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从健康人外周血中建立异种抗原特异性的T细胞系初探 被引量:3
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作者 谢晋 李宁丽 +2 位作者 张冬青 沈佰华 周光炎 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期315-317,共3页
目的 :为了探讨异种器官移植中T细胞参与的免疫排斥机理 ,从健康人外周血中试行建立识别猪淋巴细胞抗原特异性的T细胞系方法研究。方法 :通过照光致弱的猪外周血单个核细胞反复刺激人的T淋巴细胞 ,3H TdR掺入法筛选特异性增殖的T细胞。... 目的 :为了探讨异种器官移植中T细胞参与的免疫排斥机理 ,从健康人外周血中试行建立识别猪淋巴细胞抗原特异性的T细胞系方法研究。方法 :通过照光致弱的猪外周血单个核细胞反复刺激人的T淋巴细胞 ,3H TdR掺入法筛选特异性增殖的T细胞。结果 :获得 2株为TCRαβ+CD3+CD8+细胞 ,另 1株为TCRαβ+CD3+CD4+细胞。结论 :健康人外周血中有识别异种抗原特异性的T细胞系 。 展开更多
关键词 异种细胞抗原 异种移植 T细胞系
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CTLA4在T调节细胞诱导异种抗原免疫耐受中的机制研究 被引量:4
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作者 马小倩 王佳 王维 《激光生物学报》 CAS 2016年第4期342-349,共8页
目的:通过靶向CTLA4 siRNA探讨CTLA4在T调节细胞诱导异种抗原免疫耐受中是否发挥功能及其作用机制。方法:体外扩增培养利用磁珠分选出的T调节细胞,AO/PI染色计算活率并通过细胞计数作出生长曲线,流式细胞仪检测扩增后细胞表型;采用Alex... 目的:通过靶向CTLA4 siRNA探讨CTLA4在T调节细胞诱导异种抗原免疫耐受中是否发挥功能及其作用机制。方法:体外扩增培养利用磁珠分选出的T调节细胞,AO/PI染色计算活率并通过细胞计数作出生长曲线,流式细胞仪检测扩增后细胞表型;采用Alex488染料标记siRNA,通过流式细胞仪检测siRNA的转染效率;实时定量PCR检测靶向CTLA4 siRNA的沉默效率;流式细胞术检测CTLA4在蛋白水平的变化;混合淋巴实验检测CTLA4表达下调后,T调节细胞的功能变化。结果:经过4周体外扩增,T调节细胞能够增长约1 200倍,并具有高活率和高纯度;siRNA的转染效率为61.8%±4.5%;Realtime PCR和流式细胞术检测CTLA4在mRNA水平和蛋白水平均有不同程度下降,其结果与对照组相比差异显著(P<0.05);混合淋巴实验结果显示T效应细胞在受到异种抗原刺激时会发生增殖,Treg细胞能够抑制这种增殖,但是CTLA4表达下调后明显减弱了T调节细胞的抑制能力。进一步,在DC细胞参与的混合淋巴实验中发现Treg能够通过DC抑制T效应细胞对异种抗原的应答,而si CTLA4-Treg不能通过DC抑制T效应细胞增殖。结论:CTLA4在Treg介导的异种免疫应答中发挥着重要作用,这种作用方式可能是通过直接作用于T效应细胞或者间接通过DC细胞作用于T效应细胞发挥作用。靶向CTLA4 siRNA能够下调Treg细胞CTLA4的表达,影响Treg细胞抑制异种抗原引起T效应细胞应答的能力。 展开更多
关键词 细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4 小分子RNA T调节细胞 异种抗原 免疫应答
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人类白细胞抗原G1转染猪内皮细胞降低异种细胞排斥反应的研究 被引量:1
3
作者 夏振雄 韩军艳 +7 位作者 王树森 曹荣华 朱珉 祁洪刚 陈栋 吴雄文 龚非力 陈实 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期486-489,共4页
目的研究转染人类白细胞抗原G1(humanleukocyteantigenG1,HLA-G1)基因后的猪内皮细胞系(porcineendothelialcells,PECs)细胞,对人外周血单个核细胞(peripheralbloodmononuclearcell,PBMC)和自然杀伤细胞92(naturekillercell92,NK-92)细... 目的研究转染人类白细胞抗原G1(humanleukocyteantigenG1,HLA-G1)基因后的猪内皮细胞系(porcineendothelialcells,PECs)细胞,对人外周血单个核细胞(peripheralbloodmononuclearcell,PBMC)和自然杀伤细胞92(naturekillercell92,NK-92)细胞介导的杀伤作用的改变。方法利用脂质体包裹的方法,将携带HLA-G1基因的真核表达载体pcDNA3.0转染PECs细胞,在蛋白质水平通过间接免疫荧光法、在RNA水平通过RT-PCR,检测HLA-G1的表达;取6名健康志愿者,每人5ml静脉血,分离出单个核细胞和NK-92作为效应细胞,利用51Cr释放试验来检测其杀伤作用的改变。结果转染HLA-G1基因后,在转染的内皮细胞中蛋白质水平和RNA水平均检测到HLA-G1基因的表达;PBMC和NK-92细胞介导的对PECs细胞的杀伤作用均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论转染HLA-G1后的PECs,可有效地降低由人NK细胞介导的杀伤作用,从而为抑制异种细胞排斥反应提供了新的思路。 展开更多
关键词 异种排斥反应 猪内皮细胞系 人类白细胞抗原G1
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中国猪种SLA-DR基因的克隆及序列分析 被引量:5
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作者 陈福祥 谢晋 周光炎 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2002年第3期157-162,共6页
为探讨SLA DR基因结构及其在猪 人异种器官移植中的作用 ,本研究采用RT PCR扩增三个中国猪种SLA DRcDNA ,然后克隆入测序载体 ,进行双向测序 ,获得了具有完整阅读框架的三个结构和已有序列不同的新DRB等位基因 ,其长度为80 1个核苷酸 ,... 为探讨SLA DR基因结构及其在猪 人异种器官移植中的作用 ,本研究采用RT PCR扩增三个中国猪种SLA DRcDNA ,然后克隆入测序载体 ,进行双向测序 ,获得了具有完整阅读框架的三个结构和已有序列不同的新DRB等位基因 ,其长度为80 1个核苷酸 ,除末端终止密码外 ,编码 2 6 6个氨基酸残基 ;三个中国猪种DRA基因和已报告的NIH小型猪DRA基因结构相同 ,其长度均为 75 9个核苷酸 ,除末端终止密码外 ,编码 2 5 2个氨基酸残基。分析还揭示 ,(1)中国猪种SLA DR基因及其推导的氨基酸序列与人相应基因的同源性明显高于小鼠I E基因 ;(2 )中国猪DR分子 (DRα链和β链 )存在和人CD4分子相结合的HLA同源序列 ,但个别关键氨基酸残基发生改变 ,其改变幅度明显低于小鼠I E分子。人 猪MHC显示较高的同源性 ,在分子水平为人体T细胞同时采用直接和间接方式识别猪SLA这一免疫学现象提供了依据。 展开更多
关键词 主要组织相容性复合体 SLA-DR基因 异种移植
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人外周血T细胞系间接识别SLAⅠ类分子引起的异种细胞增殖反应
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作者 唐军 周芸 +3 位作者 柳子星 张勇 王胜旺 周光炎 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第7期536-539,共4页
目的 确认猪→人异种移植中存在针对猪白细胞抗原 (swineleukocyteantigen ,SLA)Ⅰ类分子的间接识别而引起的急性细胞性排斥。方法 用纯化的中国版纳猪SLAⅠ类P1基因工程蛋白为抗原 ,体外反复刺激健康人外周血T细胞 ,建立P1特异性T细... 目的 确认猪→人异种移植中存在针对猪白细胞抗原 (swineleukocyteantigen ,SLA)Ⅰ类分子的间接识别而引起的急性细胞性排斥。方法 用纯化的中国版纳猪SLAⅠ类P1基因工程蛋白为抗原 ,体外反复刺激健康人外周血T细胞 ,建立P1特异性T细胞系。观察抗原特异性CD4 + T细胞系在自身APC存在下对版纳猪外周血单个核细胞与软骨细胞的反应性 ,以及HLA DR单抗与氯喹的阻断作用。结果 建立 10株SLAⅠ类P1抗原特异性T细胞系 ,其中 8株以TCRαβ+ CD4 + 为主要表型 ,将其合并使用。该CD4 + P1特异性T细胞系在自身APC存在下对相同品系版纳猪PBMC与软骨细胞均产生显著增殖反应。经抗人HLA DR单抗与氯喹处理均能明显阻断其增殖反应。结论 健康人外周血T细胞可通过间接识别SLAⅠ类抗原对版纳猪细胞产生明显应答。 展开更多
关键词 异种移植 猪白细胞抗原 T淋巴细胞 异种排斥反应 间接识别
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Biological artificial vessel graft in distal arterial bypass for treating diabetic lower limb ischemia: a case report 被引量:4
6
作者 GU Yong-quan WU Ying-feng QI Li-xing GUO Lian-ri LI Xue-feng CUI Shi-jun TONG Zhux GUO Jian-ming and ZHANG JianGUO Jian-ming ZHANG Jian 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2011年第19期3185-3188,共4页
A 68-year-old female patient was treated for unhealed ulcer in the fourth toe of the left foot. Clinical examinations identified severe stenosis of the proximal segment and occlusion of the distal segment of the left ... A 68-year-old female patient was treated for unhealed ulcer in the fourth toe of the left foot. Clinical examinations identified severe stenosis of the proximal segment and occlusion of the distal segment of the left anterior tibial artery, and occlusion of the left posterior tibial artery and the peroneal artery. The proximal stenotic segment of the left anterior tibial artery was dilated, but the distal occlusive part failed to be re-canalized. Left anterior tibial artery to dorsal pedal artery bypass was performed on the patient with an epoxide-crosslinked, special radicals antigen-sealed, porcine-derived biological graft; debridement of the left 4th digiti pedis was also performed. Postoperation course was uneventful. The pulse of the left dorsal pedal artery was strong. The ankle brachial index (ABI) increased from 0.60 to 1.09. Warfarin and two antiplatelet drugs were given after the operation. Six months after operation, computed tomographic angiogram (CTA)identified the patent graft. 展开更多
关键词 distal arterial bypass xeno epoxide cross-link antigen-sealed BIOLOGICAL
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