扎冲十三味丸调控Hippo信号通路对脑缺血大鼠的影响

目的观察扎冲十三味丸对脑缺血大鼠的影响及作用机制。方法将75只大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性药组(金纳多,21.6 mg/kg)和扎冲十三味丸低、中、高剂量组(81、162、324 mg/kg),各给药组分别予相应药物灌胃5 d,第6日线栓法制备脑缺血大鼠模型,造模后24 h继续以相同方式给药2 d。对大鼠进行神经功能评分、横木行走评分、抓握力测试,TTC染色检测脑梗死率,HE染色、尼氏染色观察脑组织形态,TUNEL染色检测脑组织细胞凋亡率,通过转录组学筛选扎冲十三味丸治疗脑缺血差异基因,RT-qPCR、免疫组化和Western blot检测差异基因mRNA和蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠神经功能评分、横木行走评分、抓握力降低,脑梗死率升高,神经元核固缩、空泡样改变,细胞间隙增宽,尼氏体数量减少,细胞凋亡率增加(P<0.01,P<0.001);与模型组比较,扎冲十三味丸中剂量组大鼠神经功能评分、横木行走评分、抓握力升高,脑梗死率降低,神经元损伤程度较低,尼氏体数量增加,细胞凋亡率降低(P<0.05,P<0.01)。转录组学和生物信息学分析筛选出扎冲十三味丸抗脑缺血的相关通路Hippo信号通路。该通路关键基因哺乳动物不育系20样激酶(MST1)1、Yes相关蛋白(YAP)1、大肿瘤抑制激酶(LATS)1、TEA域家族成员(TEAD)1检测结果显示,模型大鼠脑组织MST1 mRNA和蛋白表达显著升高,YAP1、LATS1、TEAD1 mRNA和蛋白表达显著降低;扎冲十三味丸可下调模型大鼠脑组织MST1表达,上调YAP1、LATS1、TEAD1表达。结论扎冲十三味丸可能通过Hippo信号通路发挥抗脑缺血作用。

大黄虫庶虫丸抑制乙型肝炎后肝纤维化的临床研究

目的探讨破血逐瘀经典方剂“大黄虫庶虫丸”对乙型肝炎后肝纤维化的治疗作用。方法将乙型慢性肝炎患者92例,随机分为两组,治疗组与对照组,治疗组使用大黄虫庶虫丸,对照组使用甘利欣治疗,疗程均为6个月,分别检测两组治疗前后透明质酸(HA)、血清Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、层粘蛋白(LN)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、白蛋白与球蛋白比(A/G),并进行对比观察。结果经过治疗后,两组血清LN、Ⅳ型胶原、ALT、AST均显著下降(P<0.01),但治疗组LN、Ⅳ型胶原水平下降较之对照组更明显(P<0.05),而对于ALT、AST,两组治疗后无差异;另经治疗后,治疗组血清HA、PCⅢ水平下降(P<0.01),A/G水平升高(P<0.01),而对照组的血清HA、PCⅢ、A/G水平无明显变化(P>0.05)。结论大黄虫庶虫丸对乙型肝炎后肝纤维化有一定的治疗作用。

蒙成药扎冲十三味丸对大鼠脑缺血组织细胞凋亡的影响

目的探讨扎冲十三味丸对缺血性脑组织损伤的保护机制。方法利用线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞模型,采用Elisa法和流式细胞技术Annexin V fitc/pi细胞双染法,检测凋亡细胞相关蛋白和神经细胞凋亡百分率,观察扎冲十三味丸对脑缺血组织bcl-2和bax蛋白表达水平以及缺血组织细胞凋亡程度的影响。结果扎冲十三味丸能减低缺血脑组织Bax蛋白含量和上调Bcl-2蛋白含量以及降低缺血脑组织细胞凋亡百分率。结论扎冲十三味丸通过降低缺血脑组织细胞凋亡百分率,对脑组织缺血损伤有保护作用。

蒙成药扎冲十三味丸对兔凝血机制的影响

目的探讨蒙成药扎冲十三味丸对兔凝血机制的影响。方法选择20只新西兰大白兔为研究对象,给兔灌胃扎冲十三味丸28 d,检测给药前及给药后1 h、3 h、1 d、3 d、5 d、7 d、14 d、21 d、28 d各时间点兔血中凝血四项指标,并于给药后28 d检测血小板聚集率和黏附率,计算血小板聚集率和黏附率抑制率。结果与给药前比较,给药后凝血酶原时间、凝血酶时间、活化部分凝血活酶时间延长、纤维蛋白原减少,血小板聚集率和黏附率减少。结论扎冲十三味丸通过抗凝、抗血小板聚集和黏附,有抑制凝血作用。

蒙成药扎冲十三味丸对预处理急性脑梗死大鼠的影响

目的探讨蒙成药扎冲十三味丸预处理对局灶性脑缺血大鼠神经功能、梗死脑组织病理学改变、脑梗死区重量及脑梗死区重量/全脑重量变化的影响。方法将Wistar大鼠36只,随机分为正常组、模型组、扎冲十三味丸组,线栓法制备大鼠局灶性脑缺血模型(MCAO),神经功能行为评分,按时间点取脑,脑组织TTC染色,称量脑梗死重量及其与全脑重量之比。光镜下观察脑组织的结构变化。结果与模型组比较,扎冲十三味丸组神经功能缺损好转,脑梗死区重量及脑梗死区重量/全脑重量均明显小于模型组,光镜下梗死区水肿减轻。结论扎冲十三味丸对局灶性脑缺血大鼠具有神经保护作用。

扎冲十三味丸对肩周炎气滞血瘀证的疗效及血清前列腺素E2(PGE2)和缓激肽水平的影响

目的:探讨扎冲十三味丸治疗肩周炎气滞血瘀证的疗效及对血清前列腺素E2(PGE2)和缓激肽水平的影响。方法:选取肩周炎患者140例,按数字表法随机分为对照组例和观察组,每组70例。两组予常规肩部功能康复锻炼,2次/d,20 min/次。对照组口服活血止痛胶囊,3粒/次,2次/d。观察组口服扎冲十三味丸,5～9粒/次,1次/d。两组连续治疗4周。应用McGill疼痛问卷(SF-MPQ)评定两组视觉疼痛评分(VAS)、现在疼痛状况(PPI)及疼痛评级指数(PRI)。比较两组肩关节功能评分和临床疗效。检测两组血清前列腺素E2(PGE2)和缓激肽水平。记录两组不良反应发生情况。结果:与对照组比较,观察组治疗后VAS、PPI及PRI评分降低更明显,而日常生活活动、疼痛、关节活动度以及肌力评分增加更明显(P<0.01)。观察组患者的总有效率为95.71%,显著高于对照组(84.29%)(P<0.05)。与对照组比较,观察组治疗后血清PGE2和缓激肽水平下降更明显(P<0.01)。观察组患者轻度肝肾功能减退2例,胃肠道不良反应7例;对照组肝肾功能减退2例,胃肠道不适反应3例;两组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:扎冲十三味丸治疗肩周炎气滞血瘀证的疗效确切,且安全性好,调节患者血清中PGE2和缓激肽水平可能与其疗效有关。

蒙药经典方扎冲十三味丸的方解、方源、药理与临床应用

目的:对蒙药经典方扎冲十三味丸(GRD-13)进行基原考证、方解分析、综述药理与机制、临床应用,为该经典方的深一步研究与利用提供科学依据。方法:采用查阅文献研究与考证方法进行文献综述。结果:蒙药扎冲十三味丸出自《哲对宁诺尔》(《至高要方》),属传统蒙药经典方。该方由沉香10 g、麝香7.5 g、木香15 g、禹粮土7.5 g、制草乌30 g、甘草10 g、诃子60 g、制珊瑚7.5 g、制珍珠8 g、石菖蒲45 g、丁香5 g、煅磁石5 g、肉豆蔻5 g,共13味单味药组成。蒙医在使用过程中,因临床用药经验和用药方法有所不同而出现有单味药在处方中的入药量改变。蒙药扎冲十三味丸具有愈白脉损伤、杀黏、镇静安神功效,由蒙医主治白脉病、萨病、黏性刺痛、瘟疫、疽炭、白喉、吾亚曼病、转筋、亚玛症、协日乌素病、丹毒、高血压等疾病,临床疗效确切。结论:蒙药扎冲十三味丸出自《哲对宁诺尔》(《至高要方》),属传统蒙医经典方,对脑梗死等脑血管疾病疗效显著,具有进一步探索研究价值。

蒙药扎冲十三味丸对大鼠缺血性脑损伤后海马组织细胞凋亡影响的初步研究

目的:探讨扎冲十三味丸对缺血性脑损伤后海马组织细胞凋亡的影响。方法:建立SAH模型,采用流式细胞术和Elisa法,检测神经细胞凋亡百分率和Bax/Bcl-2蛋白表达水平。结果:与正常对照组相比较,模型组细胞凋亡率及Bax蛋白表达量增多,而Bcl-2蛋白表达减少(P<0.05);扎冲十三味丸给药组与模型组相比,细胞凋亡率及Bax蛋白表达量均显著降低,Bcl-2蛋白表达增高(P<0.05)。结论:扎冲十三味丸通过降低缺血性脑损伤后海马组织神经细胞的凋亡率,起到对脑缺血损伤的保护作用,调控凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2的表达是其抗凋亡的机制之一。

扎冲十三味丸联合长春西汀治疗脑卒中后遗症临床研究

目的观察扎冲十三味丸联合长春西汀治疗脑卒中后遗症的临床治疗效果。方法选取医院自2015年5月-2018年5月收治的96例脑卒中后遗症患者作为研究对象,将其分为观察组和对照组,每组48例。对照组患者均给予脑卒中后遗症常规治疗,包括给予系统性康复训练、任务导向性训练及营养支持等,同时给予长春西汀片,观察组患者在对照组的治疗基础上另给予扎冲十三味丸,两组患者均连续治疗1个月。治疗后,对两组患者的疗效进行评价。治疗前后,分别评价两组患者生活质量评分,主要评价项目包括物质生活、社会功能、心理健康、躯体健康及机体功能。治疗前后,分别检测两组患者血液流变学指标,主要包括血小板黏附率、全血高切黏度、纤维蛋白原、红细胞压积及血浆黏度。治疗前后,分别观察两组患者运动功能指标,主要包括Rivemead运动指数(RMI指数)、Berg平衡指数(BBS指数)、Meyer上肢运功功能指数(S-FMMFA上肢指数)及Meyer下肢运功功能指数(S-FMMFA下肢指数)。治疗前后,分别观察两组患者心理状态指标,主要包括焦虑自评量表(SAS评分)、汉密尔顿抑郁量表(HAMD评分)及精神状态量表(MMSE评分)。结果治疗后,观察组总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组物质生活、社会功能、心理健康、躯体健康及思维功能评分均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组血小板黏附率、全血高切黏度、纤维蛋白原、红细胞压积及血浆黏度改善程度均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组RMI指数、BBS指数、S-FMMFA上肢指数及S-FMMFA下肢指数改善程度均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而SAS评分、HAMD评分及MMSE评分改善程度亦均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论扎冲十三味丸联合长春西汀治疗脑卒中后遗症疗效较好,值得进行深入研究。

萨木与扎冲合用对猫实验性心力衰竭和心源性休克的影响

目的：观察萨木和扎冲注射液合用对心力衰竭和心源性休克的作用。方法：给麻醉猫注射戊巴比妥钠制造实验性心力衰竭和心源性休克的模型，然后给药观察。结果：萨木和扎冲注射液合用可使左心室收缩压、左室压力最大变化率、心输出量及平均动脉压明显增加，左心室舒张末期压明显降低。结论：萨木和扎冲注射液合用可增强麻醉猫衰竭心脏的心肌收缩力和心脏泵血功能，具有明显改善心功能的作用。

扎冲十三味丸的质量标准研究

目的建立扎冲十三味丸的质量标准。方法采用薄层色谱法、气相色谱法进行定性鉴别,以反相高效液相色谱法测定α-细辛醚的含量。采用C18柱,以甲醇为流动相A,水为流动相B进行梯度洗脱,检测波长为257 nm。结果薄层色谱、气相色谱分离度较好,专属性强。α-细辛醚的线性范围为4.305～861 ng(r=0.999,n=5),平均回收率为101.3%(RSD=1.3%,n=9)。结论所建立的定性、定量方法简便、准确、专属性强。可有效地控制扎冲十三味丸的质量。

扎冲十三味丸HPLC指纹图谱研究

目的:采用高效液相色谱(HPLC)法建立扎冲十三味丸的指纹图谱。方法:色谱柱为Waters Tnature C_(18)(250mm×4.6mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0ml/min,检测波长为254nm,柱温为36℃。采用SPSS 22.0统计学软件和SIMCA-P 14.1软件对14批扎冲十三味丸的色谱数据进行化学计量学分析。结果:对不同产地14批扎冲十三味丸进行指纹图谱研究,共标定了24个峰,指认出其中8个色谱峰,方法学考察结果符合指纹图谱的技术要求,相同厂家的药品聚为一类。经主成份分析,3个主成份因子的累积方差贡献率为90.162%。结论:本研究所建立的HPLC指纹图谱方法结果准确、稳定,可为扎冲十三味丸的质量控制提供参考。

扎冲-13水溶性多糖抗氧化活性研究

目的:研究蒙药扎冲-13中水溶性多糖的体外抗氧化能力.方法:分别用VB2—Met—NBT光照反应法和Fenton法测定扎冲-13水溶性多糖对自由基的清除效果.结果:在VB_2—Met—NBT光照反应体系中,静态实验表明扎冲-13多糖对·O_2^-自由基有一定的清除作用,其清除率SC50=0.2354 mg/mL,动态实验结果显示扎冲-13多糖对·O_2^-自由基有较强的清除作用,其清除率IC_(50)=0.2032 mg/mL;Fenton法中扎冲-13多糖对·OH自由基有较强的清除作用,其清除率EC_(50)=1.0336 mg/mL.结论:扎冲-13中水溶性多糖对·O_2^-和·OH自由基有明显的清除和抑制作用.

医院门诊含扎冲十三味丸处方点评结果分析与对策

目的了解某基层医院门诊扎冲十三味丸使用情况及存在问题并提出相应对策,为提高临床合理用药提供参考.方法应用医院合理用药系统导出2018年7月门诊含扎冲十三味丸所有处方共868张,采用回顾性处方点评方法,依据药品说明书、文献报道、相关法律法规及指导原则等对处方进行点评.结果2018年7月使用扎冲十三味丸的门诊处方共868张,不合理处方189张,不合理率为21.77%.门诊外科使用率最高,占84.91%,其不合理率为22.66%.不合理处方中"重复用药"占91.01%,其次为"适应证不适宜"占16.40%,"用药超天数"占2.12%.通过合理用药系统设置药品规则(扎冲十三味与其他有重复用药的药品不能同时开具),可将"重复用药"问题解决.结论该院扎冲十三味丸的应用主要问题为"重复用药",通过设置药品规则可有效对此进行监管,同时临床需重视对中成药的合理使用,提高合理用药水平,使中成药的应用更加规范.

扎冲十三味丸干预血管内皮细胞损伤炎性反应相关因素探讨

目的:通过建立实验大鼠血管内皮损伤模型,探讨蒙成药扎冲十三味丸(Medicine Zhachong Shisanwei Pill)干预血管内皮损伤炎性反应的相关因素。方法:制作改良腹主动脉缩窄大鼠模型(Abdominal Aorta Coarctation AAC),实验大鼠分假手术组、模型组、扎冲十三味丸组、曲美他嗪组,造模成功后分别给各组连续灌相应液体28 d。采用Masson染色法观察血管壁组织纤维化;HE染色法观察血管内皮细胞组织病理变化;透射电镜法观察血管内皮细胞超微结构变化;Western-blot法检测大鼠血管组织中IL-6、TNF-α蛋白的表达;用ELISA法检测大鼠血清TNF-α、IL-6含量,血浆中血管内皮因子NO、ET-1含量,计算NO/ET-1以观察内皮细胞依赖性血管舒张功能NO/ET-1系统平衡情况。结果:扎冲十三味丸可降低血管组织纤维化程度;使管壁组织中炎性细胞减少,线粒体肿胀减轻,粗面内质网扩张程度减少;降低血管组织中TNF-α、IL-6蛋白表达;减少大鼠血清中炎性细胞因子IL-6和TNF-α的含量;维持内皮细胞依赖性血管舒张功能NO/ET-1系统平衡。结论:扎冲十三味丸可干预血管内皮细胞损伤炎性反应,此作用优于西药曲美他嗪,与内皮细胞依赖性血管舒张功能NO/ET-1系统平衡无关。

扎冲十三味丸辅助治疗带状疱疹神经痛86例

目的探究扎冲十三味丸辅助治疗带状疱疹神经痛(PHN)的疗效。方法纳入2020年1月-2021年6月该院就诊的86例PHN患者,根据治疗用药不同将其设为两组,对照组(43例)给予常规西医治疗,观察组(43例)在此基础上给予扎冲十三味丸辅助治疗。比较两组疗效、中医证候积分、疼痛情况[视觉模拟评分(VAS评分)]、生活质量[皮肤病生活质量指数(DLQI评分)]及血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素6(IL-6)、缓激肽、前列腺素E2(PGE2)水平。结果观察组治疗总有效率93.02%(40/43),比对照组74.42%(32/43)高(P<0.05);两组治疗后中医证候积分、VAS评分均比治疗前低,DLQI评分比治疗前高,且观察组优于对照组(P<0.05);两组治疗后TNF-α、IL-6均比治疗前低,IL-2比治疗前高,且观察组优于对照组(P<0.05);两组治疗后缓激肽、PGE2均比治疗前低,且观察组比对照组低(P<0.05)。结论扎冲十三味丸辅助治疗带状疱疹神经痛可明显减轻患者疼痛,提高临床疗效。

扎冲十三味丸HPLC指纹图谱建立及4种成分测定

目的建立扎冲十三味丸(诃子、制草乌、石菖蒲等)HPLC指纹图谱,并测定4种成分的含有量。方法该药物甲醇提取液的分析采用Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相乙腈-水,梯度洗脱;体积流量1 mL/min;柱温40℃;检测波长225 nm。结果没食子酸、鞣花酸、木香烃内酯、去氢木香内酯分别在5.16~165.0、2.59~83.00、1.06~34.00、1.25~40.00μg/mL范围内线性关系良好(r≥0.999 5),平均加样回收率分别为102.4%、99.8%、98.4%、101.6%,RSD分别为1.84%、1.86%、1.33%、1.96%。10批样品指纹图谱中有13个共有峰,相似度均在0.98以上。结论该方法简便稳定,准确可靠,可用于扎冲十三味丸的质量控制。

扎冲十三挥发油提取包合工艺优化试验

目的优选扎冲十三挥发油的提取及β-环糊精包合的最佳工艺。方法以挥发油的提取量为考察指标,采用正交试验优选挥发油提取工艺;以挥发油包合率、收得率为考察指标,优选β-环糊精包合工艺。结果最佳提取工艺:加5倍量的水,浸泡1 h,提取6 h;最佳包合工艺:采用超声波法,挥发油与β-环糊精的用量比为1∶10,挥发油与乙醇的用量比为1∶6,超声45 min。结论优选的挥发油提取与包合工艺稳定、可行。

基于GC-MS技术结合网络药理学和分子对接探究扎冲十三挥发油治疗缺血性脑卒中的成分及作用机制

目的基于气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术对扎冲十三方剂中8味植物药挥发油的主要化学成分进行分析,并运用网络药理学方法探究其成分对缺血性脑卒中可能作用机制。方法利用GC-MS技术分析挥发油后,借助多个数据库预测分析化学成分作用靶点和疾病靶点,构建“化学成分-作用靶点”网络并由共同靶点得到蛋白质-蛋白质相互作用关系,将其可视化,根据筛选到的关键作用靶点完成基因本体(GO)功能和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析;在Discovery Studio软件上实施关键靶点与活性成分的分子对接验证。结果GC-MS确认出44个化合物,占总含量的94.14%,含量最高的为丁香酚;检索出扎冲十三挥发油关于缺血性脑卒中的42个活性成分,159个潜在作用靶点;得到369个GO功能条目,126个KEGG信号通路条目,涉及癌症通路、脂质和动脉粥样硬化等。分子对接数据显示丁香酚等活性成分与缺氧诱导因子1α、基质金属蛋白酶9、信号转导与转录激活因子3等关键靶点具备较强的结合性能。结论该实验探究了扎冲十三挥发油通过多成分、多靶点、多途径协同用于治疗缺血性脑卒中的可能作用机制,为进一步研究扎冲十三挥发油对缺血性脑卒中的作用提供一定参考。

气相色谱法同时测定扎冲十三药材中6种挥发性成分的含量

目的:建立同时测定扎冲十三药材中丁香酚、甲基丁香酚、异丁香酚、α-细辛脑、木香烃内酯、肉豆蔻醚等6种挥发性成分含量的方法。方法:采用水蒸气蒸馏法提取挥发油,采用气相色谱法测定挥发油中6种成分含量。色谱柱为ov-1701毛细管,氢火焰离子化检测器,载气为氮气,进样口温度为220℃,检测器温度为240℃,流速为1.0mL/min,进样量为1μL,分流比为10∶1,程序升温。结果:丁香酚、甲基丁香酚、异丁香酚、α-细辛脑、木香烃内酯、肉豆蔻醚检测质量浓度线性范围分别为2.00~12.00、1.00~6.00、0.60~3.60、0.05~0.30、0.05~0.30、0.60~3.60mg/mL(r均为0.999 9),检测限分别为0.01、0.01、0.02、0.01、0.01、0.01mg/mL,定量限分别为0.05、0.03、0.06、0.02、0.02、0.03mg/mL;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于3%;平均加样回收率为99.33%~100.04%,RSD为0.02%~0.35%(n=6);耐用性试验的RSD均小于5%。结论:本研究所建方法操作简单、重复性好,可用于扎冲十三药材中6种挥发性成分含量的同时测定。