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aadA叶绿体转化烟草对根际微土壤生物的影响
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作者 郭长虹 刘庆国 +3 位作者 刘佳莉 束永俊 吕月萍 余建平 《哈尔滨工业大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第4期141-144,共4页
为研究叶绿体转基因烟草对土壤根际微生物的影响,以aadA叶绿体转基因烟草和对照烟草为实验材料,对苗期、花期、成熟期烟草根际细菌、放线菌及真菌的菌落数进行统计,利用Biolog法分析微生物群落功能多样性.结果表明:在相同生育期,aadA叶... 为研究叶绿体转基因烟草对土壤根际微生物的影响,以aadA叶绿体转基因烟草和对照烟草为实验材料,对苗期、花期、成熟期烟草根际细菌、放线菌及真菌的菌落数进行统计,利用Biolog法分析微生物群落功能多样性.结果表明:在相同生育期,aadA叶绿体转基因烟草与对照烟草相比,根际土壤细菌、放线菌及真菌数量均无显著差异;根际土壤微生物群落的代谢相似,转基因烟草对微生物群落功能的影响不显著.aadA叶绿体转基因烟草没有对土壤微生物数量和功能多样性产生显著的影响. 展开更多
关键词 叶绿体转化烟草 根际微生物 Biolog法 aada基因
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大肠埃希菌ICU分离株发现aadA4/5、aph(3′)-Ⅰ型氨基糖苷类修饰酶基因 被引量:1
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作者 陈国忠 汪一萍 +4 位作者 应建飞 俞燕红 贺明阳 安敏飞 周成杰 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第19期2535-2538,共4页
目的了解分离于ICU的大肠埃希菌(ECO)氨基糖苷类药物各种耐药相关基因存在状况,探讨ECO多药耐药机制。方法收集2007年12月-2008年6月20株分离自医院ICU患者临床标本的ECO,采用纸片扩散法测定30种抗菌药物的敏感性;采用PCR法检测armA、r... 目的了解分离于ICU的大肠埃希菌(ECO)氨基糖苷类药物各种耐药相关基因存在状况,探讨ECO多药耐药机制。方法收集2007年12月-2008年6月20株分离自医院ICU患者临床标本的ECO,采用纸片扩散法测定30种抗菌药物的敏感性;采用PCR法检测armA、rmtB、npmA、aac(3)-Ⅰ、aac(3)-Ⅱ、aac(6′)-Ⅰb、aac(6′)-Ⅱ、ant(3″)-Ⅰ、ant(2″)-Ⅰ、ant(4′)-Ⅰa/b、aadA4/5、aadA6/16、aph(3′)-Ⅰ、aph(3′)-Ⅱb、aph(3′)-Ⅵa、3种16S rRNA甲基化酶与12种氨基糖苷类修饰酶基因。结果20株ECO中检出aac(3)-Ⅱ8株(40%)、aac(6′)-Ⅰb 3株(15%)、ant(3″)-Ⅰ3株(15%)、aph(3′)-Ⅰ1株(10%)a、adA4/5 13株(65%)5种氨基糖苷类修饰酶基因,未检出16S rRNA甲基化酶基因;在ECO中发现aadA4/5和aph(3′)-Ⅰ型氨基糖苷类修饰酶基因均为国内首次。结论ECO对氨基糖苷类药物耐药情况严重、机制复杂,产氨基糖苷类修饰酶为主要原因之一。 展开更多
关键词 大肠埃希菌 氨基糖苷类 氨基糖苷类耐药基因 氨基糖苷类修饰酶 16S rRNA甲基化酶 aada4/5 aph(3′)-Ⅰ
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丙肝病毒融合抗原基因NS_3-C定点整合入衣藻叶绿体基因组的研究 被引量:21
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作者 张中林 山松 +4 位作者 陈曦 苏宁 吴祥甫 钱凯先 沈桂芳 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期1-6,共6页
用PCR 方法从丙型肝炎病毒(HCV) cDNA 文库中克隆了两段DNA 片段,即HCV 基因组非结构NS3区抗原基因(约0.7 kb)和核心抗原C区抗原基因(约0.6 kb)的cDNA 片段。在两段cDNA 间加入连接肽S... 用PCR 方法从丙型肝炎病毒(HCV) cDNA 文库中克隆了两段DNA 片段,即HCV 基因组非结构NS3区抗原基因(约0.7 kb)和核心抗原C区抗原基因(约0.6 kb)的cDNA 片段。在两段cDNA 间加入连接肽Ser- Pro- Gly- Ser 的密码子序列,构建成融合抗原基因NS3- C。将该融合基因与衣藻叶绿体基因atpA 的启动子和rbcL 基因的3′末端连接,得到丙肝病毒融合抗原基因NS3- C表达盒,再将该表达盒与选择标记基因aadA 表达盒和衣藻叶绿体基因组同源片段连接,构建成衣藻叶绿体转化载体pSS6。基因枪法转化衣藻叶绿体,经壮观霉素筛选获得转化再生的单藻落,对转基因衣藻的PCR 和Southern 杂交分析表明,融合抗原基因NS3- C已整合到衣藻叶绿体基因组中。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 基因融合 叶绿体转化 aada基因 衣藻
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除草剂抗性基因bar导入烟草叶绿体 被引量:17
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作者 张中林 山松 +3 位作者 陈曦 刘春英 钱凯先 沈桂芳 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期574-578,共5页
将编码Phosphinothricin acetyltransferase的bar基因与水稻叶绿体psbA基因的启动子和终止子构建成表达盒,连同烟草叶绿体基因组同源片段rpl2-trnH-psbA和trnK-ORF509A以及选择标记基因aadA一起构建成烟草叶绿体转化载体pTZBA.基因枪法... 将编码Phosphinothricin acetyltransferase的bar基因与水稻叶绿体psbA基因的启动子和终止子构建成表达盒,连同烟草叶绿体基因组同源片段rpl2-trnH-psbA和trnK-ORF509A以及选择标记基因aadA一起构建成烟草叶绿体转化载体pTZBA.基因枪法转化烟草叶片,经壮观霉素筛选获得转化再生植株.分别以1.0kb的叶绿体同源片段trnK-ORF509A和0.6kb的bar基因为探针,对转基因烟草叶绿体DNA进行Southern杂交检测,证明外源基因已整合入烟草叶绿体基因组中.抗性试验表明,转基因植株具备除草剂(PPT)抗性. 展开更多
关键词 BAR基因 同源片段 烟草 aada基因 除草剂 叶绿体
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Bt叶绿体转基因植株的抗虫性及后代表型分析 被引量:12
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作者 张中林 陈曦 +1 位作者 钱凯先 沈桂芳 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1999年第9期947-951,共5页
将Bt CryIA(c) 基因与水稻( Oryza sativa L.) 叶绿体psbA 基因的启动子和终止子构建成表达盒,连同烟草( Nicotianatabacum L.) 叶绿体基因组同源片段rpl2_trnH_psbA... 将Bt CryIA(c) 基因与水稻( Oryza sativa L.) 叶绿体psbA 基因的启动子和终止子构建成表达盒,连同烟草( Nicotianatabacum L.) 叶绿体基因组同源片段rpl2_trnH_psbA和trnK_ORF509A 以及选择标记基因aadA一起构建成烟草叶绿体转化载体pTRS8。基因枪法转化烟草叶片,经壮观霉素筛选获得转化再生植株。有些转基因植株对3龄棉铃虫( Helicoverpa zea) 具有较强的毒杀作用,并能显著抑制昆虫蜕皮和生长发育。对高抗虫性植株的子一代(T1) 和子二代(T2) 进行的遗传学和分子生物学分析表明,Bt 基因已稳定地遗传给子代叶绿体。 展开更多
关键词 BT基因 叶绿体转化 抗虫作用 母系遗传 aada基因
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390株肠球菌耐药性及Ⅰ类整合子的检测 被引量:19
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作者 刘淑梅 许淑珍 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期849-851,共3页
目的调查390株肠球菌耐药性及Ⅰ类整合子的携带率,以利于临床治疗用药。方法根据NCCLS推荐的琼脂稀释法进行药敏试验,应用WHONET5软件进行统计分析;采用PCR方法进行Ⅰ类整合子的检测以及滤膜接合法进行质粒接合转移试验;联合药敏试验采... 目的调查390株肠球菌耐药性及Ⅰ类整合子的携带率,以利于临床治疗用药。方法根据NCCLS推荐的琼脂稀释法进行药敏试验,应用WHONET5软件进行统计分析;采用PCR方法进行Ⅰ类整合子的检测以及滤膜接合法进行质粒接合转移试验;联合药敏试验采用棋盘法。结果粪肠球菌对氨苄西林、青霉素、氯霉素、左氧氟沙星MIC50和MIC90分别为4、16μg/ml;8、16μg/ml;16、64μg/ml;4、16μg/ml;屎肠球菌对上述4种抗菌药物的MIC50和MIC90分别为64、128μg/ml;64、128μg/ml;32、128μg/ml;32、128μg/ml;粪肠球菌和屎肠球菌对万古霉素MIC50和MIC90均分别为2μg/ml和4μg/ml;324株粪肠球菌和66株屎肠球菌Ⅰ类整合子的携带率分别为53.1%和51.5%;Ⅰ类整合子携带aadA2基因;40株粪肠球菌和20株屎肠球菌中的Ⅰ类整合子全部转移到受体菌中;对链霉素MIC≤2 000μg/ml的菌株,链霉素与氨苄西林的FIC指数≤0.5。结论屎肠球菌对青霉素、氨苄西林、氯霉素、左氧氟沙星等抗菌药物的MIC50和MIC90显著高于粪肠球菌;万古霉素对粪肠球菌及屎肠球菌具有很好的抗菌作用;由质粒携带的整合子可通过质粒播散耐药性;携带Ⅰ类整合子及aadA2基因且非高耐链霉素的肠球菌,链霉素与氨苄西林具有协同抗菌作用。 展开更多
关键词 肠球菌 耐药性 Ⅰ类整合子 aada2基因
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苏云金芽孢杆菌(Bt)晶体毒蛋白基因在烟草叶绿体中的表达 被引量:27
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作者 张中林 任延国 +5 位作者 沈燕新 山松 范国昌 吴祥甫 钱凯先 沈桂芳 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2000年第3期270-277,共8页
将全长3.5kb的Bt基因3'端缺失,得到长为2.1kb、1.8kb的基因。分别将这3个长度 (1.8kb2.1kb、3.5kb)的基因置于水稻叶绿体psbA基因的启动于和终止子调控之下,并与选择 标记基因aadA... 将全长3.5kb的Bt基因3'端缺失,得到长为2.1kb、1.8kb的基因。分别将这3个长度 (1.8kb2.1kb、3.5kb)的基因置于水稻叶绿体psbA基因的启动于和终止子调控之下,并与选择 标记基因aadA(编码氨基糖苷-3'-腺苷酸转移酶,具壮观霉素抗性)表达盒相连5以烟草叶绿 体基因trnH-psbA-trnK为同源片段,构建成叶绿体转化载体pBT3、pBT8和pBT22。用基因枪 把Bt基因导入烟草叶绿体中,以壮观霉素筛选,获得转化再生植株。经Southern、Western检测 分析证明Bt基因已整合进入烟草叶绿体基因组中并得到表达。且子代呈现壮观霉素抗性,即 外源基因得到稳定的遗传。利用转基因植株叶片对棉铃虫进行杀虫实验,有些转化植株表现 出较强的抗虫性。总体上来说,转Bt全长基因的烟草植株,其杀虫效果最好,其余两种差异不 大。首次报道将Bt基因成功转入高等植物叶绿体并获得表达。 展开更多
关键词 BT基因 叶绿体 烟草 表达 苏云金芽孢杆菌
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烟草叶绿体转化载体的构建及转基因植株的获得 被引量:13
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作者 邹竹荣 张中林 +2 位作者 山松 倪丕冲 沈桂芳 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期410-415,共6页
选择烟草叶绿体基因组同源片段rp12-trnH-psbA和trnK-ORF509A,及aadA抗壮观霉素基因,构建烟草叶绿体转化载体pTRZ。制备pTRZ DNA金粉子弹,通过基因枪轰击烟草幼苗叶片,经壮观霉素筛选获得了愈伤组织和转化再生植株。对烟草叶绿体转化植... 选择烟草叶绿体基因组同源片段rp12-trnH-psbA和trnK-ORF509A,及aadA抗壮观霉素基因,构建烟草叶绿体转化载体pTRZ。制备pTRZ DNA金粉子弹,通过基因枪轰击烟草幼苗叶片,经壮观霉素筛选获得了愈伤组织和转化再生植株。对烟草叶绿体转化植株进行PCR和Southern分析,结果证明其中No.13、16、23为整入了外源aadA的叶绿体转基因植株,同时其子代呈现壮观霉素抗性,aadA基因得到稳定遗传。 展开更多
关键词 烟草 叶绿体转化 载体 构建 转基因植株
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定点整合抗虫基因到油菜叶绿体基因组并获得转基因植株 被引量:18
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作者 侯丙凯 胡赞民 +2 位作者 党本元 石锐 陈正华 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 2002年第3期187-192,共6页
以基因枪法进行了油菜叶绿体基因组的定点转化。载体 pNRAB携带抗壮观霉素的筛选标记基因aadA和抗虫基因cry1Aa10 ,基因的两侧被添加了可用于同源重组的叶绿体DNA序列。基因枪轰击过的油菜子叶柄经植株再生和壮观霉素筛选 ,获得了 36株... 以基因枪法进行了油菜叶绿体基因组的定点转化。载体 pNRAB携带抗壮观霉素的筛选标记基因aadA和抗虫基因cry1Aa10 ,基因的两侧被添加了可用于同源重组的叶绿体DNA序列。基因枪轰击过的油菜子叶柄经植株再生和壮观霉素筛选 ,获得了 36株抗性植株。PCR检测和Southern杂交显示 ,其中 4株的叶绿体基因组已被转化 ,外源基因已被定点整合进叶绿体基因组的rps7和ndhB基因之间。用转基因植株的叶片饲喂二龄小菜蛾 ,1周后幼虫死亡率达33%~ 47% ,存活幼虫的生长明显减慢 。 展开更多
关键词 定点整合 抗虫基因 油菜 叶绿体基因组 转基因植株
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Screening of Class 1 and Class 2 Integrons in Clinical Isolates of Pseudomonas aeruginosa Collected from Seven Hospitals in Turkey:A Multicenter Study
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作者 Aysegul Copur Cicek Aysegul Saral +9 位作者 Azer Ozad Duzgun Zeynep Cizmeci Tuba Kayman Pervin Ozlem Balci Tuba Dal Mehmet Firat Yelda Yazici Metin Sancaktar Osman Birol Ozgumus Cemal Sandalli 《Open Journal of Medical Microbiology》 2013年第4期227-233,共7页
Pseudomonas aeruginosa is one of the leading nosocomial pathogens worldwide, and their infections are difficult to treat due to acquired resistance to many antibiotics. This study aimed to detect class 1 and 2 integro... Pseudomonas aeruginosa is one of the leading nosocomial pathogens worldwide, and their infections are difficult to treat due to acquired resistance to many antibiotics. This study aimed to detect class 1 and 2 integrons and antibiotic susceptibility of clinical isolates of P. aeruginosa. Two hundred and five P. aeruginosa strains were collected from the seven general state hospitals in Turkey. They were characterized by antimicrobial susceptibility testing, screened for class 1 and class 2 integrons, and evaluated for the association between antibiotic resistance phenotypes and the presence of integrons. intI gene was amplified in 10 isolates (4.87%) by PCR and in seven isolates of them (70%) were found different gene cassettes. The aadA gene integrated into the class 1 integrons was most frequently found and it was followed by aac genes and blaOXA family genes. Sequence analysis of variable regions of the class 1 integrons showed five gene cassette arrays;aadA1(99%), aac(3)-Id(82%)-orf-aac(3”)-Ia(99%), aac(3)-Ie(83%)-blaoxa10(100%)- aadA1 (100%), aadA6(99%, 100%), aac(6’)-I(97%)-orf-aadA2(99%). No class 2 integron was detected. This study is the first multicenter study for class 1 integrons and it indicates the low rate of presence of class 1 gene cassette in P. aeruginosa. 展开更多
关键词 Pseudomonas aeruginosa Antibiotic Resistance Class 1 Integron aada Multicenter Study
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亚洲/澳大利亚航线协商协定7月起提高集装箱运价
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《海运情报》 2002年第8期38-38,共1页
关键词 亚洲/澳大利亚航线 集装箱 运价 aada
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