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Small-diameter acellular porcine corneal stroma for peripheral corneal ulceration treatment
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作者 Tian Liang Xia Wang +1 位作者 Jie Wu Yan Cheng 《International Journal of Ophthalmology(English edition)》 SCIE CAS 2024年第5期831-837,共7页
AIM:To evaluate the clinical efficacy of small-diameter acellular porcine corneal stroma(SAPS)for the treatment of peripheral corneal ulceration(PCU).METHODS:This retrospective clinical study included 18 patients(18 e... AIM:To evaluate the clinical efficacy of small-diameter acellular porcine corneal stroma(SAPS)for the treatment of peripheral corneal ulceration(PCU).METHODS:This retrospective clinical study included 18 patients(18 eyes)with PCU between April 2018 and December 2020.All patients had PCU and underwent lamellar keratoplasty with SAPS.Observation indicators included preoperative and postoperative best-corrected visual acuity(BCVA)and transparency of SAPS.The infection control rate in the surgical eye-lesion area was also calculated.RESULTS:Eighteen patients underwent lamellar keratoplasty with SAPS to treat PCU.None of the patients experienced rejection after 6mo(18/18)and 12mo(16/16)of follow-up.The BCVA(0.47±0.30)at the 6mo followup after operation was significantly improved compared with the baseline(0.99±0.80),and the difference was statistically significant(Z=-3.415,P<0.05).The BCVA at the 12mo follow-up after operation was not statistically significant compared to the 6mo(Z=0,P=1).With time,the SAPS graft gradually became transparent.At the 6mo(18/18)and 12mo(16/16)follow-up,none of the patients had recurrent corneal infection.CONCLUSION:SAPS is clinically effective in the treatment of PCU,improving the patient’s BCVA and reducing the incidence of rejection after keratoplasty. 展开更多
关键词 acellular porcine corneal stroma lamellar keratoplasty infectious corneal ulcer
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Acellular ostrich corneal stroma used as scaffold for construction of tissue-engineered cornea 被引量:6
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作者 Xian-Ning Liu Xiu-Ping Zhu +10 位作者 Jie Wu Zheng-Jie Wu Yong Yin Xiang-HuaXiao Xin Su Bin Kong Shi-Yin Pan Hua Yang Yan Cheng Na An Sheng-Li Mi 《International Journal of Ophthalmology(English edition)》 SCIE CAS 2016年第3期325-331,共7页
AIM: To assess acellular ostrich corneal matrix used as a scaffold to reconstruct a damaged cornea. METHODS: A hypertonic saline solution combined with a digestion method was used to decellularize the ostrich cornea... AIM: To assess acellular ostrich corneal matrix used as a scaffold to reconstruct a damaged cornea. METHODS: A hypertonic saline solution combined with a digestion method was used to decellularize the ostrich cornea. The microstructure of the acellular corneal matrix was observed by transmission electron microscopy (TEM) and hematoxylin and eosin (H&E) staining. The mechanical properties were detected by a rheometer and a tension machine. The acellular corneal matrix was also transplanted into a rabbit cornea and cytokeratin 3 was used to check the immune phenotype, RESULTS: The microstructure and mechanical properties of the ostrich cornea were well preserved after the decellularization process, in vitro, the methyl thiazolyl tetrazoUum results revealed that extracts of the acellular ostrich corneas (AOCs) had no inhibitory effects on the proliferation of the corneal epithelial or endothelial cells or on the keratocytes, The rabbit lamellar keratoplasty showed that the transplanted AOCs were transparent and completely incorporated into the host cornea while corneal turbidity and graft dissolution occurred in the acellular porcine cornea (APC) transplantation, The phenotype of the reconstructed cornea was similar to a normal rabbit cornea with a high expression of cytokeratin 3 in the superficial epithelial cell layer, CONCLUSION: We first used AOCs as scaffolds to reconstruct damaged corneas. Compared with porcine corneas, the anatomical structures of ostrich corneas are closer to those of human corneas. In accordance with the principle that structure determines function, a xenograft lamellar keratoplasty also confirmed that the AOC transplantation generated a superior outcome compared to that of the APC graft. 展开更多
关键词 OSTRICH acellular corneal stroma tissue engineering CORNEA
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Establishment of an untransfected human corneal stromal cell line and its biocompatibility to acellular porcine corneal stroma 被引量:5
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作者 Ting-Jun Fan Xiu-Zhong Hu +4 位作者 Jun Zhao Ying Niu Wen-Zhuo Zhao Miao-Miao Yu and Yuan Ge 《International Journal of Ophthalmology(English edition)》 SCIE CAS 2012年第3期286-292,共7页
AIM: To establish an untransfected human corneal stromal (HCS) cell line and characterize its biocompatibility to acellular porcine corneal stoma (aPCS). METHODS: Primary culture was initiated with a pure population o... AIM: To establish an untransfected human corneal stromal (HCS) cell line and characterize its biocompatibility to acellular porcine corneal stoma (aPCS). METHODS: Primary culture was initiated with a pure population of HCS cells in DMEM/F12 media (pH 7.2) containing 20% fetal bovine serum and various necessary growth factors. The established cell line was characterized by growth property, chromosome analysis, tumorigenicity assay, expression of marker proteins and functional proteins. Furthermore, the biocompatibility of HCS cells with aPCS was examined through histological and immunocytochemistry analyses and with light, electron microscopies. RESULTS: HCS cells proliferated to confluence 2 weeks later in primary culture and have been subcultured to passage 140 so far. A continuous untransfected HCS cell line with a population doubling time of 41.44 hours at passage 80 has been determined. Results of chromosome analysis, morphology, combined with the results of expression of marker protein and functional proteins suggested that the cells retained HCS cell properties. Furthermore, HCS cells have no tumorigenicity, and with excellent biocompatibility to aPCS. CONCLUSION: An untransfected and non-tumorigenic HCS cell line has been established, and the cells maintained positive expression of marker proteins and functional proteins. The cell line, with excellent biocompatibility to aPCS, might be used for in vitroreconstruction of tissue-engineered HCS. 展开更多
关键词 human corneal stromal cells cell line untransfected BIOCOMPATIBILITY acellular porcine corneal stroma
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生物角膜用于人角膜板层移植术后的临床疗效及激光扫描共焦显微镜动态观察 被引量:13
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作者 王素娟 张月琴 +3 位作者 李金 余晓菲 窦新岩 王丽娅 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期144-149,共6页
背景近年来由于角膜供体材料的缺乏,异种角膜移植研究逐渐受到研究者的关注,猪角膜脱细胞基质构建的生物角膜支架具有良好的生物相容性并已制备成生物角膜材料,但其用于人眼角膜移植后的临床效果及其组织形态学变化特征尚不清楚。目... 背景近年来由于角膜供体材料的缺乏,异种角膜移植研究逐渐受到研究者的关注,猪角膜脱细胞基质构建的生物角膜支架具有良好的生物相容性并已制备成生物角膜材料,但其用于人眼角膜移植后的临床效果及其组织形态学变化特征尚不清楚。目的观察用生物角膜进行人板层角膜移植术后的临床效果,并利用激光扫描共焦显微镜进行活体动态观察,评估生物角膜作为新型角膜替代材料进行人眼角膜板层移植的可行性。方法采用前瞻性系列病例观察研究方法,于2014年2—8月在河南省立眼科医院纳入药物治疗无效的感染性角膜炎或陈旧性角膜白斑患者15例15眼,包括真菌性角膜炎4例,细菌性角膜炎1例,混合感染性角膜炎9例,陈旧性角膜白斑1例。采用猪角膜脱细胞基质构建的生物角膜行患眼生物角膜板层移植术,以术眼的对侧正常眼作为对照。分别于术后3d、7d、1个月、3个月、6个月、9个月和12个月对术眼进行随访,对植片愈合情况进行评分,随访时间为1年。疗效指标主要包括角膜透明度、新生血管形成、角膜植片有无溶解或感染复发、最佳矫正视力(logMAR)。分别于术后3、6、9和12个月利用激光扫描共焦显微镜对角膜进行动态观察,记录和分析移植后角膜上皮和内皮细胞的形态和密度、角膜基质的形态特征以及角膜上皮下神经纤维的恢复情况。结果术眼术后3d早期出现角膜水肿等炎症反应,术后7d炎症反应消退。术后1个月植片透明,随访期间未出现角膜溶解、感染复发现象。术后6个月时1例患者出现青光眼,术后12个月时1例患者发生排斥反应。术眼术前及术后不同时间点间logMAR、角膜透明度评分、角膜新生血管评分的总体比较差异均有统计学意义(X2=92.63、59.37、10.50,均P〈0.05),其中术后视力、角膜透明度均较术前明显改善,差异均有统计学意义(均P〈0.05)。激光扫描共焦显微镜检查结果显示,术眼术后受体角膜上皮细胞逐渐覆盖植片,完成正常的上皮化,角膜上皮细胞形态接近对侧正常眼,但角膜内皮细胞体积大于对侧眼,而植片角膜基质中无细胞生长,明显与对侧眼角膜基质不同;术后6个月时8例患者植片内有上皮下神经纤维长入,但神经纤维走形弯曲,密度明显低于对侧正常眼。术后不同时间点角膜上皮细胞密度总体比较差异均无统计学意义(F=1.48,P=0.22)。对侧正常眼、术眼术后3、6、9和12个月角膜内皮细胞密度分别为(2542±119)、(1895±129)、(1869±135)、(1854±101)和(1844±103)个/mm2,术眼术后各个时间点角膜内皮细胞密度均明显低于对侧正常眼,差异均有统计学意义(均P〈0.05);术后6、9和12个月角膜上皮下神经纤维密度值分别为(1.26±0.13)、(3.62±0.81)和(5.98±0.44)mm/mm2,均明显高于前1个时间点的测定值,差异均有统计学意义(t′=-8.16、-7.24,均P=0.00)。结论用生物角膜行人眼角膜板层移植术后植片即可长期存活,重建眼表结构,改善患者视力,可替代人角膜供体材料。 展开更多
关键词 角膜移植 异种移植 植片生存/免疫 共焦显微镜 生物工程角膜 猪角膜脱细胞基质
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异种角膜基质的研究现状及问题 被引量:4
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作者 徐锦堂 陈建苏 +2 位作者 吴静 罗小玲 潘红卫 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2010年第7期601-604,共4页
在角膜3层(上皮层+Bowman’s膜、基质层、内皮层+Descemet’s膜)膜中,按等量计算,基质层的免疫原性是最低的。应用脱细胞的异种角膜基质移植后,神经和基质细胞可以再生,术后未见排斥反应,植片获得透明。因此,异种角膜基质有望成为板层... 在角膜3层(上皮层+Bowman’s膜、基质层、内皮层+Descemet’s膜)膜中,按等量计算,基质层的免疫原性是最低的。应用脱细胞的异种角膜基质移植后,神经和基质细胞可以再生,术后未见排斥反应,植片获得透明。因此,异种角膜基质有望成为板层角膜移植的供体和组织工程角膜的载体。现就异种角膜基质的研究现状及问题综述如下。 展开更多
关键词 异种角膜基质 脱细胞基质 角膜移植 载体
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猪脱细胞角膜基质的制备及组织学特征观察 被引量:6
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作者 林旭初 惠延年 +2 位作者 孟浩 张勇杰 金岩 《国际眼科杂志》 CAS 2007年第1期49-51,共3页
目的:制备低抗原性、保留天然角膜结构的组织工程角膜支架材料。方法:对猪角膜进行反复冻融联合酶消化,最后冷冻干燥,观察其组织学特征。结果:制备的脱细胞猪角膜基质的细胞成分能被有效去除,材料保留了利于角膜上皮生长的基底膜和有序... 目的:制备低抗原性、保留天然角膜结构的组织工程角膜支架材料。方法:对猪角膜进行反复冻融联合酶消化,最后冷冻干燥,观察其组织学特征。结果:制备的脱细胞猪角膜基质的细胞成分能被有效去除,材料保留了利于角膜上皮生长的基底膜和有序排列的网状的基质胶原结构,有一定的强度和韧性。结论:采用反复冻融联合酶消化、冷冻干燥法能获得一种无细胞的组织工程角膜支架材料。 展开更多
关键词 生物衍生材料 脱细胞角膜基质 组织工程
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脱细胞猪角膜基质体外支持角膜上皮和基质细胞的生长(英文) 被引量:4
7
作者 林旭初 惠延年 +2 位作者 孟浩 张永杰 金岩 《国际眼科杂志》 CAS 2008年第7期1293-1295,共3页
目的:探讨脱细胞猪角膜基质体外能否支持兔角膜细胞的生长。方法:体外培养兔角膜上皮细胞和基质细胞,并接种到制备的脱细胞猪角膜基质上,倒置相差显微镜和组织学观察细胞生长情况。结果:上皮细胞能在脱细胞猪角膜基质上贴附生长,10d... 目的:探讨脱细胞猪角膜基质体外能否支持兔角膜细胞的生长。方法:体外培养兔角膜上皮细胞和基质细胞,并接种到制备的脱细胞猪角膜基质上,倒置相差显微镜和组织学观察细胞生长情况。结果:上皮细胞能在脱细胞猪角膜基质上贴附生长,10d时可形成2~3层的复层结构。基质细胞在脱细胞猪角膜基质上贴附生长后可向材料深层迁徙。结论:制备的脱细胞猪角膜基质体外可支持兔角膜上皮细胞和基质细胞的生长。 展开更多
关键词 脱细胞猪角膜基质 角膜上皮 角膜基质细胞 组织工程
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生物工程角膜移植对真菌性角膜溃疡的临床疗效及其对组织形态学的影响 被引量:4
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作者 刘全坤 李恒 +3 位作者 杨旭 苟文军 李虹谕 林莉 《中国医学前沿杂志(电子版)》 2021年第11期102-106,共5页
目的探讨生物工程角膜移植对真菌性角膜溃疡的临床疗效及对组织形态学的影响。方法选取2017年10月至2019年5月遂宁市中心医院收治的30例真菌性角膜溃疡患者为研究对象。采用脱细胞猪角膜基质构建的生物角膜对患眼进行角膜板层移植术,以... 目的探讨生物工程角膜移植对真菌性角膜溃疡的临床疗效及对组织形态学的影响。方法选取2017年10月至2019年5月遂宁市中心医院收治的30例真菌性角膜溃疡患者为研究对象。采用脱细胞猪角膜基质构建的生物角膜对患眼进行角膜板层移植术,以对侧眼为对照。随访12个月,观察移植后移植物上皮化完成情况,利用共聚焦显微镜观察移植物角膜上皮细胞、内皮细胞密度和上皮下神经纤维修复情况。结果术后随访中患者均未再发现孢子和菌丝,术后1年,术眼角膜表面曲线光滑度与对侧眼相当。术后角膜上皮愈合时间为3 d至1周,随时间延长,患者眼部刺激性症状评分、新生血管评分、移植物透明度评分均呈下降趋势。术后3、6、12个月,术眼上皮细胞密度与对侧眼比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。术后3、6、12个月,术眼内皮细胞密度均显著低于对侧眼(均P<0.05)。术后6个月,术眼上皮下神经纤维密度最低(P<0.05),术后12个月,术眼上皮下神经纤维密度逐渐增加,但仍显著低于对侧眼(P<0.05)。结论采用生物工程角膜行板层角膜移植治疗真菌性角膜溃疡的临床效果显著,安全性高,患者预后较好。 展开更多
关键词 生物工程 真菌性角膜溃疡 脱细胞猪角膜基质
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用共聚焦显微镜观察角膜原位磨镶术术后角膜基质中“低细胞区”形态学改变 被引量:1
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作者 乔丽萍 孙惠敏 +2 位作者 赵少贞 杨柳 袁佳琴 《医学研究生学报》 CAS 2011年第8期831-834,共4页
目的角膜原位磨镶术(Laserin situ keratom ileusis,LASIK)通过制作角膜瓣,在其下基质中用激光切削组织,改变角膜曲率,达到矫正屈光不正的目的。文中旨在应用共聚焦显微镜探讨LASIK术后远期角膜基质中"低细胞区域"的相关因素... 目的角膜原位磨镶术(Laserin situ keratom ileusis,LASIK)通过制作角膜瓣,在其下基质中用激光切削组织,改变角膜曲率,达到矫正屈光不正的目的。文中旨在应用共聚焦显微镜探讨LASIK术后远期角膜基质中"低细胞区域"的相关因素。方法设计自身配对实验研究。选择2003年4月至2009年7月期间在天津医科大学眼科中心屈光手术门诊和武警医学院附属医院眼科就诊LASIK手术的病例34人(68眼),按等效屈光度分为2组,屈光度<-6.0D为低、中度近视眼组37眼,屈光度>-6.0D为高度近视眼组31眼。分别在术前、术后第1、3、7、10、30、60、90天,应用活体共聚焦显微镜(Con-foscan 3.0)观察中央角膜基质细胞形态学改变,测量角膜各层厚度并进行相关性分析。结果 68眼(100%)中央角膜见到平均深度为(44.01±10.67)μm的低细胞区域。低细胞区内的角膜细胞核排列无序,细胞核形态与正常角膜细胞核有异,细胞核反射亮度正常,细胞缺失区呈片状。低、中度近视眼与高度近视眼的界面角膜细胞核数、低细胞区域深度差异无统计学意义。结论角膜原位磨镶术后远期角膜基质出现"低细胞区",分析低细胞区的深度与手术时间、年龄、术前屈光状态、激光削切深度、激光能量、角膜瓣基质厚度、角膜瓣厚度、剩余基质床厚度、上皮厚度以及均无相关性。。 展开更多
关键词 角膜原位磨镶术 角膜基质 远期 低细胞区域 共聚显微镜 活体
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脱细胞猪角膜基质体外支持皮肤细胞生长的实验研究 被引量:2
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作者 林旭初 孙涛 +2 位作者 金岩 惠延年 孟浩 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2009年第8期565-567,共3页
目的探讨脱细胞猪角膜基质体外是否支持皮肤细胞的生长。方法制备脱细胞猪角膜基质(前期实验已完成)。体外培养人皮肤表皮细胞和成纤维细胞,取第3代人皮肤成纤维细胞接种在脱细胞猪角膜基质的中间基质面,培养3d后,将材料翻转,取第3代人... 目的探讨脱细胞猪角膜基质体外是否支持皮肤细胞的生长。方法制备脱细胞猪角膜基质(前期实验已完成)。体外培养人皮肤表皮细胞和成纤维细胞,取第3代人皮肤成纤维细胞接种在脱细胞猪角膜基质的中间基质面,培养3d后,将材料翻转,取第3代人皮肤表皮细胞接种在材料的上皮面上,再培养10d后,取细胞-支架复合体制作石蜡切片,HE染色后光镜下观察。结果组织学观察显示皮肤的表皮细胞和成纤维细胞体外均可在脱细胞猪角膜基质上黏附生长。接种10d后,皮肤表皮细胞在材料表面形成复层结构,可见角化的细胞。接种13d可见成纤维细胞存活并在支架层间生长。结论脱细胞猪角膜基质有良好的细胞相容性,在体外能支持皮肤细胞的生长和增生。 展开更多
关键词 脱细胞猪角膜基质 皮肤 表皮细胞 成纤维细胞 组织工程角膜
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人脐静脉内皮细胞移植治疗角膜内皮功能衰竭的动物实验研究 被引量:1
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作者 崔丽 马翔 赵艳辉 《国际眼科杂志》 CAS 2014年第6期1009-1012,共4页
目的:探讨异种脱细胞角膜基质为载体培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)进行后板层角膜移植(PLEK)治疗角膜内皮衰竭的可行性。方法:新西兰白兔30只,随机分为3组,实验组、基质组和对照组,每组10只,术中去除角膜内皮细胞,建立角膜内皮衰竭动物模... 目的:探讨异种脱细胞角膜基质为载体培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)进行后板层角膜移植(PLEK)治疗角膜内皮衰竭的可行性。方法:新西兰白兔30只,随机分为3组,实验组、基质组和对照组,每组10只,术中去除角膜内皮细胞,建立角膜内皮衰竭动物模型,实验组和基质组行后板层角膜移植术,对照组仅去除角膜后板层组织,不进行移植。术后观察3mo,对三组角膜的水肿混浊程度和中央角膜厚度进行统计学分析。结果:术后7d,实验组角膜水肿程度较基质组和对照组明显减轻,透明度增加。术后3mo时,实验组内皮细胞密度为2026.4±129.3个/mm2,中央角膜厚度平均为505.2±25.4μm,基质组中央角膜厚度平均为1 535.6±114.5μm,而对照组为1493.5±70.2μm。结论:实验以异种脱细胞角膜基质为载体培养人脐静脉内皮细胞,行后板层角膜移植术,治疗角膜内皮衰竭取得了初步成功。移植的人脐静脉内皮细胞能够在活体上成活,并具有一定的角膜内皮细胞的生物学功能,维持角膜透明,为临床上治疗角膜内皮疾病提供了新的思路和方法。 展开更多
关键词 人脐静脉内皮细胞 脱细胞角膜基质 后板层角膜移植
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脱细胞真皮基质在角膜中植入性的生物力学研究 被引量:2
12
作者 汲婧 刘子源 +2 位作者 张晶 李学民 王薇 《力学学报》 EI CSCD 北大核心 2014年第1期145-154,共10页
对脱细胞真皮基质(acellular dermal matrix,ADM)囊袋植入兔角膜后的生物相容性、生物学转归及组织结构改变进行生物力学研究,以探讨其作为组织工程角膜支架材料的可行性.对ADM进行了系统的组织微观结构观察和植入性实验研究,组织结构... 对脱细胞真皮基质(acellular dermal matrix,ADM)囊袋植入兔角膜后的生物相容性、生物学转归及组织结构改变进行生物力学研究,以探讨其作为组织工程角膜支架材料的可行性.对ADM进行了系统的组织微观结构观察和植入性实验研究,组织结构观察包括HE染色、胶原染色、免疫荧光染色和透射电镜观察.在植入实验中,将ADM按不同预处理方法分为无干预组、脱水组和复水组,将3组ADM囊袋植入兔角膜,观察其术后不同时期在体和离体的生物相容性和组织学特性.结果发现:ADM由横纵交替、排列疏松的Ⅰ和Ⅲ型胶原纤维束构成,未见细胞结构;囊袋植入角膜后有不同程度的炎症反应,部分植片透明;组织学观察显示3组ADM植入角膜后均有细胞长入,并进行了胶原纤维重塑.研究工作表明,经适当预处理且结构致密的脱细胞真皮基质植入后可以长期稳定存留于角膜内,是一种比较理想的组织工程角膜支架. 展开更多
关键词 眼生物力学 脱细胞真皮基质 生物相容性 角膜基质支架 角膜组织工程
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脱细胞腮腺基质的制备及组织学特征初步观察 被引量:1
13
作者 张林 甄恩明 +3 位作者 李宏波 张瑞智 张琼玲 朱形好 《口腔颌面外科杂志》 CAS 2009年第2期90-93,共4页
目的:探讨脱细胞腮腺支架材料的制备方法,制备涎腺组织工程的理想支架材料。方法:对新西兰大白兔腮腺进行冻融联合酶消化,最后冷冻干燥,观察其组织学特征。结果:制备的脱细胞腮腺基质的细胞成分能被有效去除,材料保留了利于腮腺细胞生... 目的:探讨脱细胞腮腺支架材料的制备方法,制备涎腺组织工程的理想支架材料。方法:对新西兰大白兔腮腺进行冻融联合酶消化,最后冷冻干燥,观察其组织学特征。结果:制备的脱细胞腮腺基质的细胞成分能被有效去除,材料保留了利于腮腺细胞生长的三维网状基质胶原结构,有一定的强度和韧性。结论:采用反复冻融联合酶消化、冷冻干燥法能获得一种无细胞的理想组织工程腮腺支架材料。 展开更多
关键词 生物支架材料 脱细胞腮腺基质 组织工程
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猪脱细胞角膜基质人板层角膜移植术后植片上皮化的临床观察 被引量:7
14
作者 段虎成 陈瑞 罗嘉婧 《眼科学报》 2019年第2期85-89,共5页
目的:观察猪脱细胞角膜基质进行人板层角膜移植术后角膜植片上皮化的临床过程。方法:收集2017年1月至2018年1月在佛山市第二人民医院经药物治疗无效的感染性角膜炎患者5例。采用脱细胞角膜基质(商品名:艾欣瞳)行板层移植术,以对侧眼为... 目的:观察猪脱细胞角膜基质进行人板层角膜移植术后角膜植片上皮化的临床过程。方法:收集2017年1月至2018年1月在佛山市第二人民医院经药物治疗无效的感染性角膜炎患者5例。采用脱细胞角膜基质(商品名:艾欣瞳)行板层移植术,以对侧眼为对照。术后3 d,7 d,1个月,3个月,6个月对患者进行随访,在裂隙灯显微镜下观察移植后植片上皮化完成过程。术后1,3,6个月共聚焦显微镜观察植片上角膜上皮细胞密度及上皮下神经纤维修复情况。结果:脱细胞角膜基质板层角膜移植术后3 d开始出现上皮化,术后10d上皮化逐步完成,但角膜上皮排列疏松,荧光素染色仍有点状染色。激光扫描共聚焦显微镜检查结果显示:术后1,3,6个月角膜上皮细胞排列规则、紧密,与对侧眼比较角膜上皮细胞密度差异无统计学意义(P>0.05)。结论:应用脱细胞角膜基质行板层角膜移植术后植片上皮化过程能够顺利完成。 展开更多
关键词 猪角膜脱细胞基质 板层角膜移植 异种移植 生物工程角膜
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小鼠胚胎干细胞条件培养液培养的人角膜内皮细胞在脱细胞猪角膜基质上单层细胞片的构建 被引量:1
15
作者 鹿晓燕 王智崇 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期705-709,共5页
背景 目前角膜供体来源短缺,且体外培养的人角膜内皮细胞(HCECs)难以再生和扩增,为临床上角膜移植的开展带来了很大困难,组织工程角膜的构建仍是研究的主要课题.前期研究已证实,小鼠胚胎干细胞条件培养基(ESC-CM)能够促进体外HCECs... 背景 目前角膜供体来源短缺,且体外培养的人角膜内皮细胞(HCECs)难以再生和扩增,为临床上角膜移植的开展带来了很大困难,组织工程角膜的构建仍是研究的主要课题.前期研究已证实,小鼠胚胎干细胞条件培养基(ESC-CM)能够促进体外HCECs的增生,脱细胞猪角膜基质(APCS)是较好的支架材料,但ESC-CM培养的HCECs是否能在APCS上融合成单层细胞鲜见研究. 目的 研究ESC-CM培养的HCECs在APCS上是否能够形成单层细胞. 方法 用小鼠ESC-CM培养液培养小鼠ES-E14细胞,收集培养上清液,离心后按体积比1∶3与人角膜内皮细胞培养液(CEM)混合,制备体积分数25% ESC-CM液.取穿透角膜移植术后剩余的供体人角巩膜缘组织,采用组织块培养法用ESC-CM对HCECs进行培养和传代,采用逆转录PCR法检测HCECs中Ⅷ型胶原蛋白(ColⅧ)与神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达以鉴定细胞.取猪角膜,利用磷脂酶A2和碳酸氢盐溶液脱细胞法制备APCS,将第2代HCECs混合液按照800/mm2的密度种植于灭菌的APCS上进行培养,于倒置相差显微镜下观察细胞形态,采用苏木精-伊红染色法观察培养细胞的组织结构;采用免疫荧光法检测构建的HCECs单细胞片中闭锁小带蛋白-1(ZO-1)和Na+-K+-ATP酶的表达. 结果 体外培养的HCECs呈典型的六角形,内皮特异性标志物ColⅧ和NSE mRNA表达阳性.脱细胞APCS呈白色透明状,苏木精-伊红染色显示APCS中无角膜细胞,但角膜胶原纤维排列规则.第2代HCECs复水后可在APCS上生长并贴附,培养后7d融合成单层细胞片,细胞片上HCECs的细胞密度为(2 694± 143)/mm2.构建的HCECs片中内皮细胞泵功能相关蛋白ZO-1和Na+-K+-ATP酶均呈阳性表达,呈红色荧光. 结论 25%ESC-CM可促进HCECs的生长并维持细胞的正常形态,APCS可为HCECs片的构建提供支架和较好的生存微环境.在APCS形成的HCECs单细胞片可表达HCECs泵功能,是角膜移植的良好供体. 展开更多
关键词 角膜基质/移植 角膜内皮细胞 组织工程/方法 组织支架 条件培养液 小鼠胚胎干细胞 猪脱细胞角膜基质
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生物工程角膜治疗真菌性角膜炎的临床效果 被引量:1
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作者 林莉 王宁 肖丹 《广西医学》 CAS 2021年第18期2190-2194,共5页
目的观察生物工程角膜治疗真菌性角膜炎的临床效果。方法选取15例(15眼)真菌性角膜炎患者,均使用脱细胞猪角膜基质构建的生物工程角膜施行板层角膜移植手术治疗。观察患者术后早期(术后1个月)恢复情况、术后远期效果及并发症发生情况,... 目的观察生物工程角膜治疗真菌性角膜炎的临床效果。方法选取15例(15眼)真菌性角膜炎患者,均使用脱细胞猪角膜基质构建的生物工程角膜施行板层角膜移植手术治疗。观察患者术后早期(术后1个月)恢复情况、术后远期效果及并发症发生情况,比较患者手术前后的视力。结果随访期间,所有患者眼部感染均得到控制,无感染复发,自觉症状均在术后1~2周内逐渐改善。除1例角膜植片在术后2个月发生溶解以外,其余患者的生物角膜维持在基本透明的状态,视力均有不同程度的提高。结论板层角膜移植术中采用生物工程角膜治疗真菌性角膜炎安全、有效。 展开更多
关键词 真菌性角膜炎 生物工程角膜 脱细胞猪角膜基质 角膜移植术 板层角膜移植
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复方倍他米松对异种角膜板层移植术后免疫排斥反应的影响
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作者 程燕 刘先宁 +3 位作者 吴洁 肖湘华 潘士印 朱秀萍 《国际眼科杂志》 CAS 北大核心 2018年第1期21-26,共6页
目的:观察结膜下注射复方倍他米松对鸵鸟-兔眼板层角膜移植术后免疫排斥反应的缓释治疗作用。方法:16只6周龄健康新西兰白兔角膜(单眼)行板层角膜移植术,植片应用鸵鸟脱细胞的角膜基质,术后分成两组,实验组术毕及术后结膜下注射复方倍... 目的:观察结膜下注射复方倍他米松对鸵鸟-兔眼板层角膜移植术后免疫排斥反应的缓释治疗作用。方法:16只6周龄健康新西兰白兔角膜(单眼)行板层角膜移植术,植片应用鸵鸟脱细胞的角膜基质,术后分成两组,实验组术毕及术后结膜下注射复方倍他米松注射液(每隔7d一次),对照组术毕及术后结膜下注射地塞米松磷酸钠注射液(每隔7d一次)。分别于术后1、2wk,1、2mo取兔角膜组织做石蜡包埋切片,进行HE染色观察组织特点,同时进行间接免疫荧光法检测CD4^+、CD8^+T淋巴细胞的变化。结果:术后2mo,实验组角膜植片在位,并保持透明,新生血管极少,组织切片HE染色和间接免疫荧光染色结果显示,仅见少许中性粒细胞浸润,未见CD4^+、CD8^+T淋巴细胞;对照组炎症反应明显,角膜植片混浊,组织切片HE染色和间接免疫荧光染色结果显示,炎性反应以中性粒细胞浸润为主,可见CD4^+、CD8^+T淋巴细胞。结论:复方倍他米松作为长效缓释剂可有效抑制鸵鸟-兔板层角膜移植术后免疫排斥反应,延长植片的存活时间。 展开更多
关键词 鸵鸟去细胞角膜基质 异种板层角膜移植 免疫排斥反应 CD4+T淋巴细胞 CD8+T淋巴细胞
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无细胞真皮基质与自体微粒皮复合移植治疗功能部位深度烧伤创面
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作者 叶以铨 朱水法 《现代医药卫生》 2004年第15期1462-1462,共1页
目的 :治疗大面积深度的烧伤创面 ,解决自体皮来源紧张 ,减轻供皮区疤痕增生 ,同时又改善植皮区外观和功能。方法 :应用无细胞真皮基质与自体微粒皮复合移植应用于4例切削痂的烧伤创面。结果 :未发现排斥反应。创面愈合全自体微粒皮覆... 目的 :治疗大面积深度的烧伤创面 ,解决自体皮来源紧张 ,减轻供皮区疤痕增生 ,同时又改善植皮区外观和功能。方法 :应用无细胞真皮基质与自体微粒皮复合移植应用于4例切削痂的烧伤创面。结果 :未发现排斥反应。创面愈合全自体微粒皮覆盖无细胞真皮基质反映了自体表皮在迁移、增植和扩展过程中的特殊性。与对照组部位相比 ,未见明显差异。结论 :到目前为止 ,观察3个月内 ,自体微粒皮、自体薄皮片与无细胞真皮基质复合移植后外观和功能等同 ,并优于单纯刃厚自体皮移植。 展开更多
关键词 无细胞真皮基质 自体微粒皮 复合移植 治疗 烧伤
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鸵鸟去细胞异种角膜基质载体异位移植对BALB/c小鼠外周血T细胞亚群的影响 被引量:1
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作者 刘先宁 吴洁 +3 位作者 肖湘华 潘士印 银勇 朱秀萍 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期617-620,共4页
背景 鸵鸟去细胞角膜基质具有与人角膜基质相似的天然结构,有望成为直接应用或构建生物角膜理想的载体材料之一. 目的 用鸵鸟角膜制备去细胞基质载体,研究其免疫原性,为产业化开发早日用于临床提供实验基础.方法 收集新鲜鸵鸟和猪眼球... 背景 鸵鸟去细胞角膜基质具有与人角膜基质相似的天然结构,有望成为直接应用或构建生物角膜理想的载体材料之一. 目的 用鸵鸟角膜制备去细胞基质载体,研究其免疫原性,为产业化开发早日用于临床提供实验基础.方法 收集新鲜鸵鸟和猪眼球各20个,采用低温冷冻联合酶消化及干燥剂脱水法制备鸵鸟及猪去细胞角膜基质载体,用Co^60照射法进行消毒.按随机数字表法将雄性BALB/c小鼠45只随机分为伪手术组、猪去细胞角膜基质组和鸵鸟去细胞角膜基质组,伪手术组小鼠仅制作囊袋,不植入异种角膜基质片,其余两组分别取干燥脱水法制备的猪、鸵鸟去细胞角膜基质载体(复水后每片湿质量为10 mg)异位植入BALB/c小鼠背部皮下,术后观察伤口愈合情况,并分别于术后7、14、28 d获取BALB/c小鼠外周血,进行免疫荧光标记及流式细胞仪分析,比较两种异种角膜基质对小鼠CD4^+、CD8^+、CD25^+表型的动态影响.结果 猪、鸵鸟去细胞角膜基质载体小鼠植入处皮肤无红肿及渗出,伤口愈合良好.术后7、14和28 d,伪手术组、猪去细胞角膜基质组和鸵鸟去细胞角膜基质组外周血中CD4^+细胞百分率的差异均无统计学意义(F=0.74,P=0.50;F=0.39,P=0.05;F=3.46,P=0.58);外周血中CD8^+细胞百分率的差异均无统计学意义(F=1.75,P=0.21;F=1.14,P=0.35;F=0.78,P=0.48);外周血中CD25^+细胞百分率差异亦均无统计学意义(F=0.52,P=0.61;F=3.53,P=0.62;F=2.42,P=0.13).结论 鸵鸟去细胞角膜基质载体的免疫原性低,具有重要的开发价值. 展开更多
关键词 鸵鸟 去细胞角膜基质 免疫原性 异位移植 T淋巴细胞 流式细胞术 近交系BALB C小鼠
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异种去细胞角膜基质浸提液对CHL细胞毒性的实验研究
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作者 刘先宁 汪耀 +4 位作者 肖湘华 潘士印 银勇 安娜 朱秀萍 《现代检验医学杂志》 CAS 2016年第1期112-114,共3页
目的通过鸵鸟去细胞角膜基质浸提液对中国仓鼠肺纤维细胞(CHL)毒性的实验观察,筛选出浸提液的最大无毒浓度,为进一步完成该去细胞角膜基质材料的染色体畸变实验奠定基础。方法采用细胞培养的方法,将鸵鸟去细胞角膜基质材料制备成... 目的通过鸵鸟去细胞角膜基质浸提液对中国仓鼠肺纤维细胞(CHL)毒性的实验观察,筛选出浸提液的最大无毒浓度,为进一步完成该去细胞角膜基质材料的染色体畸变实验奠定基础。方法采用细胞培养的方法,将鸵鸟去细胞角膜基质材料制备成浸提液,用浸提原液、1:2,1:4稀释的浸提液与传代培养的CHL细胞共同培养,同时设立阴性、阳性对照,参考MTT比色法评价24h后对细胞生长的影响。结果1:4稀释的浸提液既无毒性,又具有促进细胞生长的作用。结论采用CHL细胞进行细胞毒性试验,依据分级结果并结合细胞形态学特征可筛选出鸵鸟去细胞角膜基质浸提液进行CHL细胞染色体畸变实验的基准无毒浓度。 展开更多
关键词 鸵鸟去细胞角膜基质浸提液 细胞毒性试验 基准无毒浓度
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