均明显高于HAPE组;肺组织损伤与肺AQP5表达有密切的相关关系,且呈负相关。结论 AQP5表达降低可能参与了HAPE的发病机制;HBO-PC能上调AQP5表达,具有预防和减轻HAPE的作用。

急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征大鼠肾素-血管紧张素系统的变化及其干预的实验研究

目的:观察油酸诱导的急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征(ALI/ARDS)中肾素-血管紧张素系统(RAS)的变化,探索ALI/ARDS治疗新途径。方法:①建立ALI/ARDS动物模型,并利用症状、动脉血气分析、肺湿/干重比(W/D)和肺组织病理等指标评估;采用紫外分光光度法和放射免疫法分别测定RAS关键酶:血管紧张素转换酶(ACE)、ACE2和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ),并研究其变化规律。②分别给模型鼠腹腔注射卡托普利、重组大鼠ACE2(rmACE2)和氯沙坦,观察干预效果。结果:①模型评判及RAS变化:模型复制成功,油酸组大鼠肺水含量较正常组明显增多(W/D:6.71±0.64 vs 4.02±0.10,P<0.01),氧合指数明显下降(PaO_2/FiO_2:267±19 vs 450±15,P<0.01),且病理显示明显的肺损伤改变;油酸组血浆中ACE2表达下降,而ACE表达明显升高,氯沙坦组ACE表达降低,对应ACE2表达升高;油酸组大鼠血浆AngⅡ水平明显增高,而氯沙坦组水平降低(76.50±29.21 vs 118.92±45.48,P<0.05,单位:Pg/ml)。②RAS药物对ALI/ARDS的影响:与油酸组比较,卡托普利组W/D明显降低(5.35±0.25 vs 6.06±0.22,P<0.05),而rmACE2组也出现下降趋势(6.33±0.32 vs 6.71±0.64,单位:U),但无明显统计学差异(P=0.542)。氯沙坦组降低最显著(5.35±0.25,P<0.01,单位:U);氯沙坦可提高ALI/ARDS大鼠7d生存率。结论:①RAS存在激活,表现为关键酶发生显著变化:ACE、AngⅡ的升高和ACE2的降低。②干预RAS能部分改善ALI/ARDS肺损伤。其中以氨沙坦作用最为显著,且能最终提高7d生存率。③RAS可能开辟ALI/ARDS药物治疗的新时代,有望降低ALI/ARDS病死率。

人脐带间充质干细胞移植治疗大鼠急性肺损伤

背景:间充质干细胞具有免疫调节特性,脐带间充质干细胞因其特有的优势,将在急性肺损伤和急性呼吸窘迫综合征的临床应用中有着光明的前景。目的:探讨脐带间充质干细胞移植对内毒素性大鼠急性肺损伤模型的保护作用。方法:将48只健康雄性SD大鼠随机均分为正常对照组、急性肺损伤组和脐带间充质干细胞移植组。后两组采用经气管内滴注内毒素建立急性肺损伤模型。成功造模1h后,脐带间充质干细胞移植组,经气管内滴注脐带间充质干细胞混悬液,正常对照组和急性肺损伤组同法予以等量生理盐水。分别在干预后24,72h,观察肺组织病理改变,检测病理组织评分、肺组织干湿质量比、髓过氧化物酶活性及血浆白细胞介素6、白细胞介素10及肿瘤坏死因子α水平。结果与结论:脐带间充质干细胞移植可以减轻内毒素诱导的急性肺损伤模型的损伤程度;脐带间充质干细胞移植组在各时间点与急性肺损伤组比较,病理损伤评分、肺干湿质量比、肺组织髓过氧化物酶活性、血浆白细胞介素6和肿瘤坏死因子α水平均明显降低,血浆白细胞介素10水平明显升高。说明脐带间充质干细胞对内毒素性急性肺损伤模型有保护作用;其保护机制可能为脐带间充质干细胞移植维持肺内炎性递质和抗炎递质平衡。

自制低钾右旋糖酐溶液和Euro-Collins溶液对大鼠离体肺的保护作用

目的:研究自制低钾右旋糖酐(LPD)溶液和Euro-Collins(EC)溶液对大鼠离体肺的保护作用。方法:30只SD大鼠随机分成5组,每组6只,取离体肺分别用生理盐水(NS)、LPD溶液和EC溶液进行肺灌洗和保存,并于保存后4、8 h取肺组织进行病理切片观察、肺干湿重比和肺通透性的测定。结果:(1)经4 h保存,LPD组和EC组肺组织未见严重损伤,与NS组均有显著性差异(P<0.01)。(2)经4 h保存,干湿重比LPD组和EC组明显低于NS组(P<0.01,P<0.001);肺通透性测定LPD组和EC组的伊文斯蓝量明显低于NS组(P<0.01,P<0.05)。(3)经8 h保存,干湿重比LPD组明显低于EC组(P<0.05);肺通透性测定伊文斯蓝含量LPD组略低于EC组(P=0.073 6)。结论:自制的LPD溶液和EC溶液对大鼠离体肺有良好的保存效果,长时间保存,LPD溶液效果更好。

乌司他丁对重症中暑小鼠急性肺损伤的保护作用

目的探讨乌司他丁(ulinastatin,UTI)对重症中暑小鼠急性肺损伤的保护作用。方法 SPF级雄性C57/BL6小鼠60只,随机分为6组(n=10):正常组、重症中暑模型组、造模前给药组、造模前生理盐水组、造模后给药组及造模后生理盐水组。正常组小鼠置于(22±1)℃的环境中,其余各组小鼠置于加温舱(温度37℃、湿度60%)持续加温,两给药组分别于造模前、后10 min腹腔注射UTI 5×104U/kg,而两生理盐水组则腹腔注射等量的生理盐水,加热期间前1.5 h每隔30 min用水银温度计人工测定肛温(Tc)1次,之后每隔15 min测1次肛温,待Tc达42.7℃(以此作为重症中暑开始的标志)后撤离高温舱,转移至常温中复温6 h。观察各组肺组织病理学变化,检测各组支气管肺泡灌洗液(Bronchial Alveolar Lavage Fluid,BALF)中蛋白含量、肺湿/干比(W/D)、肺含水量、肺血管通透性(伊文思蓝含量)。结果与正常组相比,重症中暑模型组及造模前、后生理盐水组肺部损伤严重,病理形态学改变明显,肺W/D比值、肺含水量、BALF中蛋白含量及肺血管通透性均显著增加(P<0.05),且组间无显著性差异(P>0.05);而造模后给药组与重症中暑模型组及造模前、后生理盐水组相比,其肺部病理变化明显改善,肺W/D值、肺含水量、BALF中蛋白含量及肺血管通透性显著降低,但高于正常对照组(均P<0.05),而造模前给药组小鼠Tc≥42.7℃的时间较其它热打击组明显延长,但上述肺损伤指标却未见明显改善。结论乌司他丁对重症中暑所致肺水肿与炎性渗出具有抑制作用,能有效对抗重症中暑所致的急性肺损伤,发挥保护作用。

肺保护性通气策略对单肺通气大鼠肺组织中水通道蛋白表达的影响

目的探讨肺保护性通气策略对水通道蛋白(AQP)表达的影响。方法将15只成年雄性SD大鼠随机分为对照组(C组)、肺保护通气组(P组)、大潮气量组(H组),每组5只。C组仅切开气管导管并保留自主呼吸,P组与H组行气管插管后连接小动物呼吸机行左肺机械通气。C组在气管切开即刻处死大鼠,P组与H组在机械通气4 h后处死大鼠。采用免疫组化法测定左肺组织AQP蛋白表达。采用RT-PCR法测定AQP mRNA的表达。将剩余左肺组织用于计算肺组织湿/干重比值。结果免疫组化结果显示,C组、P组与H组AQP-1蛋白表达均未见明显差异,H组AQP-5蛋白表达较其他2组显著减少。P组和H组AQP-1 mRNA、AQP-5 mRNA表达均小于C组,且P组高于H组(P<0.05)。P组和H组中肺组织湿/干比值均显著大于C组(P<0.01),P组和H组肺组织湿/干比值有显著差异(P<0.01)。结论肺保护性通气策略能减少单肺通气大鼠肺组织中AQP-1和AQP-5蛋白的表达,但与传统的大潮气量通气模式相比,其影响相对较小。

重症急性胰腺炎大鼠肺损伤的病理生理变化及机制研究

目的观察重症急性胰腺炎大鼠肺损伤的病理生理变化并探讨其发生机制。方法选取2008年1月至2009年1月健康雄性SD(Sprague-Dawley)大鼠240只,按照随机数字表随机均分为8组,每组30只,即重症急性胰腺炎(SAP)不同时间点组(SAP 1 h、3 h、6 h、9 h、12 h、18 h、24 h组)和对照组。比较各组血清淀粉酶、肺组织湿/干重比、肺髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性、肺通透性指数的变化。结果观察组大鼠肺损伤组织评分、肺组织湿干重比以及肺髓过氧化物酶(MPO)水平随着时间的延续逐渐升高,各时间点组均明显高于对照组(P<0.05),观察组肺通透性指数随时间延续呈逐渐降低趋势,均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。肺组织MPO水平与肺损伤评分存在正相关(r=0.946,P<0.01),肺湿干重比与肺损伤评分呈正相关(r=0.879,P<0.01),肺通透性指数与肺损伤评分存在负相关(r=-0.859,P<0.01)。结论重症急性胰腺炎大鼠肺损伤的损伤程度随SAP病程延长而逐渐增加,肺组织MPO水平持续升高。

输血相关急性肺损伤小鼠模型的建立

目的探索建立输血相关急性肺损伤(TRALI)小鼠模型。方法雄性Balb/c小鼠随机分为5组(分别命名为A、B、C、D及E组),前4组小鼠5只/组,E组15只/组。E组(TRALI模型组):每只小鼠腹腔注射1 mg/m L脂多糖(LPS)预处理,注射剂量为0.1 mg/(kg·只),24 h后尾静脉注射1 mg/m L H2Kd单克隆抗体,注射剂量为2.25mg/(kg·只),建立TRALI小鼠模型;其余均为对照组,其中A为空白对照组,B为注射LPS组,C为注射LPS及24 h后注射生理盐水(NS)组,D为注射H2Kd单克隆抗体组。分析各组小鼠肺组织病理、肺湿重/干重比、直肠温度、死亡率等指标,建立TRALI小鼠模型,并以此为基础,对阿司匹林(ASA)干预小鼠TRALI的效果做验证。结果与对照组相比,TRALI模型组小鼠2 h的直肠温度(31.060±0.472)℃,明显低于其他各对照组小鼠(P<0.01),肺湿重/干重比为7.642±1.309,则较其他各组明显增加(P<0.01);TRALI模型组小鼠肺组织出现肺泡间隔增厚,肺泡壁断裂,肺泡内纤维蛋白浸润等病理变化,符合TRALI急性肺损伤典型的症状及体征;在ASA干预后2 h,TRALI小鼠死亡率为0,肺水肿明显减轻(P<0.01)。结论成功建立了TRALI小鼠模型,该模型能够模拟TRALI的临床表现,可重复性强,稳定性好,有助于解释TRALI病理过程、探索TRALI的救治措施。

IL-8及SPB蛋白在兔海水及淡水淹溺型急性肺损伤模型中的表达

目的探究组织白细胞介素(IL-8)及表面活性蛋白B(SPB)在兔海水及淡水淹溺型急性肺损伤模型中的表达。方法选取实验中心饲养健康成年新西兰兔36只,采用随机数表分组,将其分海水组,淡水组与对照组。三组兔均在动物房饲养一周后行麻醉下气管插管,气管插管完成后,海水组兔经气管插管向气管内注射3 mL/kg配置海水,淡水组经气管插管向气管内注射18 mL/kg配置淡水,对照组兔仅行麻醉气管插管操作。手术操作完成后,持续插管通气4 h,通气结束后处死各组实验兔,收集肺组织,光学显微镜下观察各组兔肺组织病理学改变情况,测定肺组织干湿重比(W/D);比较三组兔肺泡灌注液中IL-8及SPB蛋白表达情况;比较三组兔肺组织IL-8及SPB蛋白表达情况。结果海水组与淡水组W/D较对照组均明显上升,结果具有统计学意义(P<0.05),且两组兔肺组织W/D无明显差异(P>0.05);海水组与淡水组肺泡灌洗液中IL-8水平较对照组表达均上升,SPB蛋白较对照组明显下降,结果具有统计学意义(P<0.05),且两组兔肺泡灌洗液中IL-8及SPB蛋白水平无明显差异(P>0.05);海水组与淡水组肺组织中IL-8水平较对照组表达均上升,SPB水平较对照组明显下降(P<0.05),且两组兔肺组织中IL-8及SPB蛋白表达无明显差异(P>0.05)。结论海水组及淡水组淹溺型急性肺损伤实验兔肺泡灌洗液及肺组织IL-8水平均明显上升,SPB水平均明显下降,提示IL-8表达增多及SPB蛋白表达下调与该损伤发生过程密切相关。

盐酸氨溴索减轻胃液误吸导致的大鼠急性肺损伤

目的 探讨盐酸氨溴索在大鼠误吸胃液后导致的急性肺损伤中的治疗保护作用。方法 将SD大鼠随机分为对照组、模型组(采用1.5 mL/kg, pH≈2.3的大鼠胃液经环甲膜穿刺构建误吸模型)及盐酸氨溴索干预组(30 mg/kg)。造模24 h后开始经尾静脉给药,每天1次,连续3 d。HE染色检测肺组织,肺湿干重比(W/D)值和动脉血气评估肺损伤程度,ELISA检测血清中IL-6、IL-10、TNF-α和C-反应蛋白(CRP)水平。结果 与对照组比较,模型组大鼠肺泡结构萎缩、间质水肿、炎性细胞渗出及透明膜形成,W/D值增高,pH、动脉血氧分压(pO)降低,动脉血二氧化碳分压(pCO)升高,血清炎性因子(IL-6、IL-10、TNF-α和CRP)水平升高(P<0.05)。与模型组比较,盐酸氨溴索干预组肺组织病理变化减轻,W/D值降低,pH、pO回升,pCO降低,血清炎性因子(IL-6、IL-10、TNF-α和CRP)水平回降(P<0.05)。结论 盐酸氨溴索能有效减轻大鼠误吸胃液所导致的急性肺损伤,具有较好的治疗和保护作用。

低温对失血性休克炎症小体活化的影响研究

目的探索治疗性低温对失血性休克（hemorrhagic shock，HS）大鼠肺组织炎症小体活化的影响。方法本研究将24只SD大鼠随机（随机数字法）分成3组：假手术组，常温液体复苏（normothermia resuscitation，NR）组，低温液体复苏（hypothermia resuscitation，HR）组。各组通过股动脉放血到平均动脉压达40mmHg（1mmHg=0．133kPa）保持1h建立HS模型，随后NR组和HR组通过液体复苏使平均动脉压达90mmHg，维持1h，4h后通过放血处死各组大鼠，留取大鼠肺组织。经苏木精．伊红（HE）染色于光镜下观察肺组织的损伤程度，使用干湿比重法检测肺组织水肿情况，采用RT-PCR和Western blotting检测肺组织炎症小体NLRP-3、Caspase-1、IL-1βmRNA和蛋白表达水平。多组间比较采用方差分析，组间两两比较采用SNK-q检验，以P〈0．05为差异具有统计学意义。结果（1）HE染色结果示，与NR组相比，HR组急性肺损伤程度明显较低。（2）肺组织湿／干比重与HR组相比NR组肺水肿显著降低，HR组（5．85±0．10）；NR组（6．47±0．17），t=3．14，P〈0．05；（3）与NR组相比，HR组的NLRP-3和Caspase-1的蛋白表达均显著减少；（4）与NR组相比，HR组的NLRP-3mRNA表达水平显著降低，HR组（1．027±0．143），NR组（1．349±0．163），t=4．36，P〈0．05；HR组的IL-1βmRNA表达水平显著降低，HR组（1．623±0．125），NR组（2．388±0．229），t=7．72，P〈0．05。结论治疗性低温能够降低炎症小体信号通路的活化，从而减弱HS诱导的肺组织损伤。

Bruton酪氨酸激酶和核因子-κB在高氧诱导肺损伤中的作用

目的观察Bruton酪氨酸激酶（ Bruton＇ s tyrosine kinase, Btk）和核因子-κB（ nuclearfactor kappa B, NF-κB） 在高氧诱导的急性肺损伤（hyperoxia-induced acute lung injury, HALI）小鼠肺组织中的表达水平，探讨两者在HALI发生中的作用机制。方法雄性昆明小鼠72只，按随机数字表法随机分为四组：对照组、高氧暴露3d组（H3d组）、高氧暴露3d＋抑制剂组（H3d＋I组）和抑制剂组。光镜下观察各组小鼠肺组织病理学改变，测定支气管肺泡灌洗液（BALF）总蛋白含量（TP）和肺湿／干质量比值（W／D）；采用Westernblot法测定肺组织Btk、p-Btk和pNF-κBp65蛋白表达；采用RT—qPCR法测定肺组织白细胞介素-6（IL-6）mRNA表达，采用ELISA法检测血清中单核细胞趋化因子-1（MCP-）含量。各组间比较采用单因素方差分析。结果对照组与抑制剂组比较，各测定数据差异均无统计学意义（P〉0．05）。与H3d＋I组比较，H3d组肺组织病理损伤明显增加且BALF总蛋白含量和W／D比值均明显增高，（分别为P=0．002，P=0．000）差异均具有统计学意义；H3d组肺组织Btk、p-Btk和pNF—κBp65表达量明显高于H3d＋I组（分别为P=0．002。P=0．013。P=0．000）。H3d组肺组织IL-6mRNA表达水平明显高于对照组（P=0．004）、抑制剂组（P=0．000）和H3d＋I组（P=0．021）；H3d组血清MCP-1含量均高于对照组（P=0．002）、抑制剂组（P=0．000）和H3d＋I组（P=0．009）。相关性分析结果显示，各组小鼠肺组织Btk或p-Btk表达水平与pNF—κBp65表达量之间呈正相关（r=0．902；r=0．954，P〈0．01）。结论Btk可能通过调控NF-κB信号通路而介导IL-6和MCP-1等炎症细胞因子释放，在HALI发牛中起首要作用．抑制Btk的活性可有效减轻肺损伤的严重程度。

不同剂量促红细胞生成素对大鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨不同剂量促红细胞生成素在大鼠肺缺血再灌注时对单核细胞趋化蛋白(MCP)-1表达的影响,研究大鼠肺缺血再灌注损伤的机制。方法将85只健康的雄性Wistar大鼠随机分为5组(n=17):缺血再灌注组(I/R),促红细胞生成素低剂量组(L组)、中剂量组(M组)、高剂量组(H组),假手术组(S组)。缺血前24 h,L、M、H组分别腹腔注射重组促红细胞生成素1 000、3 000和5 000 U/kg,I/R组注射生理盐水;该4组予以阻断左侧肺门部血流60 min,再灌注90 min后(S组只开胸不阻断左肺门),处死大鼠,取左肺标本,观察各组中肺脏颜色、有无出血点等,测动脉血气分析,测量肺的湿干重比(W/D),制作石蜡切片,苏木精-伊红(HE)染色电镜下观察肺组织病理变化,免疫组化染色检测肺组织中MCP-1的含量。结果与S组比较,缺血再灌注各组肺组织MCP-1表达水平和W/D值均上升(P均<0.01),动脉血Pa O2值下降(P均<0.01),且均以I/R组明显;促红细胞生成素不同剂量组间比较,M组肺组织MCP-1表达水平较L、H组降低(P均<0.05),W/D值较L、H组降低(P均<0.05),动脉血Pa O2值较L、H组上升(P均<0.05)。结论不同剂量促红细胞生成素对大鼠肺缺血再灌注损伤保护作用不同,保护作用最佳剂量为3 000 U/kg,该保护作用可能是通过抑制MCP-1介导的过度炎症反应来实现的。