DLL4基因对白血病细胞株K562细胞中YY1和c-Myc蛋白表达及细胞增殖的影响

本研究旨在探讨Notch的配体DLL4基因在白血病细胞株K562中对转录因子YY1和原癌基因c-Myc蛋白表达及细胞生长的影响。实验分正常对照组、阴性对照组(转染质粒pBudCE4.1)和实验组(转染质粒pBudCE4.1-DLL4)。转染后48小时,用免疫印迹法和免疫细胞化学法检测外源性DLL4瞬时转染表达水平及YY1和c-Myc蛋白的表达水平;用细胞计数试剂盒-8法检测各组细胞的增殖;转染后48小时用流式细胞仪检测各组细胞的周期分布和凋亡。结果表明,在各组K562细胞中均检测到DLL4、YY1和c-Myc蛋白的表达,实验组的DLL4、YY1和c-Myc蛋白表达量比两个对照组显著增多(p<0.05);实验组K562细胞的生长速度明显低于对照组;实验组较对照组G0/G1期细胞增多(p<0.001),凋亡率增加(p<0.001)。结论:DLL4基因能增加细胞转录因子YY1和原癌基因c-Myc蛋白的表达,诱导细胞生长速度减慢、细胞周期停滞于G0/G1期,并能增高凋亡率增加。

贲门癌组织乙酰肝素酶和YY1蛋白表达及其与预后的关系

目的研究乙酰肝素酶(HPA)和YY1蛋白(YY1)在贲门癌组织中表达特征及其与患者预后的关系。方法采用组织病理学和免疫组织化学(ABC)法检测HPA和YY1蛋白在45例贲门癌组织中的表达,所有贲门癌组织均来自林州市中心医院,并对患者随访5a以上。结果 45例贲门癌组织HPA阳性表达率为56%(25/45),YY1阳性表达率为22%(10/45);HPA表达阳性和阴性组食管癌患者的平均生存时间及95%的可信区间分别为44(35,52)mon和60(56,64)mon,HPA表达阳性患者生存期显著小于阴性表达者(P<0.05);YY1蛋白表达阳性和阴性组患者的平均生存时间及95%的可信区间为54(43,66)mon和50(44,57)mon,YY1蛋白表达阳性患者生存期大于阴性表达者,但无明显统计学意义(P>0.05);多因素Cox模型逐步回归分析结果显示淋巴结转移对患者的影响最大。结论 HPA和YY1阳性表达对患者生存期有一定的影响,但不是贲门癌独立的预后指标,淋巴结转移是贲门癌独立的预后指标。

miR-29c对脑胶质瘤U251细胞生物学活性的影响

目的探讨miR-29c对脑胶质瘤U251细胞生物学活性的影响及可能机制。方法体外培养胶质瘤U251细胞,实验组将miR-29c mimics转染至细胞,miR mimics转染作为对照组。应用实时荧光定量PCR检测转染后miR-29c表达量的改变,MTT实验测定细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡情况,体外侵袭实验分析miR-29c转染后细胞的体外侵袭能力,Westernblot检测转染后转录因子YY1蛋白的表达。结果荧光定量PCR结果显示:实验组miR-29c表达量为(106.65±15.51),较对照组显著上调(P<0.01)。与对照组比较,实验组U251细胞的增殖能力明显降低(P<0.01),凋亡率增加(P<0.05),体外侵袭能力明显减弱(P<0.01),YY1蛋白表达下调(P<0.01)。结论 miR-29c可能通过调控YY1蛋白的表达抑制胶质瘤细胞的生物活性。

直肠癌病人肿瘤组织中RYBP的表达与疾病及预后的关联

目的:检测RYBP(ring1 and YY1 binding protein)在直肠癌的表达,分析与直肠癌的相关性。方法:用免疫组织化学方法检测107例直肠癌病人标本RYBP的表达,分析RYBP表达程度与直肠癌肿瘤体积、TNM分期及预后等的相关性。结果:107例标本中有45例RYBP低表达,62例RYBP高表达;肿瘤体积和RYBP的表达无相关性。RYBP表达程度高的病人TNM分期相对较早,有统计学意义。RYBP低表达病人的累积生存时间显著低于RYBP高表达病人,有统计学差异。结论:RYBP的表达程度与直肠癌的预后有关,可在直肠癌的诊断及预后评估中作为参考指标。

YY1蛋白对HPV16启动子P97的抑制效应依赖于上游的增强子序列

目的 观测位于HPV16LCR序列YY1结合位点上游的组织特异性增强子序列对YY1蛋白的启动子P97抑制作用的影响。方法 构建带有不同长度的HPV16野生株、启动子远端YY1位点突变株、启动子近端YY1位点突变株的 5′端LCR缺损序列的荧光素酶报导质粒 ,以及不同长度的近端YY1/SP1重叠结合位点基因工程突变LCR的荧光素酶报导质粒 ;将各种质粒转染到人类子宫颈癌细胞系C33A中 ,检测在不同LCR序列的控制下对病毒启动子P97的活性的影响。结果 去除上游增强子序列后 ,远端YY1位点突变的P97激活作用完全消失 ,近端YY1位点突变的P97激活作用部分丧失。不同长度的近端YY1/SP1重叠位点基因工程突变LCR对P97活性的影响不受上游启动子序列的控制。