玉米ZmERD4基因的分离及转基因株系的获得

为了获得转ZmERD4基因玉米植株,验证ZmERD4在玉米育种中的应用价值,通过同源克隆的方法在抗旱性强的玉米自交系CN165中克隆了ZmERD4基因全长cDNA,该基因全长2 073bp,包含一个编码591个氨基酸的开放阅读框;推导的氨基酸序列和水稻中的OsERD4(XP476646)有82%的相似性,与拟南芥中的AtERD4(BAB63915)有58%的相似性。构建了由花椰菜花叶病毒35S启动子控制下的ZmERD4基因的植物表达载体,并利用农杆菌介导的方法对玉米杂交种Hi-Ⅱ进行了遗传转化,通过双丙氨磷抗性筛选、双丙氨磷抗性基因和ZmERD4基因PCR扩增对转基因后代株系进行了检测,获得了42个转ZmERD4基因株系,转化率为2%,为玉米抗旱育种提供了重要的物质基础。