利用DNA改组技术改造aac C1基因启动子活性的研究

从表达质粒pYPX2 5 1 (GenBank登陆号 :AY1 780 4 6 )中获得aacC1基因启动子 ,采用DNA改组 (DNAshuffling)技术在体外获得突变体。以lacZ作为报告基因 ,筛选获得活性明显改变的启动子。经过验证 ,对其中活性变化明显的 7个启动子用邻硝基苯基 β半乳糖苷 (ONPG)作为底物进行表达活性测定。结果表明 ,获得的强启动子比原来的提高了 3～ 8倍 ,而弱启动子则活性下降明显 ,其中 3个几乎无活性。进一步对这

不动杆菌临床分离株耐药性相关基因研究

目的:研究北京大学第一医院不动杆菌临床分离株耐药表型与基因型。方法:琼脂稀释法和E-test法测定13种抗菌药物对31株不动杆菌的最低抑菌浓度(M IC),PCR检测8种耐药相关基因并测序分析。结果:18株不动杆菌呈现多重耐药;aacC1,aacA4,PER-1,AmpC和Int1阳性率分别为58.1%(18/31),3.2%(1/31),3.2%(1/31),54.8%(17/31)和67.7%(21/31),aacC2,OXA-23和Int2阴性;敏感组和耐药组Int1检出率分别为23.1%和100%。耐药基因与已知序列同源性均>98%。结论:北京大学第一医院不动杆菌耐药问题严重,对β内酰胺类和氨基糖苷类抗生素耐药性分别与AmpC和aacC1相关;Int1与多重耐药相关。