温阳益心中药预处理对缺血大鼠心肌细胞凋亡的实验研究

目的观察温阳益心中药预处理和心肌缺血预处理对缺血再灌注48h缺血大鼠心肌Bcl-2、Bax、细胞凋亡率的影响。方法选用雄性Wistar大鼠,随机分为4组,其中3组正常喂食,1组灌胃中药悬液,10d后选各组健康大鼠行冠脉结扎,建立大鼠心肌缺血模型。假手术组:完成全部手术操作,只穿线不结扎冠脉;心肌缺血-再灌注组(IR组):模型建立后,心肌缺血45min后再灌注48h;温阳益心中药预处理缺血-再灌注组(中药组):模型建立后,心肌缺血45min后再灌注48h;预适应处理缺血-再灌注组(IP组):模型建立后,心肌缺血5min,再灌注5min,重复3次,之后心肌缺血45min,再灌注48h。采用免疫组化检测Bcl-2、Bax阳性细胞表达,原位杂交检测Bcl-2、BaxmRNA阳性表达;流式细胞仪测定细胞凋亡率(AP)。结果 IP组和中药组AP较IR组低,Bcl-2阳性表达心肌细胞数与Bcl-2mRNA表达率比IP组高,Bax阳性表达心肌细胞数与BaxmRNA表达率比IR组低(P<0.05)。结论 IP与温阳益心中药对IR的心肌保护均具有抑制心肌细胞凋亡的功能,且有等效性。

猪肝移植时无心跳供体耐受热缺血时间的实验研究

目的探讨心脏停搏供体猪肝移植时供肝耐受无心跳热缺血损伤的安全时限。方法建立小型猪原位肝移植动物模型并按移植前供肝经历心脏停搏时间0,15,30,45 min分为四组。观测肝移植术后各组肝功能、肝脏病理和肝脏能量代谢改变。结果肝脏能量代谢等指标的改变在供肝无心跳热缺血时间30 min前是可逆的,随无心跳热缺血时间的延长逐渐向不可逆演变。结论在本实验条件下,小型猪心脏停搏供体肝移植时供肝耐受无心跳热缺血损伤的安全时限约为30min。

尾静脉注射预处理对小鼠肝脏热缺血-再灌注损伤的保护作用

目的观察小鼠快速大容量尾静脉注射预处理对肝脏热缺血-再灌注损伤的影响。方法将60只雄性BALB／c小鼠随机分为4组：（1）假手术组；（2）热缺血-再灌注组；（3）快速尾静脉注射＋热缺血-再灌注组：术前72h快速尾静脉（5—7s）注射生理盐水2．5ml；（4）常规尾静脉注射＋热缺血-再灌注组：术前72h常规（〉30s）尾静脉注射生理盐水2．5ml。肝脏热缺血-再灌注模型采用肝门阻断45min，再灌注6h。再灌注后，取小鼠外周血及肝组织，检测血清丙氨酸转氨酶（ALT）和天冬氨酸转氨酶（AST）水平、肝组织丙二醛（MDA）水平变化，并观察肝组织病理表现。结果快速尾静脉注射组血清ALT、AST水平及肝组织MDA水平分别为（641．60±225．00）U／L、（1180．80±212．54）U／L、（11．00±1．06）mmol／L，较常规尾静脉注射组[（1716．20±283．50）U／L、（1994．60±303．80）U／L、（17．22±1．22）mmol／L]和对照组[（1661．20±306．38）U／L、（2046．60±719．21）U／L、（17．20±2．09）mmol／L]显著降低（P〈0．05），病理学亦显示快速尾静脉注射组肝细胞变性坏死、炎性细胞浸润较常规尾静脉注射组和对照组显著减轻（P〈0．01）。结论快速大容量尾静脉注射预处理可以显著减轻小鼠肝脏热缺血一再灌注损伤。