MMP-9和TIMP-1在胃癌组织中的表达失衡及其与ZHX2的相关性

目的:探讨胃癌中MMP-9和TIMP-1蛋白表达与ZHX2蛋白表达的关系,并分析其与胃癌患者临床病理特征的相关性及其临床意义.方法:应用免疫组织化学Envision二步法检测62例胃癌组织及癌旁正常胃组织中MMP-9、TIMP-1及ZHX2蛋白的表达.用SPSS13.0统计软件分析MMP-9和TIMP-1蛋白表达与ZHX2蛋白表达的相关性,并分析其与患者的临床病理特征的关系.结果:MMP-9蛋白在62例胃癌组织及癌旁正常胃组织中阳性表达率分别为66.13%(41/62)和29.03%(18/62)(P<0.01),TIMP-1蛋白在胃癌组织及癌旁正常胃组织中阳性表达率分别为41.94%(26/62)和74.19%(46/62)(P<0.01).MMP-9蛋白表达在ZHX2阳性和阴性表达组中的阳性率分别为:84.44%(38/45)和17.65%(3/17)(P<0.05),与患者的年龄、性别、肿瘤大小、发生部位、大体类型、分化程度、淋巴结转移、远处转移、TNM分期均无关(P>0.05),而与肿瘤的浸润深度有关(P<0.05);TIMP-1蛋白表达在ZHX2阳性和阴性组中阳性率分别为:28.89%(13/45)和76.47%(13/17)(P<0.05),与患者的年龄、性别、肿瘤大小、发生部位、大体类型、分化程度、浸润深度、淋巴结转移、远处转移、TNM分期均无关(P>0.05).结论:MMP-9高表达可以作为评估胃癌恶性生物学行为及预后的指标,MMP-9/TIMP-1表达失衡与ZHX2表达相关,MMP-9和TIMP-1可为临床选择化疗药物提供参考依据.

结直肠癌中ZHX2蛋白表达的检测及其临床病理意义

目的检测结直肠癌中ZHX2蛋白的表达情况,探讨ZHX2与结直肠癌的关系。方法利用免疫组化法分别检测73例结直肠癌组织及其对应的癌旁正常组织中的ZHX2蛋白的表达情况。结果 73例结直肠癌组织中ZHX2蛋白的阳性率为82.2%(60/73),癌旁正常组织中ZHX2蛋白的阳性率为94.5%(69/73),差异具有统计学意义(P<0.05)。在结直肠癌组织中,ZHX2蛋白的阳性表达与肿瘤的发生部位及分化程度有关(P<0.05),与性别、年龄、肿瘤大小、浸润深度、淋巴结转移及Dukes分期无关(P>0.05)。ZHX2(+)组患者的生存时间长于ZHX2(-)组(P<0.05)。结论 ZHX2作为一种转录抑制因子,可能参与结直肠癌的发生与演进,并有助于患者预后的判断。

转录抑制因子ZHX2在胃癌组织中的表达及临床意义

目的:研究ZHX2基因在胃癌组织与癌旁正常胃组织中的表达差异及其与患者临床病理特征的相关性.方法:应用免疫组织化学Envision二步法检测62例胃癌组织与62例癌旁正常胃组织中ZHX2蛋白的表达,用SPSS13.0统计软件对ZHX2蛋白表达差异与患者的临床病理特征之间的相关性进行统计学分析.结果:ZHX2蛋白在62例胃癌组织中阳性表达(n=45),阴性表达(n=17),阳性表达率72.58%;癌旁正常组织阳性表达(n=9),阴性表达(n=53),阳性表达率14.52%,组间比较有明显统计学差异(P<0.001).在62例胃癌组织中,ZHX2蛋白表达与患者的年龄、性别、肿瘤大小、大体类型、分化程度、淋巴结转移、远处转移、TNM分期均无关(P>0.05),而与肿瘤的发生部位、浸润深度有关(P<0.05).结论:ZHX2蛋白在胃癌组织中的表达明显高于癌旁正常组织中的表达,且该蛋白在胃癌的起源及预后判断中起着重要作用.

肝细胞癌中ZHX2、NF-YA及AFP表达的相关关系

目的检测肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中ZHX2、NF-YA及AFP mRNA和蛋白表达的相关关系。方法采用RT-PCR及免疫组织化学方法检测HCC组织中ZHX2、NF-YA及AFP mRNA和蛋白的表达情况。结果 ZHX2 mRNA在AFP mRNA阴性的25例HCC组织中的表达率为52.0%,明显高于AFP mRNA阳性组织中的表达率(26.3%,P=0.038),ZHX2 mRNA与AFP mRNA表达呈负相关(OR=0.33);NF-YA mRNA与ZHX2 mRNA表达呈正相关(OR=31.429),而与AFPmRNA表达呈负相关关系(OR=0.308)。AFP蛋白阴性的142例HCC组织中,ZHX2蛋白的表达率为23.9%,明显高于在AFP蛋白阳性组织中的表达率(12.8%,P=0.034);HCC组织中ZHX2蛋白与AFP蛋白表达呈负相关(P=0.018,r=-0.153)。NF-YA蛋白在HCC组织中与ZHX2蛋白表达呈正相关(P=0.000,r=0.371),与AFP蛋白表达呈负相关(P=0.000,r=-0.497)。结论联合检测AFP和ZHX2蛋白将提高HCC的诊断率;ZHX2可能是通过NF-YA来调控AFP的表达。

小鼠肝大部切除后肝再生组织中c-myc、ZHX2及AFP基因表达的变化

目的:利用小鼠肝大部切除后肝再生动物模型,测定c-myc、ZHX2、AFP基因在肝再生过程不同阶段的表达,研究肝脏再生的细胞和分子生物学机制及病理学意义。方法:利用分叶顺次肝大部切除技术,建立小鼠肝再生动物模型,在不同的时间节点,运用荧光定量PCR手段,检测再生肝脏组织中c-myc、ZHX2、AFP激活后的表达特征。结果:在肝再生的启动阶段,c-myc表达上调。在随后的肝脏再生的持续增殖阶段,ZHX2的表达首先下调,然后再恢复到正常水平。AFP的表达为持续上调。结论:c-myc、ZHX2、AFP基因在肝脏再生不同阶段的依次激活、不同表达趋势的内在联系,初步揭示了彼此之间协同作用的可能及潜在的信号转导途径。

肝细胞癌中ZHX2蛋白表达的检测

目的检测肝细胞癌中ZHX2蛋白表达的情况。方法采用组织芯片及免疫组织化学方法检测正常肝组织、肝硬化组织、肝细胞癌(HCC)组织及癌旁非肿瘤组织中ZHX2蛋白的表达情况。结果在正常肝组织、肝硬化组织及癌旁非肿瘤组织中均未检测到ZHX2蛋白的表达,在HCC组织中ZHX2蛋白的表达率为19.5%。ZHX2蛋白在Ⅲ～Ⅳ级HCC组织中的表达率为31.3%,明显高于Ⅰ～Ⅱ级组织中的表达率(16.5%)。HCC组织中ZHX2蛋白的表达与术前血清AFP呈负相关。结论ZHX2有可能成为诊断HCC的新的标记物,它的检测有助于血清AFP≤20μg/LHCC的诊断。在人类HCC中可能存在着ZHX2对血清AFP的负调控。

转录抑制因子ZHX2功能片段原核表达载体的构建及表达

目的从人正常组织中克隆人转录抑制因子ZHX2功能片段,构建其原核表达载体,并在大肠杆菌中进行表达,纯化获得蛋白,用于下一步探讨ZHX2基因的功能。方法根据GenBank中ZHX2功能片段已知序列设计引物,从正常人组织中通过RT-PCR方法扩增ZHX2基因功能片段,克隆到原核表达载体pET28a(+)中,转化Ecoli.BL21(DE3)I,PTG诱导表达,采用镍柱亲和层析法纯化目的蛋白。结果测序结果显示克隆的ZHX2基因序列正确,SDS-PAGE鉴定表达产物分子量正确,Western-blot鉴定结果显示表达产物为人ZHX2功能片段特异性蛋白。结论本研究成功构建了含有ZHX2功能片段的原核融合表达载体,并实现了ZHX2功能片段的表达,获得了纯化的蛋白,为进一步研究ZHX2基因的功能奠定了基础。

ZHX2的研究进展

新型转录抑制因子ZHX2(zinc-fingers and homeoboxes 2,ZHX2)属于锌指和同源框(zinc-fingers and homeoboxes,ZHX)家族,广泛存在于各种组织细胞核内,发挥转录抑制作用。ZHX2与多发性骨髓瘤(multiple mye-loma,MM)和肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的发生发展密切相关。此外,ZHX2对肾脏疾病发展过程中基因表达的转录调控有重要作用。ZHX2亦参与大脑皮层发育过程中神经前体细胞维持的调控。

肝细胞癌中ZHX2 mRNA的表达及其临床意义的研究

目的探讨转录抑制因子ZHX2(zinc-fingers and homeoboxes 2,ZHX2)在肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)中的表达及其与转移的关系。方法通过RT-PCR方法,检测35例HCC癌组织及相应癌旁组织和8例正常肝组织中ZHX2 mRNA的表达,并分析其与临床病理参数的关系。结果 HCC癌组织中ZHX2 mRNA的表达率明显低于癌旁组织与正常肝组织(P<0.05)。术中发现伴随转移的HCC癌组织中ZHX2 mRNA的阳性表达率明显低于无转移的HCC(P<0.05)。ZHX2 mRNA的表达与血清甲胎蛋白(alphafetoprotein,AFP)水平呈负相关(P<0.05),而与年龄、性别、HBsAg感染、肿瘤直径、分化程度、是否伴随肝硬化无明显关系。结论 ZHX2低表达与HCC转移密切相关,并与AFP的高表达有关。

肝癌组织中ZHX2基因启动子甲基化及其与临床病理特征的关系

目的运用变性高效液相色谱(Denature High-Performance Liquid Chromatography,DHPLC)法检测原发性肝癌细胞中ZHX2基因启动子甲基化的情况,为进一步探讨其与原发性肝细胞癌(HCC)临床病理特征之间的关系奠定基础。方法采用亚硫酸氢钠-DHPLC技术,以体外甲基化的DNA和人类胎盘DNA分别为甲基化和非甲基化对照,建立ZHX2基因启动子甲基化DHPLC分析方法。在55℃部分变性条件下,对ZHX2基因启动子重要区域甲基化水平进行检测,并对24例HCC癌组织及癌旁肝组织和6例正常肝组织标本进行检测。结果建立了ZHX2基因启动子甲基化DHPLC分析方法,使用该方法检测结果显示正常肝组织未检测到甲基化,24例HCC癌组织中有11例存在甲基化(45.8%),而24例HCC癌旁组织中有3例(16.6%)存在甲基化。结论本研究建立了ZHX2基因启动子甲基化DHPLC分析方法,并首次将其应用于肝癌组织标本的检测,为深入探讨ZHX2基因与HCC发生发展之间关系奠定了基础。

ZHX2-GST融合蛋白原核表达载体的构建和鉴定

目的:构建编码ZHX2-GST融合基因的原核表达载体,在大肠杆菌中表达并对融合蛋白(ZHX2-GST)进行鉴定。方法:RT-PCR提取正常肝组织的RNA,然后扩增出ZHX2基因cDNA全长,克隆至含有GST标签的原核表达载体PGEX-4-1中,转化到Ecoli.BL21(DE3),IPTG诱导大肠杆菌表达ZHX2-GST蛋白,电泳分离鉴定。结果:测序结果显示克隆的ZHX2cDNA序列正确,SDS-PAGE鉴定表达产物分子量118ku,与ZHX2-GST分子量相符。结论:成功构建了编码ZHX2基因的ZHX2-GST原核表达载体,融合蛋白可用于临床及实验研究。

ZHX2基因与肝细胞癌关系的研究进展

转录抑制因子（zinc-fingers and homeoboxes 2,ZHX2）属于人类同源框（zinc fingers and homeoboxes,ZHX）蛋白家族成员之一,位于染色体8q24.13,编码的蛋白含有837个氨基酸残基,广泛定位于各种组织细胞核内,通过与核因子-YA（nuclear factor YA,NF-YA）结合,调节其下游基因表达,发挥转录抑制作用[1]。

ZHX2蛋白在结直肠癌中的表达及其临床病理意义

目的检测ZHX2蛋白在结直肠癌中的表达情况,分析其临床病理意义。方法收集从2013年1月~2016年12月在江门市五邑中医院手术的结直肠癌标本67例,用免疫组化法对癌组织及癌旁组织进行ZHX2蛋白检测,联系临床病理参数进行统计学分析。结果与癌旁组织比较,结直肠癌的ZHX2蛋白阳性率显著降低(95.5%vs80.5%,P<0.05)。ZHX2阳性率在直肠癌中为90.6%,在结肠癌中为71.4%(P<0.05);在高、中、低分化癌中依次为81.2%、84.2%、69.2%(P<0.05)。在随访周期内,ZHX2阳性病例比阴性病例的平均生存期显著延长[(45.1±8.8)月vs(27.3±6.7)月,P<0.05]。结论 ZHX2可能具有抑制结直肠癌的发生、发展及分化的作用,检测其表达情况对患者预后具有一定的参考价值。

ZHX2基因在肝细胞癌中表达水平及其临床意义

目的检测新型转录抑制因子ZHX2基因mRNA在肝细胞癌(HCC)中的表达水平,分析探讨ZHX2mR-NA的表达及其与肝细胞癌发病机理之间的关系。方法建立了SYBR Green I实时荧光定量PCR方法,检测了正常肝组织、24例HCC及其癌旁组织中ZHX2基因的mRNA表达水平。结果 ZHX2基因的mRNA在6例正常肝组织中均有表达;在HCC癌组织中ZHX2mRNA的阳性率为33.3%,癌旁非瘤组织中ZHX2 mRNA的阳性率为62.5%;ZHX2mRNA在HCC组织中的表达明显低于对应的癌旁肝组织,差异具有显著性;将HCC按不同的临床病理特征分组比较ZHX2mRNA的表达,结果显示,ZHX2mRNA的表达与HCC患者的性别、年龄、分化程度、肿瘤大小、有无静脉浸润以及肝硬化程度无关,而与有无肝外转移灶、HBV感染和血清AFP值有关。结论 ZHX2mRNA表达量的减少与HCC的发生、发展以及侵袭转移密切相关。

HNF1A、HNF1B、C/EBPA和ZHX2基因多态性与血清AFP水平相关性研究

目的探讨HNF1A-rs1169288(A/C)和rs2464196(G/A)、HNF1B-rs4430796(A/G)、C/EBPA-rs34529039(C/A)和ZHX2-rs7844465(G/T)基因多态性与中国健康成人血清甲胎蛋白(AFP)水平的相关性。方法纳入笔者医院2017年1~11月1010例年龄在25~65岁的汉族健康体检人员,采用等位基因特异性引物结合荧光定量PCR的方法(ARMS-TaqMan法)进行等位基因分型检测。血清AFP采用美国雅培公司i2000免疫分析仪测定。结果1010例研究对象的rs2464196最小等位基因A的频率为0.479。AFP水平在rs2464196-AA型(247例)最低,为3.60±1.59ng/ml,AG型(473例)为3.92±1.78ng/ml,GG型(290例)最高,为4.21±2.10ng/ml(P<0.001)。线性回归分析显示在控制影响AFP水平的各临床指标后,rs2464196基因多态性仍与血清AFP水平显著相关(P=0.000)。而HNF1A-rs1169288,HNF1B-rs4430796,C/EBPA-rs34529039和ZHX2-rs7844465多态性与血清AFP水平无显著相关。结论在表观健康成年人中,HNF1A-rs2464196A等位基因与血清AFP水平降低具有显著相关性,该发现为血清AFP水平变化提供了新的遗传决定因子。

结直肠癌中ZHX2蛋白表达的检测及其临床病理意义

目的探讨结直肠癌中ZHX2蛋白表达的检测意义及其临床病理意义。方法选取2009年2月—2011年2月来该院节后结直肠癌治疗的患者100例,分别取癌变病灶标本及癌旁正常部位标本使用免疫组化法进行检测,比较ZHX2蛋白表达的状况,并将比较结果使用统计学软件进行统计学处理。结果癌变组织中ZHX2蛋白的阳性率为79%,癌旁正常组织中的阳性率为95%,具有显著性差异;癌变组织中,ZHX2蛋白的表达仅与肿瘤发生的部位及分化程度有关,P<0.05。结论开展结肠癌中ZHX2蛋白的表达的检测对于结直肠癌的治疗与预后具有着重要的临床意义,值得进行进一步临床研究。

肝細胞癌ZHX2蛋白表達及其與臨床病理特徵的關係

目的探討肝細胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)、癌旁肝組織和肝血管瘤旁正常肝組織中鋅指和同源盒2(zinc-fingers and homeoboxes 2,ZHX2)蛋白的表達及分析其與臨床病理特徵之間的關係。方法收集肝臟手術標本,包括HCC(其中含癌旁肝組織)和血管瘤旁正常肝組織,並製作組織芯片。ZHX2蛋白表達採用免疫組織化學法檢測,分析ZHX2與臨床病理特徵的關係。結果ZHX2在HCC中呈現不同程度陽性,陽性表達率為37.1%(117/315);癌旁肝組織陽性表達率為49.2%(90/183例);血管瘤旁正常肝組織陽性表達率為58.6%(58/99)。HCC ZHX2陽性表達率明顯低於癌旁肝組織和血管瘤旁正常肝組織(P<0.05);AFP水平正常的HCC患者ZHX2表達高於AFP水平異常的HCC患者(P<0.05),ZHX2表達與其它臨床病理特徵無相關性。結論轉錄抑制因子ZHX2的低表達可能參與HCC的發生發展,ZHX2免疫組化檢測可以作為血清AFP水平正常的HCC患者的補充診斷指標。

转录抑制因子ZHX2对AFP启动子的抑制作用

目的：探讨转录抑制因子ZHX2对人甲胎蛋白（AFP）启动子的抑制作用。方法PCR扩增人ZHX2基因，构建ZHX2与绿色荧光蛋白和HA-tag融合表达载体pEGFP-ZHX2、pcDNA-ZHX2-HA，共转染后通过荧光显微镜及Western blot检测融合基因的表达。扩增人AFP核心启动子269bp插入pGl3-Basic，构建报告质粒phAF269。将pcDNA-ZHX2-HA和phAF269共转染HepG2细胞。48h后裂解细胞，双荧光检测分析ZHX2对AFP启动子的抑制作用。结果荧光显微镜及westem blot检测证实pEGFP-ZHX2和pcDNA-ZHX2-HA可在体外有效表达ZHX2融合蛋白，双荧光实验表明报告质粒phAF269具有AFP启动子活性，且pcDNA-ZHX2-HA与phAF269共转染HepG2后可显著抑制AFP启动子的转录作用，此抑制作用具有剂量依赖性。结论：成功构建两种新型转录抑制因子ZHX2融合表达载体，并证实其对人AFP启动子的抑制作用，为进一步探讨肝癌发生中AFP表达调控机制及提高AFP介导的靶向肿瘤基因治疗提供基础资料。

肝细胞肝癌患者ZHX2、GPC3、H19基因表达水平及其相关关系

目的研究舟山海岛地区肝细胞肝癌(HCC)组织与相应癌旁肝组织新型转录抑制因子锌指和同源框2(ZHX2)基因、磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(GPC3)mRNA和长链非编码RNA(IncRNA)H19基因的表达差异及其与临床病理特征的关系。方法收集17例原发性肝癌患者手术切除肿瘤组织及相应癌旁肝组织,反转录实时荧光定量PCR(qRTPCR)检测ZHX2、GPC3 mRNA和H19基因表达,并分析其与临床病理特征的关系。结果 ZHX2基因mRNA在HCC中表达明显低于癌旁肝组织,而GPC3基因mRNA在HCC中表达则明显高于癌旁肝组织,差异有统计学意义(P<0.05)。HCC患者ZHX2 mRNA表达与GPC3呈负相关,GPC3mRNA表达与血清AFP水平呈正相关,差异有统计学意义(r=-0.626 8,r=0.536 7,P<0.05),而且GPC3 mRNA表达增高患者多伴有乙型肝炎病毒感染(P<0.05)。结论肝细胞肝癌组织中ZHX2与GPC3具有明显相关性,ZHX2可能通过调控GPC3参与肝细胞肝癌的发生发展。

转录抑制因子ZHX2功能片段的克隆及表达

目的构建人ZHX2功能片段的真核融合表达载体。方法以含有全长ZHX2基因的pcDNA3.0-ZHX2-HA质粒为模板,PCR扩增人ZHX2基因功能片段(242-501AA),经EcoRI,KpnI双酶切后克隆入pcDNA3.0,构建真核表达载体pZHX2(242-501)-HA,通过酶切及测序鉴定其正确性。利用脂质体将pcDNA3.0和含有ZHX2功能片段的真核表达载体分别转染肝癌细胞系HepG2.2.15和非洲绿猴肾细胞COS-7,Western blot检测人ZHX2功能片段融合蛋白的表达。结果电泳结果显示:PCR扩增的ZHX2基因242-501AA片段大小与预期相符,重组质粒经双酶切和DNA测序,证明其与GenBank报道序列一致。Western blot结果显示,ZHX2功能片段的融合蛋白在肝癌细胞系HepG2.2.15和非洲绿猴肾细胞COS-7中均可有效表达。结论成功构建含有ZHX2功能片段的真核融合表达载体,为进一步探讨ZHX2基因的功能机制及其应用奠定了基础。