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白藜芦醇通过AMPK-P53途径调节糖尿病心肌线粒体自噬的研究 被引量:14
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作者 吴冰 刘睿 +1 位作者 黄慧 陈永清 《兰州大学学报(医学版)》 CAS 2020年第1期67-71,76,共6页
目的观察白藜芦醇(RES)对糖尿病心肌线粒体自噬功能的影响并探讨其分子机制。方法 C57BL/6小鼠分为对照组、糖尿病组、RES组及RES+腺嘌呤核糖核苷酸依赖的蛋白激酶(AMPK)抑制剂组。小动物超声检测各组实验动物的左室收缩末内径、左室舒... 目的观察白藜芦醇(RES)对糖尿病心肌线粒体自噬功能的影响并探讨其分子机制。方法 C57BL/6小鼠分为对照组、糖尿病组、RES组及RES+腺嘌呤核糖核苷酸依赖的蛋白激酶(AMPK)抑制剂组。小动物超声检测各组实验动物的左室收缩末内径、左室舒张末内径、左室收缩末期容积及左室舒张末期容积;计算左室射血分数及短轴缩短率。Western blotting检测各组实验动物Parkin、P62、P53及磷酸化的AMPK (pAMPK)的蛋白表达。结果与对照组相比,糖尿病小鼠心肌组织Parkin、p AMPK蛋白表达及左室射血分数、短轴缩短率显著降低,而P62、P53蛋白表达显著升高。给予RES处理后可以逆转上述改变,但RES的作用被AMPK抑制剂所阻断。结论 RES可能通过AMPK-P53途径增加糖尿病心肌线粒体自噬,改善心脏功能。 展开更多
关键词 白藜芦醇 腺嘌呤核糖核苷酸依赖的蛋白激酶 P53蛋白 糖尿病心肌病 线粒体自噬
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5′-磷酸腺苷(5′-AMP)体外抗氧化作用的研究 被引量:2
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作者 钱佳 施用晖 +1 位作者 马立芹 乐国伟 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2008年第1期89-92,共4页
目的:研究5′-磷酸胞苷(5′-AMP)清除活性氧自由基能力及对体外氧化损伤脾细胞的损伤修复能力;方法:采用化学比色法测定5′-AMP清除羟自由基和DPPH自由基的能力,建立H2O2氧化损伤体外培养脾细胞模型,用MTT法检测5′-AMP的修复作用,以评... 目的:研究5′-磷酸胞苷(5′-AMP)清除活性氧自由基能力及对体外氧化损伤脾细胞的损伤修复能力;方法:采用化学比色法测定5′-AMP清除羟自由基和DPPH自由基的能力,建立H2O2氧化损伤体外培养脾细胞模型,用MTT法检测5′-AMP的修复作用,以评价5′-磷酸腺苷(5′-AMP)的体外抗氧化能力;结果:5′-磷酸腺苷具有剂量依赖性的清除羟自由基和修复脾细胞氧化损伤的能力,但是5′-AMP的DPPH清除能力比较弱。20mmol/L5′-AMP的羟自由基清除能力高达53.009%,而DPPH清除率为17.190%;10mmol/L5′-AMP清除羟自由基和DPPH自由基的能力分别相当于7.5mmol/LVC和0.02mmol/LVC;与对照组相比,添加0.5,1,5,10mmol/L5′-AMP均能极显著(P<0.01)地修复H2O2诱导的脾细胞氧化损伤,其中10mmol/L5′-AMP作用最强;结论:5′-磷酸腺苷具有显著的抗氧化作用。 展开更多
关键词 5'-磷酸腺苷(5’-amp) 抗氧化剂 自由基 细胞培养
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根皮素调控有氧糖酵解激活AMPK-P53信号通路抑制结肠癌细胞生长 被引量:6
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作者 周立强 李世豪 +3 位作者 刘力 周祺 袁宜武 辛林 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期515-522,共8页
目的探讨根皮素抑制结肠癌细胞生长的分子机制。方法不同浓度根皮素(phlortin)处理结肠癌SW-480细胞24 h,CCK-8法检测细胞的存活率并计算IC50,倒置显微镜下观察细胞形态变化,流式细胞术检测细胞周期变化及凋亡率,比色法检测细胞培养液... 目的探讨根皮素抑制结肠癌细胞生长的分子机制。方法不同浓度根皮素(phlortin)处理结肠癌SW-480细胞24 h,CCK-8法检测细胞的存活率并计算IC50,倒置显微镜下观察细胞形态变化,流式细胞术检测细胞周期变化及凋亡率,比色法检测细胞培养液中葡萄糖和乳酸浓度,荧光酶标仪检测细胞内ATP水平;Western Blot法检测各浓度根皮素对GLUT-1、糖酵解关键蛋白(HK2、PFKM)、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、Thr172p-AMPK、P53、凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax、Caspase-3)表达的影响。结果CCK-8检测结果显示,根皮素能明显抑制SW-480细胞的增殖(P<0.05),IC50为(22.44±1.3)μmol·L^-1。流式细胞术表明,根皮素能诱导G1期阻滞并促进凋亡(P<0.01,P<0.001)。比色法和荧光酶标仪检测结果显示,根皮素能限制SW-480细胞葡萄糖吸收和乳酸、ATP释放(P<0.01,P<0.0001),抑制有氧糖酵解。Western Blot检测结果表明,根皮素能下调GLUT-1、HK2、PFKM、Bcl-2蛋白(P<0.05,P<0.01,P<0.001,P<0.0001),上调P53、Bax、Caspase-3蛋白表达和Thr 172 p-AMPK、AMPK蛋白的比值(P<0.01,P<0.001,P<0.0001)。结论根皮素能够通过抑制GLUT-1蛋白表达限制SW-480细胞对葡萄糖的摄取,抑制细胞有氧糖酵解,最终激活AMPK-P53信号通路来诱导SW-480细胞凋亡,抑制其生长。 展开更多
关键词 根皮素 结肠癌 有氧糖酵解 腺苷酸活化蛋白激酶 P53
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Dan-gua Fang (丹瓜方) Improves Glycolipid Metabolic Disorders by Promoting Hepatic Adenosine 5'-monophosphate Activated Protein Kinase Expression in Diabetic Goto-kakizaki Rats 被引量:12
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作者 蓝元隆 黄苏萍 +9 位作者 衡先培 陈玲 李鹏辉 吴静 杨柳清 潘旭东 林彤 程心玲 林青 陈斯歆 《Chinese Journal of Integrative Medicine》 SCIE CAS CSCD 2015年第3期188-195,共8页
Objective:To investigate the effect of Dan-gua Fang(丹瓜方) on adenosine 5’-monophosphate(AMP) activated protein kinase(AMPK) α expression in liver and subsequent improvement of glucose and lipid metabolism.M... Objective:To investigate the effect of Dan-gua Fang(丹瓜方) on adenosine 5’-monophosphate(AMP) activated protein kinase(AMPK) α expression in liver and subsequent improvement of glucose and lipid metabolism.Methods:Forty 13-week-old diabetic Goto-Kakizaki(GK) rats were randomly divided into model,Dan-gua Fang,metformin and simvastatin groups(n=10 for each),and fed high-fat diet ad libitum.Ten Wistar rats were used as normal group and fed normal diet.After 24 weeks,liver expression of AMPK α mRNA was assessed by real-time PCR.AMPK α and phospho-AMPK α protein expression in liver was evaluated by Western blot.Liver histomorphology was carried out after hematoxylin-eosin staining,and blood glucose(BG),glycosylated hemoglobin A1c(HbA1c),food intake and body weight recorded.Results:Similar AMPK α mRNA levels were found in the Dan-gua Fang group and normal group,slightly higher than the values obtained for the remaining groups(P〈0.05).AMPK α protein expression in the Dan-gua Fang group animals was similar to other diabetic rats,whereas phospho-AMPK α(Thr-172) protein levels were markedly higher than in the metformin group and simvastatin group(P〈0.05),respectively.However,phosphor-AMPKa/AMPK α ratios were similar in all groups.Dan-gua Fang reduced fasting blood glucose with similar strength to metformin,and was superior in reducing cholesterol,triglycerides,high-density lipoprotein cholesterol as well as improving low-density lipoprotein cholesterol in comparison with simvastatin and metformin.Dan-gua Fang decreases plasma alanine aminotransferase(ALT) significantly.Conclusion:Dan-gua Fang,while treating phlegm-stasis,could decrease BG and lipid in type 2 diabetic GK rats fed with high-fat diet,and effectively protect liver histomorphology and function.This may be partly explained by increased AMPK expression in liver.Therefore,Dan-gua Fang might be an ideal drug for comprehensive Intervention for glucose and lipid metabolism disorders in type 2 diabetes mellitus. 展开更多
关键词 Dan-gua Fang Goto-Kakizaki rat adenosine 5-monophosphate activated protein kinase type 2 diabetes mellitus liver glucose and lipid metabolism
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茶叶中AMP的苦味掩盖效果评价及其含量的测定方法 被引量:11
5
作者 徐文平 李大祥 宛晓春 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期682-687,共6页
为了研究茶叶内部可能存在的苦味抑制效应,采用定量感官分析法比较了蔗糖、D-葡萄糖酸钠、L-谷氨酸钠、乳酸锌和腺苷-5′-磷酸(AMP)对咖啡因、EGCG(表没食子儿茶素没食子酸酯)和茶汤的苦味掩盖作用。结果表明,低浓度的蔗糖(5 mmol.L-1)... 为了研究茶叶内部可能存在的苦味抑制效应,采用定量感官分析法比较了蔗糖、D-葡萄糖酸钠、L-谷氨酸钠、乳酸锌和腺苷-5′-磷酸(AMP)对咖啡因、EGCG(表没食子儿茶素没食子酸酯)和茶汤的苦味掩盖作用。结果表明,低浓度的蔗糖(5 mmol.L-1)、葡萄糖酸钠(5 mmol.L-1)和谷氨酸钠(2 mmol.L-1)对苦味掩盖不明显,在高浓度下这3种物质的苦味掩盖效果明显,但对茶汤滋味的协调性产生不利影响。乳酸锌(0.5~1.5 mmol.L-1)和AMP(0.2~0.6 mmol.L-1)对苦味的掩盖作用均明显,但是乳酸锌即使在低浓度下涩感也较强,加重茶汤涩感;AMP是最为有效的苦味掩盖剂,可有效掩盖茶汤的苦味,且对茶汤滋味协调性没有明显影响。此外,还建立了茶叶中AMP的HPLC测定方法,1/15 mmol.L-1的磷酸盐缓冲体系(pH7.0,含5 mmol.L-1四丁基溴化铵,5%甲醇)为主要流动相,35℃条件下C18柱分离,254 nm测定AMP的方法。茶叶中AMP的含量(0.23~0.32 mg.g-1)尚未达到明显掩盖茶叶自身苦味的水平。 展开更多
关键词 腺苷-5’-磷酸(amp) 苦味掩盖 茶叶 HPLC
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基于荧光光谱法的AMP与肌动球蛋白相互作用影响因素研究 被引量:4
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作者 张淼 邹烨 +7 位作者 王道营 杨玉玲 张牧焓 卞欢 吴海虹 诸永志 耿志明 徐为民 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期1049-1054,共6页
[目的]研究不同影响因素对一磷酸腺苷(adenosine 5'-monophosphate,AMP)和肌动球蛋白结合反应的影响,为进一步深入探讨AMP与肌动球蛋白间的相互作用及改善鸭肉嫩度的最佳条件提供理论依据。[方法]以鸭肉肌动球蛋白为材料,采用荧光... [目的]研究不同影响因素对一磷酸腺苷(adenosine 5'-monophosphate,AMP)和肌动球蛋白结合反应的影响,为进一步深入探讨AMP与肌动球蛋白间的相互作用及改善鸭肉嫩度的最佳条件提供理论依据。[方法]以鸭肉肌动球蛋白为材料,采用荧光光谱法,选择不同影响因素(pH值、反应时间、缓冲溶液及离子溶液)处理AMP-肌动球蛋白体系,测定其荧光光谱和反应过程中猝灭常数(Ksv)及结合常数(KLB)值,通过比较相关参数的变化,分析AMP-肌动球蛋白体系在不同环境下的稳定性变化。[结果]pH值、反应时间、缓冲溶液及离子均对AMP-肌动球蛋白体系稳定性有不同程度影响。AMP-肌动球蛋白体系的pH值在6.0~7.0范围内稳定性较好,在5.0~5.5范围内稳定性较差。AMP作用于肌动球蛋白,可以和肌动球蛋白形成作用力,并促进肌动球蛋白解离,反应10 min后,荧光强度基本保持稳定。用离子溶液处理体系时,Cl-对体系的结合能力略有增加。用不同缓冲溶液处理体系时,Tris-HCl缓冲溶液对体系的结合有增加作用。[结论]当溶液pH值为6.0~7.0时,Cl^-和Tris-HCl缓冲溶液处理AMP-肌动球蛋白体系时,可以促进AMP对肌动球蛋白的解离,改善肉品嫩度。 展开更多
关键词 鸭肉 肌动球蛋白 一磷酸腺苷(amp) 影响因素
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振腹推拿对T2DM大鼠骨骼肌AMPK/Glut 4信号链的影响 被引量:5
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作者 王康 国生 +3 位作者 钮妍 沈潜 薛恬珏 孟凤仙 《环球中医药》 CAS 2017年第11期1224-1228,共5页
目的观察振腹推拿对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)大鼠腓肠肌及腹直肌组织AMPK及Glut4基因转录及蛋白表达的影响,探讨其改善T2DM糖代谢的作用机制。方法24只Wistar大鼠随机取出6只为空白组,其余高脂高糖饮食联合低剂量(35 m... 目的观察振腹推拿对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)大鼠腓肠肌及腹直肌组织AMPK及Glut4基因转录及蛋白表达的影响,探讨其改善T2DM糖代谢的作用机制。方法24只Wistar大鼠随机取出6只为空白组,其余高脂高糖饮食联合低剂量(35 mg/kg)链脲佐菌素腹腔注射建立T2DM模型,成模大鼠随机分为模型组、西药对照组及西药推拿组。空白对照组及模型组每日灌胃蒸馏水,西药对照组每日以250 mg/kg标准进行二甲双胍灌胃一次,西药推拿组在相同给药标准基础上每日加用振腹推拿治疗一次。分别在干预第0、2、4、8周测定大鼠FBG水平,干预8周后,测定腓肠肌与腹直肌AMPK_(α2)、Glut4基因转录与蛋白表达。结果与空白组比较,模型组FBG值在第0、2、6、8周时均显著上升,干预8周后,腹直肌AMPK_(α2)及Glut4基因转录及蛋白表达均显著下降,腓肠肌AMPK_(α2)基因转录及蛋白表达均显著下降,腓肠肌Glut4蛋白表达显著下降。与模型组比较,西药组及西药推拿组FBG值在第2、6、8周时均显著下降,西药组腹直肌AMPK_(α2)基因转录显著上升,Glut4基因转录及蛋白表达显著上升,西药推拿组腹直肌AMPK_(α2)及Glut4基因转录及蛋白表达均显著上升,腓肠肌AMPK_(α2)基因转录及蛋白表达均显著上升。结论在二甲双胍常规治疗基础上,联合振腹推拿可进一步改善T2DM大鼠的FBG水平,其对糖代谢的改善机制与调控骨骼肌AMPK/Glut4信号链有关。 展开更多
关键词 振腹推拿 2型糖尿病 腺苷酸活化蛋白激酶 葡萄糖转运蛋白4
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AMPK/SIRT1-PPARγ-PGC1α-BACE1信号通路及其相关因子在阿尔茨海默病病理改变中的作用 被引量:6
8
作者 李莹 黄南渠 +3 位作者 李园园 冯飞 巴智胜 罗勇 《医学综述》 2019年第5期850-855,861,共7页
阿尔茨海默病(AD)是老年人常见的中枢神经系统退行性疾病,主要病理表现为β淀粉样蛋白(Aβ)积聚形成神经炎性斑、过度磷酸化的微管Tau蛋白形成神经元纤维缠结、神经元缺失和胶质增生,其中Aβ的生成和清除研究较多。大脑能量代谢异常可... 阿尔茨海默病(AD)是老年人常见的中枢神经系统退行性疾病,主要病理表现为β淀粉样蛋白(Aβ)积聚形成神经炎性斑、过度磷酸化的微管Tau蛋白形成神经元纤维缠结、神经元缺失和胶质增生,其中Aβ的生成和清除研究较多。大脑能量代谢异常可导致上述AD样病理变化,而AMP活化的蛋白激酶(AMPK)活化后可改善大脑能量代谢,通过抑制β位淀粉样前体蛋白裂解酶1表达及活性,进而调节淀粉样前体蛋白的裂解,以减少Aβ的生成,过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)及过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(PGC-1α)也具有类似的作用。此外,AMPK与沉默信息调节因子1的激活及相互作用对PPAR-γ、PGC-1α的信号转导及生理功能起重要作用。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 β淀粉样蛋白 amp活化的蛋白激酶 沉默信息调节因子1 过氧化物酶体增殖物激活受体Γ 过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α β位淀粉样前体蛋白裂解酶1 淀粉样前体蛋白
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5'腺苷单磷酸钠探针同步荧光测定生物样品中蛋白质含量 被引量:2
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作者 程姗 杨梦思 +1 位作者 崔文沼 崔凤灵 《河南师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2014年第4期64-68,共5页
5'腺苷单磷酸钠(AMPNa)与人血清白蛋白(HSA)相互结合可以形成没有荧光的复合物,进而导致HSA的内源荧光发生改变,并且体系的同步荧光强度和溶液中的HSA浓度呈现出良好的线性关系.根据这些现象,建立了同步荧光光谱法测定生物样品中... 5'腺苷单磷酸钠(AMPNa)与人血清白蛋白(HSA)相互结合可以形成没有荧光的复合物,进而导致HSA的内源荧光发生改变,并且体系的同步荧光强度和溶液中的HSA浓度呈现出良好的线性关系.根据这些现象,建立了同步荧光光谱法测定生物样品中蛋白质含量的新方法,而且这种方法是把AMPNa作为分子探针的.实验中考察了一些因素对同步荧光光谱特征及强度的影响,这些因素包括Δλ值、反应介质及温度等.AMPNa HSA的浓度在1.43-244.8μg·mL-1范围内的同步荧光强度与蛋白质的浓度呈现出较好的线性关系.在较为理想的实验条件下,对11份空白溶液进行平行测定,检测限可达到0.319μg·mL-1,并对血清、尿样和唾液中的蛋白质含量进行测定并进行加标回收实验,回收率在95.06%-104.89%. 展开更多
关键词 5'腺苷单磷酸钠(ampNa) 人血清白蛋白(HSA) 同步荧光
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磷酸二酯酶同工酶Ⅲ和Ⅳ调节气管平滑肌环腺苷酸的区域化分布 被引量:1
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作者 周伟琳 陈季强 周汉良 《中国药理学与毒理学杂志》 CSCD 北大核心 1996年第3期196-197,共2页
磷酸二酯酶同工酶Ⅳ(PDEⅣ)抑制剂咯利普兰(Rol,30μmol·L-1)对30μmol·L-1异丙肾上腺素所致的犬气管平滑肌环腺苷酸(cAMP)积聚的增强作用比PDEⅢ抑制剂氰胍哒嗪(SKF94836,3... 磷酸二酯酶同工酶Ⅳ(PDEⅣ)抑制剂咯利普兰(Rol,30μmol·L-1)对30μmol·L-1异丙肾上腺素所致的犬气管平滑肌环腺苷酸(cAMP)积聚的增强作用比PDEⅢ抑制剂氰胍哒嗪(SKF94836,30μmol·L-1)要强,但对异丙肾上腺素所致的犬气管平滑肌松弛的增强作用比SKF94836要弱.30μmol·L-1Rol或SKF94836对30μmol·L-1福斯科林所致的犬气管平滑肌松弛与cAMP积聚的增强作用程度几乎相等.异丙肾上腺素,福斯科林单独或与SKF94836,Rol合用都仅引起犬气管平滑肌的可溶部cAMP积聚,对颗粒部cAMP含量无明显影响.上述结果提示犬气管平滑肌存在着cAMP的区域化分布,它受PDEⅢ,PDEⅣ的调节。 展开更多
关键词 气管平滑肌 环腺苷酸 磷酸二酯酶 同工酶
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液相色谱-同位素稀释质谱精确测定奶粉中的核苷酸含量
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作者 高运华 武利庆 王晶 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第z1期236-238,241,共4页
Adenosine 5′-monophosphate in powdered milk was quantitated by liquid chromatography-isotope dilution mass spectrometry.The uncertainty was calculated.This could provide information for the further quantitative measu... Adenosine 5′-monophosphate in powdered milk was quantitated by liquid chromatography-isotope dilution mass spectrometry.The uncertainty was calculated.This could provide information for the further quantitative measurement and utilization of 5′-nucleotide acid as food additive. 展开更多
关键词 QUANTITATION adenosine 5-monophosphate Liquid chromatography-isotope dilution mass spectrometry Powdered milk
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KCN基因对小鼠脂代谢的影响及其机制初探
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作者 刘敬怡 卢晶 杨金奎 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2017年第2期161-166,共6页
目的研究钾离子电压门控通道(potassium voltage-gated channel,KCN)基因对小鼠脂代谢的影响及其相关信号通路,为治疗糖尿病的脂肪异常提供新的治疗靶点。方法采用KCN基因敲除的小鼠模型及对照C57BL/6野生小鼠动物模型,检测三酰甘油、... 目的研究钾离子电压门控通道(potassium voltage-gated channel,KCN)基因对小鼠脂代谢的影响及其相关信号通路,为治疗糖尿病的脂肪异常提供新的治疗靶点。方法采用KCN基因敲除的小鼠模型及对照C57BL/6野生小鼠动物模型,检测三酰甘油、胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇等脂代谢相关指标。HE染色观察小鼠肝脏组织脂肪变。Western blotting法测定小鼠肝脏组织腺苷酸激活蛋白激酶[adenosine 5'-monophosphate(AMP)-activated protein kinase,AMPK]通路相关蛋白的表达。结果 KCN基因敲除小鼠较野生型对照小鼠血清中三酰甘油、总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇浓度均明显增高,差异有统计学意义(P<0.05)高密度脂蛋白明显降低,肝脏HE染色显示基因敲除小鼠肝脏内脂滴的数目和体积均与野生型有明显差异,Western blotting结果显示KCN基因敲除小鼠肝脏组织中磷酸化蛋白激酶B(phosphate-protein kinase B,Phos-AKT)、磷酸化乙酰辅酶A羧化酶(phosphate-acetyl CoA carboxylase,Phos-ACC)、phos-AMPK浓度均较正常对照组小鼠表达量降低,phosACCα水平较正常对照组小鼠明显增高差异有统计学意义(P<0.05)。结论 KCN基因对小鼠血脂代谢有保护作用,其作用机制与AMPK的脂肪酸氧化有关。 展开更多
关键词 钾离子电压门控通道(potassium VOLTAGE-GATED channel KCN) 脂代谢 ampK通络
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藤黄果提取物对雄性大鼠脂代谢的影响及降脂机理 被引量:2
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作者 刘冠星 韩宁宁 马海田 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第9期202-208,共7页
以雄性大鼠为研究对象,探讨日粮中添加不同剂量的藤黄果提取物对大鼠脂代谢常规生化指标及相关基因表达的影响。结果表明:日粮中添加不同剂量的藤黄果提取物均可显著降低大鼠血清中甘油三酯的含量(P<0.05),高剂量藤黄果提取物则可显... 以雄性大鼠为研究对象,探讨日粮中添加不同剂量的藤黄果提取物对大鼠脂代谢常规生化指标及相关基因表达的影响。结果表明:日粮中添加不同剂量的藤黄果提取物均可显著降低大鼠血清中甘油三酯的含量(P<0.05),高剂量藤黄果提取物则可显著降低肝脏组织中甘油三酯的含量(P<0.05);不同剂量藤黄果提取物处理对血清和肝脏组织中总胆固醇含量均无显著影响(P>0.05)。脂肪代谢相关基因分析结果表明:高剂量藤黄果提取物处理可显著抑制SREBP1c(P<0.01)和ACL(P<0.05)基因表达水平,同时显著提高ACO和ATGL基因表达水平(P<0.05);MCD和PPARα基因表达水平在中剂量(P<0.05)和高剂量(P<0.01)藤黄果提取物处理组显著高于对照组;高剂量藤黄果提取物处理可显著促进AMPKα1和Adipo R-1基因表达水平(P<0.05),但对脂联素基因表达水平没有影响。以上结果提示,藤黄果提取物处理可通过激活Adipo-AMPK信号通路,进而抑制脂肪酸合成途径中的关键因子、增强脂肪酸氧化途径中的关键因子基因的表达,最终降低雄性大鼠体内脂肪的沉积。 展开更多
关键词 藤黄果提取物 羟基柠檬酸 脂代谢 5’-腺苷-磷酸激活的蛋白激酶
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细胞自噬与阿尔茨海默病的关系 被引量:2
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作者 周小涛 杨梦艳 张继川 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2022年第5期517-522,共6页
阿尔茨海默病(Alzheimer’s Disease,AD)是一种慢性神经元进行性退化的疾病,其具体发病机制尚不完全明确。细胞自噬是真核细胞进化中相对保守的过程,该过程将受损细胞器或蛋白质转运至溶酶体降解为可循环再利用的小分子物质。正常情况下... 阿尔茨海默病(Alzheimer’s Disease,AD)是一种慢性神经元进行性退化的疾病,其具体发病机制尚不完全明确。细胞自噬是真核细胞进化中相对保守的过程,该过程将受损细胞器或蛋白质转运至溶酶体降解为可循环再利用的小分子物质。正常情况下,自噬作为细胞自我保护的一种机制,在胞内稳态的维持中具有关键作用。众多的证据表明细胞自噬在AD的发生发展中扮演者重要的角色,探讨与自噬相关通路将为AD治疗策略的开发提供更多思路。本文综述自噬相关信号通路与AD疾病过程的关系。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 细胞自噬 单磷酸腺苷依赖的蛋白激酶 哺乳动物雷帕霉素靶点 细胞沉默调节蛋白1
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补中益气汤通过Adipor1/AMPK/PGC-1α调节脂代谢治疗运动性疲劳
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作者 彭娟 韦华妮 +3 位作者 姜婷 刘伟 潘华山 陈道睿 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期24-30,共7页
目的:探讨补中益气汤通过脂联素受体1(Adipor1)/磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)/过氧化物酶体增生物激活受体γ共激活因子-1α(PGC-1α)对运动性疲劳(EIF)小鼠骨骼肌中脂代谢的影响。方法:将C57BL/6J小鼠随机分为空白组、模型组、补中益气... 目的:探讨补中益气汤通过脂联素受体1(Adipor1)/磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)/过氧化物酶体增生物激活受体γ共激活因子-1α(PGC-1α)对运动性疲劳(EIF)小鼠骨骼肌中脂代谢的影响。方法:将C57BL/6J小鼠随机分为空白组、模型组、补中益气汤低、中、高剂量组、维生素C组。空白组不施加任何干预,其余组通过力竭游泳建立EIF模型。力竭游泳前1 h,空白组、模型组灌服0.2 mL蒸馏水,补中益气汤低、中、高剂量组分别灌胃4.1、8.2、16.4 g·kg^(-1)的补中益气汤,维生素C组灌胃0.04 g·kg^(-1)剂量维生素C,持续6周。实验6周后,计算小鼠体质量增长率、脏器指数、力竭游泳时间;酶比色法检测小鼠血清中尿素氮(BUN)、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、乳酸(LD)的水平;苏木素-伊红(HE)染色观察骨骼肌组织病理变化;透射电镜(TEM)观察骨骼肌组织超微结构;微板法检测血清中游离脂肪酸(NEFA)、甘油三酯(TG)的含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)测定骨骼肌中Adipor1、磷酸化(p)-AMPK/AMPK、PGC-1α和己糖激酶2(HK2)蛋白的表达。结果:与空白组比较,模型组小鼠的体质量增长率、胸腺指数降低,血清中BUN、CK、LD、LDH水平升高(P<0.01),NEFA、TG含量下降(P<0.01),骨骼肌组织Adipor1、p-AMPK/AMPK、PGC-1α、HK2蛋白表达下降(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,补中益气汤高剂量组体质量增长率、胸腺指数、力竭游泳时间显著升高(P<0.01),BUN、CK、LD、LDH显著下降(P<0.01),NEFA、TG显著升高(P<0.01),骨骼肌组织Adipor1、p-AMPK/AMPK、PGC-1α、HK2蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01);维生素C组胸腺指数、力竭游泳时间明显提高,BUN、CK、LD明显下降(P<0.05,P<0.01),NEFA、TG显著升高(P<0.01),骨骼肌组织Adipor1蛋白表达显著升高(P<0.01)。结论:补中益气汤能够延缓EIF的发生,其机制可能与调节Adipor1/AMPK/PGC-1α信号通路,提高骨骼肌对脂肪的利用率有关。 展开更多
关键词 运动性疲劳 补中益气汤 骨骼肌 脂代谢 补中益气汤通过脂联素受体1(Adipor1)/腺苷酸活化蛋白激酶(ampK)/过氧化物酶体增生物激活受体γ共激活因子-1α(PGC-1α)信号通路
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瓜蒌薤白半夏汤对缺血性心肌损伤大鼠的线粒体功能障碍和AMPK/PGC-1α信号通路的影响 被引量:10
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作者 谭颖颖 王慧 +3 位作者 王琰冰 马程程 李红 张琪 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期9-17,共9页
目的:观察瓜蒌薤白半夏汤对缺血性心肌损伤大鼠的线粒体功能障碍及腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子^(-1)α(PGC^(-1)α)信号通路的影响。方法:70只雄性SD大鼠,随机选取6只作为正常组(CON),其余给予高... 目的:观察瓜蒌薤白半夏汤对缺血性心肌损伤大鼠的线粒体功能障碍及腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子^(-1)α(PGC^(-1)α)信号通路的影响。方法:70只雄性SD大鼠,随机选取6只作为正常组(CON),其余给予高脂饲料结合注射异丙肾上腺素(5 mg·kg^(-1)·d^(-1),7 d),建立以高血脂为基础的缺血性心脏病模型。将造模成功者随机分为模型组(MOD)、瓜蒌薤白半夏汤高剂量(GXBD-H)组、瓜蒌薤白半夏汤中剂量(GXBD-M)组、瓜蒌薤白半夏汤低剂量(GXBD-L)组和美托洛尔(MET)组。其中,GXBD-H组、GXBD-M组和GXBD-L组大鼠分别给予11.2、5.6、2.8 g·kg^(-1)·d^(-1)的瓜蒌薤白半夏汤水煎液,MET组给予美托洛尔2.6 mg·kg^(-1)·d^(-1),CON组和MOD组给予等体积纯净水,连续28 d。心导管法测量大鼠血流动力学;透射电镜分析心肌组织线粒体变化;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清脑钠肽(BNP)和心肌肌钙蛋白T(cTnT)水平;线粒体膜电位检测试剂盒(JC^(-1)法)检测线粒体膜电位;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测线粒体DNA拷贝数的变化;分光光度计法检测心肌组织三磷酸腺苷(ATP)含量。蛋白免疫印迹法(Western blot)检测心肌组织磷酸化AMPK(p-AMPK)、AMPK、PGC^(-1)α、核呼吸因子1(NRF1)和线粒体转录因子A(TFAM)的表达水平。结果:与CON组比较,MOD组的左室收缩末期压(LVESP)和左室舒张末期压(LVEDP)明显升高(P<0.05,P<0.01),以及心室收缩时室内压最大上升速率(+dp/dtmax)和左室舒张时室内压最大下降速率(-dp/dtmax)显著降低(P<0.01);心指数和心肌间质纤维化面积均显著升高(P<0.01)及线粒体破坏损伤;血清BNP、cTnT和丙二醛(MDA)显著升高(P<0.01),以及血清超氧化物歧化酶(SOD)水平显著降低(P<0.01);心肌线粒体膜电位、DNA拷贝数和ATP水平均显著降低(P<0.01);心肌组织的p-AMPK/AMPK、PGC^(-1)α、NRF1和TFAM蛋白水平显著减少(P<0.01)。与MOD组比较,GXBD-H和GXBD-M组的LVESP、LVEDP、+dp/dt_(max)和-dp/dt_(max)明显改善(P<0.05,P<0.01);心指数和心肌间质纤维化面积均明显降低(P<0.05,P<0.01)及线粒体损伤减轻;血清BNP、cTnT和MDA明显降低(P<0.05,P<0.01),及血清SOD水平显著升高(P<0.01);心肌线粒体膜电位、DNA拷贝数和ATP水平均明显增加(P<0.05,P<0.01);心肌组织的p-AMPK/AMPK、PGC^(-1)α、NRF1和TFAM蛋白水平明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论:瓜蒌薤白半夏汤可以降低心肌损伤模型大鼠的心功能和心肌病理形态变化,抑制线粒体功能障碍,并上调心肌组织p-AMPK/AMPK、PGC^(-1)α、NRF1和TFAM蛋白表达变化。该研究为深入探索经典复方防治心肌损伤的效应机制,提供了新的实验室证据。 展开更多
关键词 瓜蒌薤白半夏汤 缺血性心脏病 线粒体功能障碍 腺苷酸活化蛋白激酶(ampK) 过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子-1α(PGC-1α)
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龙胆苦苷对非酒精性脂肪肝病大鼠AMPK信号通路的调节作用 被引量:14
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作者 武俊紫 杨斌 +2 位作者 宋波 姚政 陈文慧 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2018年第21期5142-5148,共7页
目的分析龙胆苦苷对高脂高糖饮食构建的非酒精性脂肪肝病(NAFLD)大鼠的干预作用及其机制。方法 60只SD大鼠按照随机数字法分为对照组、模型组、阳性药物多烯磷脂酰胆碱组及龙胆苦苷低、中、高剂量组,高脂高糖饮食12周建立NAFLD大鼠模型... 目的分析龙胆苦苷对高脂高糖饮食构建的非酒精性脂肪肝病(NAFLD)大鼠的干预作用及其机制。方法 60只SD大鼠按照随机数字法分为对照组、模型组、阳性药物多烯磷脂酰胆碱组及龙胆苦苷低、中、高剂量组,高脂高糖饮食12周建立NAFLD大鼠模型,龙胆苦苷低、中、高剂量组分别ig给予龙胆苦苷50、100、200 mg/kg,多烯磷脂酰胆碱组ig给予多烯磷脂酰胆碱23 mg/kg,对照组和模型组给予500μL/kg生理盐水,治疗8周后,收集各组大鼠血清,检测肝功能、血脂、血清氧化和抗氧化能力以及炎性因子相关指标,进行肝脏HE染色观察病理学改变,Western blotting和q RT-PCR检测肝脏组织中腺苷酸激活蛋白激酶α(AMPKα)和磷酸化的腺苷酸激活蛋白激酶α(p-AMPKα)的表达特点。结果 HE染色显示对照组大鼠肝脏细胞大小均一,细胞核呈均匀分布,模型组有明显脂肪空泡,且有一定的炎症反应浸润,与模型组相比,多烯磷脂酰胆碱和龙胆苦苷均有明显的改善作用,特别是龙胆苦苷中剂量和高剂量组已明显好转,但与对照组仍有一定差异;与对照组相比,模型组大鼠肝功能指标天冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)、血脂高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、氧化指标丙二醛(MDA)以及炎性因子白细胞介素-1(IL-1)和IL-6水平明显升高(P<0.05),抗氧化指标过氧化物歧化酶(SOD)活性明显下降(P<0.05),龙胆苦苷治疗后,AST、ALT、MDA、IL-1和IL-6明显降低(P<0.05),SOD明显升高(P<0.05),HDL-C和LDL-C也有一定的降低,但没有统计学意义,多烯磷脂酰胆碱则对上述指标均有明显的改善作用;与对照组相比,模型组p-AMPKα蛋白和AMPKm RNA明显降低(P<0.05);使用多烯磷脂酰胆碱和龙胆苦苷治疗后,均明显升高(P<0.05),且龙胆苦苷3个剂量组有明显的剂量依赖性,同时中剂量和高剂量组要好于多烯磷脂酰胆碱组(P<0.05),而AMPKα蛋白表达在整个治疗过程中没有明显差异。结论高脂高糖饮食12周构建的NAFLD大鼠有明显肝脏脂肪浸润,同时肝功能指标升高、血脂异常、炎性因子升高和抗氧化能力降低,龙胆苦苷则可以明显改善上述症状,这可能是龙胆苦苷增加大鼠肝脏组织中p-AMPKα蛋白表达实现的。 展开更多
关键词 龙胆苦苷 非酒精性脂肪肝病 炎性细胞因子 氧化应激 腺苷酸活化蛋白激酶
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当归芍药散对AD大鼠线粒体稳态及AMPK/SIRT1/PGC-1α信号通路的影响 被引量:12
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作者 杨苗 于文静 +7 位作者 贺春香 金怡杰 李泽 李平 邓思思 易亚乔 成绍武 宋祯彦 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期9-16,共8页
目的:探讨当归芍药散对阿尔茨海默病(AD)大鼠线粒体形态和功能的影响及作用机制。方法:采用双侧侧脑室注射链脲佐菌素(STZ)构建AD模型大鼠。40只大鼠随机分为假手术组、模型组、当归芍药散低、中、高剂量(12、24、36 g·kg^(-1))组... 目的:探讨当归芍药散对阿尔茨海默病(AD)大鼠线粒体形态和功能的影响及作用机制。方法:采用双侧侧脑室注射链脲佐菌素(STZ)构建AD模型大鼠。40只大鼠随机分为假手术组、模型组、当归芍药散低、中、高剂量(12、24、36 g·kg^(-1))组,连续灌胃14 d后透射电镜观察大鼠海马区线粒体形态变化,原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡情况,免疫荧光检测活性氧(ROS)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子-1α(PGC-1α)的表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测线粒体动力相关蛋白1(Drp1)、线粒体融合蛋白2(MFN2)、细胞色素C氧化酶亚基Ⅳ(COXⅣ)、PGC-1α mRNA的表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)、沉默信息调节因子1(SIRT1)、PGC-1α蛋白的表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠海马区线粒体损伤明显,ROS产生和细胞凋亡率显著增高(P<0.01),MFN2、COXⅣ、PGC-1α mRNA表达显著下调,Drp1 mRNA表达显著上调,p-AMPK/AMPK、SIRT1、PGC-1α蛋白明显下调(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,当归芍药散中、高剂量组明显改善线粒体损伤,ROS产生减少,细胞凋亡率下降(P<0.01),MFN2、COXⅣ、PGC-1α mRNA表达显著上调,Drp1 mRNA表达显著下调,p-AMPK/AMPK、SIRT1、PGC-1α蛋白显著上调(P<0.01)。结论:当归芍药散可以显著改善AD模型大鼠线粒体稳态失衡。 展开更多
关键词 当归芍药散 阿尔茨海默病 线粒体稳态 腺苷酸活化蛋白激酶(ampK) 沉默信息调节因子1(SIRT1) 过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子-1α(PGC-1α)
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抑制AMPK观察清燥救肺汤对肺癌细胞自噬启动相关蛋白表达的影响 被引量:7
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作者 张汗顺 余功 +1 位作者 刘成 谢斌 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期25-31,共7页
目的:观察应用腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)抑制剂(compound C)后,清燥救肺汤对肺癌细胞自噬启动相关蛋白AMPK,哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR),UNC-51样激酶1(ULK1)表达的影响。方法:雄性C57BL/6J小鼠随机分为模型组,环磷酰胺(CTX)组(50 mg&... 目的:观察应用腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)抑制剂(compound C)后,清燥救肺汤对肺癌细胞自噬启动相关蛋白AMPK,哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR),UNC-51样激酶1(ULK1)表达的影响。方法:雄性C57BL/6J小鼠随机分为模型组,环磷酰胺(CTX)组(50 mg·kg^(-1)),清燥救肺汤组(11 g·kg^(-1)),AMPK抑制剂组(10 mg·kg^(-1)),清燥救肺汤加AMPK抑制剂组(清燥加抑制剂组)(11 g·kg^(-1)+10 mg·kg^(-1))。小鼠右腋皮下注射Lewis肺癌细胞构建肺癌荷瘤模型。造模24 h后,CTX组腹腔注射给药,隔日1次,共7次,AMPK抑制剂组与清燥加抑制剂组腹腔注射compound C,每日1次,共14 d。清燥救肺汤组和清燥加抑制剂组,造模前后14 d均以中药设定剂量灌胃给药。实验结束后处死各组小鼠并取荷瘤组织,统计各组瘤质量;透射电镜(TEM)观察各组肺癌组织自噬溶酶体的生成情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测AMPK,磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK),mTOR,磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR),ULK1,磷酸化UNC-51样激酶1(p-ULK1),微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)和p62蛋白的表达;苏木素-伊红(HE)染色观察各组肺癌组织病理学变化。结果:与模型组比较,清燥救肺汤组瘤质量降低(P<0.01),电镜下发现自噬溶酶体生成,p-AMPK,p-ULK1,LC3B,LC3B-Ⅱ蛋白表达和p-AMPK/AMPK,p-ULK1/ULK1,LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ均升高(P<0.05,P<0.01),p-mTOR,p62蛋白表达和p-mTOR/mTOR均降低(P<0.05)。与清燥救肺汤组比较,清燥加抑制剂组电镜下未见自噬溶酶体生成,p-AMPK,p-ULK1,LC3B,LC3B-Ⅱ蛋白表达和p-AMPK/AMPK,p-ULK1/ULK1,LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ均明显降低(P<0.05,P<0.01),p62蛋白表达升高(P<0.05)。HE染色结果显示,各给药组肺癌组织与模型组比较,病理有明显改善。结论:清燥救肺汤能促进自噬发生标志蛋白LC3B-Ⅱ升高及p62蛋白表达降低从而诱导自噬发生,其自噬启动机制可能不是调控AMPK/mTOR/ULK1通路介导,而是通过AMPK/ULK1通路实现的。 展开更多
关键词 腺苷酸活化蛋白激酶(ampK) 清燥救肺汤 肺癌 自噬启动相关蛋白
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中医药调控AMPK信号通路治疗心肌缺血再灌注损伤研究进展 被引量:10
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作者 胡雅琪 刘建和 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第13期213-221,共9页
急性心肌梗死因其高发病率及高死亡率严重危害居民健康,再灌注策略是急性心肌梗死的首选治疗策略,这些治疗措施能够快速恢复缺血心肌的血液循环,以挽救濒死的心肌细胞,减少心肌梗死面积,降低死亡率。然而再灌注可能会导致额外心脏损伤,... 急性心肌梗死因其高发病率及高死亡率严重危害居民健康,再灌注策略是急性心肌梗死的首选治疗策略,这些治疗措施能够快速恢复缺血心肌的血液循环,以挽救濒死的心肌细胞,减少心肌梗死面积,降低死亡率。然而再灌注可能会导致额外心脏损伤,即心肌缺血再灌注损伤(MIRI)。因此,如何减轻心肌缺血再灌注损伤成为心血管治疗急需解决的问题之一,中医药在治疗MIRI方面具有多成分、多途径、多靶点的优势,能为减轻心肌缺血再灌注损伤提供新的思路。腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)与MIRI密切相关,其可以通过调控炎症反应、氧化应激、自噬、凋亡和铁死亡等过程在减轻MIRI中发挥着重要作用。故该文综述了AMPK信号通路的基本结构及其在心肌缺血再灌注损伤中的作用,以及目前中医药通过调控AMPK通路治疗MIRI的研究进展,以期为心肌缺血再灌注损伤的防治提供一定的理论基础。 展开更多
关键词 腺苷酸活化蛋白激酶(ampK)信号通路 中医药 心肌缺血再灌注损伤 研究进展
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