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不结球白菜响应ABA和低温基因WRKY18的克隆及表达分析 被引量:5
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作者 黄菲艺 唐君 +2 位作者 侯喜林 马静 王枫 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期189-196,共8页
[目的]WRKY转录因子是植物特有的一类转录因子,广泛参与植物的生长发育、生物及非生物胁迫响应。克隆和鉴定不结球白菜共同响应ABA和低温的WRKY基因,对研究不结球白菜抗逆分子机制和改良其抗逆性具有重要意义。[方法]采用电子克隆的方法... [目的]WRKY转录因子是植物特有的一类转录因子,广泛参与植物的生长发育、生物及非生物胁迫响应。克隆和鉴定不结球白菜共同响应ABA和低温的WRKY基因,对研究不结球白菜抗逆分子机制和改良其抗逆性具有重要意义。[方法]采用电子克隆的方法在NCBI数据库中进行不结球白菜WRKY18基因全长拼接,然后在不结球白菜‘苏州青’中,克隆到1个与低温及ABA响应相关的WRKY基因,通过生物信息学手段和实时定量RT-PCR(qRT-PCR)技术分析了该基因的序列结构特征及其在低温和ABA处理下的表达变化。[结果]该基因全长为1080bp,含有978bp的开放阅读框,编码326个氨基酸,与油菜及拟南芥的WRKY18直系同源,氨基酸序列相似性分别为87%和73%,命名为BcWRKY18。序列分析表明,该编码蛋白为核蛋白,不含跨膜区,无信号钛,具有WRKYGQK基序(motif)约60个氨基酸残基的WRKY保守结构域,为WRKY转录因子家族成员。系统聚类分析指出了BcWRKY18蛋白的保守性及其在开花植物中的进化关系;序列结构和同源建模分析指出了BcWRKY18蛋白的保守结构域、蛋白质的二级及三级结构分布模型;qRT-PCR检测了BcWRKY18基因在ABA和低温胁迫下的表达,表明低温和ABA都能诱导BcWRKY18基因表达,其表达模式都存在相似的过程,且BcWRKY18基因对ABA的响应比对低温的响应更快、更明显。[结论]从不结球白菜中克隆获得1个新的WRKY类转录因子基因BcWRKY18,基因表达分析发现BcWRKY18可能存在对ABA和低温的共响应及自身反馈调控。 展开更多
关键词 不结球白菜 wrky18 低温 ABA 非生物胁迫 序列分析 实时定量RT-PCR
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拟南芥转录因子WRKY18在花粉发育中的功能分析 被引量:2
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作者 荀志丽 李雪萍 +2 位作者 张丹丹 陆海 刘頔 《电子显微学报》 CAS CSCD 2014年第2期156-162,共7页
WRKY蛋白是近年来在植物中发现的一类转录因子家族,本研究从拟南芥中克隆得到转录因子WRKY18的DNA序列,利用荧光体式显微镜观察酵母单杂交菌落,确定了该转录因子与DNA序列TTGACT结合。分别通过半定量、实时荧光定量PCR技术检测其在不同... WRKY蛋白是近年来在植物中发现的一类转录因子家族,本研究从拟南芥中克隆得到转录因子WRKY18的DNA序列,利用荧光体式显微镜观察酵母单杂交菌落,确定了该转录因子与DNA序列TTGACT结合。分别通过半定量、实时荧光定量PCR技术检测其在不同组织及花药发育不同时期的表达,发现该转录因子为组成型表达。该基因在成熟拟南芥根、茎、叶、花的各个组织中均有表达,而在花药发育的9、10时期表达量显著高于其它时期。分别使用扫描电子显微镜和光学显微镜观察比较突变体与野生型植株的花粉形态差异和花粉萌发情况,发现WRKY18对拟南芥花粉发育有重要影响,WRKY18缺失造成拟南芥花粉外形异常、花粉萌发率降低。本研究对进一步分析转录因子WRKY18在拟南芥花粉发育过程中的表达与调控作用具有一定的基础意义。 展开更多
关键词 拟南芥 转录因子 wrky18 表达分析 花粉发育
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葡萄WRKY18基因的克隆及表达特性分析 被引量:15
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作者 肖培连 冯睿杰 +3 位作者 侯丽霞 吕晓彤 朱丹 刘新 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期391-398,共8页
以抗性品种‘左优红’组培苗为材料,克隆得到WRKY18基因,测序结果显示:VvWRKY18基因片段大小为954 bp,编码317个氨基酸序列。生物信息学分析结果显示VvWRKY18蛋白分子量约为35.2416 k Da,等电点为8.22,不稳定系数为48.61,推测为不稳定蛋... 以抗性品种‘左优红’组培苗为材料,克隆得到WRKY18基因,测序结果显示:VvWRKY18基因片段大小为954 bp,编码317个氨基酸序列。生物信息学分析结果显示VvWRKY18蛋白分子量约为35.2416 k Da,等电点为8.22,不稳定系数为48.61,推测为不稳定蛋白;与已知的粳稻、高粱、毛果杨及拟南芥WRKY家族蛋白高度同源;亚细胞定位预测结果显示主要存在于细胞核中,属于第二类WRKY转录因子家族成员。实时荧光定量PCR分析显示,VvWRKY18在葡萄不同组织中均有表达,在花中表达量最高;多种逆境胁迫因子如盐、干旱和低温等诱导VvWRKY18上调表达,且在低温胁迫6 h时诱导表达量最高。另外,VvWRKY18受胁迫信号分子水杨酸、脱落酸、一氧化氮和过氧化氢诱导上调表达,且VvWRKY18在一氧化氮处理下的表达模式与低温诱导的类似,推测VvWRKY18可能通过调控一氧化氮信号分子代谢途径来调节葡萄对低温胁迫应答。 展开更多
关键词 葡萄 wrky18 基因克隆 表达特性分析
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Suppression of ETI by PTI priming to balance plant growth and defense through an MPK3/MPK6-WRKYs-PP2Cs module 被引量:3
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作者 Dacheng Wang Lirong Wei +8 位作者 Ting Liu Jinbiao Ma Keyi Huang Huimin Guo Yufen Huang Lei Zhang Jing Zhao Kenichi Tsuda Yiming Wang 《Molecular Plant》 SCIE CSCD 2023年第5期903-918,共16页
Pattern-triggered immunity(PTI)and effector-triggered immunity(ETI)are required for host defense against pathogens.Although PTI and ETI are intimately connected,the underlying molecular mechanisms remain elusive.In th... Pattern-triggered immunity(PTI)and effector-triggered immunity(ETI)are required for host defense against pathogens.Although PTI and ETI are intimately connected,the underlying molecular mechanisms remain elusive.In this study,we demonstrate that flg22 priming attenuates Pseudomonas syringae pv.tomato DC3000(Pst)AvrRpt2-induced hypersensitive cell death,resistance,and biomass reduction in Arabidopsis.Mitogen-activated protein kinases(MAPKs)are key signaling regulators of PTI and ETI.The absence of MPK3 and MPK6 significantly reduces pre-PTI-mediated ETI suppression(PES).We found that MPK3/MPK6 interact with and phosphorylate the downstream transcription factor WRKY18,which regulates the expression of AP2C1 and PP2C5,two genes encoding protein phosphatases.Furthermore,we observed that the PTI-suppressed ETI-triggered cell death,MAPK activation,and growth retardation are significantly attenuated in wrky18/40/60 and ap2c1 pp2c5 mutants.Taken together,our results suggest that the MPK3/MPK6-WRKYs-PP2Cs module underlies PES and is essential for the maintenance of plant fitness during ETI. 展开更多
关键词 PAMP-triggered immunity effector-triggered immunity MAPK wrky18 protein phosphatase
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