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XRCC6调节RYBP表达的分子机制与功能
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作者 刘薇佳 李唐嫒 +2 位作者 陈修远 夏婉娉 陈等 《医学研究杂志》 2024年第12期31-36,共6页
目的研究X-射线修复交叉互补蛋白6(X-ray repair cross complementing 6,XRCC6)结合和下调RING1和YY1结合蛋白(ring1 and YY1 binding protein,RYBP)表达的分子机制与功能。方法采用蛋白质免疫共沉淀和免疫荧光方法分析XRCC6与RYBP之间... 目的研究X-射线修复交叉互补蛋白6(X-ray repair cross complementing 6,XRCC6)结合和下调RING1和YY1结合蛋白(ring1 and YY1 binding protein,RYBP)表达的分子机制与功能。方法采用蛋白质免疫共沉淀和免疫荧光方法分析XRCC6与RYBP之间的相互作用;采用Western blot法检测XRCC6对RYBP表达水平的影响;采用Western blot法和蛋白质免疫共沉淀法检验XRCC6对RYBP蛋白稳定性的调节作用;采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测XRCC6是否通过RYBP调节基因表达。结果内源性RYBP与XRCC6之间存在相互作用;XRCC6负性调节RYBP蛋白水平;过表达XRCC6促进RYBP的多聚泛素化和蛋白酶体降解,显著缩短其半衰期;XRCC6负调节H2AK119Ub1,通过调节RYBP抑制下游基因的表达。结论XRCC6结合并通过蛋白酶体途径下调RYBP表达,进而调节RYBP下游基因的表达。 展开更多
关键词 xrcc6 RYBP 蛋白质相互作用 蛋白酶体途径 基因表达调节
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抑制Ligase4或Xrcc6活性增强斑马鱼原始生殖细胞中DNA同源重组的效率(英文) 被引量:4
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作者 魏志强 熊凤 +3 位作者 何牡丹 王厚鹏 朱作言 孙永华 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期339-348,共10页
利用斑马鱼作为体内模型,研究旨在提高斑马鱼原始生殖细胞(Primordial germ cells,PGCs)中同源重组(Homologous recombination,HR)的效率。首先,将UAS:m RFP-nos1载体显微注射到Tg(kop:Kal TA4)转基因胚胎中标记转基因PGCs,结果表明筛选... 利用斑马鱼作为体内模型,研究旨在提高斑马鱼原始生殖细胞(Primordial germ cells,PGCs)中同源重组(Homologous recombination,HR)的效率。首先,将UAS:m RFP-nos1载体显微注射到Tg(kop:Kal TA4)转基因胚胎中标记转基因PGCs,结果表明筛选PGCs特异表达m RFP的胚胎能够相对提高转基因的生殖系传递效率。随后建立了PGCs中HR效率的评估体系,并且证明抑制DNA ligase IV(Lig4)和Xrcc6(曾用名Ku70)的活性不但在全胚胎水平,而且在PGCs水平都能够显著提高HR的效率。研究表明Tg(kop:Kal TA4)转基因品系是开展HR介导的基因打靶的一个有效平台。 展开更多
关键词 斑马鱼 原始生殖细胞 基因打靶 同源重组 LIGASE 4 xrcc6
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利用CRISPR/Cas系统构建在XRCC6内源基因插入Flag标签序列的HeLa细胞系 被引量:2
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作者 李瑞花 付汉江 +3 位作者 沈远 钟一然 朱捷 郑晓飞 《生物技术通讯》 CAS 2016年第1期7-11,共5页
目的:利用CRISPR/Cas系统在XRCC6基因5′端插入Flag标签序列,筛选XRCC6-Flag稳定表达的宫颈癌细胞(He La)株。方法:根据Gen Bank中XRCC6基因序列,设计XRCC6基因敲入的g RNA序列,构建入p Cas-Guide载体中,获得p Cas-XRCC6载体;设计XRCC6... 目的:利用CRISPR/Cas系统在XRCC6基因5′端插入Flag标签序列,筛选XRCC6-Flag稳定表达的宫颈癌细胞(He La)株。方法:根据Gen Bank中XRCC6基因序列,设计XRCC6基因敲入的g RNA序列,构建入p Cas-Guide载体中,获得p Cas-XRCC6载体;设计XRCC6基因的同源臂序列,利用搭桥PCR方法将同源臂和Flag标签序列作为模板进行扩增,得到供体DNA片段,并将其克隆到p Back Zero-T表达载体上,获得p XRCC6-Donor载体;将上述2个载体共转染He La细胞,采用PCR、Western印迹等方法检测和筛选Flag标签序列插入XRCC6基因5′端的细胞株。结果:构建了p Cas-XRCC6和p XRCC6-Donor载体,筛选获得3株XRCC6-Flag稳定表达细胞株。结论:构建了XRCC6-Flag稳定细胞株,为研究XRCC6基因及其蛋白产物的生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas系统 xrcc6基因 Flag标签
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MiR-1207-3p靶向XRCC6对结直肠癌细胞HT-29凋亡的影响研究 被引量:5
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作者 朱利芹 冯莹 +1 位作者 曹惠芳 杜楠 《贵州医药》 CAS 2021年第1期10-12,共3页
目的探究MiR-1207-3p靶向X-射线修复交叉补充因子6(XRCC6)对结直肠癌细胞HT-29凋亡的影响。方法对miR-1207-3p与XRCC6进行TargetScan分析其相关性,将XRCC6的3′端非编码区克隆进pmirGLO载体中,对miR-1207-3p进行双荧光素酶报告系统检测... 目的探究MiR-1207-3p靶向X-射线修复交叉补充因子6(XRCC6)对结直肠癌细胞HT-29凋亡的影响。方法对miR-1207-3p与XRCC6进行TargetScan分析其相关性,将XRCC6的3′端非编码区克隆进pmirGLO载体中,对miR-1207-3p进行双荧光素酶报告系统检测确定XRCC6基因是否被靶向调控;通过Western Blot检测XRCC6蛋白表达量和结直肠癌细胞HT-29凋亡标志蛋白的表达量;对细胞凋亡水平进行测定。结果通过TargetScan生物软件进行分析,miR-1207-3p处于16~22的位置与XRCC6的3′端非编码区有1处高度匹配;miR-1207-3p靶向结合XRCC6的3′端非编码区;过表达miR-1207-3p时,细胞凋亡标志蛋白Cleaved-Casp3、Cleaved-Casp9的表达量显著上升,XRCC6的表达量下降,细胞凋亡水平上升(t=34.180,P<0.001)。结论直肠癌细胞HT-29的凋亡与MiR-1207-3p有关,可通过提升MiR-1207-3p表达量,进而抑制XRCC6表达量,促进HT-29的凋亡。 展开更多
关键词 结直肠癌 MiR-1207-3p HT-29 xrcc6
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Predictive role of XRCC5/XRCC6 genotypes in digestive system cancers 被引量:1
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作者 Mei-Due Yang Chia-Wen Tsai +3 位作者 Wen-Shin Chang Yung-An Tsou Cheng-Nan Wu Da-Tian Bau 《World Journal of Gastrointestinal Oncology》 SCIE CAS 2011年第12期175-181,共7页
Cancers are a worldwide concern;oral,esophageal and gastrointestinal cancers represent important causes of cancer-related mortality and contribute to a signif icant burden of human health.The DNA repair systems are th... Cancers are a worldwide concern;oral,esophageal and gastrointestinal cancers represent important causes of cancer-related mortality and contribute to a signif icant burden of human health.The DNA repair systems are the genome caretakers,playing a critical role in the initiation and progression of cancers.However,the association between the genomic variations of DNA repair genes and cancer susceptibility is not well understood.This review focuses on the polymorphic genotypes of the non-homologous end-joining DNA repair system,highlighting the role of two genes of this pathway,XRCC5 and XRCC6,in the susceptibility to digestive system cancers and discussing their potential contributions to personalized medicine. 展开更多
关键词 XRCC5 xrcc6 Polymorphism Oral CANCER ESOPHAGEAL CANCER GASTROINTESTINAL CANCER COLORECTAL CANCER
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基于ATM/CHK2/p53信号通路探究下调XRCC6对结直肠癌细胞的影响
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作者 刘建通 方育 +2 位作者 高洪波 宋蒙蒙 林超 《肿瘤代谢与营养电子杂志》 2021年第6期615-619,共5页
目的探究下调XRCC6对人结直肠癌细胞凋亡、侵袭的影响及其与ATM/CHK1/p53信号通路的相关性。方法将人结直肠癌细胞SW620分为对照组、si⁃NC组和si⁃XRCC6组。MTT法检测各组细胞活力;流式细胞法检测各组细胞凋亡水平;细胞划痕实验检测各组... 目的探究下调XRCC6对人结直肠癌细胞凋亡、侵袭的影响及其与ATM/CHK1/p53信号通路的相关性。方法将人结直肠癌细胞SW620分为对照组、si⁃NC组和si⁃XRCC6组。MTT法检测各组细胞活力;流式细胞法检测各组细胞凋亡水平;细胞划痕实验检测各组细胞迁移能力;Transwell检测各组细胞侵袭能力;定量聚合酶链反应(qPCR)检测ATM、CHK2、p53的转录水平;免疫印迹(Westernblot)检测ATM、CHK2、p53的蛋白表达和磷酸化(p⁃ATM、p⁃CHK2、p⁃p53)水平。结果MTT实验结果表明,与对照组和si⁃NC组相比,si⁃XRCC6组细胞活力显著降低(P<0.05);流式细胞实验结果表明,与对照组和si⁃NC组相比,si⁃XRCC6组细胞存活比例降低(P<0.01),早期凋亡比例增加(P<0.01),晚期凋亡细胞比例显著增加(P<0.01),si⁃NC组和si⁃XRCC6组差异无统计学意义(P>0.05);细胞划痕及Transwell实验结果表明,与对照组和si⁃NC组相比,si⁃XRCC6组细胞迁移能力降低(P<0.01),侵袭能力降低(P<0.01)。qPCR及Westernblot结果表明,与对照组和si⁃NC组相比,si⁃XRCC6组细胞ATM、CHK2、p53的转录和蛋白表达水平有上升的趋势,其磷酸化蛋白p⁃ATM、p⁃CHK2、p⁃p53表达水平也具有上升的趋势。结论下调XRCC6可以抑制人结直肠癌细胞活性,诱导细胞早期凋亡,其机制可能与ATM、CHK2、p53信号通路的调控及其磷酸化水平的调控相关。 展开更多
关键词 xrcc6 人结直肠癌细胞 凋亡 侵袭 磷酸化
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Polymorphisms in XRCC5,XRCC6,XRCC7 genes are involved inDNA double-strand breaks(DSBs) repair associated with the risk ofacute myeloid leukemia(AML) in Chinese population
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作者 Guoqiang Wang Shuyu Wang +6 位作者 Qun Shen Shiwei Yin Chunping Li Aiping Li Jianyong Li Jianwei Zhou Qizhan Liu 《Journal of Nanjing Medical University》 2009年第2期93-99,共7页
Objective:To investigate the association between the X-ray repair cross complementing(XRCC) group 5, XRCC6 and XRCC7 polymorphisms and risk of acute myeloid leukemia(AML). Methods:This hospital-based case-contro... Objective:To investigate the association between the X-ray repair cross complementing(XRCC) group 5, XRCC6 and XRCC7 polymorphisms and risk of acute myeloid leukemia(AML). Methods:This hospital-based case-control study included 120 AML patients and 210 cancer-free controls in a Chinese population. Three polymorphisms of XRCC5, XRCC6 and XRCC7 were genotyped using the polymerase chain reaction(PCR) or polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism(PCR-RFLP) method. Results: We found that there was a significant decrease in risk of AML associated with the XRCC6 -61 CG/GG genotype(adjusted odd ratio (OR) = 0.55; 95% confident interval(CI) = 0.34-0.89) compared with the -61CC genotype. For the novel tandem repeat polymorphism (VNTR) in the XRCC5 promoter, we found when the XRCC5 six genotypes were dichotomized(i.e., 2R/2R, 2R/1R versus 2R/0R, 1R/1R, 1R/0R and 0R/0R), the latter group was associated with increased risk of AML(adjusted OR = 1.67; 95% CI = 1.00-2.79) compared to 2R/ 2R+2R/1R genotype. However, the XRCC7 6721G〉T polymorphism had no effect on risk of AML. Conclusion:The XRCC6 -61C 〉 G and XRCC5 2R/1R/0R polymorphisms, but not XRCC7 6721G 〉 T polymorphism, could play an important role in the development of AML. Larger scale studies with more detailed data on environment exposure are needed to verify these findings. 展开更多
关键词 XRCC5 xrcc6 XRCC7 single nucleotide polymorphism tandem repeat polymorphism acute myeloid leukemia
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MiR-1207-3p靶向XRCC6对结直肠癌细胞HT-29凋亡的影响 被引量:4
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作者 宋韬 周颖 +1 位作者 吴煌福 何贵省 《转化医学杂志》 2020年第3期142-146,共5页
目的探讨miR-1207-3p靶向X-射线修复交叉补充因子6(X-ray repair cross complementing 6,XRCC6)对结直肠癌细胞HT-29凋亡的影响。方法运用TargetScan在线分析miR-1207-3p与XRCC6的相关性;将XRCC6的3′端非编码区克隆进pmirGLO载体中,利... 目的探讨miR-1207-3p靶向X-射线修复交叉补充因子6(X-ray repair cross complementing 6,XRCC6)对结直肠癌细胞HT-29凋亡的影响。方法运用TargetScan在线分析miR-1207-3p与XRCC6的相关性;将XRCC6的3′端非编码区克隆进pmirGLO载体中,利用双荧光素酶报告系统检测miR-1207-3p是否靶向调控XRCC6基因;用LipoFiter3转染试剂转染miR-1207-3p mimics或miR-1207-3p inhibitor进结直肠癌细胞HT-29后,通过Western Blot检测XRCC6蛋白表达量和结直肠癌细胞HT-29凋亡标志蛋白的表达量;采用Annexin V染色法测定细胞凋亡水平。结果通过TargetScan分析,miR-1207-3p仅在一个区域与XRCC6具有较高匹配度;通过双荧光素酶报告系统检测发现,miR-1207-3p靶向结合XRCC6的3′端非编码区;过表达miR-1207-3p时,XRCC6的表达量下降,细胞凋亡标志蛋白Cleaved-Casp3、Cleaved-Casp9的表达量显著上升,细胞凋亡水平上升(t=34.18,P<0.0001);敲低miR-1207-3p时,XRCC6的表达量上升,细胞凋亡标志蛋白Cleaved-Casp3、Cleaved-Casp9的表达量显著下降,细胞凋亡水平下降(t=3.375,P=0.0279)。结论MiR-1207-3p可通过抑制XRCC6表达量来促进结直肠癌细胞HT-29的凋亡。 展开更多
关键词 MiR-1207-3p X-射线修复交叉补充因子6 结直肠癌 HT-29 凋亡
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Ku70高表达促进人卵巢癌细胞系的增值并与卵巢癌患者不良预后相关
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作者 王娟 张晓燕 +4 位作者 朱爱华 于宏波 范新丹 汤春辉 姚秀芳 《基础医学与临床》 2022年第9期1391-1399,共9页
目的探究X射线修复交叉互补蛋白6(Ku70/XRCC6)在上皮性卵巢癌(EOC)组织中的表达及对卵巢癌细胞的增殖、凋亡及迁移的影响。方法Western blot检测9例卵巢癌患者的不同级别的癌组织及3例健康人正常卵巢组织中的Ku70的表达;免疫组化检测11... 目的探究X射线修复交叉互补蛋白6(Ku70/XRCC6)在上皮性卵巢癌(EOC)组织中的表达及对卵巢癌细胞的增殖、凋亡及迁移的影响。方法Western blot检测9例卵巢癌患者的不同级别的癌组织及3例健康人正常卵巢组织中的Ku70的表达;免疫组化检测119例卵巢癌组织中Ku70的表达;分析其表达与临床病理参数的关系;Kaplan-Meier生存曲线分析其与患者5年生存率之间的关系;集落形成实验及CCK-8法分析卵巢癌细胞系HO8910中Ku70的表达对卵巢癌细胞增殖的影响;流式细胞测量术分析Ku70的表达对卵巢癌细胞凋亡的作用;划痕实验及Transwell小室法分析Ku70的表达对卵巢癌细胞迁移的影响。结果Ku70在卵巢癌组织中的表达高于正常卵巢组织;Ku70的表达与临床病理特征之间密切相关(P<0.05);Ku70表达高的卵巢癌患者较低表达患者生存率低(P<0.05);抑制Ku70的表达能降低卵巢癌细胞的增殖及迁移,增加卵巢癌细胞的凋亡(P<0.05)。结论Ku70的异常表达与卵巢癌的发生密切相关,有可能成为卵巢癌治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 Ku70/xrcc6 上皮性卵巢癌 增殖 凋亡 迁移
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NHEJ信号通路关键基因mRNA表达与宫颈鳞癌同步放化疗敏感性的关系 被引量:1
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作者 许义松 周文静 +2 位作者 祁晓丽 席佩 戴鹏高 《西北大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期781-786,共6页
探讨NHEJ信号通路关键基因XRCC4,XRCC5,XRCC6,LIG4,PRKDC及DCLRE1C的mRNA表达水平与宫颈鳞癌同步放化疗敏感性的关系。以42例宫颈鳞癌活检样本为研究对象,采用荧光定量PCR(qRT-PCR)技术分析上述6个基因的mRNA表达水平,并将检测结果与患... 探讨NHEJ信号通路关键基因XRCC4,XRCC5,XRCC6,LIG4,PRKDC及DCLRE1C的mRNA表达水平与宫颈鳞癌同步放化疗敏感性的关系。以42例宫颈鳞癌活检样本为研究对象,采用荧光定量PCR(qRT-PCR)技术分析上述6个基因的mRNA表达水平,并将检测结果与患者的同步放化疗敏感性进行关联分析。XRCC6 mRNA高表达患者应答率为47.6%,低表达患者应答率为90.5%(P=0.003);其他5个关键基因的mRNA表达水平与患者的应答率无显著性关联;多因素Logistic回归分析显示XRCC6 mRNA表达水平与患者同步放化疗敏感性有显著性关联(P=0.008)。XRCC6 mRNA表达水平与宫颈鳞癌患者同步放化疗敏感性密切相关,可作为评估其临床疗效的分子标志物。 展开更多
关键词 NHEJ 宫颈鳞癌 mRNA xrcc6 同步放化疗敏感性
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NHEJ通路相关基因在电离辐射所致脑损伤中的表达情况研究 被引量:5
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作者 李梅 刘梦雅 +4 位作者 王新钢 黄立群 孙鸽 尹晶晶 秦秀军 《中国辐射卫生》 2019年第3期223-227,共5页
目的通过对大鼠头部进行不同剂量的照射,研究NHEJ通路相关基因在电离辐射所致脑损伤中的表达情况。方法利用医用电子加速器装置对SD大鼠分别进行10 Gy、20 Gy、30 Gy的照射,并于照后30天提取动物海马组织中的总RNA;30 Gy照射组在照后6 h... 目的通过对大鼠头部进行不同剂量的照射,研究NHEJ通路相关基因在电离辐射所致脑损伤中的表达情况。方法利用医用电子加速器装置对SD大鼠分别进行10 Gy、20 Gy、30 Gy的照射,并于照后30天提取动物海马组织中的总RNA;30 Gy照射组在照后6 h、24 h、72 h、7天、30天五个不同时间点提取动物海马组织中的总RNA。使用实时荧光定量PCR技术对NHEJ通路中的XRCC4、XRCC5和XRCC6基因的表达情况进行研究。结果经照射大鼠海马组织中与DNA修复相关的基因XRCC4、XRCC5和XRCC6表达均有所上调;20 Gy组XRCC4、XRCC5和XRCC6基因的表达量较10 Gy和30 Gy组高;XRCC4基因在照后7天表达量达到最高,而XRCC5和XRCC6基因在照后6 h达到最高,XRCC4、XRCC5和XRCC6基因表达量均在照后30天达到最低。结论通过本项目研究发现NHEJ通路中与DNA损伤修复有关基因XRCC4、XRCC5、XRCC6在电离辐射所致脑损伤照射不同剂量点及照后不同时间点均上调表达,说明在10、20、30 Gy照射和电离辐射后6 h、24 h、72 h、7天、30天五个不同时间点机体均通过NHEJ通路进行DNA双链修复,且在照后6h和第7天修复能力最强。 展开更多
关键词 电离辐射 XRCC4基因 XRCC5基因 xrcc6基因 DNA双链断裂修复 实时荧光定量PCR
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