survivin基因沉默对宫颈癌XB1702细胞增殖和对吉非替尼敏感度的影响

目的研究survivin基因沉默对人宫颈癌XB1702细胞增殖和对化疗药物吉非替尼敏感度的影响。方法设计合成survivin的siRNA序列,LipofectamineTM2000转染入XB1702细胞。采用RT-PCR和Western blot检测survivin在干扰后mRNA和蛋白的表达情况,利用流式细胞仪检测细胞周期。通过MTT法和细胞克隆形成试验法观察survivin基因沉默后XB1702细胞对吉非替尼的敏感度。结果 Survivin基因沉默48 h后,XB1702细胞的survivin基因和蛋白表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。细胞周期被阻滞在G0/G1期,S期细胞数减少;差异有统计学意义(P<0.05)。survivin基因沉默组细胞对吉非替尼的敏感度显著增强。结论 survivin特异性siRNA能显著沉默XB1702细胞survivin基因,抑制细胞增殖,并增强XB1702细胞对吉非替尼的敏感度。

长链非编码RNA CCAT1对人宫颈癌XB1702细胞裸鼠移植瘤放射敏感性的影响

目的探讨长链非编码RNA(lnc RNA)结肠癌相关转录因子1(CCAT1)对宫颈癌XB1702细胞裸鼠移植瘤放射敏感性的影响。方法通过电穿孔法分别将CCAT1 si RNA和重组表达载体pcD NA3.1-CCAT1转染人宫颈癌XB1702细胞后,G418筛选得到稳定转染细胞系,实验分为3组:CCAT1si RNA转染组、pc DNA3.1-CCAT1转染组和空白对照组。转染48 h后,RT-PCR检测细胞中CCAT1 lnc RNA表达水平;CCK8检测细胞增殖,TUNEL法检测细胞凋亡影响;裸鼠移植瘤实验检测上调和下调RNA CCAT1表达联合X射线照射对宫颈癌的生长抑制作用。结果干扰XB1702细胞中CCAT1 lnc RNA表达后,XB1702细胞增殖被抑制,细胞凋亡率增加;裸鼠移植瘤平均体积明显小于对照组(正常XB1702细胞种植组)差异有统计学意义(P<0.05);上调XB1702细胞中CCAT1lnc RNA表达后,XB1702细胞增殖能力明显增强,细胞凋亡率降低,差异有统计学意义(P<0.05),而上调组裸鼠皮下种植瘤平均体积较照射前无明显变化。结论下调CCAT1 mR NA表达能抑制人宫颈癌XB1702细胞裸鼠移植瘤的生长,增强瘤体的放射敏感性。

ABCE1基因沉默对人宫颈癌XB1702细胞生物学特性的影响

背景:随着基因工程以及肿瘤生物分子学等新兴学科的发展壮大,基因治疗肿瘤成为一种新的治疗模式。目的:探讨ABCE1基因沉默对人宫颈癌XB1702细胞的生长、增殖及迁移等方面的影响。方法:设计及合成ABCE1的siR NA序列,LipofectamineTM 2000转染XB1702细胞。以转染NC siR NA载体细胞为对照组,未转染的宫颈癌XB1702细胞为空白组。通过RT-PCR、Western blot检测RNA干扰后ABCE1 mR NA和蛋白的表达,流式细胞仪检测细胞周期,并通过CCK-8增殖实验、划痕愈合实验、细胞侵袭实验评价沉默ABCE1基因对人宫颈癌XB1702细胞增殖、迁移以及侵袭能力的影响。结果与结论:实验组ABCE1 mR NA和蛋白表达明显低于对照组和空白组(P<0.05)。实验组细胞的生长速度明显减慢,细胞被阻滞在G0/G1期,S期细胞数减少。与对照组和空白组相比,实验组XB1702细胞的增殖受到明显抑制、迁移能力和侵袭能力显著下降(P<0.05)。结果表明特异性干扰ABCE1基因表达可抑制人宫颈癌XB1702细胞的迁移能力,并抑制肿瘤细胞增殖,因此,ABCE1的siR NA序列可能成为治疗宫颈癌的有效靶点。