EFFECTS OF DIPSACUS ASPER AND VITAMIN E ON THE SS NEURONS IN THE HIPPOCAMPAL FORMATION OF RAT MODELS OF ALZHEIMER'S DISEASE

Objective To study the effects of Dipsacus Asper and Vitamin E on the SS neurons in the hippocampal formation of rat models of Alzheimer’s Disease (AD). Methods Established rat models of AD by giving water containing AlCl 3, then treating them with Dipsacus Asper and Vitamin E(VE) for three months, observed the changing condition of rats’ memory through behavior tests, and studied changes of SS neurons in hippocampal formation with immunohistochemical ABC method. Results 3 months after treatment, behavior tests showed that rats’ memory was improved and the SS neurons in each region of hippocampal formation were increased, In CA1,CA2,CA3 and dentate gyrus, there were significant differences among treated groups and control group( P <0.05). In addition to the differences of quantity, the shape of SS neurons changed too: cytoplasm was stained strongly and equally, bodies and processes were rather clear.Conclusion Dipsacus Asper and Vitamin E can restore the SS neurons in AD models and SS neurons in hippocampal formation are related to AD’s cause and development.

续断对Alzheimer病模型大鼠海马结构淀粉样沉积的影响

目的探讨续断抗衰老作用的机理。方法用续断（２ｇ／ｄ／只）对ＡＤ模型大鼠灌胃治疗３个月。通过行为测试，光镜免疫细胞化学ＡＢＣ法，对ＡＤ大鼠行为改变，海马结构齿状回和ＣＡ１区ＡＰ－Ｌｉ神经元的形态和数目，β－ＡＰ的沉积变化进行了观察。结果续断组大鼠较对照组受电击次数减少，潜伏期延长（Ｐ＜０．０１），海马结构齿状回和ＣＡ１区ＡＰ－Ｌｉ神经元的数目较对照组均有明显减少（Ｐ＜０．０１），β－ＡＰ样反应染色减少。结论续断可以恢复ＡＤ模型大鼠的学习记忆缺损，有抑制和清除海马结构齿状回和ＣＡ１区β－ＡＰ的沉积的作用。

川续断对Alzheimer病模型大鼠顶叶皮质内淀粉样蛋白沉积的作用

目的 研究川续断和 Vit E对 Alzheimer(AD)模型大鼠学习记忆力及顶叶皮质内淀粉样蛋白沉积的影响。方法 用行为学、免疫细胞化学结合图像定量分析手段 ,观察研究川续断和 Vit E在不同时间段对 AD模型大鼠的作用。结果 行为学测试表明各时间段各组间均有显著性差异 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1 ) ;AP- L I神经元主要分布在顶叶皮质的第 、 、 层 ,在脑血管壁上也见有 β- AP沉积 ;图像分析提示 ,川续断和 Vit E处理 AD大鼠后 ,顶叶皮质内淀粉样蛋白样免疫反应 (AP- LI)神经元的截面积和光密度都有减少和降低 ,与对照组间有显著性差异 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1 ) ,同时随处理时间的延长 ,这种变化更加明显。结论 川续断可能具有与 Vit E相似的抗 AD作用 ,其机制可能是通过抑制和清除 β-

续断化学成分研究

目的:对续断的化学成分进行分离和鉴定。方法:采用硅胶色谱柱、RP-C18柱色谱等色谱方法对续断甲醇提取物进行成分分离和纯化,根据理化性质和光谱数据鉴定化合物的结构。结果:分离鉴定了12个化合物,分别为:蔗糖(1)、β-谷甾醇(2)、齐墩果酸(3)、Triplostoside A(4)、马钱苷(5)、马钱酸(6)、獐牙菜苷(7)、Epi-Vogelo-side(8)、Vogeloside(9)、木通皂苷D(10)、Cauloside A(11)、7-Deoxyloganic acid(12)。结论:其中,化合物8、9、12为首次从该植物中分离得到。

续断种质资源的研究进展

种质资源是药用植物生产的源头,种质的优劣对药材的产量和质量具有决定性的作用。阐述了续断药材基原的历史沿革及资源分布、种质亲缘关系、化学品质评价及繁育等种质资源的研究进展,探讨了续断种质资源的研究现状及当前中国续断种质资源研究存在的问题,并提出了今后研究的思路:加强对续断种质资源的收集和保存,引入遗传学、生态学、农艺学等多学科交叉的研究策略,以筛选出优质续断种源,为实现人工产业化栽培和品种选育打下基础。

川续断的研究进展

从化学成分、药理作用及临床应用等方面综述了川续断的研究进展 。

野生川续断和不同栽培年限川续断的组织结构鉴别研究

目的:研究川续断主根的生长发育的规律及结构的变化;寻找区别野生及栽培川续断、鉴别川续断不同栽培年限的依据。方法:对栽培川续断1、2年生主根及野生川续断不抽苔、抽苔植株的主根连续分段取样,切片观察;栽培川续断1～4年生主根分别切片观察。结果:首次发现川续断主根结构中存在生长轮的结构,并发现野生与栽培川续断生长轮导管排列方式不同,野生品为切向排列而栽培品为团状排列;野生品根上部有髓部,栽培品未见髓部,可以作为初步区别野生与栽培川续断的方法。每一主根从上到下生长轮结构一致,根的增粗主要取决于第1年木质部增长。栽培川续断1～4年生主根结构与年限之间有一定的关系和规律,可以作为初步鉴别生长年限的依据。结论:建立了野生川续断和不同栽培年限川续断的组织结构鉴别方法,为续断药材鉴别提供依据。

川续断的化学成分研究

从川续断(Dosacus asper Wall)的根中分得六个化合物(Ⅰ～Ⅵ)。Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ和Ⅵ分别鉴定为蔗糖、胡萝卜甙、β-谷甾醇和akebia saponin D.Ⅵ和Ⅴ为新化合物,根据光谱分析和化学方法证明其结构分别为3-O-(4-O-乙酰基)-α-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂甙元28-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖酯甙和3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸28-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D一-吡喃葡萄糖酯甙。

贵州续断药材川续断皂苷Ⅵ含量的地理分布趋势分析

为了解引起贵州续断中川续断皂苷Ⅵ含量变化的内外因素,采用HPLC法测定样品中川续断皂苷Ⅵ含量,对居群内、居群间的含量与分布地海拔进行分析。结果表明:川续断皂苷Ⅵ含量与产地或种源地的海拔呈正相关,居群内和居群间川续断皂苷Ⅵ含量差异均较大,且该差异不随海拔的改变而改变。结论:海拔是影响川续断皂苷Ⅵ含量变化的主导生态因子,续断居群内和居群间丰富的遗传多样性是造成川续断皂苷Ⅵ含量差异大的根本原因,在任一居群或产地,都可能有含量较高的植株和含量较低的植株。

川续断中的新三萜皂甙

从川续断(Dispsacus asper Wall.)根的乙醇提取物中得到二个新三萜皂甙(Ⅶ和Ⅷ)。根据光谱分析、化学反应及双向高效薄层层析结果,证明其结构分别为:3-O-β-D-吡喃葡萄糖(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂甙元28-O-β-D-吡喃葡萄糖(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖酯甙和3-O-α-L-吡喃鼠李糖(1→3)-β-D-吡喃葡萄糖(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖-常春藤皂甙元28-O-β-D-吡喃葡萄糖(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖酯甙。

综合评分法优选川续断产地加工方法

目的:优选川续断产地加工方法。方法:以川续断浸出物、川续断皂苷Ⅵ及总皂苷的含量为指标,采用综合评分优选川续断产地加工方法。结果:烘至半干发汗(0.7046)>阴至半干发汗(0.5857)>烫软发汗(0.5280)>晒干(0.3138)>蒸软发汗(0.0952)。结论:用综合评分法优选产地加工方法,可较好的保证川续断的质量。

川续断对Alzheimer病模型大鼠海马内淀粉样前体蛋白表达的影响

有关Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病（ＡＤ）的治疗尚无有效的措施。文中用铝诱导建立ＡＤ大鼠模型，将ＡＤ大鼠分为对照、续断和ｖｉｔａｍｉｎＥ（ＶＥ）三组，用川续断／ＶＥ处理ＡＤ大鼠１，３，５个月，分别进行行为学测试、光镜形态学观察、免疫细胞化学图像分析处理。结果：１．川续断／ＶＥ处理１，３，５个月三个时间段中三组间①大鼠学习记忆力有显著性差异（Ｐ＜０．０５）；②海马结构内淀粉样前体蛋白样免疫反应（ＡＰＰ－ＬＩ）神经元的胞体平均截面积及光密度（ＡＳＯ）各存在有统计学差异（Ｐ＜０．０５）。２．续断组和ＶＥ组于川续断／ＶＥ处理１，３，５个月间的纵向比较显示①大鼠学习记忆力也有显著性差异（Ｐ＜０．０５或０．０１）；②海马结构内ＡＰＰ－ＬＩ神经元的胞体平均截面积及ＡＳＯ各存在有统计学差异（Ｐ＜０．０１）。提示川续断和ＶＥ对淀粉样前体蛋白在神经元的过度表达有明显的抑制作用，并且可以改善大鼠学习记忆力。

川续断中皂甙Ⅸ和Ⅹ的结构研究

从川续断(Dipsacus asper Wall.)根的乙醇提取物中得到二个新三萜皂甙(Ⅸ和Ⅹ),根据光谱分析和化学反应,其结构分别确定为3-O-[β-D-吡喃木糖(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖(1→4)][α-L-吡喃鼠李糖(1→3)]-β-D-吡喃葡萄糖(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖-常春藤皂甙元(Ⅸ)及其28-O-β-D-吡喃葡萄糖(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖酯甙(Ⅹ)。

云南续断药材HPLC特征指纹图谱研究

目的:研究云南续断药材的HPLC指纹图谱,为有效的控制药材质量提供可靠的方法。方法:以云南地区续断药材主要分布区5个州(市)的11个县(市、区)的16批样品,采用Aglient Zorbax SB-18(4.6 mm×250mm,5μm)色谱柱,流动相:甲醇、水溶液按二元梯度洗脱,流速:1 mL/min,检测波长:220 nm,柱温:35℃。结果:建立了续断HPLC指纹图谱分析方法,16批续断样品测定结果表明,得到了14个共有峰,续断药材相似度在0.674～0.965之间,聚类分析可以聚为两类。结论:在云南首次采集到了日本续断;不同产地续断药材指纹图谱相似度极高,建立的续断指纹图谱测定方法准确可靠。

GC-MS法分析“发汗”对续断挥发性成分的影响

目的通过GC-MS法分析＂发汗＂对续断Dipsacus asper Wall.ex Henry挥发性成分的影响。方法水蒸气蒸馏法提取续断乙醚萃取物挥发油后,GC-MS法鉴定其成分,面积归一化法计算各成分相对含有量。结果续断在＂发汗＂前后均鉴定出28种成分,其中26种为共有成分。＂发汗＂前未检测出9,12,15-十八碳三烯酸甲酯和9-亚甲基-9H-芴,而＂发汗＂后未检测出顺-13-十八碳烯酸和十七烷醇。结论 ＂发汗＂后续断中共有成分的含有量均有明显变化,变化范围为30.81%-99.34%。

续断生品与酒炙品HPLC指纹图谱及其成分差异分析

目的:建立并比较续断酒炙前后HPLC指纹图谱,探讨续断酒炙前后化学成分差异。方法:采用Agilent C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)。流动相:乙腈-0.05%磷酸,梯度洗脱;流速1.0 m L/min;柱温25℃。结果:炮制后部分化学成分含量有不同程度改变,川续断皂苷Ⅵ含量显著增加,且有两个新的色谱峰出现。结论:该方法可较全面地反映续断酒炙前后化学成分的差异,可用于控制续断生品和酒炙品的内在质量。

灌服川续断水煎液对大鼠正畸牙移动的影响

目的研究灌服川续断水煎液对大鼠正畸牙移动的影响。方法选择48只SPF级Wistar大鼠,随机分2组,每组24只,于上颌一侧第一磨牙与上切牙之间结扎正畸螺旋弹簧,建立大鼠正畸牙齿移动实验模型。实验组每日灌服6g/kg川续断水煎液;对照组每日灌服3ml生理盐水。两组动物于正畸加力7、14、21、28d后分批处死,取上颌磨牙及牙周组织,测量上颌第一磨牙近中移动距离并行统计学分析。结果正畸加力7d,实验组大鼠第一磨牙近中移动距离与对照组无统计学差异(P>0.05)。正畸加力14、21、28d,实验组大鼠第一磨牙近中移动距离明显大于对照组(P<0.05)。结论川续断能够加速正畸牙齿的移动速度。

基于化学指纹图谱的药用植物种质资源多样性评价——以黔产川续断种质资源评价为例

目的:以指纹图谱的指纹峰面积为参数,探讨药用植物种质资源多样性评价方法。方法:以黔产川续断为例,对其HPLC指纹图谱进行标准化处理,利用相关软件计算指纹峰面积多样性、指纹峰之间相关性分析以及主成分分析,并进行不同种质之间的聚类分析。结果:各指纹图谱峰的峰面积表现出不同程度的多样性;大多数指纹峰面积之间呈显著的相关性;主成分分析结果表明,第一主成分反应了川续断的品质特征;聚类分析显示欧式遗传距离与种质资源的空间距离无关。结论:以指纹图谱为指标对药用植物进行多样性评价,可以揭示药用植物种质资源多样性规律和结构,同时还能反映药用植物种质资源的内在质量,与其他研究药用植物的遗传多样性的方法相比,具有明显的特色。

恩施州川续断的RAPD分析

采用RAPD分子标记技术对恩施州8个不同产地的川续断进行了遗传多样性研究.从50个引物筛选出5个条带清晰、多态性明显并且重复性好的的引物,共扩增出53条DNA片段,利用NTSYS软件进行聚类分析,以相似系数0.85为标准,可将所有品种分为3类,第Ⅰ大类包括建始县龙坪、利川市元堡、恩施市鱼塘坝上坝、恩施市鱼塘坝硒矿区、巴东县绿葱坡;第Ⅱ包括鹤峰县太平乡和鹤峰县五里坪;恩施市双河独立分为一类.本研究可为川续断的鉴别提供一定参考和依据.

川续断中皂甙Ⅺ,Ⅻ和ⅩⅢ的结构研究

从川续断(Dipsacus asper Wall.)根的醇提物中得到三个微量新三萜皂甙(Ⅺ～ⅫⅠ),根据光谱分析和化学反应,其结构分别鉴定为3-O-[β-D-吡喃葡萄糖(1→4)][α-L-吡喃鼠李糖(1→3)]-β-D-吡喃葡萄糖(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖-常春藤皂甙元(Ⅺ)、Ⅺ的28-O-β-D-吡喃葡萄糖(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖酯甙( Ⅻ)和3-O-[β-D-吡喃木糖(1→4)-B-O-吡喃葡萄糖(1→4)][α-L-吡喃鼠李糖(1→3)]-B-D-吡喃葡萄糖(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖-齐墩果酸-28-O-β-吡喃葡萄糖(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖酯甙(ⅫⅠ)。