RAD51B-RAD51C-RAD51D-XRCC2肿瘤抑制因子的结构和功能

同源重组是生命的一个基本过程,它是保护和重启断裂的复制叉、修复染色体断裂和在减数分裂过程中交换遗传物质所必需的。携带有关键重组基因突变的个体,如携带BRCA2(也称为FANCD1),或RAD51同种异型基因RAD51B、RAD51C(也称为FANCO)、RAD51D、XRCC2(也称为FANCU)和XRCC3,易患乳腺癌、卵巢癌和前列腺癌以及易患癌症综合征Fanconi贫血。BRCA2肿瘤抑制蛋白,即BRCA2的产物,已被充分表征,但RAD51同源物的细胞功能仍不清楚。

大肠癌细胞XRCC2基因对电离辐射损伤的反应

目的构建稳定的XRCC2基因沉默大肠癌细胞系及阐明沉默XRCC2基因表达的大肠癌细胞对电离辐射损伤的反应。方法采用Western blot法检测不同肿瘤细胞系人大肠癌细胞系(T84、HT29、Lovo)、食管癌EC9706细胞、乳腺癌MCF-7细胞和人正常胚肾HEK293细胞中XRCC2蛋白的表达水平。大肠癌T84细胞经0、2、4、8、12 Gy X射线照射后和8 Gy X线照射后0、6、24、48 h,用Western blot法和实时定量PCR法测定XRCC2蛋白和mRNA的表达水平。将XRCC2 shRNA质粒转染T84细胞,用嘌呤霉素进行细胞筛选,采用Western blot法和实时定量PCR法,检测沉默XRCC2蛋白和mRNA表达的效率。将XRCC2 shRNA质粒转染T84细胞,经X线照射后,采用单细胞凝胶电泳测定沉默XRCC2基因表达的T84细胞的DNA损伤修复。结果与人正常胚肾HEK293细胞相比,在不同肿瘤细胞系中XRCC2蛋白均呈不同程度的高表达,其中在大肠癌T84细胞中XRCC2蛋白表达最高。随着X线照射剂量的增加,T84细胞中XRCC2蛋白的表达水平逐渐升高,8 Gy照射后XRCC2蛋白表达水平在48 h内随着时间的延长而逐渐升高;XRCC2 mRNA表达也表现出随剂量增加和时间延长而逐渐升高。与未处理的细胞相比,转染XRCC2 shRNA质粒的细胞中XRCC2蛋白和mRNA表达明显下降,约分别减少了70%和60%。照射后的T84细胞DNA损伤修复中shRNA-XRCC2组TDNA%、TM和OTM均显著高于未处理组和shRNA-SC组,差异有统计学意义(t=15.12、11.36、13.15,P<0.01)。结论成功建立了稳定表达XRCC2基因沉默的大肠癌T84细胞系,XRCC2基因沉默导致辐射诱导的DNA损伤修复能力下降。

XRCC1和XRCC2的基因多态性在乳腺癌治疗中的临床意义

目的:乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一,其发生发展与遗传因素十分密切,寻找与乳腺癌发生、病理、治疗及预后相关的分子标志物对于该病的治疗具有重要的指导意义。XRCC是参与DNA损伤修复的重要基因。XRCC1及XRCC2基因的多态性已被研究与多种肿瘤易感性及生物学行为有关。本实验研究XRCC1和XRCC2多态性与中国女性乳腺癌发病风险、临床病理(腋窝淋巴结转移状态)及预后(复发和转移)的相关性,以探讨其在乳腺癌临床治疗中的潜在价值。方法:采用PCR-RFLP方法检测60例原发性乳腺癌患者新鲜血标本中XRCC1 Arg399Gln、XRCC2 C41657T、XRCC2 G4234C多态,采用SAS 9.1.3统计软件分析基因型与乳腺癌发病风险、临床病理及预后的相关性。结果:XRCC1 Arg399Gln不同基因型与乳腺癌的发病风险不存在统计学相关性(P>0.05);XRCC1 Arg399Gln与乳腺癌的腋窝淋巴结转移情况及乳腺癌的远处转移、局部复发不存在相关性(P>0.05);XRCC2 C41657T、XRCC2 G4234C基因型与乳腺癌的发病风险均无显著相关(P>0.05);XRCC2 C41657T C/T和T/T基因型的多态性可能与乳腺癌的腋窝淋巴结转移状态、乳腺癌的远处转移及局部复发具有相关性(P<0.05)。结论:XRCC1 Arg399Gln G/G、XRCC2 C41657T、XRCC2 G4234C基因型可能均与乳腺癌的发病风险无关。XRCC2 C41657T C/T和T/T基因型的多态性可能与乳腺癌的腋窝淋巴结转移状态、乳腺癌的远处转移及局部复发具有相关性。

X线对肺癌细胞株A549 XRCC2和XRCC3表达水平的影响

目的:研究X线对肺癌细胞X线修复交叉互补基因2((X-ray repair cross complementing gene2,XRCC2))与XRCC3表达水平的影响,探讨DNA同源重组修复机制在肺癌放疗过程中的作用。方法:以噻唑蓝还原法(MTT)检测X线对肺腺癌细胞株A549抑制率的影响,实时荧光定量RT-PCR技术检测X线处理肺癌细胞(人肺腺癌细胞株A549)后XRCC2和XRCC3mR-NA的表达水平。结果:肺癌细胞抑制率多数情况下随X线照射时间的延长及照射剂量的增大,细胞增殖抑制率增加,呈照射时间依赖性(P<0.05)和剂量依赖性(P<0.05),除了16Gy组与32Gy组比较无统计学意义(P=0.211)。X线照射后肺癌细胞XRCC2与XRCC3 mRNA的表达水平均先增高后降低,在照射后48h表达水平达高峰(P<0.05),且随着照射剂量的增大,XRCC2与XR-CC3 mRNA的表达水平也随之增加(P<0.05)。结论:X线照射可引起肺癌细胞XRCC2与XRCC3 mRNA表达水平的明显改变,表明DNA同源重组修复机制可能在肺癌放疗耐受中起了重要的作用。

XRCC2基因沉默联合辐射对结肠癌细胞裸鼠移植瘤生长的影响

目的探讨sh RNA介导的XRCC2基因沉默联合辐射对结肠癌细胞移植裸鼠肿瘤的疗效。方法将结肠癌T84细胞接种于BALB/c裸鼠建立肿瘤移植模型,分为control组、sh RNA-SC组和sh RNA-XRCC2组。裸鼠经X射线局部照射,检测放射治疗后肿瘤的体积和质量变化,并对肿瘤组织进行病理分析。结果 sh RNA-XRCC2组肿瘤生长速度较缓慢,从放射治疗的第12天开始至放射治疗继续到第28天,sh RNA-XRCC2组瘤体明显较control组减小,差异有统计学意义(P<0.01)。sh RNA-XRCC2组肿瘤质量明显轻于control组,二者比较差异有统计学意义(t=18.843,P<0.01)。sh RNA-XRCC2组裸鼠移植瘤的抑瘤率为56.25%,远远高于sh RNA-SC组(4.69%)。移植瘤组织的病理检查结果表明,sh RNA-XRCC2组肿瘤组织核异型不明显,少见核分裂相,多见坏死区。结论 XRCC2基因沉默联合辐射对裸鼠结肠癌移植瘤具有显著的抑瘤效果。

XRCC2基因多态性与鼻咽癌患者放射性口腔粘膜炎反应程度的相关性研究

目的研究XRCC2基因多态性与放射性口腔粘膜炎反应程度的关系。方法采用PCR—RFLP方法检测126例接受同期放化疗鼻咽癌患者外周血标本XRCC2基因多态性，记录放疗期间的口腔粘膜炎发生情况，分析XRCC2基因多态性与放射性口腔粘膜炎反应程度的相关性。结果在126例接受同期放化疗患者中，放射性口腔粘膜炎发生率为100％，1、2级71例，3、4级55例。与XRCC2C41657T位点C／T基因型相比，C／C基因型发生3—4级放射性口腔炎比例较低，风险比为1．48（0．682～3．211）；与XRCC2G4234C位点G／G基因型相比，G／C基因型发生3～4级放射性口腔炎比例略低，风险比为0．862（0．386～1．923），但两者不具有统计学意义（P〉0．05）。XRCC2CA1657T，G4234C位点的等位基因频率在1、2级和3、4级口腔粘膜炎中的分布无统计学差异（P〉0．05）。结论XRCC2C41657T、G4234C基因型、等位基因多态性可能与放射性口腔粘膜炎反应程度无相关性。

XRCC2基因沉默对结肠癌细胞放射敏感性的影响

目的探讨XRCC2基因沉默对人结肠癌细胞放射敏感性的影响。方法实验分组为control组(结肠癌T84细胞)、shRNA-SC组(T84/shRNA-SC细胞)和shRNA-XRCC2组(T84/XRCC2-shRNA细胞)。经X-射线照射后,采用碱性"彗星"电泳法测定结肠癌细胞的DNA损伤修复,采用流式细胞术检测结肠癌细胞的细胞周期和细胞凋亡率。结果照射前shRNA-XRCC2组细胞显示出拖尾彗星;照射后shRNA-XRCC2组细胞尾长、尾矩或Olive尾矩均明显高于control组细胞,差异有统计学意义(t=6.95、5.34、9.43,P<0.01)。照射前shRNA-XRCC2组细胞与control组细胞相比,停留在G2/M期较多(14.36%±1.32%),差异有统计学意义(t=10.46,P<0.01);照射后shRNA-XRCC2组滞留在G2/M期的细胞显著增加(38.51%±4.15%),与control组细胞相比差异有统计学意义(t=3.92,P<0.05)。照射前shRNA-XRCC2组细胞凋亡率(17.40%±4.81%)明显高于control组细胞(t=8.59,P<0.01);照射后shRNA-XRCC2细胞的凋亡率显著增加(33.16%±2.69%),与control组细胞相比差异有统计学意义(t=15.31,P<0.01)。结论 XRCC2基因沉寂提高了结肠癌细胞的放射敏感性,XRCC2有望在结肠癌的临床放射治疗敏感性中作为一重要的靶向基因。

XRCC2基因多态性与中国北方人群肺癌易感性的相关性研究

目的研究DNA双链断裂修复基因XRCC2多态性与中国北方人群肺癌易感性的关系。方法采用病例对照研究,收集河北石家庄及其周边县市区的原发性肺癌患者300例为肺癌组,同时选择与患者同一地区的健康人300例为对照组,应用PCR-FLP方法分析了肺癌组和对照组的XRCC2基因(C41657T)位点的多态性,比较不同基因型与肺癌易感性的关系,以及基因多态性与吸烟之间对肺癌易感性的交互作用。结果XRCC2(C41657T)C/T等位基因频率肺癌组为84.67%、15.33%,对照组为87.50%、2.50%,两组间分布无显著性差异(P=0.16);C/C、C/T、T/T基因型频率肺癌组分别为72.7%、24.0%、3.3%,对照组分别为6.3%、22.0%、1.7%,C/C及C/T基因型频率两组间比较无显著性差异(χ2=0.48,P=0.48)。非吸烟者C/T基因型频率肺癌组高于对照组(χ2=6.67,P=0.01);相对于C/C基因型,C/T基因型的个体患肺癌的(OR=2.11,95%CI=1.19～3.73);吸烟者C/C及/T基因型频率肺癌组与对照组无显著性差异(OR=0.69,95%CI=0.41～1.16,P=0.16)。结论XRCC2(C41657T)基因多态性总体上对肺癌易感性无明显影响,但其C/T基因型可增加非吸烟中国北方人群患肺癌的危险性。

XRCC2在结直肠癌中的表达及其临床意义

目的通过对300例结直肠癌病例的研究,分析结直肠癌患者中XRCC2的表达以及临床意义。方法应用免疫组化和qRT-PCR的方法,检测癌组织、癌旁组织中的XRCC2表达水平,探讨其与病理及预后的关系。结果癌组织XRCC2水平较癌旁组织更高(P<0.05);免疫组化提示癌组织XRCC2阳性者占比69.67%;qRT-PCR检测提示XRCC2在癌组织中的表达水平(1.7±0.3)显著高于癌旁组织(0.5±0.1)(P=0.0001)。XRCC2表达与Duke’s分期、TNM分期、T分期、癌灶大小、M分期、肝脏转移、淋巴结转移相关(P<0.05)。XRCC2水平较低患者的无复发生存期、总生存期更长(P<0.05)。回顾性Cox分析提示结直肠癌预后因素与Duke’s分期、XRCC2、淋巴结转移、年龄有关(P<0.05)。结论在结直肠癌患者中,XRCC2表达水平偏高,建议临床将其作为预测、判断结直肠癌患者病情进展、预后的主要标志。

XRCC2基因R188H位点多态性与大肠癌易感性的Meta分析

目的 通过系统性回顾性分析评价X射线交错互补修复基因2（XRCC2）基因多态性与大肠癌易感性的相关性,以期为大肠癌的临床诊断提供相应参考。方法 计算机检索知网、万方、PubMed,Embase,WebofScience和CNKI数据库,2000年1月-2015年12月XRCC2基因R188H多态性与大肠癌的病例对照研究,应用RevMan5.3及Stata软件进行定量分析。结果 共纳入5篇病例-对照研究：大肠癌病例组2 106例,正常对照组2 607例。Meta分析结果显示,XRCC2 R188H基因多态性与大肠癌发病风险的差异无统计学意义。GA vs GG基因型[OR=1.08,95%CI（0.92-1.27）,P=0.36]。AA vs GG 基因型[OR=1.26,95% CI（0.81-1.97）,P=0.31]。GA＋AA vs GG基因型[OR=1.04,95% CI（0.87-1,23）,P=0.69]。AAvs GG＋GA基因型[OR=1.26,95%CI（0.81-1.96）,P=0.31]。结论 XRCC2 R188H基因多态性与大肠癌易感性无关,而进一步的验证则仍需要更大样本的多中心随机化对照试验进行研究。

结肠镜取组织中PRL-3、XRCC2检测在结直肠癌中的临床意义

目的:分析结肠镜取组织X射线交叉互补修复基因2(X-ray repair cross-complementing gene,XRCC2)和促肝细胞再生磷酸酶-3(Phosphatase of Regenerating Liver-3,PRL-3)对结直肠癌患者的意义。方法:选择本院自2019年3月-2022年3月期间接收的78例结直肠癌患者作为研究对象,采用免疫组织化学法对其结直肠癌组织和癌旁组织进行检测分析,对比在不同组织中PRL-3、XRCC2表达水平;比较结直肠癌患者不同分期的结直肠癌组织PRL-3、XRCC2表达水平;对比PRL-3、XRCC2表达与结直肠癌病理特征的关系:包括年龄、肿瘤大小、肝脏转移及淋巴结转移。结果:结直肠癌组织PRL-3阳性率(69.23%)高于癌旁组织阳性率、XRCC2阳性率(61.54%)也高于癌旁组织阳性率(P<0.05);结直肠癌组织III-IV期PRL-3、XRCC2阳性率均高于0-II期(P<0.05);PRL-3、XRCC2表达与年龄无显著关系(P>0.05);PRL-3、XRCC2表达与肿瘤大小、淋巴结转移及肝脏转移有关(P<0.05)。结论:PRL-3的表达与结直肠癌细胞迁移及增殖有密切关联,而XRCC2的异常表达影响了癌细胞病灶的形成,两者均可作为结直肠癌诊断、治疗及预后的观察指标。

XRCC2在结直肠癌中的表达及其临床意义

[目的]探讨XRCC2在结直肠癌组织中的表达及其临床意义。[方法]收集101例结直肠癌患者的标本及临床病理资料,通过q RT-PCR及免疫组化染色检测XRCC2在结直肠癌及癌旁组织中的表达,分析其与临床病理及预后之间的关系。[结果]q RT-PCR结果表明癌组织中XRCC2 m RNA表达水平高于相对应的癌旁组织(P<0.001);免疫组化结果显示67.3%(68/101)的结直肠癌组织XRCC2蛋白表达阳性。XRCC2蛋白表达与肿瘤大小、肿瘤T分期、M分期、TNM分期、Duke’s分期、淋巴结转移和肝脏转移有关(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示,高表达XRCC2的结直肠癌患者预后差,与XRCC2低表达的患者相比,XRCC2高表达的患者中位生存期及无复发中位生存时间明显缩短(P<0.05)。Cox回归分析显示XRCC2表达是影响结直肠癌患者预后的独立因素。[结论]XRCC2在结直肠癌组织中呈高表达,其可能成为预测结直肠癌发生发展及预后的生物标志物。

中国人XRCC2基因多态性与食管癌、贲门癌遗传易感性的关联研究

目的探讨X-射线交错互补修复基因2（X-ray repair cross-complementing gene 2，XRCC2）41657C／T、4234G／C单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism,SNP）与河北省磁县和涉县人群食管鳞状细胞癌（esophageal squflnious cell carcinoma，ESCC）和贲门腺癌（gastric cardiac adenocarcinoma，GCA）发病易感性的关系。方法采用聚合酶链反应．限制性片段长度多态性方法检测了330例ESCC、254例GCA患者和629名健康对照个体XRC6241657C／T、4234G／CSNP的基因型。结果XRC6241657C／TSNP中，ESCC组的CC、CT、TT3种基因型频率（67．8％、26．4％和5．8％）与对照组（68．8％、28．8％和2．4％）相比差异有统计学意义（X^2=7．43，P=0．02），与CC基因型相比，携带TT基因型能显著增加ESCC的发病风险（OR=2．12，95％CI：1．03～4．35）；GCA组的CC、CT、TT3种基因型频率（59．8％、35．8％和4．3％）和等位基因分布与对照组相比差异均有统计学意义（X^2=7．46，7．23；P=0．02，0．01），与CC基因型相比，携带CT基因型的个体GCA的发病风险显著增加（OR=1．38，95％CI：1．01～1．89）。XRC624234G／CSNP中，ESCC、GCA患者的基因型频率及等位基因分布与对照组相比差异无统计学意义（P值均〉0．05）。与GG基因型相比，CG基因型及CC基因型均未增加ESCC和GCA的发病风险。两多态性位点联合分析显示，GCA组与对照组的单倍型分布差异有统计学意义（X^2=13．28，P〈0．01）。与41657C／4234G单倍型相比，41657C／4234C和41657T／4234G单倍型均能显著增加GCA的发病风险（OR值分别为1．44和1．55，95％CI分别为1．06～1．95和1．18～2．02）。结论XRCC2 41657C／T多态可能成为预测高发区人群食管癌和贲门癌发病风险的独立因素；XRCC2 4234G／C多态可能与食管癌、贲门癌的发病风险无关；但41657C／4234C和41657T／4234G单倍型可能增加GCA的发病风险。

shRNA介导的XRCC2基因沉默有效地提高结肠癌细胞对X射线的放射敏感性

结肠癌是威胁人类生命健康的常见消化道恶性肿瘤。放射治疗是结肠癌的主要治疗手段之一，但放射治疗结肠癌的辐射耐受现象严重影响结肠癌患者的疗效。

肿瘤中X线修复交叉互补基因2及其基因单核苷酸多态性的研究进展

当前靶向治疗和个体化治疗逐渐成为肿瘤治疗的重要内容,利用肿瘤发生过程中的DNA修复基因缺陷寻找特异性治疗靶点,是目前肿瘤药物研发的热点.目前已知X线修复交叉互补基因2（X-ray repair cross-complementing gene 2, XRCC2）蛋白位于DNA同源重组修复（homologous recombination repair, HRR）通路的最下游,参与搜寻同源部位与DNA的配对过程,与肿瘤的发生发展有着紧密联系,本文拟对XRCC2及其基因单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism, SNP）在肿瘤中的研究进展作一简要综述.

X-射线交错互补修复基因2 C41657T、G4234C多态与卵巢上皮性癌发病风险的关联研究

X-射线交错互补修复基因2（X—ray repair crosscomplementing gene 2，XRCC2）在细胞分裂过程中通过参与同源重组修复DNA链的断裂和交联损伤，具有维持遗传物质稳定性的重要作用。XRCC2定位于人体染色体的7q36．1。XRCC2上存在多个单核苷酸多态性（SNP）位点，