HPLC指纹图谱结合多成分含量测定评价香附质量

目的建立香附药材的高效液相色谱(High performance liquid chromatography,HPLC)指纹图谱,结合4种化学成分含量对不同产地及用药规格香附的质量进行综合评价。方法采集HPLC指纹图谱,并结合聚类分析(Cluster analysis,CA)和主成分分析(Principal component analysis,CA)等多种化学计量学方法对不同产地及用药规格的香附药材进行区分比较。利用HPLC法测定香附药材中香附烯酮、α-香附酮、木犀草素和阿魏酸的含量。结果CA和PCA分析结果显示,不同产地香附均可单独聚为一类,而浙江金华与其他产地香附差异最大,河南尉氏香附综合得分最高,质量较优;正交偏最小二乘法判别分析(Orthogonal partial least square-discriminant,OPLS-DA)结果显示,指纹图谱中13号峰(α-香附酮)、10号峰(香附烯酮)和14号峰是不同产地间香附质量产生差异的主要成分。广东湛江和浙江金华香附中香附烯酮与α-香附酮含量较为接近,香附烯酮含量远大于河南香附,α-香附酮含量远小于河南香附;不同产地香附中阿魏酸和木犀草素含量差异不大。去皮后香附中香附烯酮、α-香附酮和木犀草素含量降低,阿魏酸含量增加。结论不同产地间香附质量存在差异,以河南香附质量最佳。去皮前后香附化学成分相似,无明显种类差异。

香附饮片与4种醋制香附饮片的快速鉴别

目的建立香附饮片与4种醋制香附饮片的傅里叶变换红外光谱图,快速鉴别香附饮片与4种醋制香附饮片;建立香附饮片与4种醋制香附饮片的高效液相指纹图谱,并测定α-香附酮、香附烯酮、5-羟甲基糠醛(5-HMF)、对香豆酸、阿魏酸、木犀草素的含量。方法建立25批香附样品的红外光谱图,利用OMNIC 9.2软件分析其平均红外光谱间的差异,采用Spectrum for Window 3.02软件标定共有峰,计算相对峰高;采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》建立香附饮片与4种醋制香附饮片的高效液相指纹图谱,进行相似度评价,确定共有峰个数;采用SIMCA 14.1软件进行聚类分析、主成分分析、正交偏最小二乘法-判别分析,判断红外光谱图结果与高效液相指纹图谱结果是否相互验证;测定α-香附酮、香附烯酮、5-HMF、对香豆酸、阿魏酸、木犀草素的含量。结果25批香附样品的红外光谱图的相关系数为0.9347~0.9829,共标定16个共有峰,1500~1300 cm^(-1)波段处差异明显。正态分布分析结果显示,2928、1649、995 cm^(-1)波段处可分别将醋煮品、醋炙品、醋蒸品与饮片区分;高效液相指纹图谱结果显示25批样品共有21个共有峰,相似度均大于0.9。指认出3号峰为5-HMF,7号峰为对香豆酸,8号峰为阿魏酸,14号峰为木犀草素,19号峰为香附烯酮,21号峰为α-香附酮;红外光谱图与高效液相指纹图谱聚类分析结果、主成分分析结果与正交偏最小二乘法-判别分析结果一致,均可聚为五类,即能够相互验证;5-HMF的含量经炮制后均有增加。对香豆酸、阿魏酸、木犀草素在饮片中含量最低,经炮制后均有增加。香附烯酮经醋炙、醋煮、醋蒸、醋煮蒸后均有减少,在香附饮片中含量最高。α-香附酮经醋炙后含量略有增加,经醋煮、醋蒸、醋煮蒸后均减少。结论香附饮片与4种醋制香附饮片的红外光谱图之间存在明显差异,能够快速鉴别香附饮片与4种醋制香附饮片;所建立的高效液相指纹图谱与含量测定方法操作简单、准确。

基于GC-MS定性分析结合多成分含量测定评价香附不同部位药用价值

目的利用气相色谱-质谱联用(gas chromatography-mass spectrography,GC-MS)和高效液相(high performance liquid chromatography,HPLC)技术,探讨香附不同部位(花、茎、根、须)间化学成分变化和含量差异,为非药用部位再利用提供参考。方法采用GC-MS技术研究香附不同部位中的挥发性成分的分布情况,借用HPLC对4种化学成分含量进行含量测定,完成对香附不同部位的定性、定量分析。结果不同部位共检测到49个化学成分,其中花部共指认20个成分,茎部共指认17个成分,根部共指认38个成分,须部共指认17个成分;不同部位共存在8个主要挥发性成分,其中花部与根部8种成分相对含量均接近;定量分析结果显示花部与根部的香附烯酮、α-香附酮和阿魏酸含量接近;聚类分析结果显示多个产地花部与根部可聚为一类。结论花部与根部化学成分较为接近,有较高的开发价值,该结果为香附非药用部位的合理利用和后续研究提供有效的数据支撑。

香附质量标志物的预测分析

香附药用历史悠久,具有疏肝解郁、理气宽中、调经止痛的功效,用于治疗肝郁气滞,月经不调。香附药效物质基础复杂,若仅以一种或者两种化学成分作为其质量指标,不能较全面地、科学地评价其质量。近年来,质量标志物的提出为中药质量控制提供了一个新模式,成为中医药领域研究和探讨的一个热点。因此在香附质量控制现况的基础上,结合质量标志物的概念,从亲缘关系以及化学成分特有性、传统功效、传统药性、化学成分的可测性、中药不同配伍环境、不同炮制方法化学成分含量的变化、新功效、网络药理学等几个方面对香附进行质量标志物成分的预测分析,从而为香附及其制剂的质量标准与质量控制提供参考的依据,进一步完善质量标准。

基于网络药理学方法分析柴胡配伍香附治疗癫痫的作用机制

目的:运用网络药理学方法探讨柴胡配伍香附对癫痫靶基因及信号通路的影响。方法:通过中药系统药理学数据库与分析平台筛选柴胡、香附有效成分及靶点,然后采用人类基因数据库、在线孟德尔人类遗传数据库筛选与癫痫相关的基因,通过靶点交集获得中药与疾病的靶点,然后利用cytoscape.3.6.0软件绘制柴胡、香附有效成分与靶基因关系网络图,并对靶基因进行基因本体论功能富集分析、KEGG富集分析。结果:共筛选出柴胡119个、香附40个有效成分作用于癫痫的CHRM2、GABRA1、PRSS140等靶基因。靶基因主要富集在神经递质受体活性、类固醇激素受体、核受体活性、转录因子活性、乙酰胆碱受体活性等生物过程,涉及神经活性配体-受体相互作用、雌激素信号通路、胆碱能突触等信号通路。结论:从网络药理学角度筛选柴胡配伍香附治疗癫痫潜在的有效成分及作用靶基因和信号通路,可为开发柴胡配伍香附治疗癫痫提供理论依据。

生命关怀与人性烛照——王祥夫小说的动物叙事意蕴

“动物叙事”通过与动物相关的叙事,加深对社会、人性、精神文化等更深层面上的探求。王祥夫的小说运用“动物之镜”,呈现人与动物的生存状态,观照复杂多变的人性,映现传统自然家园的衰落。无论是对生命存在价值及意义的探讨,还是对复杂人性的探究,或是对生态问题的关注,都传达了浓厚的生命意识与人文关怀,从而使作品表现出独特的审美意蕴。

香附四物汤对大鼠卵巢颗粒细胞增殖的影响及活性部位成分分析

目的评价香附四物汤及其不同分离部位对大鼠卵巢颗粒细胞增殖的影响,并对活性部位成分进行分析。方法体外培养大鼠卵巢颗粒细胞,将香附四物汤的不同分离方法所得提取物以2、20、200μg/mL 3个终浓度分别加入培养体系中,通过四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测细胞增殖情况,观察其对卵巢颗粒细胞生长的影响。采用超高效液相-四级杆串联飞行时间-质谱(UPLC-QTOF-MS)分析鉴定活性部位的成分。结果香附四物汤挥发油、水煎液、醇沉沉淀、醇沉上清液及醇沉分子量大于5万的部位对卵巢颗粒细胞均具有明显的促进增殖作用,并呈现剂量依赖性。其中水提物大孔树脂醇洗脱部位在200μg/mL剂量下30%及40%部位表现出显著的促进增殖作用。从醇沉上清液中分析鉴定了16种化合物。结论香附四物汤对离体培养的卵巢颗粒细胞增殖具有明显的促进作用,其调节机体性激素生成作用可能与促进卵巢颗粒细胞生长效应相关;活性部位醇沉上清液的化学组分主要为萜类、有机酸类和生物碱类成分。

香附对大鼠离体脂肪组织释放游离脂肪酸的影响

用不同浓度的香附水煎剂灌流大鼠离体脂肪组织 ,发现香附水煎剂可促进脂肪组织释放游离脂肪酸 ,并且存在剂量效应关系。心得安、异搏定和元钙液可不同程度的阻断香附的作用 ,表明香附促进脂肪组织释放游离脂肪酸的作用部分经肾上腺素能 β受体、异搏定敏感的L型Ca2 + 通道及外Ca2 + 内流介导。

不同炮制方法对香附中香附烯酮和α-香附酮的影响

基于高效液相法考察不同炮制方法对香附中香附烯酮和α-香附酮的含量的变化规律。取不同产地20批的香附,经醋制、四制和酒制炮制后;采用高效液相色谱法(HPLC)测定香附烯酮和α-香附酮的含量;利用单因素方差分析法比较香附不同炮制品的香附烯酮和α-香附酮的含量,采用Spearman相关分析探究香附烯酮和α-香附酮之间的相关性。在不同香附炮制品中,生香附和四制香附之间的香附烯酮含量差异具有统计学意义,生品香附烯酮含量高于四制香附;香附烯酮和α-香附酮含量呈负相关(r=-0.231,P<0.05)。不同产地香附中2种成分含量差异较大,香附烯酮含量经过醋制,酒制和四制后较生香附均下降,α-香附酮含量在醋制中含量较生香附降低,经过酒制和四制后有所升高。且随着香附中香附烯酮含量的升高,α-香附酮含量有一定程度的降低,这对香附不同炮制品的质量评价标准和炮制工艺的选择提供参考。

常用妇科中药治疗前列腺炎、前列腺增生的探讨

目的:探讨常用妇科中药对前列腺炎、前列腺增生的治疗作用。方法:分析妇科常用中药治疗前列腺炎、前列腺增生的理论可行性;总结分析益母草、泽兰、香附、红花、乌鸡白凤丸与治疗前列腺炎、前列腺增生的临床及相关实验研究。结果:益母草、泽兰、红花、香附、乌鸡白凤丸治疗前列腺炎及前列腺增生有较好的疗效,缺少单味中药或乌鸡白凤丸治疗前列腺炎、前列腺增生的药理作用及机制研究。结论:常用妇科中药治疗前列腺炎、前列腺增生有疗效,可为相关临床和研究提供新的思路和方法。

香附四物汤全方与组方药材挥发油经皮外用“药辅合一”作用研究

目的比较香附四物汤全方挥发油与组方药材挥发油经皮外用“药辅合一”作用。方法以水蒸气蒸馏法提取得到香附四物汤全方挥发油和当归油、川芎油、木香油、香附油等4种组方药材挥发油。采用GC-MS分析挥发油成分,通过皮肤电阻法比较全方挥发油和各组方药材挥发油的透皮促渗效果,以人角质形成细胞HaCaT评价挥发油的皮肤细胞毒性,并采用大鼠离体子宫收缩模型评价全方挥发油和组方药材挥发油的生物效应。结果香附四物汤全方挥发油以藁本内酯为其最主要成分,含量为43.54%;与各组方药材挥发油相比,全方挥发油含有16种新成分。全方挥发油及4种组方药材挥发油均具有显著的透皮促渗效果(P<0.05),其中全方挥发油的促渗作用较强,是氮酮的2.5倍。5种挥发油对人角质形成细胞的毒性均显著低于氮酮(P<0.05),IC_(50)值为氮酮的1.98~6.25倍。5种挥发油均不同程度地抑制缩宫素诱导的离体子宫收缩,其中全方挥发油对平滑肌收缩幅度、收缩频率和肌张力的抑制作用均最强,分别为66.69%,47.56%和66.98%。结论香附四物汤全方挥发油作为透皮促渗剂应用于中药外用制剂具有低毒、高促渗和生物活性强的特点,更易发挥“药辅合一”作用。

基于GC-MS指纹图谱结合化学计量学的不同产地香附挥发油化学成分比较研究

目的比较不同产地香附挥发油化学成分的种类与含量,为香附种质筛选与开发利用提供参考。方法采用GC-MS技术,对不同产地的香附药材挥发油成分进行定性分析;建立香附药材挥发油成分指纹图谱并进行相似度评价,结合聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)等化学计量学方法比较不同产地香附挥发油化学成分种类差异;通过HPLC法对香附挥发油中的有效成分(香附烯酮、α-香附酮、圆柚桐)进行定量分析,比较不同产地样品的含量差异。结果从12个产地香附挥发油中共鉴定出46种不同化合物,通过峰面积归一化法计算各成分相对百分含量,其中香附子烯(18.87%)的相对含量较高;通过建立香附挥发油GC-MS指纹图谱,发现12个产地样品中含有19个共有峰,并鉴定其化学名称;12个产地香附挥发油成分的相似度平均值为0.91;聚类分析结果显示,12个产地的香附挥发油样品可聚成3类;主成分分析结果显示前4个主成分的累计贡献率为97.621%,可以反映原始色谱峰的大部分信息,综合得分结果显示云南、山西产香附相比其他产地质量更好;对3种有效成分的含量测定结果显示,香附烯酮、圆柚酮以及α-香附酮的含量在不同产地存在显著性差异。结论香附在我国分布范围广,不同产地香附挥发油化学成分种类与含量均存在一定差异,本研究通过对香附挥发油化学成分的分析,以期为香附挥发油质量控制与产品开发提供理论依据。

β-环糊精包合佛手、香附、木香混合挥发油的制备工艺研究

目的:研究β-环糊精包合佛手、香附、木香混合挥发油的最佳工艺。方法:以挥发油包合率为评价指标,对饱和水溶液法、研磨法及超声法进行了比较试验,采用正交试验法,优选研磨法的最佳包合工艺条件,并对包合物进行TLC检验及稳定性考察。结果:优选出的最佳包合工艺条件是:β-环糊精与挥发油的投料比为 101,加 3倍量水,研磨 3h。混合挥发油包合前后,成分未见明显改变,包合后制剂的稳定性增强。结论:本实验为确认佛手、香附、木香混合挥发油的合理包合工艺提供了实验依据。

川芎-香附药对超临界萃取工艺优化及含量测定

目的:筛选川芎-香附药对的超临界CO2流体萃取工艺并对萃取物进行含量测定。方法:采用正交设计法,以得油率为指标,考察萃取压力、萃取温度、萃取时间、CO2流量等因素对萃取效果的影响;采用HPLC法建立萃取物中α-香附酮以及丁烯基苯酞的含量测定方法。结果:最佳工艺为萃取压力25 MPa、萃取温度45℃、萃取时间2 h、CO2流量20 kg/h。萃取物中α-香附酮和丁烯基苯酞的平均含量为3.26%、1.50%。结论:所得最佳萃取工艺条件切实可行,萃取物质量稳定可控。

半夏-苍术-香附组药干预痰湿型多囊卵巢综合征的生物机制

目的:运用网络药理学方法和技术研究"半夏-苍术-香附"组药治疗多囊卵巢综合征(PCOS)的主要活性成分、靶点和通路。方法:通过数据挖掘获得PCOS痰湿型核心组药半夏-苍术-香附;检索中药系统药理学分析平台(TCMSP),筛选出半夏、苍术和香附的主要活性成分和潜在靶点;查询NCBI数据库获得PCOS疾病靶点,找到药物和疾病的共靶点;通过David数据库和Omicshare数据库对共靶点进行基因功能GO富集分析和KEGG富集分析;采用Cytoscape软件构建中药-成分-靶标网络。结果:从"半夏-苍术-香附"组药中筛选得到40个候选活性分子,作用于681个靶点,其中与PCOS重合的23个疾病靶点主要涉及癌症通路、流体剪切应力与动脉粥样硬化通路、HIF-1信号通路、糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路等生物学过程中的多条信号通路。结论:"半夏-苍术-香附"组药通过槲皮素、山奈酚、β-谷甾醇、木犀草素、汉黄芩素等活性物质形成多靶点、多通路调控网络,增强免疫机制,改善胰岛素抵抗,降低炎症细胞因子水平,达到系统治疗PCOS的目的。

香附理气颗粒对小鼠免疫功能影响的实验研究

目的研究香附理气颗粒对正常小鼠的细胞免疫及体液免疫的影响。方法采用LPS刺激脾脏T淋巴细胞增殖、碳粒廓清、溶血素抗体生成等实验,研究香附理气颗粒对小鼠免疫功能的影响。结果香附理气颗粒能明显提高正常小鼠的碳粒廓清指数和吞噬指数,增加脾脏、胸腺指数,明显促进溶血素抗体的生成,显著增加脾脏T淋巴细胞的增殖活化。结论香附理气颗粒对正常动物的免疫功能有一定的增强作用。

高祥福教授病证结合诊治强直性脊柱炎经验

[目的]总结高祥福教授临床病证结合诊治强直性脊柱炎(ankylosing spindylitis,AS)经验。[方法]通过跟随高祥福教授临诊和学习高祥福教授的医案,总结老师治疗AS的学术观点和临床经验,并附验案举隅。[结果]高祥福教授认为AS的病机以肝肾亏虚、气血不足、肾虚督寒为内因,风寒湿邪为外因,瘀血阻络贯穿疾病始终。治疗原则以辛温散寒、补益肝肾、祛瘀止痛为主,常用方剂为独活寄生汤和桂枝芍药知母汤加减化裁,取得较好疗效。所附验案,疗效显著。[结论]高祥福教授治疗AS的经验特色鲜明,疗效确定,值得深入学习和推广运用。

香附的本草考证

目的:通过查阅与香附记载相关的本草文献,对香附正本清源,以确保其质优效良、临床使用安全有效,以期从中挖掘其中重要或特殊功能主治,指导现代研究方向及相关产品的开发,以利于其多元化发展。方法:查阅自香附药用以来的主要本草、后世对其的注解类本草书籍,及现代重要的中药辞典,对香附进行本草考证,从包括其药用名、品种、功能主治及采收、加工炮制等多方面进行归纳总结。结论:古代香附品种固定为莎草科莎草;而其药用部位由最初不明确而最终确定为根茎;采收加工基本为二、八月采,去毛晒干净制;功效方面主要用于气血调和,主治妇科疾病,总的来说,古今变化不大且经历多年医学佐证,逐步完善。而主产地有一定的变化,主产地由古书记载的广东、重庆、湖南一带,逐步发展为山东、广西、江浙一带,性味归经方面古今差异一直为各代医家所争论,应对争议之处进行相关研究,以利于香附的临床应用安全有效,并期能从中获取新信息,更加适宜现代临床用药需求。

醋制香附不同提取部位对肝郁血瘀模型大鼠的的影响

目的:建立具有中医证候特点的肝郁血瘀大鼠模型,探究醋香附治疗肝郁血瘀的有效物质基础,筛选其疏肝散瘀有效部位。方法:采用外界随机刺激造模法及盐酸肾上腺素所致的肝郁血瘀造模法,从体征变化、血液流变学两方面指标评价醋香附不同提取部位疏肝解郁化瘀的药效学差异性,筛选出最佳活性部位。结果:给药后,醋香附不同提取部位组大鼠各项指标均有所改善。体表瘀斑消散、乙酸乙酯组、乙醚组、正丁醇组能显著性降低全血切变率1的水平,乙酸乙酯组亦能显著性减低全血切变率5的水平(与模型组比较,P<0.05);石油醚组、乙醚组、正丁醇组可显著性降低血浆粘度及红细胞压积水平(与模型组比较,P<0.05);乙酸乙酯组、水提组只能降低红细胞压积水平(与模型组比较,P<0.05);正丁醇组、水提组可显著性降低血沉方程K值和红细胞聚集指数(与模型组比较,P<0.05);石油醚组能显著性升高全血高切还原粘度(与模型组比较,P<0.05);石油醚组、乙醚组、乙酸乙酯组、正丁醇组、水提组可显著性减低血浆纤维蛋白原水平(与模型组比较,P<0.05))。结论:乙酸乙酯部位及石油醚部位为醋香附疏肝散瘀的主要有效提取部位,初步认为醋香附是通过降低血液中的血浆纤维蛋白原、降低血液黏度以达到活血化瘀的功效。

香附四物汤对原发性痛经(气滞血瘀型)凝血功能的影响

目的:观察香附四物汤对气滞血瘀型原发性痛经患者凝血功能的影响并评价其临床疗效。方法:选取12例气滞血瘀型原发性痛经患者,口服香附四物汤配方颗粒治疗3个月经周期,观察治疗前后临床疗效,并检测治疗前和治疗第2月经周期、第3月经周期月经来潮12小时内凝血功能。结果:经香附四物汤治疗后,12例患者总有效率为83.3%。治疗后凝血功能示APTT时间延长,与治疗前比较,差异有统计学意义(P<0.05),其余项目治疗前后无明显变化(P>0.05)。结论:香附四物汤对气滞血瘀型原发性痛经患者疗效较好,且能延长APTT,可能为其治疗本病机制之一。