病证结合骨质疏松模型大鼠骨骼的生物力学性能分析

背景:肾虚是骨质疏松症的最主要病机,对肾阳虚、肾阴虚与骨质疏松的关系研究有利于病证结合临床诊疗模式的发展。目的:评价右归丸对肾阳虚、肾阴虚大鼠股骨生物力学性能的影响差异,从生物力学角度论证骨质疏松症病证结合、因证施药的科学性。方法:手术摘除60只雌性SD大鼠双侧卵巢建立骨质疏松模型,10周后将大鼠随机分为肾阴虚组(n=30)和肾阳虚组(n=30),肾阳虚组臀部肌肉注射氢化可的松注射液,肾阴虚组灌胃甲状腺片混悬药液,1次/d,连续14 d。造模结束后,每组取20只灌胃右归丸混悬液,1次/d,连续12周,剩余10只作为对照不灌胃。灌胃结束后使用Micro-CT扫描测量股骨微结构参数,在力学试验机上对股骨分别进行三点弯曲、有限元仿真、股骨头压缩及表面压痕分布实验。结果与结论:①Micro-CT扫描显示,与肾阴虚组比较,肾阴虚+右归丸组股骨骨密度、骨体积分数、骨表面密度、骨小梁数量、骨小梁分离度升高(P<0.05);与肾阳虚组比较,肾阳虚+右归丸组股骨骨体积分数、骨表面密度、骨小梁数量及骨小梁厚度升高(P<0.05);②三点弯曲实验显示,与肾阳虚组相比,肾阳虚+右归丸组股骨弹性模量、最大抗弯强度和弯曲断裂强度均降低(P<0.05),韧性提高(P<0.05);③有限元仿真显示,右归丸能显著提高肾阳虚组大鼠股骨抗骨折能力,对肾阴虚组大鼠不产生明显作用;股骨头压缩实验显示,右归丸可增强肾阳虚组大鼠股骨头抵抗形变的能力,但右归丸对肾阴虚组和肾阳虚组大鼠股骨头表面性能的影响无显著区别;④结果表明,右归丸可增强肾阳虚骨质疏松骨骼生物力学性能,但对肾阴虚骨质疏松骨骼无显著影响。

右归饮对皮质酮大鼠下丘脑单胺类递质含量以及体重饮食摄水的影响

本研究观察大鼠在每日注射皮质酮（１０ｍｇ／ｋｇ皮下注射共１４天）状态下，下丘脑单胺类递质含量、每日体重、饮食、摄水的变化，以及右归饮对这些变化的影响。结果表明：皮质酮大鼠下丘脑去甲肾上腺素、３，４二羟基苯乙酸、多巴胺、５－羟基吲哚乙酸、５－羟色胺等单胺类递质含量明显升高，体重增长严重受抑，每日饮食与摄水量显著减少；加用右归饮（１０ｇ／ｋｇ灌胃共１４天）后能有效改善皮质酮大鼠的上述各项指标。提示：外源性糖皮质激素在抑制下丘脑—垂体—肾上腺轴（ＨＰＡ）时可能激活中枢单胶类递质的合成与代谢和抑制体重增长，减少每日饮食摄水量；右归饮在改善皮质酮大鼠ＨＰＡ轴抑制程度的同时，抑制其中枢单胺类递质的激活，保护下丘脑对饮食摄水的正常调节。

右归饮对肾阳虚大鼠下丘脑正中隆起室管膜细胞的影响

目的 :探讨肾阳虚证的本质及补肾中药右归饮的作用机理。方法 :以大剂量醋酸可的松造成大鼠肾阳虚模型 ,取其下丘脑进行扫描电镜观察。结果 :1 .肾阳虚大鼠下丘脑正中隆起室管膜细胞超微结构发生改变 ,细胞出现孔洞。2 .右归饮能够逆转肾阳虚所致下丘脑正中隆起室管膜细胞超微结构的改变。结论 :肾阳虚大鼠下丘脑正中隆起室管膜细胞存在着超微结构的改变和损伤 ,右归饮对这种超微结构的改变和损伤具有逆转作用 ,说明肾阳虚证与下丘脑正中隆起室管膜细胞的结构和功能改变密切相关。

补肾、活血、祛痰法对激素性股骨头坏死模型血液流变学的影响

目的观察补肾、活血、祛痰三种中医治法对激素性股骨头坏死模型兔血液流变学的影响。方法在运用改良Matsui方法成功制备兔激素性股骨头坏死模型后,108只白兔随机分为正常对照组、模型对照组、通络生骨组、补肾组、活血组、祛痰组共6组,每组18只,通络生骨组、补肾组、活血组、祛痰组分别给予通络生骨胶囊、右归饮、桃红四物汤和苓桂术甘汤灌胃,其余各组则灌服同容量生理盐水。在实验第2周,第4周,第8周分别抽血检查血液流变学指标。结果与正常对照组比较,模型对照组第2、4、8周血液流变学指标均维持在较高水平(P<0.01)。在第2周时,通络生骨组、活血组、祛痰组与模型对照组比较,均得到下降(P<0.05),其中又以通络生骨组、活血组改善更明显,该两组在实验第8周时恢复至正常白兔水平(P>0.05)。补肾组在实验第2周时较模型对照组改善不明显(P>0.05),至第4周时才有明显改善(P<0.05)。结论桃红四物汤较右归饮、苓桂术甘汤能迅速改善激素性股骨头坏死血液流变学指标,右归饮、苓桂术甘汤对血液流变学指标的改善作用可能与其它途径相关,提示补肾、活血、祛痰三种中医治法治疗激素性股骨头坏死的作用机制可能不同。

右归饮对家兔激素性股骨头坏死骨髓脂肪化的影响

为观察右归饮对激素性股骨头坏死骨髓脂肪化的影响,探讨其防治作用机理。采用醋酸氢化泼尼松臀肌注射造模,设模型组、治疗组和正常组,应用PAS-8000病理图象分析系统分别测定各组髓腔内脂肪细胞面积,并观察股骨头局部病理形态改变、计数骨陷窝空虚率。结果显示,与正常组比较,模型组髓腔内脂肪细胞面积显著增大(P<0.01),骨陷窝空虚率显著增高(P<0.01)。与模型组比较,治疗组髓腔内脂肪细胞面积明显减少(P<0.01),骨陷窝空虚率明显降低(P<0.01)。表明右归饮可抑制股骨头髓腔内骨髓脂肪化,认为这可能是右归饮通过拮抗激素诱导骨髓基质细胞成脂分化同时促进成骨修复达到防治激素性股骨头坏死作用的机理。

四君子汤和右归饮对衰老大鼠学习记忆能力及自由基水平的影响

目的观察比较四君子汤、右归饮对衰老模型大鼠学习记忆能力和脑组织中自由基的影响。方法以D-半乳糖腹腔注射致亚急性衰老动物模型,观察大鼠水迷宫游泳到达出口的时间及错误次数及脑组织中SOD、MDA、NO、NOS等有关自由基指标。结果四君子汤可缩短衰老模型大鼠水迷宫游泳到达出口的时间;右归饮可升高衰老模型大鼠脑组织SOD水平,降低MDA水平,四君子汤可降低衰老模型大鼠脑组织中NO、NOS水平。结论四君子汤可改善D-半乳糖致衰老模型大鼠空间学习记忆能力,具有增强记忆的功能;右归饮能减轻模型大鼠脑组织自由基对机体的损伤,具有良好的抗自由基作用。

基于粗糙集理论及均匀设计拆方的右归饮配伍规律研究

目的利用粗糙集的方法评价右归饮的疗效,探究其中补阴药、补阳药和边缘药的相互作用及地位,进而改进右归饮的配伍。方法将右归饮按照补阴药、补阳药和边缘药3个因素进行均匀设计拆方,把大鼠分为:正常组、肾阳虚模型组、右归饮原方组以及右归饮均匀设计的药方组5组,共8组。分别检测其T4、CORT和T。建立基于粗糙集的决策规则模型,通过决策规则分析补阴药、补阳药和边缘药三者之间的相互作用。结果右归饮中补阴药和补阳药之间具有协同作用;同时右归饮的边缘药对补阴药有促进作用;当右归饮的补阳药药量较小时,边缘药对其有促进作用,当补阳药药量较大时边缘药对补阳药有拮抗作用。结论右归饮的配伍应注重阴阳并补、阴阳互济,补阴补阳同样重要。

皮质酮大鼠神经干细胞增殖分化的变化

目的 观察皮质酮 (corticosterone ,CORT)大鼠神经干细胞增殖分化的变化 ,探讨肾阳虚证与CORT大鼠神经干细胞增殖分化的联系。方法 成年雄性SD大鼠连续 14d皮下注射CORT ( 10mg·kg- 1 ·d- 1 ) ,采用免疫单标和双标方法检测成体大鼠神经干细胞及分化的功能细胞。给予CORT大鼠右归饮水煎剂灌胃 ,观察CORT大鼠神经干细胞增殖分化的变化。结果 与正常对照组相比 ,CORT大鼠大脑皮层、海马及下丘脑区BrdU阳性细胞数明显减少 ,BrdU +NF2 0 0 ,BrdU+NeuroD ,BrdU +GFAP免疫荧光双标细胞数也显著减少 (P <0 .0 1)。给予右归饮后CORT大鼠BrdU阳性细胞以及免疫荧光双标细胞数明显增加 (P <0 .0 1)。结论 CORT大鼠神经干细胞增殖分化能力显著下降 。

炙甘草汤对脐静脉内皮细胞分泌转化生长因子与G-CSF的影响

目的研究炙甘草汤对转化生长因子(TGF-β1)与G-CSF分泌的影响。方法选取炙甘草汤与右归饮2个方剂,脐静脉内皮细胞设空白对照组、炙甘草汤组、右归饮组及混合组,每组分别加入相应中药液,于培养第3,6,9天收集细胞培养上清液,ELISA检测上清液中TGF-β1与G-CSF的分泌水平。结果 TGF-β1分泌水平:给药组均明显刺激脐静脉内皮细胞产生TGF-β1,与空白对照组相比差异有统计学意义(P<0.001)。实验初期(第3,6天)炙甘草汤刺激效果较强,实验后期(第9天)混合给药组表现出更好的刺激效果。G-CSF分泌水平:给药组均明显刺激脐静脉内皮细胞产生G-CSF,与空白对照组相比,P<0.001。混合给药组刺激效果最明显,其次为炙甘草汤组。给药后细胞因子分泌均随时间延长而增加。结论炙甘草汤能增强细胞TGF-β1与G-CSF的分泌,当有右归饮辅助时这种效应更加明显,其刺激增强作用有时间累积效应,随时间延长TGF-β1与G-CSF的分泌增多。

右归饮合炙甘草汤对21例Shy-Drager综合征血压的影响

目的：探讨右归饮合炙甘草汤对ＳＤＳ直立性低血压的治疗作用。方法：２１例ＳＤＳ口服右归饮合炙甘草汤４周，观察治疗前后卧立位血压变化及头晕、晕厥等症候的改善情况。结果：治疗前后卧立位血压差明显改善（Ｐ＜０．０１），头晕减轻，晕厥消失。结论：右归饮合炙甘草汤对ＳＤＳ直立性低血压及头晕。

右归饮对中晚期男性广西肝癌细胞P53基因表达影响

目的:观察右归饮对中晚期男性广西肝癌细胞P53基因表达的影响,探讨广西肝癌的肾虚机制。方法:选择经CT或MRI、AFP和肝穿病理确诊的男性中晚期广西肝癌50例,随机分为右归饮组和左归饮组各25例,分别口服右归饮、左归饮合剂50 m L,每日3次,连续10个月,比较两组治疗前后主要临床症状及P53基因表达的变化。结果:右归饮组主要临床症状明显改善、肝癌细胞P53基因表达水平显著下降,与本组治疗前比较P<0.01,与左归饮组治疗后比较P<0.01。结论:右归饮对中晚期男性广西肝癌细胞P53基因的表达具有抑制作用,突变型P53基因(mt P53)过度表达是广西肝癌肾阳虚的机制之一。

从“阴中求阳”角度探讨右归丸治疗肾阳虚证的临床疗效

【目的】观察右归丸及其拆方治疗肾阳虚证的临床疗效。【方法】采用随机对照方法,将60例肾阳虚证患者随机分为右归丸治疗组及其拆方温肾阳对照组各30例。治疗组给予右归丸治疗,对照组给予右归丸中的温肾阳中药复方治疗,2组均以4周为1个疗程,连续用药2个疗程,观察2组临床疗效,以及治疗前后症状积分和外周血白细胞、血清抗体、补体等指标的变化情况。【结果】在临床疗效及症状积分、外周血白细胞的改善方面,治疗组均优于对照组(P<0.05或P<0.01),在血清抗体、补体的改变方面2组作用差异无统计学意义(P>0.05)。【结论】右归丸治疗组在治疗肾阳虚证方面优于其单纯温肾阳中药复方对照组,提示"阴中求阳"法优于单纯温肾阳治疗。

右归饮合炙甘草汤对21例Shy-Drager综合症血压的影响

目的 探讨右归饮合炙甘草汤对SDS直立性低血压的治疗作用。方法 21例SDS口服右归饮合炙甘草汤4周,观察治疗前后卧—立位血压变化及头晕、晕厥等症候的改变情况。结果治疗前后卧—立位血压差明显改善(P<0.01),头晕减轻,晕厥消失。结论 右归饮合炙甘草汤对SDS直立性低血压及头晕、晕厥有显著治疗作用。

右归饮治疗激素性股骨头坏死作用机制的网络药理学分析

背景:目前细胞实验、动物实验以及临床试验都发现,右归饮可以对激素性股骨头坏死起到积极作用,但并未阐述右归饮具体的药理作用机制。目的:基于网络药理学原理探讨右归饮治疗激素性股骨头坏死的作用机制,为右归饮治疗激素性股骨头坏死的临床应用提供理论依据。方法:利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP),以口服生物利用度与类药性为限定条件,检索右归饮中制附子、肉桂、熟地黄、山茱萸、炒山药、枸杞子这6味中药的主要有效成分并预测关键靶基因;借助OMIM及GeneCards数据库搜索激素性股骨头坏死相关靶基因,通过R语言得到右归饮和激素性股骨头坏死的交集靶基因,绘制韦恩图;利用Cytoscape 3.6.1软件绘制“成分-疾病-靶点”的中药调控网络,然后借助STRING平台建立PPI网络,最后通过R语言和Bioconductor平台对交集基因进行GO富集分析和KEGG通路分析。结果与结论:①右归饮中发挥治疗激素性股骨头坏死作用的主要有效成分有quercetin、glycitein、diosgenin、Karanjin、Stigmasterol等43个;关键靶基因102个,包括ESR1、AKT1、NCOA1、PTGS1、JUN等;GO富集分析得到137个分子功能、2119个生物过程以及41个细胞组成;KEGG通路分析得到153条信号通路;②右归饮可能主要通过调节类固醇激素受体、磷酸酶结合等分子功能,参与活性氧代谢过程、对类固醇激素的反应等生物过程,影响膜筏、RNA聚合酶II转录因子复合物等细胞组成,借助内分泌抵抗等信号通路,发挥抗骨质疏松、抗炎等作用,从而达到治疗激素性股骨头坏死的效果。

右归饮、鹿马片对激素诱导的兔股骨头坏死血浆雌二醇、睾酮的影响及疗效观察

探讨性激素雌二醇 (E2 )、睾酮 (T)在激素诱导的兔股骨头坏死中的作用 ,并评价补肾植物药 (右归饮 )、动物药 (鹿马片 )对激素诱导的兔股骨头坏死的防治效果。用外源性糖皮质激素诱导的家兔股骨头坏死的动物模型 ,动态观察血浆中 E2 、T含量的变化 ,同时观察助肾阳的动、植物药对其的防治效果。结果显示激素诱导的兔股骨头坏死模型组 E2 、T含量明显降低 ,右归饮能拮抗E2 的降低 ,不能拮抗 T的降低。鹿马片能拮抗 E2 、T的降低 ,使之恢复平衡 ,而且其升高幅度比右归饮明显 ,两者比较有差异。病理观察结果表明 ,鹿马片的防治效果优于右归饮。说明 E2 、T分泌不足在骨坏死中可能起重要作用。温补肾阳的中药能够预防激素性股骨头坏死 ,且动物药疗效好于植物药。

加减右归饮对膝骨性关节炎大鼠膝关节软骨退变的影响

【目的】探讨加减右归饮对膝骨性关节炎模型大鼠膝关节软骨退变的影响。【方法】将120只SD雄性大鼠随机分成假手术组、模型组、加减右归饮组及阳性对照组,每组30只。采用Hulth法将模型组、加减右归饮组及阳性对照组大鼠构建成膝骨性关节炎大鼠模型,假手术组仅打开关节腔。成功造模后,加减右归饮组给予加减右归饮灌胃,阳性对照组给予双醋瑞因(溶于蒸馏水)灌胃,假手术组、模型组给予等量蒸馏水灌胃。给药6周。给药结束后,观察大鼠膝关节影像学表现、血流变学改变、关节液肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平、膝关节苏木素-伊红(HE)染色病理学改变及Mankin’s评分。【结果】模型组大鼠影像学可见膝关节退行性改变,全血高切黏度、TNF-α水平均较假手术组明显升高(P<0.01)。加减右归饮组与阳性对照组影像学的膝关节退行性程度、全血高切黏度、TNF-α水平均低于模型组(P<0.01),但仍高于假手术组(P<0.01),而2个治疗组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。【结论】加减右归饮可减轻膝骨性关节炎模型大鼠膝关节软骨退变。

右归丸及其拆方对肾阳虚大鼠血清T、LH和CORT的影响

目的探讨右归丸及其拆方对肾阳虚大鼠血清中睾酮(testosterone,T)、促黄体生成素(luteinizing hormone,LH)和皮质醇(cortisol,CORT)的影响。方法取3月龄SPF级雄性SD大鼠50只,随机分成正常对照组、模型组、补阴药组、补阳药组、全方组,除正常对照组外,其他组均采用后肢肌内注射氢化可的松建立肾阳虚动物模型。造模成功后,补阴药组、补阳药组、全方组分别给予相应药物连续灌胃14 d,正常对照组与模型组给予等容量的生理盐水灌胃,停药后第2天,经麻醉后断头处死,心脏取血获得血清,摘除双侧睾丸。记录大鼠体质量及睾丸质量,并计算睾丸指数;用ELISA法测定血清中T、LH和CORT含量。结果模型组大鼠较正常对照组大鼠体质量、睾丸指数及血清T、LH、CORT含量均降低(P<0.05);治疗组中全方组较模型组大鼠大鼠体质量、睾丸指数及血清T、LH、CORT含量明显提升(P<0.05),补阴药组相对补阳药组增加大鼠体质量及血清LH含量(P<0.05),补阳药组相对补阴药提升睾丸指数及血清T含量作用较强(P<0.05);补阴组和补阳组对血清CORT含量均无明显作用(P>0.05)。结论右归丸全方可对肾阳虚证大鼠体质量、睾丸指数、血清中的T、LH和CORT表达水平产生良性影响,右归丸方中的补阴药在提升肾阳虚大鼠体质量和增加血清中LH的含量方面调控作用较好,补阳药在增加血清中T的含量和提高睾丸指数方面调控作用较好,补阴药和补阳药对血清中CORT表达水平的调控均无明显作用。

右归饮联合盐酸雷洛昔芬对骨质疏松症小鼠骨形成、骨密度影响的研究

目的:探究右归饮联合盐酸雷洛昔芬对骨质疏松症小鼠骨形成、骨密度的影响。方法:选取40只C57BL/6品系雌性小鼠,切除卵巢构建骨质疏松症模型,饲养12周,分为假手术组、模型组、雷洛昔芬组及联合组。其中假手术组和模型组均用0.5 mL0.9%氯化钠溶液灌胃,雷洛昔芬组用5 mg/kg盐酸雷洛昔芬治疗,联合组用0.2 m L右归饮+5 mg/kg盐酸雷洛昔芬治疗。连续给药6周后眼球取血,检测血清骨钙素(Osteocalcin,OC)、I型胶原氨基端延长肽(Procollagen I N-terminal Propeptide,PINP)、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrate-resistant acid phosphatase,TRACP)等骨代谢指标水平。处死小鼠,测定骨密度,Micro-CT检测骨体积分数(Bone volume/total volume,BV/TV)、骨表面积/骨体积(Bone surface/bone volum,BS/BV)、骨小梁分离度(Trabecular separation/spacing,Tb.Sp)、骨小梁平均厚度(Trabecular thickness,Tb.Th)等骨组织形态指标。胫骨组织HE染色,观察骨组织形态损伤情况。结果:与假手术组比较,模型组小鼠骨密度、BV/TV、Tb.Th、PINP降低,差异均有统计学意义(P <0.05),BS/BV、Tb.Sp、OC、ALP、TRACP升高,差异均有统计学意义(P <0.05);与模型组比较,雷洛昔芬组、联合组骨密度、BV/TV、Tb.Th、PINP升高,差异均有统计学意义(P <0.05),BS/BV、Tb.Sp、OC、ALP、TRACP降低,差异均有统计学意义(P <0.05);与雷洛昔芬组比较,联合组骨密度、BV/TV、Tb.Th、PINP升高,差异均有统计学意义(P <0.05),BS/BV、Tb.Sp、OC、ALP、TRACP降低,差异均有统计学意义(P <0.05)。结论:右归饮联合盐酸雷洛昔芬治疗骨质疏松症比单用盐酸雷洛昔芬能更显著地抑制骨丢失,改善骨代谢,促进骨形成,达到增加骨密度的治疗效果。

右归饮治疗骨伤科疾病临床研究进展

右归饮具有温补肾阳的功效,是治疗肾阳不足、命门火衰的经典方,近年来被广泛地应用于骨伤科疾病的治疗。笔者就右归饮在股骨头坏死、骨质疏松症、关节炎、腰椎间盘突出症、强直性脊柱炎等骨科疾病治疗中的应用进行概述,为右归饮在骨伤科的临床应用提供依据。

右归饮结合整脊治疗肾阳虚型腰椎间盘突出症的疗效观察

目的:观察右归饮结合整脊治疗肾阳虚型腰椎间突出症的疗效。方法:将符合诊断标准的80例患者随机分成治疗组与对照组,治疗组采用右归饮结合整脊治疗,对照组单独采用右归饮治疗,运用JOA评分进行治疗前后的疗效评价,并参考《中医病证诊断疗效标准》进行临床疗效评估,比较两组治疗方案的有效率。结果:治疗组的改善指数高于对照组(P<0.05),且临床有效率高于对照组。结论:右归饮结合整脊治疗肾阳虚型腰椎间盘突出症的疗效明确。