还脑益聪方提取物含药血清对APP/PS1双基因转染细胞γ分泌酶活性及相关蛋白表达的影响

目的观察中药复方-还脑益聪方提取物(Huannao Yicong decoction,HYD)含药血清对β-淀粉样前蛋白swe基因(APPswe)人类早老素(PSEN1d E9,PS1)和早老蛋白1d E9基因(PSEN1d E9)人鼠淀粉样前蛋白融合体(APPswe,APP)双基因转染人胚肾293(human embryonic kidney 293,HEK293)细胞γ分泌酶活性及相关蛋白的影响,分析含药血清影响γ分泌酶活性相关蛋白的作用机制。方法以人APP/PS1双基因转染(HEK293)人胚肾细胞株为载体,将其分为5组,分别为空白组,7.5%HYD含药血清组,15%HYD含药血清组,HYD直接给药组,γ分泌酶抑制剂-DAPT组,复苏传代后采用细胞计数试剂盒CCK-8(cell counting kit-8,CCK-8)法检测HYD含药血清(大鼠灌胃10 d,取血清并进行血药成分检测)对人APP/PS1双基因转染细胞的生长活力和超微结构的影响;透射电镜观察各组细胞超微结构;双荧光素酶基因检测γ分泌酶活性;蛋白质印迹法(Western blot)检测γ分泌酶组件及相关蛋白早老素1(Presenilin 1,PS1)、鸟苷酸结合蛋白(GTP binding protein,CDC42)、热休克蛋白70羧基端作用蛋白(carboxyl terminus of Hsc70-interacting protein,CHIP)、前咽缺陷蛋白-1α(anterior pharynx defective-1α,Aph-1α)和低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)的表达。结果 15%HYD含药血清组对细胞株的增殖作用高于其余各血清浓度组(P<0.05,P<0.01);透射电镜显示模型组线粒体膜不完整,有轻微肿胀,线粒体嵴模糊,胞质内有较多的脂褐素沉积,其余各组数量均有一定程度的好转和减轻。γ分泌酶活性结果,给药后24 h和48 h,与模型组比较,直接给药组、DAPT组差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与DAPT组比较,15%HYD含药血清组差异有统计学意义(P<0.05)。γ分泌酶结果与模型组比较,各给药组的PS1蛋白、CDC42蛋白表达差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),CHIP蛋白表达和Aph-1α蛋白表达无统计学意义(P>0.05),而HYD直接给药组HIF-1α蛋白差异有统计学意义(P<0.05)。结论HYD含药血清具有改善人APP/PS1双基因转染细胞超微结构、抑制γ分泌酶活性的作用,其机制涉及促进CDC42蛋白的表达,抑制PS1蛋白水解生成PS1 CTF/NTF异二聚体,同时抑制HIF-1α蛋白的生成,进而降低γ分泌酶的活性。

六味地黄方超微饮片含药血清对大鼠前脂肪细胞的影响

目的探讨六味地黄方超微饮片含药血清对大鼠前脂肪细胞增殖与分化的影响。方法原代培养大鼠前脂肪细胞,用四甲基偶氮唑盐(MTT)方法检测六味地黄方超微饮片含药血清对前脂肪细胞的增殖情况,以酶组织化学法检测其对前脂肪细胞分化过程中的磷酸甘油脱氢酶(GPDH)的影响,油红O染色方法测定其对细胞内脂肪积聚的影响。结果10.0%、5.0%、2.5%浓度的六味地黄方超微饮片含药血清对大鼠前脂肪细胞增殖的影响与空白血清比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。10.0%、5.0%浓度的六味地黄方超微饮片含药血清对大鼠前脂肪细胞分化过程中脂肪积聚的影响,与空白血清比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论六味地黄方超微饮片能促进大鼠前脂肪细胞的增殖,抑制大鼠前脂肪细胞的分化。

加味黄芪桂枝五物汤治疗老年2型糖尿病下肢血管病变临床研究

目的 探讨加味黄芪桂枝五物汤对老年2型糖尿病下肢血管病变患者糖脂代谢、神经功能的影响及可能作用机制。方法 选取2019年3月—2021年3月就诊于陕西中医药大学第二附属医院的150例老年糖尿病下肢血管病变患者,随机分为对照组和研究组各75例。对照组给予常规西医治疗,研究组在对照组治疗基础上给予加味黄芪桂枝五物汤治疗,2组患者均连续治疗3个月。观察2组患者治疗前后血清糖脂代谢指标[空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2hPG)、糖化血红蛋白(HbAlc)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)]、炎症相关指标[C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]、氧化应激相关指标[超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、氧化型低密度脂蛋白(Ox-LDL)]、疾病进展相关指标[内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(Vaspin)、视黄醇结合蛋白4(RBP4)]及左胫神经、右胫神经传导速度。结果 治疗后,2组患者FPG、2hPG、HbAlc及血清TC、TG、LDL-C、CRP、IL-6、TNF-α、MDA、Ox-LDL、RBP4水平均明显降低(P均<0.05),血清HDL-C、SOD、Vaspin水平均明显升高(P均<0.05),左胫神经、右胫神经运动神经传导速度与感觉神经传导速度均明显加快(P均<0.05),且研究组上述各项指标改善情况均明显优于对照组(P均<0.05)。结论 加味黄芪桂枝五物汤可以有效调节老年糖尿病下肢血管病变患者机体糖脂代谢,改善神经功能,可能与其抗炎、抗氧化应激、保护血管作用有关。

加味六味地黄汤治疗绝经后骨质疏松症的研究

目的观察加味六味地黄汤治疗绝经后骨质疏松症的临床疗效。方法将70例患者随机分为2组:治疗组40例采用加味六味地黄汤治疗,对照组30例采用强骨胶囊治疗,疗程均为3个月。观察临床疗效及治疗前后骨密度(BMD)、雌二醇(E2)、骨钙素(BGP)、尿吡啶酚(PYD)等指标的变化。结果治疗组总有效率为95%,对照组为90%,2组比较无显著性差异;2组治疗后BMD、E2无显著性改变,BGP明显升高,PYD明显降低。2组治疗后各项指标比较均无显著性差异。结论加味六味地黄汤可提高骨密度,改善临床症状,促进骨形成,抑制骨吸收,可用于防治绝经后骨质疏松症。