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Gus基因在转基因棉花细胞中的表达及其与NPTⅡ基因、Bt基因表达的相关性 被引量:6
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作者 孟钊红 焦改丽 +1 位作者 张换样 李燕娥 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2001年第4期243-246,共4页
通过农杆菌介导法将含有 Gus基因、NPT 基因、Bt基因的 Ti质粒转入棉花细胞中 ,用Gus组织化学检测法检测转化愈伤组织、再生棉株 R0 、R1和 R2 代植株组织细胞中的 Gus基因表达的水平 ,并用 NPT 活性速测法和室内生物测虫法检测三个外... 通过农杆菌介导法将含有 Gus基因、NPT 基因、Bt基因的 Ti质粒转入棉花细胞中 ,用Gus组织化学检测法检测转化愈伤组织、再生棉株 R0 、R1和 R2 代植株组织细胞中的 Gus基因表达的水平 ,并用 NPT 活性速测法和室内生物测虫法检测三个外源基因在 R0 、R1和 R2 代植物植株组织中的表达情况 ,分析三者存在及表达的相互关系。结果表明 ,Gus基因在转化愈伤组织细胞有丝分裂增殖过程中能稳定遗传给后代细胞。转化棉株 R0 、R1和 R2 代 Gus活性、NPT 活性、抗虫性三者有一定的相关性但不完全是共表达的 。 展开更多
关键词 转基因棉花 农杆菌介导 GUS基因 基因表达 NPTⅡ基因 BT基因 相关性 协同性
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以对潮霉素抗性为筛选标记的棉花遗传转化 被引量:14
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作者 岳建雄 张慧军 张炼辉 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2002年第4期195-199,共5页
以 HPT基因作为筛选标记基因 ,潮霉素作为筛选剂 ,通过农杆菌介导法将 GFP基因导入棉花细胞并得到再生植株。经过 Southern杂交证实外源基因已经整合到棉花基因中 ,荧光显微镜可以观察到绿色荧光 ,说明 GFP基因得到表达。研究确定了潮... 以 HPT基因作为筛选标记基因 ,潮霉素作为筛选剂 ,通过农杆菌介导法将 GFP基因导入棉花细胞并得到再生植株。经过 Southern杂交证实外源基因已经整合到棉花基因中 ,荧光显微镜可以观察到绿色荧光 ,说明 GFP基因得到表达。研究确定了潮霉素作为棉花转化的筛选剂在农杆菌介导的转化中适用的浓度范围及筛选方法 ,即棉花转化中潮霉素的筛选浓度范围为 2 .5~ 1 0 mg· L- 1,在有 GFP等一些易于观察和检测的标记基因存在时 ,起始浓度可用较低 ( 2 .5 mg· L- 1)的筛选浓度 ;而在没有标记基因或检测方法较复杂时 ,起始浓度用较高 ( 1 0 mg· L- 1) 展开更多
关键词 潮霉素 抗性 筛选标记 棉花 遗传转化
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枸杞转基因植株的再生 被引量:13
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作者 王慧中 黄发灿 +2 位作者 李安生 邵启全 牛德水 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1991年第3期220-223,共4页
本文报道一个快速简便的枸杞转化再生系统。宁夏枸杞的幼茎外植体,能被含非致瘤性Ti质粒载体的根癌农杆菌感染。在该载体双向启动子的一端连有一个npt-Ⅱ基因(新霉素磷酸转移酶Ⅱ基因)以供选择卡那霉素抗性的转化植物细胞。把选择诱导... 本文报道一个快速简便的枸杞转化再生系统。宁夏枸杞的幼茎外植体,能被含非致瘤性Ti质粒载体的根癌农杆菌感染。在该载体双向启动子的一端连有一个npt-Ⅱ基因(新霉素磷酸转移酶Ⅱ基因)以供选择卡那霉素抗性的转化植物细胞。把选择诱导培养基上形成的愈伤组织转到选择分化培养基后能很快分化出芽点,继而长成完整的小植株。对再生植株的NPT-Ⅱ酶活性检测及DNA分子杂交表明:外源基因已整合到枸杞细胞的核基因组上,并能在植株水平表达出相应的性状。 展开更多
关键词 枸杞 转化 转基因植株
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不同培养基及外源激素对西洋参毛状根的生长和皂甙含量的影响 被引量:24
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作者 王冲之 丁家宜 《植物资源与环境学报》 CAS CSCD 2001年第4期1-4,共4页
分析了 1/2MS、改良White、SJ 1、改良Nisch、B5和B5 I 6种液体培养基、水解乳蛋白 (LH)以及IAA、IBA、NAA、6 BA和ABA 5种激素对西洋参 (PanaxquinquefoliumL .)毛状根生长及皂甙含量的影响。用高效液相色谱法测定部分毛状根样品的 4... 分析了 1/2MS、改良White、SJ 1、改良Nisch、B5和B5 I 6种液体培养基、水解乳蛋白 (LH)以及IAA、IBA、NAA、6 BA和ABA 5种激素对西洋参 (PanaxquinquefoliumL .)毛状根生长及皂甙含量的影响。用高效液相色谱法测定部分毛状根样品的 4种单体皂甙含量。结果表明SJ 1和B5培养基较好 ,水解乳蛋白可增加毛状根的鲜重 ,但降低毛状根中总皂甙的含量。IAA、IBA和ABA对毛状根的生长有促进作用 ,6 BA对皂甙积累有显著促进作用 。 展开更多
关键词 西洋参 发根农杆菌 培养基 激素 人参皂甙 含量 毛状根
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山豆根毛状根培养体系的建立与优化 被引量:5
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作者 李林轩 韦坤华 +3 位作者 姚绍嫦 唐美琼 韦范 缪剑华 《贵州农业科学》 CAS 2016年第1期27-31,共5页
为探索定向培养山豆根植物细胞及器官获取有效药用成分的新途径,为山豆根有效药用成分的大规模生产奠定基础,采用共培养法研究发根农杆菌R1601感染诱导山豆根无菌苗子叶产生毛状根,并在此基础上从不同培养液、不同蔗糖浓度和外源激素对... 为探索定向培养山豆根植物细胞及器官获取有效药用成分的新途径,为山豆根有效药用成分的大规模生产奠定基础,采用共培养法研究发根农杆菌R1601感染诱导山豆根无菌苗子叶产生毛状根,并在此基础上从不同培养液、不同蔗糖浓度和外源激素对毛状根生长的影响方面筛选山豆根毛状根生长的最佳培养液。结果表明:利用发根农杆菌R1601感染山豆根无菌苗子叶16min,在MS+AS 100μmol/L的固体培养基上培养可诱导产生毛状根,且诱导率最高,达66.67%;1/2 MS+IAA 0.5mg/L+5%蔗糖的培养液最有利于山豆根毛状根的生长。 展开更多
关键词 山豆根 毛状根 农杆菌 培养液 药用植物
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转基因玉米抗性愈伤再生植株的影响因素研究 被引量:5
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作者 张志勇 李晚忱 付凤玲 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期637-642,共6页
再生植株的培养是玉米转基因重要环节之一。本文比较了基本培养基、愈伤组织大小、继代次数、激素添加物对转基因抗性愈伤组织分化和再生植株的影响。结果表明:以N6为基本培养基有利于抗性愈伤组织分化;抗性愈伤组织大小在2.5-3.5mm之... 再生植株的培养是玉米转基因重要环节之一。本文比较了基本培养基、愈伤组织大小、继代次数、激素添加物对转基因抗性愈伤组织分化和再生植株的影响。结果表明:以N6为基本培养基有利于抗性愈伤组织分化;抗性愈伤组织大小在2.5-3.5mm之间、继代2-3次的分化率最高;再生培养基中添加ABT 0.5 mg·L^-1和S3307 0.25 mg·L^-1能促进生根壮苗。本研究为转基因玉米再生体系建立提供了依据。 展开更多
关键词 玉米 转基因 农杆菌 培养基 再生植株
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农杆菌培养方式和预培养基激素配比对甘蓝型油菜下胚轴转化效应分析 被引量:13
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作者 孙洁 黄团 +3 位作者 李加纳 殷家明 柴友荣 丁彩霞 《西南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期49-53,共5页
利用根癌农杆菌共培养法转化甘蓝型油菜"华双4号"下胚轴,通过组织化学染色法检测报告基因gus的表达情况,研究了农杆菌培养方式和预培养基激素配比对转化效果的影响.结果表明,用LB培养基活化后的农杆菌再用添加AS的MS培养液继... 利用根癌农杆菌共培养法转化甘蓝型油菜"华双4号"下胚轴,通过组织化学染色法检测报告基因gus的表达情况,研究了农杆菌培养方式和预培养基激素配比对转化效果的影响.结果表明,用LB培养基活化后的农杆菌再用添加AS的MS培养液继续培养6~30h对转化有明显的促进作用;不同的农杆菌培养方式对转化的影响有明显的差异,在试验的6种农杆菌培养方式中s2-5的转化效果最好,即收集活化后的农杆菌用MS+AS+抗生素重悬培养24h,再用MS+AS培养6h;2,4-D与6BA之间的相互作用对转化有重要影响,在试验的预培养基激素组合中,2,4-D2.00mg/L6BA0.25mg/L的组合转化效率最高;抗性愈伤率与转化效率之间不一定具有相关关系. 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 下胚轴 农杆菌培养方式 预培养基 转化
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放射性土壤杆菌产可得然胶最佳条件的研究 被引量:2
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作者 赵双枝 吉武科 张彦昊 《山东食品发酵》 2010年第3期28-32,共5页
通过对本实验室保藏的一株放射性土壤杆菌Agrobacterium cradiabacter发酵生产可得然胶时的氮源、碳源等培养基组分及发酵条件的研究,得出了菌株产可得然胶的最佳培养基配方及最适培养条件。结果表明,最佳培养基配方为:葡萄糖6.0%,(NH4)... 通过对本实验室保藏的一株放射性土壤杆菌Agrobacterium cradiabacter发酵生产可得然胶时的氮源、碳源等培养基组分及发酵条件的研究,得出了菌株产可得然胶的最佳培养基配方及最适培养条件。结果表明,最佳培养基配方为:葡萄糖6.0%,(NH4)2HPO40.24%,KH2PO40.2%,MgSO4·7H2O0.1%,CaCO30.2%,营养因子浓缩液0.25%,pH7.0。最佳培养条件为:装液量80ml/500ml三角瓶,摇床转速为180rpm,培养温度30℃,发酵时间120hr。在此条件下,可得然胶产量达41.0g/L,糖胶转化率高达68.3%。 展开更多
关键词 可得然胶 放射性土壤杆菌agrobacterium cradiabacter 最佳培养基配方 最佳培养条件
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灯盏花发根培养条件筛选研究 被引量:1
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作者 黄鑫 季倩 +2 位作者 陈瑞兵 何德 张磊 《西南林业大学学报(自然科学)》 CAS 北大核心 2016年第5期21-26,共6页
为建立灯盏花的发根培养体系,用C58C1发根农杆菌空菌株和携带目的基因的菌株转化灯盏花叶片获得发根,测定发根的生长曲线,比较不同因素对发根生长量的影响。结果表明:利用发根农杆菌C58C1菌株成功从灯盏花中诱导出了发根,并建立了灯盏... 为建立灯盏花的发根培养体系,用C58C1发根农杆菌空菌株和携带目的基因的菌株转化灯盏花叶片获得发根,测定发根的生长曲线,比较不同因素对发根生长量的影响。结果表明:利用发根农杆菌C58C1菌株成功从灯盏花中诱导出了发根,并建立了灯盏花发根最优的培养体系,其诱导的最佳农杆菌菌液浓度为OD_(600)=0.6,最佳浸染时间为10 min,最佳共培养时间为2 d,在此条件下诱导率高达60%。经PCR鉴定证明Ri质粒的T-DNA已成功转化灯盏花的发根。 展开更多
关键词 发根农杆菌 诱导率 遗传转化体系 灯盏花 培养基
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豇豆子叶节再生体系建立及Pti4基因的遗传转化 被引量:1
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作者 姜建业 谢永东 +3 位作者 王一鸣 赵丽 铁曼曼 唐懿 《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期534-542,共9页
为获得豇豆(Vigna unguiculata)遗传转化体系,以‘成豇七号’带1片子叶的子叶节作为外植体,对其高效再生体系和农杆菌介导抗病基因Pti4的遗传转化进行了研究。结果表明,豇豆无菌苗、不定芽诱导和不定芽伸长培养的最适培养基分别为MSB5+6... 为获得豇豆(Vigna unguiculata)遗传转化体系,以‘成豇七号’带1片子叶的子叶节作为外植体,对其高效再生体系和农杆菌介导抗病基因Pti4的遗传转化进行了研究。结果表明,豇豆无菌苗、不定芽诱导和不定芽伸长培养的最适培养基分别为MSB5+6-BA 3.0 mg L–1、MSB5+6-BA 1.0 mg L–1+KT 0.06 mg L–1和MSB5+6-BA 0.5 mg L–1+IBA 0.2 mg L–1。不定芽在MS培养基上能迅速诱导生根,获得完整植株。以豇豆子叶节为受体,通过农杆菌介导成功将Pti4整合到‘成豇七号’抗性芽基因组中。因此,豇豆高效再生体系的建立为遗传育种研究奠定了基础。 展开更多
关键词 豇豆 子叶节 组织培养 抗病转录因子 Pti4 农杆菌介导
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钩藤发根的高效诱导和最适培养基的筛选 被引量:2
11
作者 姜育松 强玮 +4 位作者 马东迪 左婷婷 苏畅凤 代玉玉 路星星 《中药材》 CAS 北大核心 2021年第11期2516-2520,共5页
目的:建立钩藤发根的高效诱导体系,筛选最适于钩藤发根生长和活性成分积累的培养基。方法:用发根农杆菌C58C1(pRiA4)浸染钩藤无菌的茎、嫩叶和老叶,探究C58C1对不同外植体的发根诱导率;用6种植物培养基(1/2MS、MS、N6、White、B5、WPM)... 目的:建立钩藤发根的高效诱导体系,筛选最适于钩藤发根生长和活性成分积累的培养基。方法:用发根农杆菌C58C1(pRiA4)浸染钩藤无菌的茎、嫩叶和老叶,探究C58C1对不同外植体的发根诱导率;用6种植物培养基(1/2MS、MS、N6、White、B5、WPM)培养钩藤发根,HPLC测定钩藤碱和异钩藤的含量。结果:农杆菌C58C1对3种外植体的诱导率都超过了80%,嫩叶的最高达到了91.8%;PCR检测表明农杆菌中rolB和rolC基因均已整合入钩藤发根的基因组;钩藤发根能合成钩藤碱和异钩藤碱2种活性成分,且钩藤碱占优势;B5培养基最适于钩藤发根的生长和2种生物碱的积累,钩藤碱与异钩藤碱产量最高,100 mL培养基分别可积累0.506 mg和0.160 mg;1/2MS是次优培养基。结论:该研究建立了钩藤发根的高效诱导体系和最适培养体系,为钩藤活性成分的大量生产和农杆菌介导的发根遗传转化体系研究奠定了技术基础。 展开更多
关键词 钩藤 发根农杆菌 发根 钩藤碱 培养基优化
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Proline and Glutamine Improve in vitro Callus Induction and Subsequent Shooting in Rice 被引量:1
12
作者 Bhausaheb PAWAR Prashant KALE +3 位作者 Jyoti BAHURUPE Ashok JADHAV Anil KALE Sharad PAWAR 《Rice science》 SCIE CSCD 2015年第6期283-289,共7页
This study was conducted to evaluate the effects of proline and glutamine on in vitro callus induction and subsequent regeneration and to develop a reproducible and highly efficient plant regeneration protocol in four... This study was conducted to evaluate the effects of proline and glutamine on in vitro callus induction and subsequent regeneration and to develop a reproducible and highly efficient plant regeneration protocol in four rice genotypes, viz. Pawana, Jaya, Indrayani and Ambemohar. Considerable variation in response to plant growth regulators and amino acid supplements used was observed in all the four genotypes. Medium supplemented with proline and glutamine was shown to be superior to medium without proline and glutamine. The best callusing from mature embryo was observed on Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 2.0 mg/L 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D), 500 mg/L proline and 500 mg/L glutamine. Shoot induction was higher in the callus obtained from medium supplemented with 500 mg/L proline and 500 mg/L glutamine. The highest shoot regeneration frequency (83.2%) was observed on MS medium with 2.0 mg/L benzylaminopurine, 0.5 mg/L 1-naphthaleneacetic acid, 500 mg/L proline, and 500 mg/L glutamine in the callus obtained from MS medium supplemented with 2.0 mg/L 2,4-D, 500 mg/L proline and 500 mg/L glutamine. Among the four genotypes, Pawana has the highest regeneration efficiency (83.2%), whereas the regeneration efficiency of the rest three rice genotypes was in the range of 32.0% to 72.3%. This optimized regeneration protocol can be efficiently used for Agrobacterium mediated genetic transformation in rice. 展开更多
关键词 callus induction GLUTAMINE PROLINE RICE agrobacterium mediated genetic transformation 2 4-dichlorophenoxyacetic acid Murashige and Skoog medium
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不同培养条件对黄瓜发状根生长影响研究 被引量:1
13
作者 田雲 蒋景龙 +1 位作者 李丽 黎远东 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期3231-3236,共6页
本研究以PCR分子鉴定转化成功的黄瓜发状根为试材,采用悬浮培养的方法分析不同培养基类型、不同培养基组分和不同激素对黄瓜发状根生长的影响。分析显示:MS培养基中黄瓜发状根生长速度最快,其次为1/2 MS培养基,N6培养基中发状根生长的... 本研究以PCR分子鉴定转化成功的黄瓜发状根为试材,采用悬浮培养的方法分析不同培养基类型、不同培养基组分和不同激素对黄瓜发状根生长的影响。分析显示:MS培养基中黄瓜发状根生长速度最快,其次为1/2 MS培养基,N6培养基中发状根生长的速度最慢;以MS为基础培养基,30 g/L的蔗糖为氮源,C_(NH4+):C_(NO3)-=1:2为碳源和204 mg/L KH_2PO_4为磷源时,培养基中黄瓜发状根生长量最大;以MS为基础培养基,分别添加激素IAA(Indole acetic acid)、GA3(Gibberellin)、NAA(Naphthalene acetic acid)、KT(Kinetin),其中1 mg/L IAA作用下的黄瓜发状根的增长量最大(51.0 mg),1 mg/L的NAA(Naphthalene acetic acid)处理下黄瓜发状根的增长量最少(37.8 mg/L)。以上为发状根进一步扩大培养和后期的工业化大规模生产提供一定理论依据。 展开更多
关键词 黄瓜 发根农杆菌 培养基 激素
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