消癌平诱导人肺腺癌(ASTC-a-1)细胞内caspase-3活化的荧光光谱分析

采用CCK-8技术检测发现传统中药消癌平(XAP)对人肺腺癌(ASTC-a-1)细胞的增殖活性具有显著的抑制作用。利用共聚焦扫描荧光显微成像、荧光共振能量转移(FRET)及其受体光漂白技术证实了基于FRET技术构建的SCAT3质粒在ASTC-a-1细胞中的稳定表达。将消癌平加入细胞培养液中培育细胞,并在不同的时间检测活细胞内SCAT3的荧光发射光谱,从而监测细胞中caspase-3的活化状态。实验结果表明:(1)消癌平可以有效抑制人肺腺癌(ASTC-a-1)细胞的增殖活性并诱导细胞的死亡,消癌平对细胞的抑制作用具有剂量依赖性。(2)消癌平处理细胞72 h后,细胞内大量的SCAT3被切割,表明细胞内caspase-3的活化水平明显升高。(3)将含消癌平的细胞培养液与细胞共同培养24 h,然后采用没有消癌平的细胞培养液培养细胞48和72 h后,细胞内SCAT3的光谱没有明显改变,表明消癌平作用细胞24 h内没有显著激活细胞内的caspase-3。

小柴胡汤对内异症大鼠异位内膜Fas及Caspase-3蛋白表达的影响

目的:探讨小柴胡汤治疗大鼠内异症的作用机制。方法:建立大鼠内异症动物模型,利用免疫组化的方法,观察分析各用药组在位、异位内膜Fas及Caspase - 3蛋白的表达。结果:小柴胡汤治疗组内异症大鼠异位内膜Fas蛋白、Caspase - 3蛋白的表达水平明显高于其在位内膜,但对照组(蒸馏水)中却相反,而在丹那唑组中两者相差不明显。结论:小柴胡汤治疗大鼠内异症的作用机制可能是通过上调Fas蛋白的表达,促进异位内膜细胞的凋亡而实现的。

消瘀化痰方对非酒精性脂肪肝大鼠肝细胞凋亡和Caspase3蛋白表达的影响

目的观察中药消瘀化痰方对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠肝细胞凋亡和肝组织caspase 3蛋白表达的影响,探讨其防治NAFLD的部分作用机理。方法采用高脂饮食喂饲大鼠复制NAFLD模型,以东宝肝泰为对照药,运用流式细胞仪观察各组大鼠肝细胞凋亡及肝组织caspase 3蛋白表达的变化,同时采用HE染色观察各组大鼠肝组织形态学变化。结果镜下可见模型组大鼠肝脏中度以上脂肪变性,并有少量的肝细胞坏死;流式细胞术分析可见其细胞凋亡率明显增高(P<0.01),caspase 3蛋白表达FI值增高(P<0.01)。与模型组比较,各用药组肝脂变程度显著改善,肝细胞的凋亡率明显下降(P<0.01),caspase 3蛋白表达FI值降低(P<0.01)。结论消瘀化痰方通过抑制caspase 3蛋白的表达,抑制肝细胞的凋亡,以达到抗脂肪肝作用。

消癌平诱导caspase-3活化动态过程的实时监测

消癌平是从萝摩科(Asclepiadaceae)植物通关藤(Marsdenia tenacissima)根部提取的药物,已经广泛应用于癌症和多种炎症的临床治疗,并且具有较好的疗效。将消癌平注射液与细胞培养液按照1∶1的比例混合后共同培养人肺腺癌(ASTC-a-1)细胞,通过CCK-8方法检测发现消癌平能够显著抑制细胞的增长。然后利用荧光共聚焦扫描显微镜和荧光共振能量转移(fluorescence resonance energy transfer,FRET)技术在稳定表达了SCAT3质粒的单个ASTC-a-1细胞中实时动态监测消癌平处理后SCAT3的空间分布以及SCAT3被caspase-3切割的动态过程。实验结果表明:消癌平处理后20 min中SCAT3开始向细胞核以及细胞膜部位转移,约在100min左右SCAT3被迅速切割。

小张庄地面O_3和NO_x的初步研究

介绍１９９３年１０月１４日～２６日在联合国环保“全球５００佳”——淮北平原南部的小张庄村（３２°４７′Ｎ，１１６°２３′Ｅ）——进行的Ｏ３和ＮＯｘ地面浓度测量结果，给出了Ｏ３和ＮＯｘ浓度的平均概况及随时间变化的一些特征．分析表明，地面Ｏ３浓度主要决定于地面总辐射强度控制下的光化学反应过程。

消肿止痛合剂对大鼠膝骨性关节炎软骨中PI3K/Akt信号通路影响的实验研究

目的观察消肿止痛合剂对大鼠膝骨性关节炎软骨中磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)蛋白和丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(AKT)蛋白、天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)表达的影响及其作用机制。方法将80只SD大鼠随机分为4组:观察组(消肿止痛合剂组)、对照组(硫酸氨基葡萄糖片组)、模型组、假手术组,每组20只。除假手术外,其余三组通过改良Hulth法行膝骨关节炎造模。药物连续干预8周后,取各组大鼠膝关节软骨,采用ELISA方法检测血清中TNF-α、IL-1β、iNOS水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组软骨中PI3K、AKT、Caspase-3mRNA的表达情况,蛋白质印迹法(Western blot)检测各组软骨细胞中PI3K、AKT、Caspase-3蛋白的表达。结果消肿止痛合剂可显著减低KOA大鼠血清TNF-α、IL-1β、iNOS水平,显著下调PI3K、AKT、Caspase-3基因及蛋白表达。结论消肿止痛合剂对KOA关节软骨损伤的保护可能与PI3K/AKT信号通路相关。

复合多因素方法复制肝郁脾虚证动物模型的实验研究

目的:利用复合多因素刺激方法复制肝郁脾虚证动物模型,探讨肝郁脾虚证动物模型复制方法和病理生理改变。方法:利用复合多因素造模方法,并观察造模前后、给药前后大鼠行为学及血浆促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、可的松(CORT)、精氨酸加压素(AVP)含量的变化。结果:模型对照组与正常对照组、逍遥散组、酮康唑组地塞米松组比较,CRH显著升高,差异有统计学意义或显著性差异(P<0.05,P<0.01);模型对照组与正常对照组、逍遥散组、酮康唑组、地塞米松组比较,CORT显著升高,有显著性差异(P<0.01)。同时,模型对照组与正常对照组、逍遥散组、酮康唑组和地塞米松组比较,ACTH含量升高,差异有统计学意义或有非常显著性差异(P<0.05,P<0.01);模型对照组与正常对照组、逍遥散组、酮康唑组和地塞米松组比较,AVP含量降低,有显著性差异(P<0.01)。结论:CUMS造模方法可以成功复制肝郁脾虚证模型,肝郁脾虚证的病理生理与HPA轴功能紊乱有关,拮抗HPA轴亢进是逍遥散治疗肝郁脾虚证的机制之一。

小柴胡汤治疗大鼠子宫内膜异位症作用机制的实验研究

通过建立大鼠子宫内膜异位症(内异症)动物模型, 利用免疫组化的方法, 观察分析各用药组在位、异位内膜Fas及Caspase 3蛋白的表达, 探讨小柴胡汤治疗大鼠内异症的作用机制。结果显示, 小柴胡汤治疗组内异症大鼠异位内膜Fas蛋白、Caspase 3蛋白的表达水平明显高于其在位内膜, 而对照组中却恰恰相反, 丹那唑组中两者相差不明显, 提示小柴胡汤治疗大鼠内异症的作用机制可能是通过上调Fas蛋白的表达, 促进异位内膜细胞的凋亡而实现的。

小柴胡汤冲剂治疗子宫内膜异位症的作用机制

目的探讨小柴胡汤冲剂治疗大鼠子宫内膜异位症(内异症)的作用机制。方法建立大鼠内异症动物模型,利用免疫组化的方法,观察分析各用药组在位、异位内膜Fas及Caspase-3蛋白的表达。结果小柴胡汤治疗组内异症大鼠异位内膜Fas蛋白、Caspase-3蛋白的表达水平明显高于其在位内膜,而在对照组中的表达却恰恰相反,丹那唑组中两者相差不明显。结论小柴胡汤冲剂治疗大鼠内异症的作用机制可能是通过上调Fas蛋白的表达,促进异位内膜细胞的凋亡而实现的。

中药系列组方治疗艾滋病生存10年以上病例报告

目的:中国和坦桑尼亚合作观察中药治疗艾滋病的疗效。方法:根据临床证候不同,辨证分型为风寒外袭、风热在表、肝胆湿热、脾胃气虚、气虚血瘀、气阴两虚型,分别给予通宣理肺散(丸)、小柴胡汤、龙胆泻肝汤(丸)、参苓白术散、生脉饮等进行治疗。结果:23例患者经治疗已存活10a以上,一般治疗0.5a临床症状大部分消失。通过中药治疗至2.5a时,CD4与体重明显升高。结论:临床实践证明,中药治疗艾滋病病情稳定时间较长,远期效果较好。

活络效灵颗粒中乳香酸类成分含量分析

目的：建立活络效灵颗粒中5种乳香酸的含量测定方法,为控制和评价其质量提供依据。方法：采用HPLC测定,Agilent SB-C18色谱柱（4.6 mm×150 mm,5μm）;流动相0.1%磷酸水溶液-乙腈梯度洗脱;检测波长210 nm和250 nm;柱温30℃。结果：α-乳香酸、β-乳香酸、3-乙酰-β-乳香酸、11-羰基-β-乳香酸、11-羰基-β-乙酰乳香酸的线性范围分别是0.078~0.390μg、0.512~6.656μg、0.574~7.462μg、0.084~0.420μg和0.296~1.480μg,线性关系良好;回收率分别为97.1%、100.4%、99.8%、99.6%和103.4%。结论：方法准确可靠,可用于活络效灵颗粒中5种乳香酸成分含量测定。

马里亚纳南部弧内坡橄榄岩的岩石学及地球化学特征：对弧前地幔流体交代作用的指示

马里亚纳俯冲带弧内坡由于俯冲的太平洋板片的侵蚀而出露了相当于弧下地幔成分的橄榄岩,这些橄榄岩是研究岛弧岩浆作用及弧下地幔流体交代作用难得的样品。报道了马里亚纳南部关岛以南的弧内坡橄榄岩的矿物组成、主量元素以及微量元素地球化学特征。这些岩石具有非常难熔的矿物组成:橄榄石具有很高的Mg,斜方辉石中的Al2O3含量极低,尖晶石具有很高的Cr。滑石、蛇纹石和角闪石(透闪石为主,有少量镁角闪石和浅闪石)则指示了流体在中低温度下对橄榄岩的交代作用,并表明流体可能含有较高的SiO2、Al2O3和Na2O。全岩的主量元素中,CaO和Al2O3的质量百分比含量很低,而MgO的含量较高(干体系下多在43%左右),显示岩石经历了高度熔融。微量元素中,U和Sr的含量较高,相对富集,可能是来源较浅的板片流体化学特点的反映。

抵挡汤早期干预对2型糖尿病大鼠肿瘤坏死因子-α与血管细胞黏附分子-1表达的影响

目的观察抵挡汤早期干预对2型糖尿病大鼠血管病变中大血管的保护作用,探讨其机制。方法采用高脂饲料喂养及链脲佐菌素诱导方法制成大鼠糖尿病模型,抵挡汤早期干预组、抵挡汤中期干预组和抵挡汤晚期干预组分别于实验成模前4周、成模和成模后4周给予抵挡汤灌胃,辛伐他汀组和罗格列酮组大鼠于成模时分别给予辛伐他汀和罗格列酮灌胃,至实验24周时结束。酶联免疫吸附法检测大鼠血清血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)水平,实时荧光定量PCR法检测主动脉肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达。结果与正常对照组比较,模型对照组大鼠血清VCAM-1水平明显升高(P<0.05),主动脉TNF-αmRNA表达明显升高(P<0.05);与模型对照组比较,抵挡汤早期干预组和辛伐他汀组大鼠血清VCAM-1水平明显降低(P<0.05),并且抵挡汤早期干预组、抵挡汤中期干预组和罗格列酮组大鼠主动脉TNF-αmRNA的表达明显降低(P<0.05)。结论抵挡汤早期干预能抑制大鼠主动脉TNF-αmRNA表达升高,抑制大血管病变的炎性损伤,延缓糖尿病大血管病变的发展,发挥其保护大血管的作用。

基于NLRP3/GSDMD/Caspase-1通路探究小续命汤联合电针对脑缺血/再灌注损伤的改善作用

目的:研究旨在全面解析小续命汤(XXMD)和电针(EA)协同缓解脑缺血/再灌注(I/R)损伤的潜在机制。方法:采用改良线栓法建立大鼠脑I/R损伤模型。在建模7 d后,XXMD+EA组大鼠分别给予低剂量(15 g·kg^(-1))、中剂量(30 g·kg^(-1))和高剂量(60 g·kg^(-1))的XXMD,同时每天接受20 min的EA治疗(刺激穴位GV14和GV20)。通过Zea Longa测试评分、2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色和原位末端标记法(TUNEL)染色评估脑梗死和神经元损伤。利用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测脑皮质缺血区NOD样受体蛋白3(NLRP3)、消皮素D(GSDMD)、胱天蛋白酶-1(Caspase-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-18(IL-18)的表达。结果:与假手术组比较,I/R组大鼠神经功能缺损评分和梗死体积显著增加(P<0.01),皮层神经元凋亡率及NLRP3、GSDMD、Caspase-1、IL-1β和IL-18的mRNA和蛋白表达水平显著增加(P<0.05)。与I/R组比较,中剂量和高剂量XXMD联合EA治疗显著降低神经功能缺损评分和梗死体积(P<0.01)。皮层神经元凋亡率及NLRP3、GSDMD、Caspase-1、IL-1β和IL-18的mRNA和蛋白表达水平也明显下降(P<0.05)。这种改善作用还显示出与XXMD剂量呈依赖性关系。结论:XXMD和EA联合使用可通过调节NLRP3/GSDMD/Caspase-1信号通路,减少神经功能缺损、缩小脑梗死范围并改善皮层神经元损伤,从而发挥脑保护作用。

小承气汤对烟熏法诱导慢性支气管炎模型大鼠TGF-β1/Smad3信号通路的影响

目的:探讨小承气汤对慢性支气管炎模型大鼠药物干预的可能机制。方法:80只SD大鼠随机分为空白对照组、模型组和治疗组。采用改良烟熏法复制慢性支气管炎模型,造模完成后用小承气汤对模型大鼠进行治疗。取肺和结肠光镜下观察病理形态学改变,测量转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad3表达水平。结果:病理形态学观察:与模型组比较,治疗组大鼠肺及肠组织病理损伤程度减轻。免疫组化:与模型组比较,治疗组大鼠肺组织TGF-β1、Smad3表达及肠组织TGF-β1、Smad3表达明降低(P<0.05,P<0.01)。结论:小承气汤"肺病治肠"的药物干预机制可能和降低肺、肠组织的TGF-β1、Smad3等炎性介质的表达有关。

消栓颗粒对缺氧缺血性新生大鼠脑组织Caspase-3蛋白的影响

目的探讨消栓颗粒对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠Caspase-3蛋白的影响。方法 7日龄SD新生大鼠36只,随机分为假手术组、HIBD模型组和消栓颗粒治疗组,每组各12只。HIBD模型组和消栓治疗组参照Yager法建立HIBD模型,消栓颗粒治疗组灌服消栓颗粒(8g/kg,qd),HIBD模型组及假手术组灌服等量9g/L氯化钠注射液。造模后第14d断头取出脑组织,观察3组大鼠左侧大脑半球病理形态学的变化,比较3组的病理学评分;免疫组化法检测3组大鼠海马及皮质区Caspase-3蛋白的表达情况。结果 HE染色结果显示,假手术组未见明显病变,HIBD模型组大鼠脑组织变性、坏死显著,消栓颗粒治疗组仅表现为局灶性神经细胞变性,病理学评分假手术组显著低于HIBD模型组及消栓颗粒治疗组(P<0.01),消栓颗粒组低于HIBD模型组(P<0.01)。免疫组化结果显示,假手术组海马及皮质区有少量Caspase-3蛋白表达,HIBD模型组Caspase-3蛋白的表达较假手术组明显增多,消栓颗粒治疗组Caspase-3蛋白的表达较HIBD模型组明显减少,3组间两两比较均具有显著性差异(P<0.01)。结论消栓颗粒可减轻HIBD新生大鼠的脑损伤,机制可能为抑制Caspase-3蛋白的表达。

胃癌CD133阳性细胞的纯化及其生物学特性研究

目的检测人胃癌KATO-Ⅲ、SGC7901、AGS及MKN-45细胞株中CD133基因及蛋白的表达,研究CD133阳性(CD133+)细胞与CD133阴性(CD133-)细胞的生物学特性的差异。方法采用半定量聚合酶链反应及免疫蛋白印迹法分别检测KATO-Ⅲ、SGC7901、AGS及MKN-45细胞株中CD133基因和蛋白的表达;免疫磁珠细胞技术将KATO-Ⅲ细胞株中CD133+和CD133-细胞分离纯化,对比两者生长形态特点、体外增殖能力及分化能力的差异;采用CCK-8法分析CD133+和CD133-细胞对不同浓度(0.05、0.10、0.20、0.50、1.00mg/ml)化疗药物5-氟尿嘧啶(5-FU)敏感性的差别。结果 KATO-Ⅲ细胞中CD133基因及蛋白表达量均明显高于SGC7901、AGS及MKN-45细胞(P<0.05)。CD133+细胞在无血清培养基中呈球形克隆悬浮生长,相比CD133-细胞具有更强的体外增殖能力及潜在分化能力。5-FU耐药性实验中,CD133+细胞在0.50mg/ml浓度下的抑制率较CD133-细胞明显降低(P<0.05),但其他浓度时二者比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论人胃癌细胞株KATO-Ⅲ中的CD133+细胞具有一定增殖、分化及耐药潜能,CD133可作为胃肿瘤起始细胞亚群的表面标志之一。

中古精见知照声母在霸州方言的合流现象

提要霸州方言不分尖团,精、见晓组声母在三等细音前完全合流,不能区别。但与众多不分尖团方言不同的是,合流情况又存在[ts ts's]、[t■t■'■]两种读音类型。其中大部分精见晓组细音合流读[t■t■'■],但山臻摄合口三四等精组、见系今细音舒声字,霸州方言读为[ts ts's]与知三章合流。河北方言这种声母演变的类型为语言类型学研究提供了新的资料。