PNH病人血浆中AchE含量的测定

用ＥＬＩＳＡ方法测定阵发性睡眠性血红蛋白尿症（ＰＮＨ）病人血浆和红细胞膜中乙酰胆碱酯酶（ＡｃｈＥ）的含量，结果显示ＰＮＨ病人红细胞膜中的ＡｃｈＥ低于正常，而血浆中的ＡｃｈＥ高于正常．

黄饭花对α-葡萄糖苷酶、AChE和亚硝酸根的抑制活性研究

研究黄饭花不同部位提取物对α-葡萄糖苷酶、乙酰胆碱酯酶和对亚硝酸根离子的清除能力。结果表明黄饭花60%乙醇提取物、乙酸乙酯部位提取物和正丁醇部位提取物的抑制α-葡萄糖苷酶活性强于阳性对照阿卡波糖(IC50=2.998 mg/m L),其IC50值为1.640、0.952、1.900 mg/m L;黄饭花乙酸乙酯部位提取物对乙酰胆碱酶(acetyl cholinesterase,ACh E)的抑制作用效果强于阳性对照利斯的明(IC50=0.745 mg/m L),其IC50值为0.503 mg/m L;黄饭花乙酸乙酯部位提取物对亚硝酸根离子的清除活性约高于阳性对照VC(IC50=1.199 mg/m L),其IC50值为1.079 mg/m L。黄饭花乙酸乙酯部位的提取物具有较强的抑制α-葡萄糖苷酶和ACh E活性及清除亚硝酸离子的能力。

毒死蜱和甲氨基阿维菌素苯甲酸盐的联合增效作用机理研究

以水稻褐飞虱为试虫,从对靶标酶和水解酶抑制作用两个方面,研究了毒死蜱和甲氨基阿维菌素苯甲酸盐联合增效作用机理。结果表明,以毒死蜱为毒力标准,甲氨基阿维菌素苯甲酸盐对乙酰胆碱酯酶、羧酸酯酶和谷胱甘肽S一转移酶的相对毒力指数分别为:0.76、1.52和0.75,与毒死蜱联合抑制作用的相对毒力指数分别为10.41、11.68和7.28,明显高于独立作用。药代动力学研究表明,毒死蜱和甲氨基阿维菌素苯甲酸盐对乙酰胆碱酯酶活性的抑制方式为竞争性抑制。

光寻址电位式传感器在有机磷检测上的应用

通过将乙酰胆碱酯酶用戊二醛交联法固定在光寻址电位式传感器的H+敏Si3N4膜上,即可用于检测有机磷农药。介绍了该传感器的工作原理及制作方法,并且分析探讨了缓冲溶液和乙酰胆碱底液的影响,还给出了在不同抑制时间和不同有机磷浓度下的响应特性。实验表明这是一种简捷灵敏、高效实用的有机磷农药检测新方法。

基于普鲁士蓝/碳纳米管纳米棒修饰电极用于有机磷农药检测的研究

通过在碳纳米管(MWCNTs)表面原位自发还原形成普鲁士蓝纳米颗粒(PB),制备PB包覆的MWCNTs(PB@MWCNTs)纳米棒,并以壳聚糖(CS)为交联剂,制备了有机磷农药电流型乙酰胆碱酯酶(AChE)生物传感器.实验表明,PB@MWCNTs纳米棒独特的纳米结构,增强了PB稳定性,加快了电子传递的速率,保持了乙酰胆碱酯酶(AChE)活性.制备的传感器对有机磷农药(OPs)呋喃丹的检测具有检测限低3 nmol/L、灵敏度高和使用寿命长等优点.

用多项生物标志物评价家用洗涤剂对小鼠的早期影响

将小鼠暴露于不同浓度的家用洗涤剂后,对肝ATP酶、谷胱甘肽转硫酶(GST)、总氧自由基清除能力(TOSC)和脑乙酰胆碱酯酶(AChE)进行测定.结果显示,4周龄的小鼠暴露于家用洗涤剂时,在4~12d时间里即可使AChE、GST、TOSC等生物标志物受到影响,但ATP酶活力改变不明显,这些生物标志物的改变证明了家用洗涤剂对小鼠的早期影响.

生化法快速测定蔬菜中农药残毒

用自行研制的便携式农药残毒速测仪 ,对蔬菜中残留农药进行生化检测。依据有机磷和氨基甲酸酯类农药对乙酰胆碱酯酶的活性有抑制的原理 ,绘制农药残毒———吸光度标准曲线 ,读出吸光度即得到相应的农药浓度。

芪甲酸衍生物的合成及抑制乙酰胆碱脂酶活性的研究

本文报道了22个芪甲酸类衍生物的合成及抑制乙酰胆碱酯酶的活性,实验证明其中19个化合物具显著的抑制该酶的活性。抗癌活性筛选正在进行中。

新型体外胆碱酯酶抑制剂筛选体系的构建

目的:构建新型简便可靠的体外胆碱酯酶抑制剂筛选体系。方法:从SD大鼠大脑和血清中提取乙酰胆碱酯酶(AChE)和丁酰胆碱酯酶(BuChE),应用Ellman比色法构建体外AChE和BuChE抑制剂筛选实验体系。结果:选择10倍稀释的雄性大鼠脑匀浆液〔蛋白浓度(1.69±0.10)mg·mL^(-1)〕和5倍稀释的血清作为AChE/BuChE酶源,使用AChE/BuChE抑制剂他克林作为参考。他克林对AChE/BuChE的半数抑制浓度(IC50)分别为262 nmol·L^(-1)和168 nmol·L^(-1),体外胆碱酯酶抑制剂筛选体系构建成功。在等量蛋白浓度情况下,雌性大鼠脑匀浆液中AChE酶活性为雄性大鼠的1.84倍。结论:本研究从大鼠大脑和血清里分别提取AChE和BuChE粗酶,构建了一种新型的简单易行且稳定可靠的AChE/BuChE抑制剂筛选平台。

四溴双酚A对霍甫水丝蚓的毒性效应研究

以颤蚓属的霍甫水丝蚓(Limnodrilus hoffmeisteri)为受试生物,研究了四溴双酚A(TBBPA)的急性毒性和对颤蚓体内抗氧化酶以及乙酰胆碱酯酶(AChE)的影响。结果表明:TBBPA对颤蚓48、72、96 h的半数致死浓度LC_(50)分别为11.295、3.864、2.204 mg/L。暴露1 d和7 d后,颤蚓体内的超氧化物岐化酶(SOD)活性和过氧化氢酶(CAT)活性均在0.05 mg/L时产生最大诱导(P<0.01),其中暴露7 d的颤蚓CAT酶活性总体低于暴露1 d的CAT酶活性。在0.025 mg/L TBBPA暴露时过氧化物酶(POD)活性被最大诱导(P<0.01),分别为对照组的1.28和1.38倍。在0.25 mg/L TBBPA暴露时乙酰胆碱酯酶(AChE)活性被最大诱导(P<0.01),分别为对照组的1.25和1.20倍。在1 mg/L TBBPA暴露的10 d内,SOD、CAT和AChE活性均出现先升高后下降的变化趋势,其活性分别在第3天和第5天达到最大值(P<0.01)。POD活性的变化则分为降低、升高、再降低3个阶段,其活性在第3天到达峰值(P<0.01)。综上,TBBPA对颤蚓表现为高毒,且SOD、CAT、POD和AChE活性变化可以反映出TBBPA对颤蚓的污染胁迫。

肝癌细胞乙酰胆碱酯酶表达水平与丙型肝炎病毒感染之间的相互影响

目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)感染对乙酰胆碱酯酶(AchE)表达水平的影响以及细胞内AchE活性的变化对HCV感染的影响。方法以细胞培养来源的HCV(HCVcc)感染人肝癌细胞系Huh7细胞,用蛋白质印迹法以及实时荧光定量PCR(qPCR)进一步验证HCV感染对AchE表达水平的影响,AchE活性检测试剂盒检测细胞内AchE活性的变化。以AchE抑制剂多奈哌齐和伊托必利处理Huh7细胞,同时用HCVcc感染,通过蛋白质印迹法以及免疫荧光法检测Huh7细胞的HCV感染情况。用针对AchE基因的小干扰RNA(siRNA)转染Huh7细胞,随后用HCVcc感染Huh7细胞,通过蛋白质印迹法和免疫荧光法检测AchE的表达以及HCV感染情况。结果 HCVcc感染Huh7细胞60 h后,AchE蛋白表达水平升高,同时酶活性也增强(P均<0.01)。AchE抑制剂呈浓度依赖性抑制HCV对Huh7细胞的感染(P<0.01)。用siRNA敲低AchE的表达后,HCV对Huh7细胞的感染降低(P<0.01)。结论 HCV感染Huh7细胞能上调AchE的表达并增强AchE活性,AchE表达增加和活性增强都能促进HCV的感染,表明AchE在HCV感染Huh7细胞的过程中起着正反馈增强感染的作用。

琥珀酸脱氢酶-乙酰胆碱脂酶结合显示法对肌梭的形态学研究

通过SDH-AchE酶结合方法,对人蚓状肌肌梭进行了观察,结果显示肌梭内肌纤维呈蓝色,肌纤维显著较梭外肌纤维细,并在其上可见有运动终板分布。此结果使在同一切片对肌肉、运动终板、肌梭进行定性、定量分析研究成为可能,为研究神经肌肉病变提供了较好的方法。