冠心病患者血清Wnt-1、DKK-1水平及红细胞分布宽度的改变及其意义

目的探讨Wnt-1、Dickkopf相关蛋白1(DKK-1)、红细胞分布宽度(red cell distribution width,RDW)与冠心病的相关性,并分析Wnt-1、DKK-1和RDW之间的内在联系及其对冠心病的联合诊断价值。方法选取行冠状动脉(简称冠脉)造影的住院患者188例,根据冠脉造影结果将其分为冠心病组(n=128)和非冠心病组(n=60)并收集临床资料,比较两组间的Wnt-1、DKK-1、RDW差异。结果冠心病组患者血清Wnt-1水平降低,而DKK-1、RDW升高,与非冠心病组相比差异均有统计学意义(P<0.05);冠心病组中的急性心肌梗死组(30例)、不稳定型心绞痛组(54例)和稳定型心绞痛组(44例)三个亚组间Wnt-1、DKK-1及RDW差异均无统计学意义(P>0.05)。经Logistic回归分析,Wnt-1、DKK-1、RDW的OR值分别为0.947、1.023、64.995。三者联合诊断冠心病的受试者工作特征曲线下面积为0.977(95%CI 0.958~0.997),敏感性为92.2%,特异性为96.7%。结论DKK-1、RDW可能为发生冠心病的独立危险因素,Wnt-1可能为发生冠心病的独立保护因素。Wnt-1、DKK-1、RDW三者联合高于上述任一指标单独对冠心病的诊断价值。

阻断Wnt-1信号通路对云南肺癌细胞株的影响

目的初步探讨个旧肺癌细胞株中是否存在功能性的Wnt-1信号通路的激活,以及阻断该信号通路后,观察个旧肺癌细胞株的增殖和生长情况.为云南肺癌研究提供新的切入点.为临床对肺癌的早期诊断、预后判断提供依据,为肺癌的分子病理分期和靶向治疗提供理论基础.方法应用免疫组织化学的方法检测个旧肺癌细胞株中Wnt-1蛋白的表达.以及按计划加入Wnt-1抗体,抑制Wnt-1蛋白和胞膜受体结合,引起Wnt通路下游蛋白的改变,从而阻断该信号通路的传导,应用MTT法检测肺癌细胞增殖和生长情况.结果 (1)Wnt-1蛋白阳性染色主要定位于细胞浆和细胞膜,为粗细不一的棕黄色颗粒.在肺癌组中的阳性表达率为75.40%,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.001);(2)Wnt-1抗体浓度为0.01 mg/m L时能极显著抑制细胞增殖和生长(P<0.01);0.005 mg/m L时能显著抑制细胞增殖和生长(P<0.05).而过于稀释抗体浓度组则不能抑制细胞增殖和生长.IC50计算结果显示抑制率50%的时候抗体浓度为0.003 mg/m L.结论 (1)个旧肺癌细胞株中存在功能性的Wnt-1信号通路;(2)Wnt-1抗体能极显著抑制个旧肺癌细胞增殖和生长,且与抗体浓度成正比;(3)抑制率50%的时候抗体的浓度0.003 mg/m L.

Wnt-1、β-catenin在鼻咽癌组织中的表达及其临床意义

背景与目的:Wnt-1和β-catenin分别作为Wnt/β-catenin信号通路中的信号分子及关键分子在多种肿瘤中异常表达,且与预后不良有关。本研究通过检测Wnt-1、β-catenin在鼻咽癌组织中的表达,探讨其与鼻咽癌临床预后的关系。方法:用免疫组化SP法检测111例鼻咽癌组织中Wnt-1、β-catenin蛋白的表达情况,分析其与鼻咽癌无复发生存率、无转移生存率和无进展生存率的关系。结果:111例标本中,β-catenin高表达64例(57.7%),晚期鼻咽癌β-catenin的高表达率高于早期(63.1%vs40.7%,P=0.041);β-catenin高表达组的无复发生存率、无转移生存率、无进展生存率均显著低于低表达组(P<0.05)。多因素Cox回归模型显示β-catenin高表达与肿瘤进展有关。Wnt-1高表达68例(61.3%),高表达组与低表达组的无复发生存率、无转移生存率、无进展生存率相比,两者差异无统计学意义(P>0.05)。结论:部分鼻咽癌中可能存在Wnt/β-catenin通路的异常活化,β-catenin可作为鼻咽癌的一个预后指标。

过量表达Wnt-1基因诱导P19细胞的神经分化

Wnt-1基因在小鼠神经发育过程中起着重要作用。该基因在胚胎性癌细胞P19向神经分化过程中存在瞬时性表达。利用克隆到的Wnt－1基因转染P19细胞（Wnt－1／P19），可使细胞不经视黄酸（RA）诱导，自发向神经细胞方向分化。早期神经分化关键基因MASH-1在Wnt－1／P19细胞的神经分化过程中的表达，晚于RA诱导引起的P19细胞的分化过程。

Wnt-1蛋白和β-catenin在卵巢癌中的表达及意义

目的研究Wnt-1蛋白及β-连环蛋白(β-catenin)在卵巢上皮癌中的表达情况,探讨二者在卵巢癌发生发展中的作用及意义。方法应用免疫组织化学技术(S-P法)检测60例卵巢癌、24例卵巢上皮良性肿瘤以及26例正常卵巢上皮组织的石蜡包埋组织中Wnt-1蛋白和β-catenin的表达情况。结果Wnt-1蛋白在卵巢癌组织组中表达水平分别与卵巢上皮良性肿瘤组和正常卵巢上皮组织组相比,差异有显著性(P<0.05);β-catenin在卵巢癌组织组中的异位表达水平显著高于正常卵巢上皮组织组,并有统计学意义(P<0.05);β-catenin与卵巢癌的组织学分型及分化程度具有相关性(P<0.05)。结论Wnt-1蛋白和β-catenin的表达可能对卵巢癌的演变过程起到作用,为卵巢癌的靶向治疗提供理论依据和参考。

大鼠脊髓损伤后内源性神经干细胞增殖过程中Wnt-1的表达

目的:探讨大鼠脊髓损伤后信号蛋白Wnt-1的表达及其与脊髓内源性神经干细胞(ENSCs)早期增殖的关系。方法:30只Wister成年大鼠,随机分为正常对照组(A组,n=5)和损伤组(B组,n=25)。A组不损伤脊髓,B组在大鼠T10采用经典Allen′s打击法(25g·cm)造成脊髓损伤,于造模后1d、3d、1周、2周、4周进行取材,对距离损伤中心5mm的脊髓行免疫组化染色,检测ENSCs的增殖及Wnt-1蛋白表达的动态变化,与A组比较,并统计分析二者之间的相关性。结果:30只大鼠均进入结果分析。A组脊髓在中央管周围、外周软膜可见极少数BrdU/Nestin阳性细胞,白质中几乎没有。B组中BrdU/Nestin阳性细胞于损伤后24h表达于室管膜以及软膜,灰质和白质亦有少量表达,3d时明显增多,1周达到高峰(P<0.05),2周开始逐渐下降,4周时仍可见少量BrdU/Nestin阳性细胞。B组各时间点与A组比较差异有显著性意义(P<0.05)。B组大鼠各时间点均有Wnt-1蛋白的表达,损伤后第1天开始表达,3d达到高峰,一直至脊髓损伤后2周Wnt-1都维持在较高的表达水平。Wnt-1蛋白的表达与Nestin的表达具有相关性(r=0.893,P<0.05)。结论:大鼠脊髓损伤后信号蛋白Wnt-1表达增加,其可能与大鼠ENSCs的早期增殖有关。

食管鳞状细胞癌中SFRP1、Wnt-1的表达及临床意义

目的:研究分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)和Wnt-1在食管鳞癌中的表达情况,探讨其在食管鳞状细胞癌发生发展及与临床病理特征的关系。方法:应用免疫组织化学法(SP法),检测60例食管鳞状细胞癌组织和40例正常食管黏膜中SFRP1和Wnt-1蛋白的表达。结果:食管鳞状细胞癌中SFRP1的阳性表达率为25.0%,显著低于癌旁正常组织黏膜中的92.5%(χ2=43.81),Wnt-1在食管鳞状细胞癌中的阳性表达率为73.3%,显著高于癌旁正常组织中的17.5%(χ2=29.94)。在食管鳞癌组织中,SFRP1的表达与临床病理因素无相关性,Wnt-1的表达与组织分化程度有关。结论:SFRP1和Wnt-1在食管鳞癌的发生、发展中起一定的作用,它们有望成为辅助参考指标应用于临床,并可能为食管鳞癌的生物治疗和预后判断提供部分理论依据。

β-连环蛋白、上皮钙粘蛋白及Wnt-1在喉癌中的表达及意义

目的检测喉癌组织中β-连环蛋白(β-catenin)、上皮钙粘蛋白(E-cadherin)及Wnt-1的表达情况,在探讨此3种蛋白在喉癌发生、发展及转移过程中的作用及相关性。方法应用免疫组织化学SP法检测β-catenin、E-cadherin及Wnt-1在35例喉癌及27例喉正常黏膜的异常表达情况;分析它们在不同组织中的相互关系及与喉癌临床病理指征的关系。结果喉癌中β-catenin的异常表达率高于正常喉黏膜(P<0.01)。低分化喉癌中β-catenin的异常表达率高于高分化喉癌(P<0.05)。喉癌中E-cadherin的异常表达率高于正常喉黏膜(P<0.01)。低分化喉癌中E-cadherin的异常表达率高于高分化喉癌(P<0.01)。伴有淋巴结转移的喉癌中E-cadherin异常表达率高于无淋巴结转移的喉癌(P<0.01)。Ⅲ、Ⅳ期喉癌E-cadherin的异常表达率高于Ⅰ、Ⅱ期喉癌(P<0.05)。喉癌中Wnt-1的异常表达率高于正常喉黏膜(P<0.01)。β-catenin的异常表达与E-cadherin的异常表达呈正相关(r=0.457,P<0.01)。结论β-catenin、E-cadherin及Wnt-1在喉癌发生、分化程度、浸润及转移过程中的起重要作用。β-catenin、E-cadherin的协同作用可能影响喉癌的浸润及转移。

β-catenin和wnt-1在食管癌组织中的表达及其临床意义

研究β-catenin和wnt-1在食管癌组织中的蛋白表达水平及其与肿瘤病理参数和预后的关系。选取40例具有完整病理资料、手术切除的食管癌蜡块标本和其中10例癌旁组织,应用免疫组化方法检测其β-catenin和wnt-1的蛋白表达水平,比较β-catenin和wnt-1蛋白在组织中的表达差异,及其与食管癌各种临床病理特征和预后的关系。结果显示,β-cate-nin的表达水平与临床分期有相关性(P<0.05);wnt-1的表达水平与细胞分化、预后有相关性(P<0.05);β-catenin、wnt-1的蛋白表达水平与性别、年龄无相关性(P>0.05)。wnt-1和β-catenin作为Wnt信号通路的相关蛋白,与食管癌的发展和预后有一定关系。

Wnt-1诱导分泌蛋白-1在乳腺浸润性导管癌中的表达及其临床意义

目的通过检测Wnt-1诱导分泌蛋白-1(Wnt-1 induced secreted protein-1,WISP-1)在人乳腺癌中的表达,探讨其在乳腺癌发生发展中的作用。方法采用实时荧光定量RT-PCR和免疫组化法检测WISP-1 mRNA和蛋白表达水平,定量分析其表达与临床病理特征的关系。结果WISP-1在乳腺癌组织中的表达水平高于癌旁正常乳腺组织,差异有统计学意义(P=0.001)。WISP-1 mRNA表达与肿瘤大小、分期、组织学类型、是否有淋巴结转移和表皮生长因子受体-2(HER-2)表达有关(P<0.05),与年龄和雌、孕激素受体无关(P>0.05)。WISP-1蛋白表达与肿瘤组织学类型、是否有淋巴结转移和HER-2表达有关(P<0.05),与年龄,肿瘤大小,分期和雌、孕激素受体无关(P>0.05)。结论乳腺癌组织中WISP-1表达明显升高,在乳腺癌的浸润与转移中具有重要作用。

Wnt-1在大鼠气管干细胞早期增殖与分化过程中的表达

目的检测Wnt-1在大鼠气管上皮损伤修复中的表达及其变化,探讨影响气管干细胞早期增殖分化的分子调控机制。方法氟脲嘧啶(5-FU)作用大鼠离体气管,去除5-FU后分别于0、6、12、24及48 h用Westernblotting及免疫组织化学方法检测气管上皮中Wnt-1的表达。结果5-FU损伤后12 h,气管上皮脱落,仅残留少量G0期细胞表达Wnt-1;去除5-FU后6 h,上皮细胞数目增多,呈扁平状间断分布,Wnt-1表达最强;12 h后,上皮细胞呈立方状,并连接成片,Wnt-1表达逐渐减少;恢复48 h,气管上皮内出现假复层结构,仅见极少量Wnt-1阳性细胞。正常气管上皮Wnt-1表达极少。结论Wnt-1时间依赖性表达与气管上皮损伤修复进程相吻合,说明其在气管干细胞早期增殖分化中起重要调控作用。

Wnt-1和PAR-1在胃癌中的表达及其病理特征的相关性研究

目的探讨Wnt-1和PAR-1在胃癌的表达与临床病理学特征的关系以及2者在胃癌组织中表达的相关性。方法用免疫组化方法检测78例胃癌及其癌旁胃组织中Wnt-1和PAR-1的表达情况,运用统计学分析Wnt-1和PAR-1在胃癌的表达与临床病理学特征的关系,以及Wnt-1和PAR-1在胃癌的表达的相关性。结果 Wnt-1和PAR-1在胃癌的表达明显高于正常胃组织(P<0.05);Wnt-1和PAR-1的表达阳性组具有更高的淋巴结转移率(P<0.05);Wnt-1和PAR-1的表达与患者的性别和年龄无关,与肿瘤的大小、肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移情况以及TNM分期密切相关(P<0.05);且Wnt-1和PAR-1在胃癌中的表达成正相关。结论 Wnt-1及PAR-1的表达可促进胃癌的侵袭和转移。2者高表达均与胃癌的浸润深度、区域淋巴结转移、TNM分期、淋巴管浸润及较高淋巴结转移率有关,可作为胃癌恶性程度的预测因子,并且2者在胃癌组织中的表达呈正相关性。

Wnt-1和β-catenin在宫颈鳞状上皮癌变过程中的表达和意义

目的:探讨Wnt-1和β-catenin在宫颈正常鳞状上皮、宫颈上皮内瘤样病变(CIN)和宫颈浸润性鳞状细胞癌(SCC)中的表达及意义,寻找早期诊断SCC的生物学指标。方法:采用免疫组织化学方法(SP法)检测Wnt-1和β-catenin蛋白在20例宫颈正常鳞状上皮、30例CINⅠ、40例CINⅡ/Ⅲ及40例SCC患者中的表达情况。结果:(1)Wnt-1阳性表达率在宫颈正常鳞状上皮、CINⅠ、CINⅡ/Ⅲ、SCC组织中分别是25.0%、60.0%、82.5%、97.5%,其在4组中的表达差异具有统计学意义(χ2=40.04,P<0.05);(2)β-catenin异常表达率在宫颈正常鳞状上皮、CINⅠ、CINⅡ/Ⅲ、SCC组织中分别是5.0%、26.7%、57.5%、82.5%,差异具有统计学意义(χ2=37.25,P<0.05);(3)两者在SCC中表达的相关性:Wnt-1蛋白的阳性表达和β-catenin蛋白的异常表达有相关性(r=0.33,P<0.05)。结论:Wnt-1和β-catenin参与了宫颈鳞状上皮的恶性转化过程,在由CIN发展到宫颈癌的过程中起了促进作用,联合检测这两项指标有助于早期诊断SCC。

尖锐湿疣组织中分泌性卷曲相关蛋白-1和wnt-1蛋白的表达与细胞凋亡指数检测

目的:检测尖锐湿疣(CA)组织中分泌性卷曲相关蛋白(sFRP)-1和wnt-1蛋白的表达水平和细胞凋亡指数,了解它们在CA发病中可能的作用。方法:采用免疫组化法检测sFRP-1、wnt-1蛋白的表达水平,并用末端脱氧核苷酸转移酶介导的末端标记(TUNEL)法检测,计算细胞凋亡指数。结果:CA组织中sFRP-1的表达显著弱于正常包皮组织,wnt-1的表达强于正常包皮组织;CA组织中细胞凋亡指数明显高于正常包皮组织。结论:在CA组织中sFRP-1和wnt-1蛋白表达异常以及细胞凋亡指数增高,提示sFRP-1/wnt-1通路可能参与CA的发病。

β-catenin和Wnt-1在食管癌组织中的表达及其临床意义的研究

目的研究β-catenin和Wnt-1在食管癌组织中的蛋白表达水平及其与肿瘤病理参数和预后的关系。方法 2012全年选取江苏省人民医院病理科保存的40例手术切除食管癌蜡块标本和10例癌旁组织,将其分为实验组和对照组,应用免疫组化方法检测其β-catenin和Wnt-1的蛋白表达水平,采用JD-801病理图像分析系统,利用计算机技术对病灶影像定量分析其光密度参数、灰度分布。使用Stata 9.0(USA)软件包,参考值选用10例癌旁组织的蛋白表达水平,将肿瘤组织中的表达水平与参考值进行比较,分为高表达组和低表达组,分析两组生存率是否存在差别采用Kaplan-meier法。结果 Wnt-1的表达与食管癌预后的关系:高表达组生存率比低表达组高,差异有统计学意义(P=0.0177)。β-catenin的表达与食管癌预后的关系:高表达组生存率比低表达组高,但差异无统计学意义(P=0.1010)。结论 Wnt-1和β-catenin作为Wnt信号通路的相关蛋白,与食管癌发展、侵袭和预后等方面有密切关系。

压力作用下牙周组织护骨素与Wnt-1的表达

背景:目前研究发现Wnt信号通路及相关因子对骨组织具有调节作用,Wnt-1与骨形成密切相关,但与正畸骨改建的相关性少有报道。目的:通过建立大鼠的正畸牙移动模型,观察压力侧牙周组织Wnt-1及护骨素的表达。方法:Wistar大鼠80只制备大鼠正畸牙移动动物模型,按牙齿移动1,3,7,14d分别取材,每只大鼠对侧牙周组织设为空白对照组。苏木精-伊红染色观察大鼠压力侧牙周组织的形态变化,然后采用RT-PCR及免疫组织化学方法检测牙周组织Wnt-1及护骨素OPG的表达。结果与结论:免疫组织化学结果与PCR检测结果显示,大鼠牙齿移动后1,3,7,14d时,压力侧护骨素均有表达,在牙齿移动后3和7d时护骨素表达明显增强(P<0.05)。Wnt-1仅在在免疫组化中检测中显示,大鼠牙齿移动后3d与对照组表达出现明显增强(P<0.05)。结果证实,在正畸力作用下,护骨素参与了正畸牙周组织改建的过程,护骨素在压力区随正畸牙齿移动表达升高具有时间依赖性。Wnt-1在正畸骨改建中的作用需进一步研究证实。

Wnt-1与Smad4在大肠癌中的表达及其临床病理意义

目的研究Wnt-1和Smad4的表达与大肠癌临床病理的关系,探讨二者在大肠癌演变中的作用。方法采用免疫组化方法检测51例大肠癌标本中Wnt-1和Smad4的表达情况。结果①大肠癌组织中Wnt-1的表达明显高于正常组织的表达(P<0.05),Smad4的表达明显低于正常组织(P<0.05);②Wnt-1表达与年龄、性别、Dukes分期、淋巴结转移无关(P>0.05),但与肿瘤的大体类型、组织分级有关(P<0.05);③Smad4表达与年龄、性别、大体类型无关(P>0.05),但与肿瘤的Dukes分期、淋巴结转移、组织分级有关(P<0.05);④Wnt-1、Smad4联合表达与肿瘤的组织分级有关(P<0.05),与其他临床病理学特性无关(P>0.05)。结论Wnt-1的高表达和Smad4的低表达可能与大肠癌的发展、生物学行为及预后有关,可作为重要的生物学标志物。

Wnt-1在大鼠喙侧神经干细胞迁移流中的时空表达

目的 比较在大鼠脑发育过程中 ,Wnt 1在喙侧神经干细胞迁移流中表达水平的时空差异。方法 以 5 溴脱氧尿嘧啶尿苷 (BrdU)对胚胎 14d、出生后 0d和 7d的Wistar大鼠行活体标记 ,取各时相点鼠脑 ,冰冻切片 ,行BrdU、Wnt 1和胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)免疫荧光染色 ,比较在上述三个时相点 ,Wnt 1于室管膜前下区、迁移流主干部分和嗅球三个部位的表达情况。结果 在时间上 ,Wnt 1的表达在胚胎 14d高于出生后 0d和 7d ,出生后 0d和 7d的表达情况相似 ;在空间上 ,Wnt 1的表达在嗅球最高 ,室管膜前下区稍低 ,在神经干细胞迁移流主干部分的表达最低。结论 随着大鼠脑的发育 ,Wnt 1于喙侧神经干细胞迁移流中的表达逐渐减弱 ;在胚胎期及出生后早期 ,Wnt 1在喙侧神经干细胞迁移流中表达的空间分布情况相似。

Wnt-1、β-catenin,E-cadherin在胃癌的表达及其意义

目的探讨Wnt-1、β-连环素、E-钙黏蛋白在胃癌的表达及其与临床病理学特征的关系。方法应用免疫组织化学(SP法)检测180例胃癌组织和30例相应癌旁正常胃组织中Wnt-1、β-连环素、E-钙黏蛋白的表达。结果胃癌组织中Wnt-1、β-连环素、E-钙黏蛋白异常表达率分别为54.4%、45.6%、47.2%。三者基因异常表达与正常对照比较有显著性差异(P<0.01),三者基因异常表达与肿瘤大小、浸润深度、淋巴结转移、pTNM分期、分化程度及5年生存情况密切相关(P<0.05)。结论Wnt-1、β-连环素、E-钙黏蛋白在胃癌的进展、分化、浸润和转移中起重要作用,是判断胃癌生物学行为的良好指标。

骨保护蛋白和Wnt-1在张力侧牙周组织中的表达

目的运用RT-PCR和免疫组织化学方法,观察骨保护蛋白(OPG)和Wnt-1在大鼠正畸牙牙周组织改建过程中张力侧的表达,探讨OPG和Wnt-1与正畸牙周组织改建的关系。方法制备80只大鼠正畸牙移动模型,牙移动1、3、5、7 d分别取材,苏木精-伊红染色,观察大鼠张力侧牙周组织的形态变化,然后以RT-PCR和免疫组织化学方法检测张力侧牙周组织中OPG和Wnt-1的表达。结果在牙移动3 d后,OPG表达在张力侧增强,5 d达到高峰,7 d时下降,免疫组织化学与RT-PCR检测结果一致;免疫组织化学显示,Wnt-1在3、5d呈阳性,但在RT-PCR中未检测出。结论 OPG参与了正畸牙周组织的改建,OPG在张力区随正畸牙移动的表达升高具有时间依赖性;Wnt-1与正畸牙周组织改建的相关性尚无定论,需进一步研究。