全脑缺血再灌注损伤中JNK及Bim蛋白的表达

目的探讨大鼠全脑缺血再灌注氨基末端激酶或应激活化激酶(p-JNK)及与Bcl-2相互作用的细胞死亡调解子(Bim)蛋白表达的变化。方法构建大鼠全脑缺血再灌注模型,采用TUNEL法原位检测凋亡锥体细胞,免疫印迹检测不同实验组中Bim及p-JNK蛋白表达。结果缺血再灌注各组神经元细胞的凋亡率明显高于假手术组(P<0.05)。缺血再灌注组p-JNK及Bim蛋白表达积分光密度值与假手术组相比差异有显著性(P<0.05)。结论在脑缺血及在灌注损伤中存在有JNK途径的过度激活,p-JNK蛋白与Bim蛋白表达为正相关。JNK途径的激活导致Bim蛋白表达增加,进而导致神经元细胞的凋亡明显增加。

内关穴不同治法对心肌缺血再灌注大鼠心电图及心肌形态学的影响

目的通过内关穴电针、注射复方丹参注射液及注射注射用水对心肌缺血再灌注大鼠心电图及心肌形态学的影响,探讨不同治法的治疗效应。方法将60只Wistar大鼠随机分为假手术组,模型组,内关电针组,内关注药组、内关注水组、合谷电针组。采用大鼠冠状动脉左前降支根部穿线结扎建立心肌缺血再灌注损伤模型。应用心电图和光学显微镜分别观察STⅡ的改变及心肌病理形态变化。结果结扎后20、40min及松扎后60min,各组STⅡ差值较假手术组均有不同程度的升高,依次为模型组、合谷电针组、内关注水组、内关电针组、内关注药组(P<0.05或P<0.01)。结论内关注药组、内关电针组和内关注水组均能不同程度降低实验性心肌缺血大鼠的STⅡ,改善心肌缺血程度,其效果为内关注药组>内关电针组>内关注水组。合谷电针组对降低STⅡ及受损心肌的改善无明显影响。

灯盏花注射液对小鼠肝损伤生化指标的影响

目的 :观察灯盏花注射液对小鼠肠缺血再灌注肝损伤生化指标的影响。方法 :制作小鼠肠缺血再灌注肝损伤模型。小鼠缺血时间 2 0min ,再灌流 1h后制备血清 ;摘取肝脏 ,制备肝匀浆 ,测定肝脏超氧化物歧化酶 (SOD)活性和丙二醛 (MDA)含量。结果 :小鼠血清ALT明显增高 ,灯盏花注射液能降低缺血再灌注肝损伤小鼠血清ALT的活性 (P <0 .0 1) ;还可使SOD活性和MDA含量明显恢复 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。结论 :灯盏花注射液可改善小鼠肠缺血再灌注肝损伤时生化指标 ,提示灯盏花注射液对小鼠肠缺血再灌注肝损伤有保护作用 。

四氢帕马汀对大鼠海马缺血再灌注损伤保护作用

目的 :研究四氢帕马汀 (THP)对大鼠海马缺血再灌注损伤的保护作用。方法 :利用结扎颈总动脉造成大鼠急性脑缺血再灌注模型 ,观察THP对大鼠海马缺血再灌注损伤的保护作用。结果 :THP能使脑缺血再灌注过程中海马组织超氧化物歧化酶 (SOD)活力 (P <0 .0 1)和谷胱甘肽过氧化物酶 (GSHPx)活力明显升高 (P <0 .0 5 ) ,脂质过氧化产物丙二醛 (MDA)明显下降 (P <0 .0 1) ;同时使细胞膜上Na+ K+ ATP酶和Ca2 + Mg2 + ATP酶活力升高 (P <0 .0 5 )。结论 :THP对脑缺血再灌注损伤有保护作用。

早期肠内营养对大鼠胃缺血再灌注损伤的影响

目的探讨早期肠内营养对大鼠胃缺血-再灌注损伤(gastric ischemia-reperfusion injury,GI-RI)的影响及主要作用机制。方法建立大鼠GI-RI模型,将实验动物采用随机数字表法分为早期肠内营养组(early enteral nutrition,EEN)、单纯损伤组(I)和正常对照组(C),肉眼计数胃黏膜损伤指数、光镜下行病理评分、采用比色法检测胃黏膜脂质过氧化物丙二醛(maleic dialdehvde,MDA)含量和血清超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力,并观察大鼠的体质量变化。结果 EEN组和I组的胃黏膜溃疡指数、病理评分、MDA含量、体质量下降值在GI-RI后明显高于对照组(P<0.05),SOD活力明显低于对照组(P<0.05)。EEN组和I组比较,除6h以外的各时间点,EEN组胃黏膜损伤指数、MDA含量、体质量下降值均明显低于I组(P<0.05),SOD活力高于I组(P<0.01)。72h病理评分EEN组低于I组(P<0.05)。结论早期肠内营养能明显减轻大鼠缺血-再灌注后的胃黏膜损伤,其可能机制是通过促进机体氧化与抗氧化平衡实现的。

低温肠内喂养对胃缺血再灌注损伤大鼠影响的实验研究

[目的]探讨低温肠内喂养对胃缺血-再灌注损伤(GI-RI)大鼠影响及主要作用机制。[方法]将40只雄性SD大鼠随机分为肠内喂养温度10℃、24℃、32℃、40℃四组,采用夹闭腹腔动脉30min造成大鼠胃缺血,松开动脉夹后再灌注形成胃缺血-再灌注损伤模型,手术后2h开始给予肠内营养(EN),术后48h观察胃黏膜损伤指数,采用免疫组织化学方法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在胃黏膜细胞中的表达,采用ELISA法检测血清TNF-α含量。[结果]10℃组肠内喂养胃黏膜损伤指数明显低于24℃组(P<0.05)、32℃组(P<0.01)、40℃组(P<0.01),胃黏膜TNF-α阳性表达低于24℃组(P<0.05)、32℃组(P<0.05)、40℃组(P<0.01);胃黏膜损伤指数、TNF-α阳性表达与肠内喂养温度均呈正相关(P<0.01);各组大鼠血清TNF-α含量差异无统计学意义(P>0.05)。[结论]10℃肠内喂养温度对大鼠因缺血再灌注造成的急性胃黏膜损伤具有保护作用,其机制可能与低温抑制机体过度表达的炎症反应有关。

大鼠肝脏短期缺血再灌注损伤早期肝细胞超微结构观察

目的 探讨大鼠肝脏缺血再灌注损伤早期肝细胞超微结构的病理变化。方法 切取肝脏局部缺血再灌注模型大鼠肝脏组织 ,观察光镜及电镜下的组织学改变。结果 肝脏局部缺血再灌注模型大鼠肝细胞在缺血 4 0min后再灌注 90min时 ,达到不可逆性破坏。结论 实验大鼠肝脏组织的缺血时间应少于 4 0min。

异丙酚对宫内窘迫胎鼠的神经保护作用

目的观察异丙酚对宫内窘迫胎鼠的神经保护作用。方法 SD大鼠♀18只,交配后获得孕鼠。将孕鼠随机分为6组(n=3):假手术组(S组)、缺血/再灌注组(IR组)、异丙酚低、中、高剂量组(P1~P3组)和荷包牡丹碱组(B组)。S组和IR组孕鼠经尾静脉注射生理盐水1 m L。P_1~P_3组孕鼠经尾静脉分别注射异丙酚10、30、50 mg·kg^(-1)。B组在注射异丙酚50 mg·kg^(-1)的同时,腹腔注射荷包牡丹碱5 mg·kg^(-1)。夹闭子宫卵巢动脉11 min。再灌注3 d后取材,每只孕鼠各取2只胎鼠,每组6只。制作切片,计算海马CA1区神经元损伤指数(LI)。硫代巴比妥酸反应法检测胎鼠脑组织丙二醛(MDA)含量。结果 S组LI为7.2±0.9,MDA为(3.86±0.20)μmol·g^(-1),与之相比,IR组的LI为71.9±2.8,MDA为(9.10±0.45)μmol·g^(-1)(P<0.01)。与IR相比,异丙酚各组的LI分别为40.8±2.6,21.4±1.4,20.1±1.3,MDA分别为(7.32±0.41),(5.65±0.27),(5.44±0.28)μmol·g^(-1)(P<0.05)。B组的LI,MDA分别为(51.2±2.3),(7.54±0.31)μmol·g^(-1),翻转了异丙酚的保护作用。结论异丙酚对宫内窘迫胎鼠具有神经保护作用。

硫化氢在肾脏病中的保护作用

肾脏病发病率逐年增高,已经成为影响人类健康的重要疾病之一。硫化氢是继NO、CO之后的第三种气体信号分子,大剂量有毒害作用,但生理浓度的硫化氢起到舒张血管、抗氧化、抗炎、抗凋亡等重要作用。肾脏病尤其继发性肾脏病如梗阻性肾病、肾移植、糖尿病肾病及高血压性肾损害等与血管病变、氧化应激、炎症密切相关,那么硫化氢与肾脏疾病之间有怎样的关系,本文将就硫化氢在肾脏病中的保护作用做一综述。

补阳还五汤与瑞代合用对缺血再灌注损伤大鼠保护作用及肠道菌群影响

目的:研究补阳还五汤与瑞代合用对脑缺血再灌注老龄大鼠炎症损伤的保护作用及肠道菌检测群的影响。方法:用线拴法建立大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,60只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、补阳还五汤组、瑞代组、补阳还五汤与瑞代合用组,连续口服给药7 d,ELISA法检测脑组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-1β(IL-1β)、脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)、超酶C反应蛋白(Hs-CRP),采用酶比色法在全自动生化分析仪测定低密度脂蛋白(LDL-C)和高密度脂蛋白(HDL-C)的含量,流式细胞技术检测T细胞亚群CD3、CD4、CD8及其比例,取大鼠粪便稀释一定浓度后涂布于相应的选择性培养基计数大肠杆菌、双歧杆菌、乳酸杆菌。结果:补阳还五汤组、补阳还五汤与瑞代合用组能显著降低脑组织内IL-1β、TNF-α和IFN-γ的表达,显著降低脑缺血再灌注大鼠血清中Lp-PLA2和Hs-CRP的表达,升高血浆HDL-C含量并降低血浆LDL-C含量,合用组效果更明显(P<0.05);补阳还五汤与瑞代合用组能有效降低CD3+T阳性细胞、增高CD4+T阳性细胞、降低CD8+T阳性细胞,增加CD4/CD8比例;补阳还五汤与瑞代合用组、瑞代组能有效增加乳酸杆菌和双歧杆菌数量,补阳还五汤与瑞代合用组显著降低大肠杆菌数量(P<0.05)。结论:补阳还五汤组、补阳还五汤与瑞代合用组对于脑缺血再灌注损伤中的炎症损伤有较明显的改善作用。其机制与抑制炎症、调节机体免疫功能有关。补阳还五汤与瑞代合用通过调节肠道菌群比例,进一步促进吸收,使补阳还五汤的药效功能更显著。本研究为缺血性中风ICU病患机体运动量少,内分泌紊乱,药物吸收差,药效不明显提供参考治疗方法,也为中药与肠内营养在脑血管方面的用途提供实验依据。

从局灶脑缺血再灌注炎症因子的动态变化探讨内毒形成及作用

目的从局灶脑缺血再灌注炎症因子的动态变化探讨内毒形成及作用。方法63只大鼠随机分假手术组、模型组(缺血再灌注组),采用线栓法制备大鼠左侧大脑中动脉脑缺血再灌注模型,缺血1.5 h,分别再灌注1、3、6、12、24、48 h,用免疫组织化学方法测定上述各时间点肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β),并进行组织病理学观察。结果免疫组化显示模型组缺血再灌注6h病变侧IL-1β表达开始升高且于12 h达高峰;再灌注3 h病变侧TNF-α开始升高且于24 h达到高峰;HE染色显示模型组大脑皮层结构层次随着脑缺血再灌注时间的延长结构破坏加重,于再灌注24 h最为明显。结论IL-1β与TNF-α是脑缺血级联反应的重要环节,参与了脑缺血病理损害,其动态变化和毒性效应体现了内毒形成及作用过程。

止血带下肢体缺血再灌流损伤的实验探讨

采用动物实验模型,观察止血带下不同缺血、不同再灌流时间、患肢静脉血中超氧化物歧化酶(SOD)活性、脂质过氧化物(LPO)含量和肌酸磷酸激酶(CPK)的变化,并辅以肌组织病理检查。实验结果患肢缺血再灌流后SOD酶活性显著降低,LPO浓度和CPK含量显著增高,缺血再灌流损伤的程度与缺血时间、范围和程度明显相关。实验表明超氧自由基对肢体微循环系统的脂质过氧化损害,在止血带缺血再灌流损伤的病理生理变化中可能起重要的作用。

从心肌力学观察银杏酮酯抗心肌缺血再灌注损伤的作用

目的研究银杏酮酯(GBE50)对大鼠离体心肌缺血再灌注(I/R)损伤的保护作用,并探讨心肌力学和血流动力学信息对其的评价作用。方法55只SD大鼠随机分为6组:模型组,GBE50低、中、高剂量组,丹参组,地尔硫卓组。进行Langendorff离体心脏灌流,各组均平衡灌注15 min,停灌造成全心缺血30 min,再复灌40 min。记录左心室内压力,观察药物对心脏心肌力学和血流动力学的影响。结果I/R后各组HR、mLVSP、DP、±dp/dt_(max)都明显低于缺血前,mLVDP、t-dp/dt_(max)明显升高(P<0.05～0.001);随着再灌注时间的延长,各指标呈逐渐恢复的趋势。GBE50中剂量组、丹参组、地尔硫卓组DP、±dp/dt_(max)显著高于模型组(P<0.05),t-dp/dt_(max)、mLVDP显著低于模型组(P<0.05)。结论GBE50对心肌缺血再灌注损伤后心功能的下降具有明显的预防和保护作用,以心肌力学和血流动力学信息进行评价是稳定和可靠的。

高血压大鼠全脑缺血再灌注后神经细胞DNA损伤修复的研究

目的从 DNA 损伤和修复的角度探讨局灶性脑缺血再灌注后神经元凋亡的机制。方法运用双肾双夹法建立肾血管性高血压大鼠模型,采用四血管法制备高血压大鼠全脑缺血再灌注模型,免疫组化法检测再灌注过程中鼠脑 DNA 损伤修复,蛋白 XRCC1、TUNEL 法检测凋亡。结果与假手术组相比,脑缺血再灌注3h 在缺血区皮质和海马 CA1区 XRCC1表达出现显著减低,这种减低一直持续到缺血再灌注24h(P<0.05);再灌注24h 缺血区皮质和海马 CA1区神经细胞发生了凋亡,神经细胞XRCC1的表达强度与凋亡呈负相关。结论脑缺血再灌注早期神经细胞 XRCC1表达的减少可能导致机体对此时出现的 DNA单链断裂修复的能力下降,造成了再灌注后期发生了凋亡。