樱桃根癌土壤杆菌及其对土壤杆菌素84敏感性的研究

从山东、河北、辽宁等地樱桃园的樱桃冠瘿瘤和土壤样品中分离到46株根瘤土壤杆菌。经鉴定有4株是Agrobacteriumtumefaciens（原生物型1），其余42株是A.rhizogenes（原生物型2）。这些菌株所诱导的冠瘿瘤中均合成胭脂碱（nopaline），属胭脂碱型Ti质粒的根癌土壤杆菌，并对放射土壤杆菌K84菌株所产生的土壤杆菌素84敏感。由于K84菌株对含胭脂碱Ti质粒的根癌土壤杆菌有很好的抑制效果，因此，用K84菌株防治樱桃根癌病是有应用前景的．

A_(84)的敏感性与胭脂碱 Ti 质粒及宿主的关系

本文通过对农杆菌素 A_(84)敏感菌株 C_(58)和不敏感菌株 H_(35)Ti 质粒(胭脂碱质粒类型)的相互转化,发现 A_(84)的敏感性除由 Ti 质粒决定外,还与宿主细胞有关。利用37℃高温处理、胭脂碱平板复制,分别得到 C_(58)和 H_(35)的治愈株 C_(58)12和2-15,并经马铃薯碟块致瘤和 Ti 质粒检测进行验证。分别使用来自 H_(35)的质粒转化 C_(58)12、C_(58)的质粒转化2-15,利用胭脂碱平板、马铃薯碟块致瘤及 Ti 质粒检测筛选鉴定出 pTiH_(35)的转化子 HC2、HC4,pTiC_(58)的转化子 CHl、CH2和 CH3.A_(?)的敏感性测定表明,这些转化子均对 A_(84)敏感,即 pTiH_(35)对 A_(?)的敏感性与其宿主细胞有关,而 pTiC_(58)对A_(?)的敏感性与其宿主细胞无关。

农杆菌素MI15的分离、纯化及分子量测定

放射土壤杆菌(Agrobacterium radiobacter)MI15菌株,属于生物I型。在平皿培养时,能够产生农杆菌素MI15,能抑制葡萄根癌土壤杆菌的生长。采用透析和DEAE纤维素柱离子交换层析纯化制备了MI15菌株分泌的农杆菌素MI15。经HPLC分析,此制备物纯度较高,可达到结构分析要求。紫外吸收光谱分析显示,该物质在260nm和280nm处均无洗脱峰,故认为该物质不是核酸、蛋白类似物。经红外吸收和元素分析,初步认定它是一种小分子有机物,质谱测定结果显示,农杆菌素MI15的分子量为368。

应用生物3型放射土壤杆菌防治葡萄冠瘿瘤形成的研究

从葡萄冠瘿中分离到的放射土壤杆菌 E26菌株,属于生物3型。在平皿培养时,能够产生土壤杆菌素,抑制葡萄根癌土壤杆菌的生长。在温室指示植物向日葵幼苗和葡萄幼枝上,明显抑制葡萄根癌土壤杆菌诱导形成冠瘿瘤。E26菌株对土壤杆菌菌株的抑菌谱较宽,其质粒的琼脂糖凝胶电泳图谱上,有两条质粒带,与生物3型葡萄根癌土壤杆菌 GL56-2菌株的质粒情况基本相同,其中大的质粒与根癌土壤杆菌 C58的质粒(PTiC58)大小近似。经双重抗药性标记的 E26菌株接种到葡萄枝条上,一个月后仍能得到抗药性菌株的分离,表明该菌株能在葡萄上定殖。

土壤杆菌K1026对樱桃冠瘿病病原菌的抑制作用及田间防治效果

由致病性根癌土壤杆菌Agrobacteriumspp.侵染引起的根癌病对樱桃等果树生产造成严重的影响。利用双层平板、胡萝卜圆盘法和接种指示植物番茄等方法验证了澳洲生防菌株K1026对2种不同原生物型樱桃冠瘿病病原菌的抑制作用;检测了不同接种时间对病原菌侵染产生瘤状组织的影响,结果显示提前或者在病原菌接种后20h内接种K1026可抑制胡萝卜产生瘤状组织;研究了K1026对大樱桃根癌病的作用机制是产生土壤杆菌素和竞争附着位点;田间试验表明K1026蘸根处理,对‘中国樱桃’株系冠瘿病的防治效果达81.61%,使发病率降低至18.13%。