菲莱氏温扬球虫(Wenyonella philiplevinei)的裂殖体、裂殖子及大配子体在杯状细胞中发育的超微结构研究

本文描述了寄生于北京鸭小肠上皮杯状细胞中的菲莱氏温扬球虫滋养体、裂殖体、裂殖子、大配子体的超微结构,并与寄生干吸收上皮细胞的同种虫体以及鸡十二指肠杯状细胞中的Eimeria acervulina 作了比较。整个裂殖生殖(包括成熟裂殖子的形成)可在杯状细胞中进行。发育中的大配子体(早、中期大配子体),可在杯状细胞内生长,但未见小配子体在其中发育。裂殖生殖时期虫体常寄生于杯状细胞的胞质内,而大配子体多见于杯状细胞的粘液颗粒之中,此与 E.acervulina 不同。所见各期虫体在杯状细胞内发育正常,其结构与在吸收上皮寄生者相同。

菲莱氏温扬球虫(Wenyonella philiplevinei)受精和卵囊壁形成的超微结构研究

本文利用透射电镜研究了寄生于家鸭小肠上皮细胞的菲莱氏温扬球虫的受精和卵囊壁的形成过程。作者在感染后96 h 的样品中发现一例大、小配子已受精;小配子已进入大配子中,大配子胞质中有一根纵切的鞭毛,小配子的核呈流体状,位于大配子核附近。卵囊壁是由成囊颗粒内含物进入合子表面的膜之间沉积成层而形成。成囊颗粒Ⅰ形成外层卵囊壁,成囊颗粒Ⅱ形成内层卵囊壁。沉积于膜之间的成囊颗粒Ⅰ内含物逐渐浓缩,堆积成颗粒状,使卵囊壁外层外表面形成颗粒状突起。成熟的卵囊壁由三层组成:即薄的外周膜、外层和内层。其内的合子原生质还被两层单位膜包裹。

菲莱氏温扬球虫(Wenyonella philiplevinei)小配子发育的超微结构研究

描述了电镜下菲莱氏温扬球虫小配子体的发育和小配子的形成过程。小配子体的发育可分为二个时期:第一期为生长期,是小配子体生长发育和核进行有丝分裂的时期;第二期是小配子实际形成和分化时期,此期可见小配子体表面形成含核和线粒体的突起并逐渐增长,此后小配子仅以后端与小配子母体的基质相连,之后彼此分离。成熟的小配子呈月芽形,核致密,在核前,侧旁有一个线粒体位于鞭毛基体下,呈梭形。小配子前端限制膜下有一块长1.1μm的致密板。鞭毛基体位于体前端,包埋于致密板原基中,两根鞭毛与体部呈锐角向后伸延,后部游离。

龙海麻鸭自然感染菲莱氏盲肠温扬球虫亚种(Wenyonella philip levinei caecum)内生殖虫体与组织病变

考察了厦门地区龙海麻鸭盲肠寄生的球虫,经鉴定为菲莱氏盲肠温扬球虫亚种.该球虫寄生于盲肠,卵囊的最早孢子化时间为24 h.组织切片显示内生殖虫体有三型裂殖体,成熟大配子体位于绒毛中部或肠腺上皮细胞核的下方,椭圆形.成熟小配子体位于绒毛中部和基部上皮细胞核的下方,内有50 个以上逗点状小配子.卵囊位于绒毛基部上皮细胞核的下方、绒毛固有层和粘膜肌层.盲肠病理切片显示盲肠绒毛上皮、肠腺上皮细胞遭到破坏,并伴有炎症反应.

龙海麻鸭自然感染菲莱氏盲肠温扬球虫亚种(Wenyonella philiplevinei caecum)季节动态及内生殖各期虫体多糖的细胞化学

对厦门地区龙海麻鸭自然感染菲莱氏盲肠温扬球虫亚种的季节动态进行了调查，结果表明一年四季均可感染，其中流行高峰期是３～７月．对盲肠组织进行石蜡切片的细胞化学染色，显明：成熟的裂殖体含有多糖，成熟大配子体、小配子体和卵囊ＰＡＳ反应呈阳性，而滋养体。

上海地区家鸭球虫种类初步调查

为初步了解上海地区家鸭的球虫种类,本试验从上海市郊8个鸭场采集鸭粪便,实验室离心、分离球虫后,经2.5%重铬酸钾溶液培养至孢子化。用带SPOT拍摄系统的显微镜观察、拍摄孢子化卵囊,记录其大小、面积以及卵囊内部结构,并对照文献进行种类初步鉴定。鉴定结果显示,上海地区家鸭的球虫有3属10种,即艾美耳属(Eimeria)6种、温扬属(Wenyonella)3种、等孢属(Isospora)1种。本调查结果为有效防治鸭球虫病提供了基础资料。

菲莱氏温扬球虫18S rDNA基因的扩增与克隆分析

菲莱氏温扬球虫是鸭球虫病的重要病原之一,为了寻找种特异性的遗传标记,本研究采集广东省某鸭场的新鲜鸭粪,通过Sheather’s蔗糖漂浮法收集球虫卵囊,经形态学鉴定为菲莱氏温扬球虫;提取该球虫DNA样品,经过PCR扩增,首次获得了该虫的18S rDNA基因部分片段;对该基因进行了克隆和测序,比较了该虫株与其他原虫的亲缘关系。结果显示,对菲莱氏温扬球虫序列与艾美耳科其他球虫关系较近,系统进化树分析属于艾美耳科的另一分支。表明18S rDNA基因在鸭菲莱氏温扬球虫的分类鉴定上是一种有效的分子标记。

菲莱氏温扬球虫裂体生殖的发育过程及超微结构

菲莱氏温扬球虫（ＷｅｎｙｏｎｅｌａｐｈｉｌｉｐｌｅｖｉｎｅｉＬｅｉｂｏｖｉｔｚ，１９６８）的裂体生殖过程是在具皱褶膜的纳虫空泡中进行的。发育早期的滋养体外被单层界膜，胞质中含一些退化的运动期虫体特有的细胞器（如微线体等），以及丰富的内质网、线粒体、高尔基体等。裂殖子以外出芽方式形成于裂殖体表面。裂殖子外被３层单位膜，中层和内层组成内膜复合体。裂殖子中部表膜上有１～２个微孔。类锥体由５～６圈微管组成，内有１对棒状体颈部，２根锥体内微管和若干微线体。类锥体前为Ｒ１、Ｒ２。棒状体起于顶孔，止于虫体中部，分细的颈部和膨大的体部，虫体前部有大量微线体。膜下微管为２２根。核位于虫体后部，每代成熟裂殖子均有数个致密体和大量支链淀粉粒。

安徽省部分地区散养鸭菲莱氏温扬球虫感染情况的调查

为了解安徽省散养鸭群中菲莱氏温扬球虫的感染情况,本实验采集安徽省不同地区散养鸭的粪便样品487份,利用基于菲莱氏温扬球虫18S rDNA的PCR方法对所有样品进行检测,阳性样品测序后经同源性及遗传进化分析。结果显示,共鉴定出49个菲莱氏温扬球虫阳性样品,18S rDNA基因序列的同源性及构建的进化树分析结果均表明PCR获得的序列均为菲莱氏温扬球虫18S rDNA基因序列。流行病学调查显示,安徽省散养鸭菲莱氏温扬球虫的感染率为10.10%(49/487),其中,4周龄~8周龄鸭的感染率(14.69%,26/177)显著高于0~3周龄(5.48%,4/73)和>8周龄鸭(8.02%,19/237)(p<0.05)。粪便异常鸭菲莱氏温扬球虫的感染率(19.56%,18/92)显著高于粪便正常鸭(7.85%,31/395)(p<0.01)。本研究首次采用分子生物学方法对安徽省散养鸭菲莱氏温扬球虫的感染情况进行了调查,显示该虫种在安徽省散养鸭中的感染较为普遍,且菲莱氏温扬球虫感染鸭与其周龄和粪便性状显著相关,本研究结果可为鸭球虫病的诊断与防控提供参考。