细胞极性蛋白复合物PAR/aPKC的研究进展

不对称细胞分裂是动物发育过程中用以调控细胞分化的一种进化上保守的基本模式。极性的祖细胞通过不对称分裂产生两个不同命运的子细胞,这一过程涉及细胞命运决定因子的不对称分布、纺锤体的旋转定位等,而这些过程都必须依赖特定细胞极性的存在才能得以正常进行。简要综述了高度保守的蛋白复合物PAR/aPKC在细胞极性建立和维持中的重要作用,以及它如何调控纺锤体定位和命运决定因子不对称分配,并讨论了在该领域的一些新发现和研究进展。

Cdx2和aPKC对胚胎早期发育的影响

尾型同源盒转录因子(Cdx2)能促进早期胚胎滋养外胚层(TE)的发育,并在胚胎发育体节的延伸中发挥着重要的作用;非典型性蛋白激酶(aPKC)则控制着细胞对称性和胚胎的极性,以维持哺乳动物神经细胞的功能和干细胞的分化,同时aPKC还参与调节外胚层细胞的发育,此外,Cdx2的表达水平也影响着aPKC在胚胎卵裂球顶端的定位。论文对Cdx2和aPKC在胚胎发育和极性建立方面的作用机制进行综述。

克罗恩病患者外周血aPKC-ι基因表达及对纤维化水平临床评估价值

目的 测定克罗恩病患者外周血中aPKC-ι的基因表达水平,探讨aPKC-ι基因表达水平与克罗恩病纤维化发生发展的关系.方法 基于SYBR Green荧光标记技术,建立实时荧光相对定量RT-PCR方法,在ABI PRISM 7000荧光定量PCR仪上测定了50例克罗恩病患者（按肠壁纤维化程度分为三组）和20例健康对照者外周血中aPKC-ιmRNA的含量.结果 成功建立了人aPKC-ι基因表达含量的实时荧光定量RT-PCR检测方法;三种纤维化组aPKC-ι mRNA的平均拷贝数显著高于健康对照组,分别为对照组的1.32（1.08～3.97）、2.56（2.38～2.72）、3.35（2.25～8.96）倍（P＜0.01）,且其含量高低与肠壁纤维化呈正相关,并且三组之间的aPKC-ιmRNA表达量差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 克罗恩病患者外周血aPKC-ι mRNA可为临床监测病情活动性提供一种敏感的指标.

Par3、Par6及aPKC蛋白在胃癌发生、发展中的意义

目的探讨Par3、Par6和a PKC在胃癌中的表达及意义。方法采用免疫组化法分别检测Par3、Par6和a PKC三种蛋白在153例胃癌各个位点(即胃癌黏膜层、肿瘤中心、侵袭前沿)及淋巴结转移灶中的表达,并以正常胃黏膜作为对照。结果Par3、Par6和a PKC在胃癌组织各个位点的表达水平均显著低于正常胃黏膜(P<0.01);Par3、Par6、a PKC在胃癌中的表达下调率高于肠型和混合型胃癌(P<0.05,P<0.01,P<0.01),Par6和a PKC在侵袭至浆膜及浆膜外病例中的表达下调率显著高于侵及黏膜及肌层的病例(P均<0.01),伴有淋巴结转移病例中Par6的表达低于不伴有淋巴结转移病例(P>0.05)。结论Par3、Par6和a PKC表达下调促进胃癌的发生、发展。

卵巢浆液性癌组织中Hugl-1和aPKC的表达及意义

目的探讨原发性卵巢浆液性癌组织中Hugl-1和aPKC的表达及意义。方法选择浙江大学医学院附属妇产科医院2000年6月至2007年6月经手术切除的原发性卵巢浆液性癌组织79例,用免疫组化SP法检测Hugl-1和aPKC蛋白在其组织中的表达。同时检测Hugl-1和aPKC蛋白在25例正常卵巢组织,31例卵巢浆液性囊腺瘤,41例卵巢交界性浆液性肿瘤中的表达,并分析了Hugl-1和aPKC蛋白表达与卵巢癌临床病理参数间的关系。结果Hugl-1蛋白在卵巢浆液性癌组织、正常卵巢、浆液性囊腺瘤及交界性浆液性肿瘤中的强阳性表达率分别为12.7%、48%、58%、41.5%。癌组织中的表达显著低于其余3组,差异有统计学意义(P<0.001);aPKC蛋白在卵巢浆液性癌组织、正常卵巢、浆液性囊腺瘤及交界性浆液性肿瘤中的强阳性表达率分别为19%、0、0、0。癌组织中的表达显著高于其余3组,差异有统计学意义(P<0.001);Hugl-1和aPKC的表达与组织学分级、手术病理分期、淋巴结转移有一定的相关性(P<0.05)。Hugl-1和aPKC在卵巢癌组织中的表达不存在相关性(P>0.05)。结论Hugl-1和aPKC可能均参与了卵巢癌的发生与发展。

Tim-3/aPKC-ι通路在英夫利西单抗治疗克罗恩病病程判断中的作用

目的:探讨克罗恩病(CD)患者接受英夫利西(IFX)治疗前后Tim-3/aPKC-ι通路的变化并分析其临床意义和在病程判断中的作用。方法:制备外周血T细胞亚群同时构建靶向RNA干扰Tim-3基因的慢病毒载体,体外转染T细胞亚群,检测细胞因子分泌水平和Tim-3以及aPKC-ιmRNA的变化,确认Tim-3/aPKC-ι通路的存在;收集2009年6月至2019年7月武汉大学人民医院符合研究标准的45例CD患者,分别在第0、2、6周时给予IFX治疗。以同期16例健康体检者为健康对照组。CD患者于治疗开始前(0周)和治疗第5、10和15周时取静脉血,并经结肠镜检查取肠黏膜活组织检查标本。观察CD患者克罗恩病活动指数(CDAI)、血沉(ESR)、C-反应蛋白(CRP)的变化。使用荧光定量PCR方法分析外周血和肠黏膜组织内Tim-3和aPKC-ιmRNA基因表达水平变化。结果:RNA干扰Tim-3基因在T细胞表达后,可抑制下游的aPKC-ι mRNA表达水平以及T细胞增殖的作用,提示CD发病机制中存在Tim-3/aPKC-ι通路。IFX治疗前,CD患者在外周血Tim-3和aPKC-ι mRNA表达水平(5.25±0.89和5.11±0.45)和肠黏膜组织内Tim-3和aPKC-ι mRNA表达水平(5.77±0.56和5.07±0.35)均明显高于健康对照者,差异均有统计学意义(均P<0.05)。第10周和15周时,CD患者外周血Tim-3和aPKC-ιmRNA表达水平和肠黏膜组织内Tim-3和aPKC-ι mRNA表达水平均明显低于治疗前,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:证实Tim-3/aPKC-ι通路在CD的发病机制中有重要作用,活动期CD患者经IFX治疗后Tim-3和aPKC-ιmRNA表达水平下降,提示Tim-3/aPKC-ι通路参与IFX治疗活动期CD,可以导致临床缓解,下降的幅度对病程判断具有临床意义。

极化调节蛋白aPKC—τ与cyclinE在肝癌中的表达及意义

目的探讨细胞极化调节蛋白aPKC—τ与CyclinE在肝细胞肝癌（HCC）及其癌旁组织中表达情况及关系。方法采用RT-PCR方法检测aPKC-τ基因在9例正常肝、43例HCC及其癌旁组织中的表达；免疫组化检测aPKC-τ,CyclinE蛋白的表达，对所得结果进行分类和统计分析。结果aPKC-τ在HCC中的基因表达值为0．844±0．315，明显高于癌旁0．530±0．217及正常肝组织0．372±0．130（P=0．009）IaPKC—τ蛋白在HCC、癌旁组织阳性率分别为58．1％（25／43）、23．6％（10／43），分化程度越低、分级越晚表达越高，表达有显著性差异（P〈0．05）；CyclinE蛋白在HCC、癌旁组织阳性率分别为65．1％（28／43）、51．6％（22／43），分化程度越低、分级越晚表达越高，表达有显著性差异（P〈O．05）；aPKC—τ蛋白的表达与CyclinE蛋白的表达呈正相关（P〈0．05）。结论aPKC-τ和CyclinE在HCC的表达提示其在HCC侵袭、转移中发挥重要作用；两者在HCC中共表达，为进一步研究肝癌侵袭转移机制提供了理论依据。

运动过程中骨骼肌摄取葡萄糖的调节

运动过程骨骼肌摄取葡萄糖的速率主要受到3个因素的影响葡萄糖运送到肌细胞的速率、肌细胞膜对葡萄糖的转运速率以及肌细胞内对葡萄糖的磷酸化。细胞膜对葡萄糖的转运相对于葡萄糖的运输和磷酸化显得更为重要。运动时会出现肌细胞膜上GLUT4的转位并增加对葡萄糖的转运,但其机制并不是很清楚,很有可能是通过细胞内的一些分子信号传递,这些信号包括CaMK,PKC,NO,AMPK,PKB和aPKC等。