大肠埃希菌临床分离株aac(6)′-Ib-cr基因的检测

目的:了解温州地区大肠埃希菌临床株中质粒介导的喹诺酮类耐药基因aac(6)′-Ib-cr的分布、耐药情况。方法:收集温州医学院附属第一医院环丙沙星耐药的大肠埃希菌临床株60株,应用PCR方法检测其aac(6)′-Ib基因,琼脂稀释法检测菌株的耐药情况,DNA测序aac(6)′-Ib-cr基因变异体,用接合传递试验方法验证细菌质粒介导的耐药性的可转移性。结果:60株大肠埃希菌临床株检出10株aac(6)′-Ib,其扩增产物进行测序,结果表明4株菌在第223位(T→C或T→A)发生变异,均携带aac(6)′-Ib-cr基因;这4株菌接合传递试验成功,临床株对喹诺酮类的耐药性传递给了受体株。结论:温州地区aac(6)′-Ib-cr介导的喹诺酮类耐药的大肠埃希菌较普遍存在。

鲍曼不动杆菌耐药基因aac（6＇）-Ib和aac（6＇）-Ib-cr的检测

目的了解阿米卡星耐药的鲍曼不动杆菌中aac（6＇）-Ib-cr基因的分布情况。方法收集2007年1月2009年10月临床标本中分离对阿米卡星耐药的鲍曼不动杆菌73株，利用聚合酶链反应（PCR）方法扩增aac（6＇）-Ib基因，PCR产物进行电泳分析和测序，aac（6＇）-Ib基因阳性PCR产物用内切酶FOK酶切后电泳分析。统计菌株对亚胺培南等12种抗生素的耐药率。结果aac（6＇）-Ib基因的检出率为89．0％，其中7．7％为突变了的aac（6＇）-Ib-cr基因。所有菌株对除亚胺培南外的其它抗生素的耐药率均大于80％。结论aac（6’）．Ib基因广泛存在于这些耐药菌株中，突变成aac（6＇）-Ib-cr基因的发生率较低。这些对阿米卡星耐药的菌株，对其它抗生素的耐药也十分严重。

aac(6')-Ib-cr基因是微生物对喹诺酮类抗菌药的又一耐药途径

aac(6')-Ib-cr基因表达的氨基糖苷乙酰转移酶通过质粒介导方式对环丙沙星等乙酰化,使其抗菌生物活性降低,并与其他耐药因素产生协同作用,导致MIC值大幅升高。该基因分布范围广,检出率高,使得微生物对喹诺酮类抗菌药物耐药更加复杂。本文检索了近年来aac(6')-Ib-cr基因相关研究报道,归纳论述该基因在喹诺酮类抗菌药物耐药中的作用,提醒临床医务工作者应高度重视aac(6')-Ib-cr基因对临床用药的影响,以促进喹诺酮类抗菌药的合理应用。

鲍曼不动杆菌耐药基因aac（6’）－Ib和aac（6’）－Ib－cr的检测

目的了解阿米卡星耐药的鲍曼不动杆菌中aac（6’）－Ib—cr基因的分布情况。方法收集2007年1月到2009年10月临床标本中分离对阿米卡星耐药的鲍曼不动杆菌73株，利用聚合酶链反应（PCR）方法扩增aac（6’）-Ib基因，PCR产物进行电泳分析和测序，aac（6’）-Ib基因阳性PCR产物用内切酶FOKI酶切后电泳分析。统计菌株对亚胺培南等12种抗生素的耐药率。结果aac（6＇）-Ib基因的检出率为89．0％，其中7．7％为突变了的aac（6’）-Ib-cr基因。所有菌株对除亚胺培南外的其它抗生素的耐药率均大于80％。结论aac（6＇）-Ib基因广泛存在于这些耐药菌株中，突变成aac（6’）-Ib—cr基因的发生率较低。这些对阿米卡星耐药的菌株，对其它抗生素的耐药也十分严重。

肺炎克雷伯菌质粒介导的喹诺酮类耐药基因aac(6')-Ib-cr的研究

目的调查本院临床所分离的产超广谱β-内酰胺酶的肺炎克雷伯菌中质粒介导的aac(6’)-Ib-cr基因的存在情况,为临床预防感染及合理使用抗菌药物提供依据。方法收集2007年7月～2008年12月本院临床分离的产超广谱β-内酰胺酶的肺炎克雷伯菌共57株,采用PCR技术检测aac(6’)-Ib基因,并对阳性菌株进行测序。以大肠埃希菌J53为受体菌,通过接合试验从aac(6’)-Ib-cr阳性菌株中获得的接合子,采用E-test方法测定菌株的药敏情况。结果 57株肺炎克雷伯菌中,aac(6’)-Ib基因阳性菌共12株,经测序全部为aac(6’)-Ib-cr基因,阳性率为21.1%。aac(6’)-Ib-cr基因阳性肺炎克雷伯菌中6株接合试验获得成功。环丙沙星对接合子的MIC值均为0.5μg/ml,左氧氟沙星对接合子的MIC值均为0.25μg/ml;接合子与受体菌MIC值比较,环丙沙星和左氧氟沙星的耐药性分别提高了63倍和17倍。结论本院产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌质粒介导的喹诺酮类耐药基因aac(6’)-Ib-cr携带率很高,临床上应加强喹诺酮类耐药基因的检测,以避免产aac(6’)-Ib-cr基因菌株感染的暴发流行。

连云港地区大肠埃希菌质粒介导喹诺酮类抗菌药耐药基因检测

目的了解连云港地区临床分离的大肠埃希菌质粒介导喹诺酮类抗菌药物耐药基因的携带状况，为临床喹诺酮类药物耐药的预防提供指导。方法采用PCR检测88株分离自连云港地区的大肠埃希菌株的质粒介导喹诺酮耐药基因qnrA，qnrB，qnrS和aac（6’）-Ib—cr，将阳性结果进行测序分析确认，并通过将aac（6’）一Ib序列与Genbank登记序列比对以确定aac（6’）-Ib-cr；分析基因阳性菌株的喹诺酮类药物的药敏结果。结果在检测的大肠埃希菌临床分离株中，共检出qnr基因阳性7株（7．95％），其中qnrB基因2株（2．27％），qnrS基因5株（5．68％），未检出qnrA基因阳性菌株。检出aac（6’）-Ib基因阳性菌株12株（13．64％），经测序确定其中6株（6．82％）为aac（6’）-Ib-cr基因。检测出的12株qnr和aac（6’）-Ib-cr基因阳性的大肠埃希菌中，8株对喹诺酮类耐药，3株对喹诺酮类敏感，1株对左旋氧氟沙星敏感但对环丙氟派酸耐药；有11株为产超广谱p内酰胺酶（ESBLs）菌株。结论连云港地区临床分离的大肠埃希菌中存在qnr和aac（6’）-Ib-cr基因阳性菌株的流行，喹诺酮类敏感菌株与耐药菌株中均有qnr基因和aac（69-Ib—cr基因的存在。qnr和aac（6’）-Ib—cr基因往往和ESBLs同时存在，应加强临床分离菌株的质粒介导喹诺酮类抗菌药物耐药基因监测，以防止其传播与流行。

肠杆菌科临床株质粒介导的喹诺酮类耐药机制的研究

目的了解天津地区肠杆菌科临床株中质粒介导的喹诺酮类耐药基因 qnrA、aac(6′)-Ib-cr 的分布并研究其耐药机制。方法从天津地区8家三甲医院收集环丙沙星耐药(CPLX,MIC≥4μg/ml)的肠杆菌科菌株共116株,包括77株大肠埃希菌、24株阴沟肠杆菌、15株克雷伯菌属细菌。应用 PCR 方法筛查所有临床株的 qnrA 基因,并对大肠埃希菌进行 aac(6′)-Ib 的检测;琼脂稀释法测菌株的药敏情况;DNA 测序检测 aac(6′)-Ib-cr 基因变异体;接合传递试验方法探讨细菌质粒介导的耐药性传递。结果 116株喹诺酮类耐药的肠杆菌科临床株中未发现 qnrA 基因阳性株;77株环丙沙星耐药的大肠埃希菌15株检出 aac(6′)-Ib,其中对卡那霉素耐药10株、中敏4株、敏感1株;选出对卡那霉素耐药表型不同的6株菌的 aac(6′)-Ib 扩增产物进行测序,结果表明5株菌在第223位(T→C或 T→A)和454位(G→T)发生变异,均携带 aac(6′)-Ib-cr;6株测序菌株中4株接合传递成功,临床株对喹诺酮类和氨基糖甙类的耐药性部分传递给了受体株。结论 qnrA 基因在天津地区116株肠杆菌科临床株中甚为罕见;首次在天津发现 aac(6′)-Ib-cr 介导的喹诺酮类耐药。

肺炎克雷伯菌质粒介导的喹诺酮类耐药基因的研究

目的研究本地区质粒介导的喹诺酮类耐药基因aac(6’)-Ib-cr和qnr在肺炎克雷伯菌中的发生率及接合子对环丙沙星和左氧氟沙星不同耐药水平的发生机制。方法筛选2007年7月～2008年12月本院临床分离的产超广谱β-内酰胺酶的肺炎克雷伯菌共57株,采用PCR法检测qnrA、qnrB、qnrS和aac(6’)-Ib阳性菌株并对部分菌株进行测序。以大肠埃希菌J53为受体菌,通过接合试验从aac(6’)-Ib-cr和(或)qnr阳性菌株中获得接合子,采用E-test方法测定菌株的药敏情况。结果所分离的57株肺炎克雷伯菌中aac(6’)-Ib基因阳性菌12株,经测序全部为aac(6’)-Ib-cr基因,阳性检出率为21.1%;qnr基因阳性菌25株(43.9%),其中3株(5.3%)含qnrA基因,21株(36.8%)含qnrB基因,20株(35.1%)含qnrS基因;aac(6’)-Ib-cr、qnrA、qnrB和qnrS均阳性菌共3株(5.3%),qnrB和qnrS均阳性菌共13株(22.8%)。本研究中共有14株菌株接合试验获得成功,环丙沙星和左氧氟沙星对接合子的最低抑菌浓度(MIC)范围分别为0.25～0.5μg/ml和0.25～1μg/ml;接合子与受体菌的MIC值比较结果显示,环丙沙星耐药性提高了31～63倍,左氧氟沙星耐药性提高了17～63倍。结论本地区产超广谱β-内酰胺酶的肺炎克雷伯菌质粒介导的喹诺酮类耐药基因aac(6’)-Ib-cr和qnr携带率很高,部分菌株的喹诺酮类抗菌药物MIC值升高与喹诺酮类耐药基因aac(6’)-Ib-cr和(或)qnr有关。