从lncRNA NEAT1/miRNA-377-3p调控角度探讨乌头汤改善骨关节炎软骨退变的实验研究

目的:探讨乌头汤通过调控lncRNA NEAT1/miRNA-377-3p对骨关节炎软骨退变的作用机制。方法:饲养C57BL/6小鼠48只,随机分为空白对照组12只和造模组36只。采用Hulth法制备骨关节炎模型,模型建立后,再随机分为模型对照组、乌头汤组和硫酸氨基葡萄糖组,每组12只,番红-固绿染色进行骨关节炎模型鉴定。待干预完成后,采用Micro-CT观察膝关节形态变化,采用Real-time PCR检测软骨组织中lncRNA NEAT1、miRNA-377-3p、MMP-9、MMP-13、ADAMTS-4、ADAMTS-5、Aggrecan水平变化。结果:Micro-CT结果显示:与空白对照组比较,模型对照组小鼠关节结构变形明显,关节间隙严重狭窄,骨关节面破坏程度高且伴有骨赘形成;与模型对照组比较,乌头汤组、硫酸氨基葡萄糖组小鼠关节变形及损害程度发生显著改善。与空白对照组比较,模型对照组lncRNA NEAT1、MMP-9、MMP-13、ADAMTS-4、ADAMTS-5水平显著增高,miRNA-377-3p、Aggrecan相对表达水平显著降低(P<0.05);而乌头汤组可显著降低lncRNA NEAT1、MMP-9、MMP-13、ADAMTS-4、ADAMTS-5水平,并上调miRNA-377-3p、Aggrecan水平(P<0.05)。结论:乌头汤可改善骨关节炎软骨退变,与调控lncRNA NEAT1/miRNA-377-3p有关。

基于《辅行诀》所载“汤液经法图”探究乌头汤治疗膝骨关节炎的组方思想

《素问·脏气法时论》里面提到了人与天地四时之间的对应关系,并进一步论述了二十四节气对人体疾病发展变化的影响及选药组方思想。而随着《辅行诀》的问世,这一组方思想在“汤液经法图”中被充分展现。本文在综合分析《黄帝内经》与《辅行诀》内容的基础上,运用“五运六气”理论分析膝关节骨性关节炎(膝骨关节炎)的产生、发展及预后,并且从“汤液经法图”的角度分析乌头汤治疗膝骨关节炎的组方思想,以期为中医临床辨证及选药组方提供一定的理论依据和文献支撑。

乌头汤治疗寒湿痹阻型膝骨关节炎:与双氯芬酸钠的比较

目的:观察乌头汤治疗寒湿痹阻型膝骨关节炎患者的功能康复疗效。方法:将60例寒湿痹阻型膝骨关节炎患者随机分为乌头汤组和扶他林组,每组30例。2组均给予健康教育。乌头汤组另给予乌头汤内服外洗。扶他林组另给予双氯芬酸钠肠溶片内服,双氯芬酸二乙胺乳胶剂外敷。经10 d、20 d治疗后,评价2组视觉模拟评分法(VAS)评分、关节活动度、Lysholm膝关节功能评分。结果:治疗后,2组VAS评分较治疗前均降低,关节活动度、Lysholm膝关节功能评分均升高,差异有统计学意义(P<0.01);治疗10 d后,扶他林组VAS评分改善程度显著优于乌头汤组(P<0.01);治疗20 d后,乌头汤组在改善关节活动度及Lysholm膝关节功能评分方面均优于扶他林组(P<0.05或P<0.01)。结论:乌头汤、扶他林均可缓解膝骨关节炎患者疼痛,改善膝关节功能障碍程度,提高关节活动度,促进患者功能恢复,其中乌头汤改善膝关节功能疗效较佳,对临床具有一定的参考价值。

基于计算机模拟乌头汤治疗疼痛的药效物质基础与分子作用机制

目的:探讨乌头汤治疗疼痛的药效物质基础与分子作用机制。方法:借助Discovery Studio模拟平台,构建乌头汤分子数据集,比较其与Drug Bank数据库中抗炎镇痛药物分子的化学空间,在此基础上采用基于分子对接的网络药理学方法,构建乌头汤中化合物-靶点作用网络,探讨其与治疗疼痛靶点的相互作用。结果:乌头汤中分子与药物分子在化学空间上具有良好的重叠性,其主要药效物质基础为生物碱、黄酮类、皂苷类化合物,可作用于诱导型一氧化氮合酶、p38、c-Jun氨基末端激酶1、肿瘤坏死因子-α、磷酸二酯酶4A和Kappa阿片受体。结论:乌头汤可作用于p38 MAPK、JNK等信号通路,抑制NO释放,减弱机械痛敏,阻止痛觉冲动的传导和传递等途径,起到多成分、多靶点、多途径治疗疼痛的效果。

乌头汤合强的松治疗风湿性多肌痛临床观察

目的观察乌头汤合强的松治疗寒湿痹阻型风湿性多肌痛的临床疗效。方法将52例患者随机分为对照组24例,治疗组28例。对照组患者单纯应用强的松治疗,治疗组在对照组治疗基础上加用中药乌头汤治疗。结果对照组和治疗组总有效率分别为62.5%和89.3%,治疗组临床疗效明显优于对照组,两组比较有显著性差异(P<0.05)。两组患者治疗后ESR、CRP、HGB、PLT指标改善情况,治疗组优于对照组,两组比较有显著性差异(P<0.05)。结论乌头汤合强的松治疗寒湿痹阻型风湿性多肌痛疗效显著,具有降低患者ESR、CRP、PLT水平和升高HGB的作用。

乌头汤治疗骨关节炎的系统评价

目的:系统评价乌头汤治疗骨关节炎的有效性及安全性。方法:计算机检索中国知网、维普、万方、Pub Med等数据库,查找乌头汤治疗骨关节炎的临床随机对照试验,检索时间为建库至2016年9月。采用改良Jadad评分法评价文献质量,可定量分析的文献采用STATA 12.0软件进行Meta分析,否则仅进行描述性评价。结果:共纳入12篇文献,均为低质量文献。Meta分析结果显示,乌头汤内服、外洗的总有效率与对照组相当,差异无统计学意义(P>0.05);乌头汤内服合外洗、内服联合西药治疗的总有效率较对照组好,差异有统计学意义(P<0.05)。在减轻疼痛、延缓病情、改善功能活动等方面有一定效果,无严重不良反应。结论:乌头汤对骨关节炎具有一定疗效,安全性尚可;但由于本研究纳入文献数量较少、方法学质量不高等情况,结果有待临床进一步验证。

舒通胶囊抗炎作用的实验研究

实验研究表明 ,舒通胶囊对蛋清所致急性炎症及佐剂性关节炎有显著的抗炎作用 ,其抗炎能力与雷公藤片相当。

乌头汤联合常规西药治疗类风湿关节炎随机对照试验的Meta分析

目的:探讨乌头汤联合西药治疗类风湿关节炎的临床疗效,为其临床治疗及研究提供参考及循证医学支持。方法:计算机检索中国知网(CNKI)、万方(WANFANG DATA)、维普(VIP)、The Cochrane图书馆、中国生物医学文献数据库(CBM)等数据库,选取以乌头汤及其联合疗法治疗类风湿关节炎临床随机对照试验,检索时间为建库至2018年6月。由2名研究员独立筛选文献,提取文献资料及评估偏倚风险,并采用Rev Man 5.3软件对数据进行分析。结果:共纳入11篇随机对照试验文献,总样本量为890例,其中试验组448例,对照组442例。Meta分析结果显示:乌头汤联合西药能提高疗效(RR=1.31,95%CI=[1.21,1.41],P <0.000 01),且乌头汤联合西药在红细胞沉降率(WMD=-1.08,95%CI=[-1.45,-0.70],P <0.000 1)、C-反应蛋白(WMD=-1.23,95%CI=[-1.89,-0.58],P=0.000 2)、类风湿因子(WMD=-13.76,95%CI=[-24.32,-3.19],P=0.01)等指标改善方面均优于常规西药。纳入的文献有8篇提及不良反应。结论:乌头汤联合西药治疗类风湿关节炎可以进一步提高临床疗效,但由于纳入研究样本量小且质量较低,仍需要高质量、大样本的随机对照试验加以证实。

乌头汤对脂多糖诱导大鼠软骨细胞炎症反应的影响

目的:基于核转录因子-κB(NF-κB)炎症相关信号通路,观察乌头汤水提物对脂多糖(LPS)诱导体外培养软骨细胞炎症模型的影响。方法:①制备乌头汤水提物;②分离、培养软骨细胞;③噻唑蓝(MTT)法检测乌头汤对LPS诱导软骨细胞活性的影响;采用Western Blot法检测NF-κB p65、IκB激酶复合物(IKK)、磷酸化核因子κB抑制蛋白(pIκB)含量表达。结果:①MTT实验结果显示,乌头汤水提物对LPS诱导软骨细胞的最佳干预时间和浓度分别为24 h和150 μg·mL^(-1);②Western Blot检测结果显示,乌头汤水提物100 μg·mL^(-1)组、150 μg·mL^(-1)组、200 μg·mL^(-1)组对LPS诱导的软骨细胞干预24 h后,可调节与炎症相关的NF-κB p65、IKK、pIκB含量表达,尤其以乌头汤水提物150 μg·mL^(-1)组变化显著(P<0.01)。结论:乌头汤通过降低LPS诱导的软骨细胞中与炎症相关的NF-κB途径调节因子含量表达,发挥抗炎作用。

加味乌头汤外洗联合西药对类风湿关节炎患者手关节炎症状改善的临床观察

目的:观察加味乌头汤外洗联合西药对类风湿关节炎患者手关节炎症状改善的临床疗效。方法:将60例类风湿关节炎患者随机分为治疗组和对照组,每组30例。对照组口服甲氨蝶呤及塞来昔布胶囊治疗,治疗组在对照组治疗基础上加用加味乌头汤外洗双手关节。2组均以60 d为1个疗程。观察2组临床疗效,以及治疗前后主要症状、体征和实验室指标变化情况。结果:治疗组ACR20、ACR50、ACR70均高于对照组,2组比较,差异有统计学意义(P <0.05)。治疗后,2组关节压痛数、关节肿胀数、晨僵时间、视觉模拟评分法评分、C-反应蛋白、红细胞沉降率、双手握力较治疗前均有改善(P<0.05),且治疗组优于对照组(P <0.05)。结论:加味乌头汤外洗联合西药对类风湿关节炎患者手关节炎症状的改善有明显的疗效。

乌头汤对膝骨关节炎大鼠软骨细胞焦亡相关基因表达的影响

目的:探讨乌头汤通过调控软骨细胞炎性焦亡途径延缓膝骨关节炎软骨退变的作用与机制。方法:将36只SD大鼠(雄性,8周龄)随机分为空白对照组、模型对照组和乌头汤组,每组12只。空白对照组不造模,模型对照组和乌头汤组采用改良Hulth法造模。空白对照组与模型对照组采用生理盐水(3 mg·kg^(-1)·d^(-1))灌胃,乌头汤组采用乌头汤(生药浓度4.2 g·mL^(-1))灌胃。干预8周后,麻醉状态下摘取大鼠膝关节软骨。采用Western blot检测不同组别关节软骨中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、白细胞介素(IL)-1β、IL-18的蛋白含量表达;采用Real-time PCR检测不同组别关节软骨中NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18的基因相对表达变化。结果:模型对照组和乌头汤组NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18蛋白含量与基因相对表达量均上调,与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);乌头汤组能够下调NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18蛋白含量与基因相对表达量,与模型对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:乌头汤可改善膝骨关节炎大鼠软骨NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18的表达,抑制软骨细胞焦亡,延缓软骨退变。

乌头汤抑制膝骨关节炎软骨细胞氧化应激反应的作用研究

目的:探讨乌头汤抑制膝骨关节炎软骨细胞氧化应激反应的途径与作用机制。方法:①采用回流法制备乌头汤药物;②软骨细胞培养、LPS诱导软骨细胞退变及Ⅱ型胶原免疫组织化学染色法进行鉴定;③采用ELISA法检测软骨细胞上清液中一氧化氮(NO)与超氧化物歧化酶(SOD)水平变化;④采用Western blot法检测软骨细胞中核因子NF-E2相关因子(Nrf2)、肌动蛋白结合蛋白(Keap1)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白含量表达。结果:①ELISA检测结果显示,与模型对照组比较,乌头汤各浓度组中的NO水平下降(P<0.01),而SOD水平明显增高(P<0.01);②Western blot检测结果显示,乌头汤组(150μg·mL^(-1))对脂多糖诱导的软骨细胞干预24 h后,可显著改善软骨细胞中Nrf2、Keap1、iNOS含量表达(P<0.01)。结论:乌头汤可抑制膝骨关节炎软骨细胞氧化应激反应,其作用机制与调控Nrf2/Keap1途径相关。

乌头汤治疗肾虚督寒型强直性脊柱炎30例临床观察

目的:观察乌头汤治疗肾虚督寒型强直性脊柱炎的临床疗效。方法:将60例活动期肾虚督寒型强直性脊柱炎患者随机分为治疗组和对照组,每组30例。治疗组口服乌头汤治疗,对照组口服美洛昔康片治疗。2组均以4周为1个疗程。观察2组ASAS20疗效、ASAS40疗效、中医证候疗效,以及治疗前后脊柱痛视觉模拟评分法(VAS)评分、患者自我评价VAS评分、Bath强直性脊柱炎功能指数(BASFI)、Bath强直性脊柱炎活动指数(BASDAI)、中医证候积分等指标,并评估安全性。结果:治疗组ASAS40达标率为33.33%,明显优于对照组的6.67%,2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。2组中医疗效总有效率均为83.33%,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,2组脊柱痛VAS评分、患者自我评价VAS评分、BASFI、BASDAI较治疗前均有一定改善,差异有统计学意义(P<0.05);2组间各指标比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:乌头汤对肾虚督寒型强直性脊柱炎的临床疗效较好,且安全性高。

乌头汤调控lncRNA GAS5抑制骨关节炎软骨细胞炎症反应的研究

目的:探讨乌头汤调控lncRNA GAS5进而干预白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的软骨细胞炎症反应的效果及机制,为乌头汤的临床应用提供实验依据。方法:4周龄SPF级SD雄性大鼠10只,提取大鼠双膝关节软骨,进行体外软骨细胞的分离与培养,采用Ⅱ型胶原免疫组化法对软骨细胞进行鉴定;经10 ng·mL^(-1) IL-1β干预24 h诱导软骨细胞退变。将软骨细胞随机分为空白对照组、模型对照组(10 ng·mL^(-1) IL-1β)和乌头汤组(150μg·mL^(-1)乌头汤水提物)。通过Real-time PCR检测各组软骨细胞中lncRNA GAS5的相对表达水平。免疫荧光染色技术检测软骨细胞中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)和解聚蛋白样金属蛋白酶-5(ADAMTS-5)的荧光表达量。结果:与空白对照组比较,模型对照组lncRNA GAS5相对表达水平显著升高(P<0.01),TNF-α、MMP-3和ADAMTS-5荧光表达增强;与模型对照组比较,乌头汤组lncRNA GAS5相对表达水平显著降低(P<0.01),TNF-α、MMP-3和ADAMTS-5荧光表达显著减弱。结论:乌头汤可抑制骨关节炎软骨细胞炎症反应,维持软骨细胞外基质稳态,与调控lncRNA GAS5相对水平表达有关。

配伍对乌头汤中乌头碱型生物碱的影响

目的:考察在乌头汤中制川乌配伍后对乌头碱型生物碱的影响。方法:采用HPLC-ESI-MS正离子检测模式分析制川乌单煎液及乌头汤中乌头碱型生物碱类成分,对各成分的MS2和MS3谱图进行解析,比较制川乌单煎液与乌头汤中乌头碱型生物碱类成分的区别。结果:制川乌单煎液及乌头汤中检出36个共有成分,制川乌单煎液中有13个成分在乌头汤中未检出,分别为10-羟基焦乌头碱,10-羟基焦乌头原碱,10-羟基焦中乌头原碱,中乌头碱,10-羟基次乌头次碱,10-羟基焦次乌头碱,去氧乌头碱,焦去氧乌头原碱,去氧中乌头次碱,去氧中乌头原碱,3,13-去氧乌头原碱,3,13-去氧焦乌头碱,3,13-去氧焦乌头原碱。乌头汤中10-羟基中乌头原碱在制川乌单煎液中未检出。结论:制川乌配伍后,大量乌头碱型生物碱类成分丢失,成分区别明显。建立的HPLC-ESI-MS可有效分离各种乌头碱型生物碱类成分,提供了各组分的相对分子质量和结构信息。

乌头汤对大鼠肝药酶CPY3A4活性的影响

目的:考察乌头汤对大鼠肝药酶CPY3A4活性的影响,以探索乌头汤作用于CPY3A4发生药物间相互作用的可能性。方法:50只SD雄性大鼠随机分为空白对照组、抑制剂SKF-525A阳性组(0.1 g.kg-1)、乌头汤高剂量组(原方剂量2倍)、乌头汤中剂量组(原方剂量)、乌头汤低剂量组(原方剂量1/2)。大鼠连续灌胃给药7 d,第8 d处理动物并制备肝微粒体,以睾酮为探针,采用超高效液相色谱(UPLC)测定6β-羟基睾酮的生成量,计算其代谢速率并评价CPY3A4活性的变化。结果:与空白对照组相比,乌头汤高、中、低剂量组的睾酮代谢速率均明显降低(P<0.05);与乌头汤低、中剂量组相比,乌头汤高剂量组的睾酮代谢速率皆降低。结论:乌头汤连续给药7 d后可抑制大鼠肝脏CPY3A4的活性,提示乌头汤与CPY3A4底物药物合用时可能发生药物间相互作用。

乌头赤石脂汤对老年缺血性心肌病伴心力衰竭患者血清TNF-α,BNP及Hcy水平的影响

目的:探讨乌头赤石脂汤对老年缺血性心肌病伴心力衰竭患者血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α),B型钠尿肽(B-type natriuretic peptide,BNP)及同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)水平的影响。方法:取郑州市中医院治疗的缺血性心肌病心力衰竭老年患者94例,按随机数字表法分为治疗组和对照组,对照组(47例)予以基础治疗,治疗组(47例)在基础治疗上联用乌头赤石脂汤治疗,观察并记录心室重构及心功能、血清指标、生活质量等指标,同时观察临床疗效及不良反应。结果:治疗后对照组治疗有效率(74.47%)低于治疗组(91.49%)(P<0.05);与治疗前比较,两组治疗后心室重构及心功能、血清指标、生活质量均发生变化,治疗组治疗后左心室舒张末内径(left ventricular end diastolic diameter,LVEDD),左室收缩末期内径(left ventricular end systolic diameter,LVESD)指标低于对照组(P<0.05),左心室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF),每分钟输出量(output per minute,CO)指标高于对照组(P<0.05),治疗组治疗后血清BNP,肌钙蛋白I(Troponin I,c Tn I),高敏C反应蛋白(high-sensitivity C-reactive protein,hs-CRP),TNF-α,Hcy水平低于对照组(P<0.05),治疗组治疗后生活质量改善程度优于对照组(P<0.05);两组治疗期间无严重不良反应发生。结论:采用乌头赤石脂汤对老年缺血性心肌病伴心力衰竭疗效确切,能降低血清TNF-α,BNP及Hcy水平,提高生活质量。

乌头汤联合双醋瑞因治疗膝关节骨性关节炎寒湿痹阻证37例临床观察

目的观察乌头汤联合双醋瑞因治疗膝关节骨性关节炎(KOA)寒湿痹阻证的临床疗效。方法将74例KOA寒湿痹阻证患者按照就诊顺序分为对照组和治疗组,各37例。对照组给予双醋瑞因胶囊治疗,治疗组在对照组治疗方法的基础上给予乌头汤治疗。8周后比较2组的临床疗效、不良反应发生率,以及治疗前后中医证候积分、西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎(WOMAC)指数、视觉模拟评分法(VAS)评分。结果对照组总有效率为54.1%(20/37),治疗组为86.5%(32/37),2组比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗后2组中医证候积分、WOMAC指数及VAS评分均明显降低,与同组治疗前比较差异有统计学意义(P<0.01),且治疗组降低更明显,与对照组治疗后比较差异均有统计学意义(P<0.01);对照组不良反应发生率为10.81%(4/37),治疗组为8.11%(3/37),2组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论乌头汤联合双醋瑞因可明显改善KOA寒湿痹阻证患者膝关节疼痛、晨僵及功能活动,缓解临床症状,值得临床推广应用。