祖师麻膏药对胶原诱导型关节炎小鼠炎症及骨破坏的抑制作用

目的:探讨祖师麻膏药对CIA小鼠炎症及骨破坏的抑制作用。方法:采用SPF级雄性DBA/1小鼠,随机选取6只为正常组,将造模成功的18只CIA小鼠按照随机数字表法分为模型组、膏药组(1.0 g/kg)、扶他林组(0.12 g/次),每组各6只,各个给药组按照体质量予以药物贴敷治疗,正常组和模型组给予生理盐水同时贴敷透气胶纸,每日一次,4 h/次,连续给药4周。采用关节炎评分指数观测各组小鼠关节炎症状变化及关节炎指数评分,Micro-CT观察小鼠后爪损伤情况,实时荧光PCR法检测踝关节组织IL-17、IL-1β、TNF-αmRNA表达,免疫组织化学法检测踝关节组织OPG、RANKL蛋白的表达,苏木素-伊红(HE)染色后观察滑膜组织病理改变,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)法观察踝关节组织破骨细胞变化。结果:与正常组比较,模型组小鼠关节炎指数评分明显升高(P<0.05)。Micro-CT示小鼠后爪骨侵蚀严重,骨面破坏,骨量减少;踝关节组织IL-17、IL-1β、TNF-αmRNA(PCR)表达明显升高(P<0.05)。免疫组化显示踝关节组织OPG蛋白相对表达量降低(P<0.01),RANKL蛋白相对表达量升高(P<0.01)。HE结果显示中度的炎性细胞浸润,滑膜细胞肿大,大量的血管翳形成及滑膜增生;破骨细胞数量增加,关节软骨组织表面粗糙,出现严重的骨破坏,软骨层变薄。与模型组比较,膏药组和扶他林组小鼠关节炎症状缓解,关节炎指数评分降低;小鼠后爪骨质密度改善,有效地缓解骨质疏松;踝关节组织IL-17、IL-1β、TNF-αmRNA(PCR)表达明显降低(P<0.05);免疫组化结果示OPG蛋白相对表达量升高(P<0.05),RANKL蛋白相对表达量降低(P<0.01)。HE结果示滑膜细胞肿大明显改善,轻度炎性细胞浸润,滑膜增生不明显;破骨数量减少,关节软骨破坏明显改善缓解,软骨层厚度显著增加。结论:祖师麻膏药可以缓解RA局部症状,降低炎症因子表达,减轻炎症反应,可能是通过调控OPG/RANKL信号轴抑制破骨细胞的分化及活化,进一步改善关节骨及软骨破坏的生物学效应。

基于HPLC指纹图谱与近红外光谱模型评价祖师麻膏药质量

目的:采用高效液相色谱(HPLC)指纹图谱结合近红外光谱模型评价祖师麻膏药质量。方法:采用HPLC法测定了祖师麻甲素含量,建立了25批祖师麻膏药HPLC指纹图谱;用近红外光谱仪采集25批祖师麻膏药近红外光谱图,应用分析软件OPUS5.5建立相关系数模型和一致性评价模型。结果:祖师麻甲素含量均符合药品质量标准,平均值为122μg/g;祖师麻膏药HPLC指纹图谱和近红外图谱的平均相似度分别为98.52%和99.90%,25批祖师麻膏药全部通过一致性评价模型验证,两种方法均证明了祖师麻膏药质量稳定、可控。结论:近红外光谱模型具有快速、无损伤、无污染的优点,可用于评价祖师麻膏药的质量。

祖师麻膏药及不同萃取部位多次给药皮肤刺激性和过敏性试验研究

目的观察祖师麻膏药及其不同萃取部位多次给药对皮肤的刺激性和过敏性,并探索刺激性或过敏性成分存在部位。方法SD大鼠随机分为完整皮肤组和破损皮肤组,将祖师麻膏药及其不同萃取部位涂于右侧脱毛区,左侧为对照,连续给药7 d,观察给药7 d和停药后72 h皮肤状况并记录。白色豚鼠随机分为正常对照组、阳性对照组、祖师麻膏药组、石油醚组、二氯甲烷组、乙酸乙酯组、水层组,于第0、7、14天右侧脱毛皮肤给药致敏,第28天左侧脱毛皮肤给药激发,观察是否引起过敏性反应。结果祖师麻膏药、石油醚、二氯甲烷部位完整皮肤组和破损皮肤组均出现轻微红斑、水肿反应,乙酸乙酯部位、水层部位完整皮肤组和破损皮肤组均无红斑、水肿反应。豚鼠皮肤过敏性试验各组皮肤均未出现明显红斑、水肿等过敏性反应。结论祖师麻膏药具有轻微刺激性,无过敏性,刺激性成分可能存在于石油醚部位和二氯甲烷部位。

HPLC法测定祖师麻膏药中祖师麻甲素和紫丁香苷

目的建立定量测定祖师麻膏药中祖师麻甲素和紫丁香苷的高效液相色谱法(HPLC)。方法采用高效液相色谱法,以二极管阵列检测器(PAD)进行测定。色谱柱CAPCELL PAK MG C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相乙腈-0.4%磷酸(10∶90),体积流量1.0 mL/min,检测波长225 nm,柱温30℃。结果祖师麻甲素、紫丁香苷进样量分别在0.088 8μg～0.266 4μg和0.00 57μg～0.017 1μg范围内呈良好的线性关系(祖师麻甲素r=0.999 6;紫丁香苷r=0.999 3),平均回收率分别为99.95%和98.93%,RSD分别为1.33%和1.76%(n=9)。结论本方法快速,简便,结果准确可靠,重现性好,可用于祖师麻膏药的质量控制。

祖师麻膏药治疗膝骨关节炎:多中心随机对照临床试验

目的验证祖师麻膏药治疗膝骨关节炎的有效性和安全性。方法采用多中心随机对照临床试验设计,于2016年5月至2017年4月纳入中国中医科学院广安门医院、首都医科大学附属北京中医医院、上海市中医医院、卫生部北京医院、北京积水潭医院、首都医科大学世纪坛医院、北京军区总医院、甘肃省中医院门诊确诊的396例膝关节炎患者,参照美国风湿病学会1995年膝骨关节炎分类标准,将患者以1∶1∶1的比例随机分为祖师麻膏药12 h贴敷组、祖师麻膏药24 h贴敷组和吲哚美辛巴布膏24 h贴敷组并干预2周。主要疗效指标为膝关节疼痛视觉模拟评分(PVAS),次要疗效指标为西安大略和麦克马斯特骨关节炎指数(WOMAC)评分,采用皮肤刺激性强度评价标准对试验过程中出现的皮肤刺激症状进行安全性评价。采用符合方案数据集进行统计分析。结果 3组患者治疗2周后PVAS和WOMAC评分较治疗前均有明显改善(P<0.001)。3组间WOMAC评分中疼痛维度的"平地走路时"和生理功能维度的"上楼"、"平地走路"和"繁重家务劳动"条目评分差异有统计学意义(P<0.022),其中祖师麻膏药24 h贴敷组"平地走路时"、"上楼"和"繁重家务劳动"条目评分低于吲哚美辛巴布膏24 h贴敷组,差异有统计学意义(P<0.006);祖师麻膏药24 h贴敷组的"平地走路"条目评分低于祖师麻膏药12 h贴敷组,差异有统计学意义(P=0.006)。祖师麻膏药12 h和24 h贴敷组患者局部皮肤红斑、水肿、瘙痒症状分别为23、7、22和32、13、34例次,多于吲哚美辛巴布膏24 h贴敷组的8、2、8例次,差异均有统计学意义(P<0.005),但皮肤刺激症状轻微,不影响药物使用。结论祖师麻膏药短期应用与吲哚美辛巴布膏止痛疗效相当;祖师麻膏药贴敷24 h可明显改善患者平地走路时疼痛和上楼、繁重家务劳动的关节功能,其作用优于吲哚美辛巴布膏。祖师麻膏药应用后局部皮肤刺激但症状轻微。

贴敷后祖师麻膏药中祖师麻甲素和7-羟基香豆素的残留量测定

目的建立以高效液相色谱法测定祖师麻膏药中祖师麻甲素和7-羟基香豆素的方法,并用于贴敷后祖师麻膏药中药物残留量测定。方法 Agilent Eclipse Plus C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液(15∶85);体积流量为1.0 mL/min;检测波长327 nm。6名健康志愿者签署知情同意书后分别在背部贴敷祖师麻膏药3贴,于24、48、72 h各揭帖1张,采用上述方法测定其祖师麻甲素和7-羟基香豆素的残留量,进而计算残留率。结果祖师麻甲素、7-羟基香豆素的质量浓度分别在16.8～67.2μg/mL(r=0.999 1)、5～60μg/mL(r=0.999 1)范围内与各自峰面积积分值呈良好的线性关系;平均回收率和RSD分别为100.58%、100.53%和1.62%、1.74%(n=9);贴敷24、48、72 h后的祖师麻膏药中祖师麻甲素和7-羟基香豆素的平均残留率分别为69.45%、53.12%、30.00%和93.23%、88.28%、86.74%。结论祖师麻膏药使用后祖师麻甲素和7-羟基香豆素的残留较多,后者更明显存在差异。

腰宁汤联合祖师麻膏药治疗寒湿瘀阻型慢性腰肌劳损的临床评价

目的评价腰宁汤联合祖师麻膏药治疗寒湿瘀阻型慢性腰肌劳损的临床疗效。方法选取从2016年7月-2018年6月医院收治的慢性腰肌劳损患者60例作为研究对象,该60例患者经中医辨证均为寒湿瘀阻型。对照组采用祖师麻膏药进行治疗,观察组在此基础上加服腰宁汤进行治疗。比较两组患者寒湿瘀阻型腰肌劳损的临床治疗效果,观察记录两组治疗前后患者VAS评分、ODI指数、血液流变学指标和炎症指标的变化差异。结果观察组总有效率93.33%(28/30);对照组总有效率73.33%(22/30)。观察组总有效率明显优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),经治疗两组患者ODI评分和VAS评分显著下降;观察组治疗后ODI及VAS评分明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者治疗后,观察组全血黏度(高切、低切)、血浆黏度、血小板聚集率均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后观察组IL-6、CRP、TNF-α均显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论腰宁汤联合祖师麻膏药治疗寒湿瘀阻型慢性腰肌劳损的临床疗效确切,能明显改善患者腰肌活动功能、疼痛症状、血液流变学及炎症因子指标。

祖师麻膏药治疗寒湿痹阻型类风湿关节炎腕关节病变40例

目的:观察祖师麻膏药治疗寒湿痹阻型类风湿关节炎腕关节病变的临床疗效。方法:将60例寒湿痹阻型类风湿关节炎腕关节病变患者用简单随机分组的方法分为观察组(40例)和对照组(20例)。观察组给予祖师麻膏双腕关节贴敷治疗;对照组给予吲哚美辛巴布膏双腕关节贴敷治疗,每组治疗周期均为2周。观察治疗前与治疗后疼痛VAS评分、腕关节功能活动度、晨僵时间、类风湿因子(RF)、血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)和腕关节B超检测结果及不良反应。结果:临床痊愈率观察组为55.00%,对照组为35.00%,2组比较差异有统计学意义(P<0.05);总有效率观察组为97.50%,对照组为90.00%,2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。VAS、晨僵时间、RF、ESR、CRP等指标治疗后2组均明显改善(P<0.05),观察组改善更明显(P<0.05)。超声对腕关节病变检出率治疗后2组均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。2组均未出现明显不良反应和毒副作用。结论:祖师麻膏药治疗寒湿痹阻型类风湿关节炎腕关节病变安全、有效,可以显著缓解患者腕关节疼痛及活动受限症状。

HPLC测定复方祖师麻膏中祖师麻甲素的含量

建立复方祖师麻膏中祖师麻甲素的含量测定方法。采用Shim-pack VP-ODS C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),以甲醇-0.5%醋酸水(31∶69)为流动相,流速为1.0mL.min-1,检测波长为327nm,柱温为30℃。祖师麻甲素浓度在6.32—31.60μg.mL-1范围内线性关系良好,r=0.9998;平均回收率95.8%(n=6),RSD为3.83%。本法操作简便、结果准确,可用于复方祖师麻膏的质量控制。