小鼠ZBTB9基因的克隆、亚细胞定位及原核表达

应用RT-PCR扩增技术从小鼠肺组织中成功克隆锌指蛋白ZBTB9基因;该基因含有1 380bp的开放阅读框(ORF),编码459个氨基酸。为研究其生物学功能,构建pEGFP-C1/ZBTB9融合载体转染细胞,亚细胞定位显示ZBTB9定位于细胞核且呈斑点状分布。构建原核表达载体pGEX-4T-1/ZBTB9,转入大肠杆菌BL21(DE3Lysis)中,IPTG诱导融合蛋白表达。重组蛋白经SDS-PAGE鉴定后进行纯化。结果表明:成功地纯化了ZBTB9的融合蛋白。ZBTB9基因的成功克隆及表达,为进一步深入研究ZBTB9的生物学功能奠定基础。