WHBE兔膝骨关节炎模型的建立与PRFr的干预研究

目的采用内侧副韧带和部分髌韧带切除术建立WHBE兔KOA模型并用富血小板纤维蛋白释放液(PRFr)干预,探讨WHBE兔KOA模型软骨损伤和炎症的机制以及PRFr干预疗效。方法取WHBE兔24只,随机分成3组,即对照(NC)组(n=6)、模型(KOA)组(n=12)和治疗(PRFr)组(n=6);其中KOA组和PRFr组分别于术后第7天和第14天时向两侧关节腔内注射生理盐水和PRFr 0.5 mL。造模4、8周时,各组动物进行行为学评分、X线影像学观察,并取血清进行ELISA检测IL-1β、TNF-α、MMP-13水平,4周时KOA组处理6只,8周时处理各组剩余动物,取兔双侧膝关节,进行大体评分,脱钙后行病理切片制作,然后进行HE染色、甲苯胺蓝染色和番红O固绿染色以及TGF-β、BMP3和NF-κB免疫组化表达检测。结果与NC组比,造模后WHBE兔Lequesne MG行为学评分,Mankin’s评分,Pelletier评分均显著升高(P<0.01),可见膝关节肿胀明显、关节疼痛刺激和活动受限明显,且X光显示软组织呈高密度阴影,关节积液较多,解剖观察显示关节面粗糙,病理观察显示软骨表面缺损,软骨细胞丢失或部分丢失,表明WHBE兔KOA模型成立。与KOA组比较,PRFr干预治疗后血清炎症水平(IL-1β、TNF-α、MMP-13)均显著降低(P<0.05,P<0.01),软骨表面粗糙程度低,大部分软骨细胞分布整齐;同时TGF-β、BMP3和NF-κB表达水平亦显著降低(P<0.01)。结论本研究成功建立了WHBE兔KOA模型,且PRFr可通过TGF-β/BMP和NF-κB途径改善WHBE兔KOA模型软骨损伤和炎症。

WHBE兔遗传特异性的RAPD分析

应用随机扩增多态DNA技术(RAPD)对WHBE兔、日本大耳白兔和新西兰兔进行了遗传分析.用10个随机引物对其基因组DNA进行PCR扩增.根据电泳结果选用其中8个引物扩增的条带进行遗传分析,共检测到107条扩增片段,其中多态性片段32条,占29.91%,反映了家兔品系间的遗传变异.多态性统计分析表明,WHBE兔和日本大耳白兔的遗传相似度最高,为0.7948.其中4个引物既可扩增出3个品系共同的DNA条带,也可扩增出不同品系的特征条带,表明WHBE兔与日本大耳白兔和新西兰兔之间有遗传的相似性,也存在遗传差异.这些结果表明应用RAPD技术可以很好地检测家兔不同品系间以及同一品系不同个体间的亲缘关系.

WHBE兔与日本大耳白兔腹泻型肠易激综合征模型的肠道菌群研究

目的比较分析WHBE兔和日本大耳白(Japanese white rabbit,JW)兔腹泻型肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)模型肠道菌群的差异性。方法 WHBE兔和JW兔各16只,按品系随机分为两组,即正常对照(NC)组和IBS模型组,每组8只。采用湿热应激复合番泻叶方法建立腹泻型IBS兔模型,观察实验兔的腹围指数、粪便含水量、结肠转运功能,处死后分别取结肠组织和结肠内容物进行病理组织学观察和肠道菌群多样性分析。结果与NC组比,IBS模型兔均出现腹围指数和粪便含水量增加,结肠转运时间缩短,但结肠组织未见病理性改变;同时IBS模型兔Shannon指数和Chao1指数均显著下降(P<0.05)。根据OTU分类分析的结果,厚壁菌门和拟杆菌门为兔肠道菌群的绝对优势菌群。与NC组比较,WHBE兔IBS模型组厚壁菌门、疣微菌门、绿弯菌门、Akk菌属、链球菌属均明显下降(P<0.05,P<0.01),拟杆菌门和rc4-4菌属丰度显著上升(P<0.05,P<0.01);而JW兔IBS模型组优杆菌属和罕见小球菌属均显著上升(P<0.05),乳酸杆菌属、粪杆菌属、韦荣球菌属和链球菌属均显著下降(P<0.05)。与JW兔NC组比,WHBE兔NC组厚壁菌门、Odoribacter菌属、韦荣球菌属、链球菌属、颤螺旋菌属、Pseudoflavonifractor菌属较低(P<0.05,P<0.01),拟杆菌门、疣微菌门、优杆菌属、粪杆菌属、Akk菌属较高(P<0.05,P<0.01)。与JW兔IBS模型组比,WHBE兔IBS模型rc4-4菌属、粪杆菌属、梭菌属的丰度较高(P<0.05,P<0.01),而厚壁菌门、多尔氏菌属、粪球菌属和罕见小球菌属的丰度则较低(P<0.05,P<0.01)。结论 IBS模型兔存在肠道菌群失调,导致菌群多样性降低;WHBE兔和JW兔IBS模型肠道菌群变化均具有其自身的特点,且具有明显的差异性。

WHBE兔脾虚型肠易激综合征模型的建立

目的用WHBE兔建立脾虚型IBS模型,为脾虚型肠易激综合征(IBS)的药物开发和基础研究提供工具。方法取WHBE兔和日本大耳白兔各18只,分别随机分成两组,即正常对照组6只,模型组12只,采用湿热应激加灌服番泻叶煎剂的方法造成脾虚证肠易激综合征(IBS)兔模型,其中模型组造模后处理6只,剩余兔自然恢复10d,观察实验兔的临床症状、体重、腹围指数、粪便含水量、胸腺指数、脾脏指数、内脏敏感性以及小肠推进率等变化。结果与正常对照组比较,模型组实验兔体重、胸腺指数、脾脏指数均明显降低(P<0.05,P<0.01),腹围指数、粪便含水量、内脏敏感性以及小肠推进率明显升高(P<0.05,P<0.01),且恢复较为缓慢。结论脾虚型IBS兔模型符合IBS临床发病特点,而WHBE兔是较适合于脾虚证IBS模型研究的理想的实验动物。

RAPD标记技术用于WHBE兔近交系培育中的遗传分析

目的探讨用随机引物扩增多态性DNA技术对大耳白黑眼兔近交系培育中的遗传监测作用。方法选用F4、F5、F6和F7代共70只WHBE兔的皮肤组织样品提取基因组DNA,用60个随机引物对基因组DNA进行PCR扩增,根据电泳结果筛选出其中25个多态性较高的引物进行RAPD-PCR分析,再利用Popgene 3.2统计软件对共检测到的584个扩增片段进行遗传分析,获得实验数据。结果①F4代扩增得到124条片段,F5代扩增得到150条片段,F6扩增得到152条片段,F7代扩增得到158条条带;其中F4代与F5代的共有条带数为105,F5代与F6代的共有条带数为119,F6代与F7代的共有条带数为125。②F4代与F5代的遗传相似度为0.7674,F5代与F6代的遗传相似度为0.7984,F6代与F7代的遗传相似度为0.8092。结论随着WHBE兔近交培育代数的增加,遗传相似度呈上升趋势,说明RAPD技术可以用于WHBE兔近交系培育的遗传检测。

微卫星标记对WHBE兔封闭群、日本大耳白兔和新西兰兔的遗传分析

目的分析比较大耳白黑眼兔（WHBE兔）封闭群与日本大耳白兔（Jw兔）、新西兰兔（NZW兔）基因组存在的微卫星结构，研究WHBE兔封闭群的微卫星多态性。方法利用21个微卫星位点，通过微卫星分子标记技术对WHBE兔封闭群、Jw兔和NZW兔进行遗传多样性检测和对比。结果根据初步结果，在21对微卫星引物中筛选出扩增产物稳定并且具有多态性的11对引物。WHBE兔封闭群在每个位点上的等位基因数为3～8个不等，11个位点的平均有效等位基因数为2．0402个，平均杂合度为0．4810；Jw兔在每个位点上的等位基因数为2～8个不等，11个位点的平均有效等位基因数为3．6077个，平均杂合度为0．5039；NZW兔在每个位点上的等位基因数为3～9个不等，11个位点的平均有效等位基因数为2．6537个，平均杂合度为0．5334。WHBE兔封闭群在11个微卫星位点上的平均多态信息含量（PIC）为0．6005，多位点累积个体识别率达到100％，多位点累积非父排除概率（CPE）在双亲信息都是未知情况下的为0．9613，而在得知任一亲本信息的情况下，CPE值高达0．9973。在11个微卫星座位中，9个位点上出现了WHBE兔封闭群特有等位基因，其中在Sat2、Sat5、Sat7、Sat12、Sat13、Sat16、S0144和INRACCDDV0003八个位点上WHBE兔封闭群的特有等位基因为一个，在sat8位点上为两个。结论WHBE兔8个位点的平均杂合度、平均有效等位基因数均比JW兔及NZW兔低，说明WHBE兔群体的基因纯合度高于其他两个品系，具有更优的遗传稳定性。9个WHBE兔特有的等位基因可作为区分WHBE兔封闭群和其它两个品系实验兔的分子标记。

WHBE兔对卵白蛋白诱发变应性鼻炎的敏感性研究

目的通过与日本大耳白兔作比较,来探究WHBE兔对卵白蛋白诱发变应性鼻炎的敏感性。方法 WH-BE兔和日本大耳白兔各20只,各随机分成模型组和正常对照组,每组10只,隔天用卵白蛋白加氢氧化铝腹腔注射作基础致敏7次后用1%卵白蛋白溶液每侧滴鼻0.1 ml激发建立变应性鼻炎模型,观察各组兔子鼻部症状并评分,末次激发后取各组动物的鼻黏膜作甲苯胺蓝染色,计数并比较肥大细胞在各组之间的差异。结果与正常对照组比,变应性鼻炎激发后WHBE兔和日本大耳白兔模型组症状明显(P<0.01),鼻黏膜肥大细胞数量增加(P<0.01);WHBE兔激发后鼻部症状评分有高于日本大耳白兔的趋势,末次激发评分显著高于日本大耳白兔(P<0.05),鼻黏膜肥大细胞数量也显著高于日本大耳兔(P<0.05)。结论 WHBE兔对卵白蛋白加氢氧化铝诱导变应性鼻炎有较强的敏感性,较适合用于变应性鼻炎的研究。

微卫星标记对封闭群和近交第五代WHBE兔的遗传分析

目的分析比较封闭群白毛黑眼（WHBE）兔和近交第五代（F5）WHBE兔的微卫星结构的变化，寻找针对WHBE兔品系的遗传监测基因位点并应用于实际监测。方法利用21个微卫星位点，通过微卫星分子标记技术对封闭群和近交F5代WHBE兔进行遗传多样性检测和对比。结果在21对微卫星引物中筛选出扩增产物稳定并且具有多态性的11对微卫星引物。封闭群WHBE兔在每个位点上的等位基因数为3－8个不等，11个位点的平均有效等位基因数为3．0344个，平均杂合度为0．4956，平均多态信息含量（PIC）为0．6130，多位点累积个体识别率达到100％，多位点累积非父排除概率（CPE）在双亲信息都是未知情况下的为0．9683，而在得知任一亲本信息的情况下，CPE值为0．9980；近交F5代WHBE兔在每个位点上的等位基因数为3-9个不等，11个位点的平均有效等位基因数为1．8132个，平均杂合度为0．3808，平均多态信息含量（PIC）为0．5241，多位点累积个体识别率达到100％，多位点累积非父排除概率（CPE）在双亲信息都是未知情况下的为0．9264，而在得知任一亲本信息的情况下，CPE值为0．9933。在10个封闭群WHBE特有的等位基因中（与日本大耳白兔、新西兰兔DNA多态性比较），其中7个微卫星位点的8个等位基因为封闭群与近交F5代WHBE兔所共同特有。近交F5代WHBE兔的平均有效等位基因数和平均杂合度均比封闭群低，说明经过5代培育，近交F5代的基因纯合度高于封闭群，具有更优的遗传稳定性。结论本研究选取的21个微卫星位点中的11个适用于WHBE兔近交系培育的遗传监测。

WHBE兔主要脏器重量及脏器系数的测定

目的测定WHBE兔主要脏器重量并计算脏器系数。方法实验选用成年WHBE兔，测定体重和主要脏器重量，计算脏器系数，并对雌、雄WHBE兔脏器重量、脏器系数进行比较。结果雌雄WHBE兔甲状腺差异有显著性（P〈0．01），其他脏器系数，雌雄WHBE兔均无显著性差异（P〉0．05）。结论WHBE兔脏器重量、脏器系数、消化道长度测定结果，为相关研究提供参考。

基于3.0 T磁共振成像系统初步观察WHBE兔脑部形态解剖结构

目的基于3.0 T磁共振成像(MRI)技术,活体观察WHBE兔脑部形态解剖结构,累积WHBE兔脑的影像学基本生物学数据,为进一步拓宽WHBE兔的应用提供背景资料。方法成年雄性WHBE兔9只,用3%戊巴比妥钠溶液静脉注射麻醉,行3.0 T MRI加兔脑专用线圈常规横断面和矢状面扫描,并测量分析脑部的各种结构大小。结果 MRI扫描可成功获得活体WHBE兔脑矢状面和横断面T2WI或T1WI图像,可完整清晰地观察到活体WHBE兔的嗅球、大脑、小脑和垂体等基本结构,并发现了4只兔脑T2WI中左右两侧颞叶海马区高信号,相应区域在T1WI出现低信号外,其余均无异常。同时,获得了额叶、海马、大脑、侧脑室、垂体等相关解剖结构的参考值。结论采用3.0 T磁共振成像系统加上兔脑专用线圈,可以清晰地观察到WHBE兔脑部的各种形态解剖结构,并初步建立了WBHE兔脑影像学基本数据。

WHBE兔痰瘀证心肌缺血模型的建立

目的利用高脂喂养结合冠脉结扎建立WHBE兔痰瘀证心肌缺血模型。方法 18只WHBE兔随机分成正常对照(NC)组、心肌缺血模型(MI)组和痰瘀证心肌缺血模型(PBSS-MI)组,每组6只,MI组和PBSS-MI组均采用冠脉结扎法建立心肌缺血,然后NC组和MI组饲喂普通饲料,PBSS-MI组饲喂高脂饲料,连续造模4周,制备痰瘀证心肌缺血模型,分别通过测定动物的体重、心肌酶指标、血脂水平、血液流变学和心肌梗死面积(MIS)来评价模型的建立和痰瘀证的病理进程,用Pearson法进行相关性分析。结果与NC组比,MI组体重略有降低,但血清CK、LDH、TG、血浆粘度、卡松粘度和心肌梗死面积均明显升高(P<0.05,P<0.01),PBSS-MI组体重降低不明显,但血清CK、LDH、TC、TG、LDL-C、HDL-C、全血粘度、血浆粘度、红细胞电泳时间、卡松粘度、心肌梗死面积均显著升高(P<0.05,P<0.01);与MI组比,PBSS-MI组TC、LDL-C、HDL-C、高切全血粘度、红细胞电泳时间和心肌梗死面积均高于MI组(P<0.05,P<0.01)。相关分析显示,MI组MIS与TC、TG和HDL-C指标密切相关(P<0.01);而PBSS-MI组MIS与TC、TG、HDL-C、LDL-C、LDH、CK、高切和低切全血粘度、红细胞电泳时间和卡松粘度密切相关(P<0.05,P<0.01)。结论高脂喂养结合冠脉结扎法在WHBE兔体内可成功建立痰瘀证心肌缺血模型,且缺血程度与血脂、血液流变学有相关性变化,这些可反映了中医"痰瘀互结"的相关生物学基础。

肠易激综合征模型WHBE兔神经-体液-内分泌系统调节的变化

目的观察肠易激综合征(IBS)模型WHBE兔神经内分泌激素和电解质水平的变化,探讨神经-体液-内分泌系统在IBS中的作用。方法以湿热环境应激加小剂量致泻剂诱导WHBE兔建立IBS模型,在造模9 d和14 d时取血分离血清,检测血清中5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质醇(COR)、β-内啡肽(β-EP)激素和K+、Na+、Cl-含量的变化,并以JW兔作对照。结果与正常对照组比,造模9 d时WHBE兔的5-HT、DA、ACTH、β-EP、COR均显著升高(P<0.05,P<0.01),Na+、K+含量均显著降低(P<0.01),而JW兔ACTH、β-EP、COR均显著升高(P<0.05,P<0.01),K+含量显著降低(P<0.05);造模14 d时WHBE兔5-HT、ACTH、β-EP均显著升高(P<0.05,P<0.01),JW兔ACTH显著升高(P<0.05);相关分析显示,IBS模型中血清中5-HT、COR与Na+、K+浓度呈显著负相关(P<0.05,P<0.01),血清中DA、β-EP水平与Na+、K+、Cl-浓度呈显著负相关(P<0.05,P<0.01),ACTH水平则与K+浓度呈显著负相关(P<0.01)。结论 IBS的发生不仅与HPA轴兴奋性升高有关,亦与体液因素有关,故神经-体液-内分泌系统参与了WHBE兔IBS的发生过程。

WHBE兔的血液学指标测定与比较

目的测定和比较分析WHBE兔、日本大耳白兔、新西兰白兔的血液学指标，揭示WHBE兔的血液学特性。方法选择WHBE兔、日本大耳白兔、新西兰白兔各40只，雌雄各半，耳动脉采血，应用BayerADVIA120五分类血球分析仪测定红细胞、白细胞、血小板等血液细胞参数。结果①性别因素对WHBE兔的％NEUT、％LYMP、MCH、MCHC、RDW等有显著差异（P〈0．05，P〈0．01），其它指标雌雄性别间均无显著差异（P〉0．05）：②WHBE兔的白细胞参数和红细胞参数与日本大耳白兔和新西兰白兔存在着显著差异，如白细胞数目明显低于日本大耳白兔（P〈0．01），淋巴细胞和血红蛋白含量均明显高于日本大耳白兔和新西兰白兔（P〈0．01）。结论WHBE兔有其自身的特性，也有其兔种群的共性，WHBE兔的血液学生理指标与人类较为接近。

WHBE兔血气-电解质分析及与日本大耳白兔和新西兰白兔比较研究

目的探讨WHBE兔、日本大耳白兔和新西兰白兔血气、电解质指标的差异性。方法取WHBE兔、日本大耳白兔和新西兰白兔经耳中动脉取肝素抗凝血，在NOVA血气电解质分析仪上测定血气、电解质指标。结果与日本大耳白兔比较，WHBE兔pH值、PCO2、PO2、SO2、BE-ECF、BE-B、SBC、HCO3^-、TCO2、a／A和P02／FI11个指标均明显低于日本大耳白兔（P〈0．05，P〈0．01），而Osm、Na^＋和Mg^＋＋明显高于日本大耳白兔（P〈0．01）；与新西兰白兔比较，WHBE兔pH值明显低于新西兰白兔（P〈0．01）。而Mg^＋＋明显高于新西兰白兔（P〈0．01）。结论上述结果为WHBE兔标准化提供可靠的生物学数据，同时为WHBE兔在呼吸系统和心血管疾病中的应用提供了实验依据。

脾虚型IBS模型WHBE兔的抗氧化活性研究

目的观察脾虚型肠易激综合征（IBS）模型wHBE兔的抗氧化活性的变化。方法取WHBE兔和日本大耳白兔各12只，分别分成正常对照组6只、模型组6只，模型组采用湿热应激加灌服番泻叶煎剂的方法造成脾虚证肠易激综合征模型，造模结束后正常饲养10d进行自然恢复，观察实验兔血清中的SOD、MDA、GSH-Px、NO和NOS活性水平的变化。结果与正常对照组比较，模型组造模后WHBE兔和日本大耳白兔的血清SOD、GSH—Px活性水平显著降低（P〈0．05，P〈0．01）；而血清MDA含量、NO和NOS活性水平均显著性升高（P〈0．05，P〈0．01）；自然恢复10d后，WHBE兔血清GSH—Px活性水平仍显著降低（P〈0．05），MDA含量和NOS活性水平仍显著高于正常对照组（P〈0．05）；日本大耳白兔除NOS活性水平仍显著高于正常对照组（P〈0．05）外，其它各项抗氧化指标均无显著差异（P〉0．05）。结论脾虚型肠易激综合征模型WHBE兔的抗氧化活性明显降低，且恢复较为缓陵，其症状与人的临床表现近似，因此WHBE兔可能适合用于人脾虚型肠易激综合征的研究。

WHBE兔脾虚型肠易激综合征模型舌象病理组织形态学观察

目的观察脾虚型肠易激综合征模型WHBE兔活体舌象和舌组织病理形态学的变化。方法采用湿热应激复合番泻叶致脾虚型肠易激综合征兔模型,观察造模及自然恢复后WHBE兔和日本大耳白兔活体舌象和舌组织病理形态学的变化。结果与正常对照组比较,脾虚型肠易激综合征模型兔舌色淡红,舌质嫩;背隆起前后固有层乳头密度明显降低(P<0.01),基底层核分裂相频数减少(P<0.01),舌下角质层和上皮层厚度均明显增厚(P<0.01),且角质层/上皮层比值明显增加(P<0.01),且WHBE兔菌状乳头密度显著降低(P<0.05);自然恢复10d后,自然恢复组实验兔背隆起前后固有层乳头密度仍显著低于正常对照组(P<0.01),舌下角质层厚度明显大于正常对照组(P<0.05),且WHBE兔的上皮层厚度显著高于正常对照组(P<0.05),日本大耳白兔角质层/上皮层比值显著高于正常对照组(P<0.05)。结论脾虚型肠易激综合征可能与机体营养、代谢相关。

基于OPG-RANK-RANKL系统研究饲粮不同钙水平对生长期WHBE兔骨代谢的影响

目的利用护骨素-核因子κB受体活化子-核因子κB受体活化子配体(OPG-RANK-RANKL)系统,探讨饲粮不同钙水平对生长期WHBE兔骨代谢影响。方法选择21只雄性断奶WHBE兔,随机分为3组(I、II、III组),分别饲以钙水平为0.95%,1.10%和1.30%,其他营养水平基本一致的饲粮。实验期42 d。实验结束,测定兔血清钙(Ca)、甲状旁腺素(PTH)和骨源性碱性酶(BALP)含量;分别运用荧光定量PCR法和免疫组织化学法对WHBE兔骨组织进行OPG-RANK-RANKL的基因转录和蛋白表达分析。最后以RANKL/OPG比值为指标,评估WHBE兔骨代谢与饲粮钙水平间的相关性。结果实验结果表明,I、II、III组在血清Ca、PTH含量和BALP活力上差异无显著性(P>0.05)。WHBE兔骨组织RANKL mRNA表达水平和RANKL/OPG mRNA比值均以II组最低,与I、III组差异有显著性(P<0.05)。钙水平对WHBE兔骨组织OPG-RANK-RANKL蛋白表达影响显著(P<0.01),II组和III组OPG蛋白表达阳性指数均极显著高于I组(P<0.01);而II组兔骨组织RANK蛋白表达阳性指数则极显著低于I组和III组(P<0.01),RANKL/OPG的蛋白表达阳性指数比值以II组最低,与I组差异有显著性(P<0.01)。此外,WHBE兔骨组织RANKL/OPG mRNA比值和的蛋白表达阳性指数比值均与饲粮钙水平间存在显著的二次曲线相关(R^2=0.4068,0.8433,P<0.05,P<0.001)。结论生长期WHBE兔的骨代谢与饲粮钙水平间呈显著相关性,当饲粮钙含量为1.10%时,生长期WHBE兔可获得较理想的骨代谢水平。

细菌内毒素致WHBE兔致热敏感性的研究

目的探讨不同剂量的细菌内毒素对WHBE兔致热反应的敏感性。方法静脉注射不同剂量(1.25、2.5、5、10 EU/kg)细菌内毒素诱发WHBE兔和日本大耳白兔发热反应,并设空白对照组,记录升温曲线图,计算发热峰值、180 min时体温差、发热指数以及升温率,并通过曲线拟合计算出体温升高0.6℃时的发热阈值。结果随细菌内毒素注射剂量的增加致WHBE兔和日本大耳白兔的发热反应增强,性别因素对细菌内毒素所致WHBE兔和日本大耳白兔发热反应无明显影响(P>0.05)。5 EU/kg和10 EU/kg的细菌内毒素所致WHBE兔的致热反应均高于日本大耳白兔,且WHBE兔的升温率分别为60.7%和92.9%,日本大耳白兔的升温率分别为39.3%和82.1%。另外,WHBE兔和日本大耳白兔的发热阈值分别为5.72 EU/kg和7.93 EU/kg。结论细菌内毒素对WHBE兔具有较好的致热敏感性,适于致热原物质的检查。

不同年龄的WHBE兔血气电解质分析

目的观察不同性别、不同年龄的WHBE兔血气、电解质及能量代谢的变化。方法取幼年、青年、老年WHBE兔经耳中动脉取肝素抗凝血，在NOVA血气电解质分析仪上测定血气、电解质指标。结果（1）幼年雄性WHBE兔血糖（Glu）明显低于雌性（P〈0．05），青年雄性WHBE兔SO2、Hb和R均显著高于雌性（P〈0．05），老年WHBE兔性别间无明显差异（P〉0．05）；（2）青年WHBE兔PCO2、BE-ECF、BE—B、SBC、HC03^-、TCO2、以均明显高于幼年职0．05，P〈0．01），而PO2、SO2、O2Ct、A和PO2／FI均明显低于幼年（P〈0．05，P〈0．01）；老年WHBE兔血液pH、PCO2、BE—ECF、BE—B、SBC、HCO3^-、TCO2、a／A和Osm均明显高于幼青年（P〈0．05，P〈0．01），而PO2、SO2、Het、Hb、O2Ct、A和PO2／FI均明显低于幼青年限0．05，P〈0．01）。结论性别因素对幼年WHBE兔Glu、青年WHBE兔SO2、Hb和K^＋有影响，而年龄对WHBE兔的血气、电解质和能量代谢影响随年龄增长而变化，与WHBE兔的生理生长密切相关。

高胆固醇饮食加铜水喂养WHBE兔引起的脑组织病理学改变

目的观测散发性WHBE兔阿尔茨海默症(AD)模型脑组织病理学变化。方法取雄性WHBE兔30只,随机分成3组:正常对照(NC)组,高胆固醇饮食(HCD)组,高胆固醇饮食+铜饮水(HCD+Cu^(2+))组,每组10只;另取10只老年WHBE兔作为老年(Senile)组。NC组和Senile组给予普通饲料,HCD组给予2%胆固醇饲料,HCD+Cu^(2+)组给予2%胆固醇饲料和添加0.12 ppm铜饮水,连续造模12周。造模12周时,取血测定总胆固醇(TC)和β淀粉样蛋白(Aβ)1-42水平;取部分脑组织测定脑皮质和海马组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,另取冠状切片脑组织行免疫组化染色观察Aβ、β-分泌酶1(BACE1)、磷酸化tau(p-tau)蛋白的阳性表达情况,同时切片行刚果红和皮尔苏斯基氏(Bielschowsky)染色分别观察老年斑和神经纤维缠结情况。结果老年组WHBE兔的体重明显高于NC组(P<0.01),各组血浆TC、Aβ1-42明显高于NC组(P<0.05,P<0.01);且各组脑组织中SOD活性明显低于NC组(P<0.05),MDA含量显著高于NC组(P<0.05,P<0.01)。免疫组化染色显示,各组脑组织中Aβ、BACE1、p-tau蛋白阳性表达均显著高于NC组(P<0.05,P<0.01),且HCD+Cu^(2+)组脑组织中BACE1和p-tau蛋白阳性表达亦显著高于HCD组(P<0.05,P<0.01)。刚果红和Bielschowsky染色显示HCD组、HCD+Cu^(2+)组和老年组WHBE兔脑组织中观察到大量的老年斑和神经纤维缠结。结论高胆固醇饮食或复合添加微量铜饮水能诱导散发性AD模型WHBE兔脑部明显的AD病理学变化,包括氧化损伤、脑内Aβ沉积增多、老年斑和tau病理学等改变,WHBE兔可用于神经退行性疾病动物模型的研究。