SC-04抗生素的生物活性测定

通过SC-04菌发酵液的稳定性分析及其抗菌物质的极性分析,对SC-04抗生素的分离提取方法进行了优化。抑菌谱分析表明,该分离产物抑菌谱较广,对辣椒早疫病菌和辣椒疫霉病菌等大多数病原真菌都有较好的抑制效果,且抑菌活性较强。

牛病毒性腹泻病毒基因2型代表株全基因组序列分析

为了解我国牛病毒性腹泻(BVD)的分子流行病学情况,本研究对分离的3株牛病毒性腹泻病毒基因2型(BVDV-2)代表株全基因组进行序列分析,应用RT-PCR法分段扩增3株BVDV-2(XJ-04、SD-09和QH-09)的全基因组序列,共分为18个片段:A～Q以及5'-UTR和3'-UTR的部分序列。除5'-UTR和3'-UTR部分序列外,A～Q基因片段末端相互重叠。经序列拼接获得3株全基因组序列,全长均为12 284 bp。将测序结果与GenBank登录的瘟病毒科代表毒株序列、自我裂解酶(Npro)、结构蛋白(C、Erns、E1、E2)以及标准株BVDV-1 NADL和BVDV-2 890进行核苷酸以及氨基酸序列同源性分析。结果表明:XJ-04、SD-09和QH-09的全基因组序列同源性高于99.6%,3株BVDV-2分离株与890和NewYork93株亲缘关系最近,属于BVDV-2a亚型。在致细胞病变型的XJ-04、SD-09、QH-09株的NS2/3基因上无外源基因的插入。本研究分离的BVDV-2株为国内首次鉴定国内分离株全基因组序列,为我国BVD的分子流行病调查提供依据。

登革热病毒基因组末端cDNA的克隆及序列分析

采用磁性分离技术从登革热病毒 (D2 0 4株 )感染的C6/36细胞中分离了D2 0 4病毒RNA .以该RNA为模板进行RT PCR ,分别扩增了D2 0 4RNA 5′和 3′端cDNA片段 ,该cDNA片段分别克隆到 pGEM 3Z质粒多聚接头的HincⅡ位点得到含有 5′端 2 84bp及 3′端 52 5bpcDNA的重组质粒 .通过荧光标记引物及双脱氧核苷酸PCR方法测定了上述cDNA插入片段的序列 .同源性比较结果证明D2 0 4株与其他不同株间的同源性较高 ,可达 93%～ 98% ;不同型间的同源性较差 ,仅 80 %左右 ;