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一种新型醛酮还原酶的克隆表达、性质研究以及在不对称合成(R)-CHBE中的应用
1
作者
张瑾成
魏淼
+1 位作者
许琳
严明
《生物加工过程》
CAS
2016年第2期33-40,共8页
为开发催化4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)制备(R)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯((R)-CHBE)的新型催化剂,挖掘到了来自白色念珠菌SC5314中的一种NADPH辅酶依赖型醛酮还原酶CAK基因(cak),并将该基因在大肠杆菌中表达。将重组酶进行纯化后,测定其酶学性质...
为开发催化4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)制备(R)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯((R)-CHBE)的新型催化剂,挖掘到了来自白色念珠菌SC5314中的一种NADPH辅酶依赖型醛酮还原酶CAK基因(cak),并将该基因在大肠杆菌中表达。将重组酶进行纯化后,测定其酶学性质,并构建了以葡萄糖为辅底物的双酶偶联辅酶再生系统,考察其不对称转化制备(R)-CHBE的能力。结果表明:CAK对多种醛酮类化合物有催化活性,其催化COBE的最适反应温度为40℃,最适p H为5。CAK在40℃下以及酸性条件中能保持较好的稳定性。Mg2+、Na+、K+对酶活有一定的激活作用,而Cu2+存在条件下酶会彻底失活。乙酸乙酯、邻苯二甲酸二丁酯对酶活的抑制作用较小。利用双酶偶联辅酶再生系统不对称转化制备(R)-CHBE。在合适的条件下,转化600 mmol/L的底物,产率达80.6%,产物对映体过量值(e.e.值)>99%。
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关键词
醛酮还原酶
NADPH再生
蛋白纯化
酶学性质
(
r
)-4-氯-
3
-羟基丁酸乙酯
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职称材料
某黄金冶炼公司含氰贫液综合治理技术研究
被引量:
5
2
作者
迟崇哲
叶锦娟
+2 位作者
吴铃
吕春玲
王晓伟
《黄金》
CAS
2015年第2期73-77,共5页
针对某黄金冶炼公司的含氰贫液特点,以达标排放为主要目的,采用长春黄金研究院自主研发的3R-O净化回收系统、Colt’s酸法再生回收系统、除砷系统以及深度治理系统进行了综合治理技术研究。研究结果表明:3R-O净化回收系统可回收贫液中98...
针对某黄金冶炼公司的含氰贫液特点,以达标排放为主要目的,采用长春黄金研究院自主研发的3R-O净化回收系统、Colt’s酸法再生回收系统、除砷系统以及深度治理系统进行了综合治理技术研究。研究结果表明:3R-O净化回收系统可回收贫液中98%以上的氰化物;Colt’s酸法再生回收系统可去除95%的硫氰酸盐,再生回收75%的氰化物;除砷系统中砷的去除率可达99%;深度处理系统可使处理后的尾液中各污染物质量浓度稳定达到GB 8978—1996《污水综合排放标准》中的一级标准。
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关键词
3
r
-O净化回收
Colt’s酸法
再生回收
除砷
深度治理
达标
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职称材料
题名
一种新型醛酮还原酶的克隆表达、性质研究以及在不对称合成(R)-CHBE中的应用
1
作者
张瑾成
魏淼
许琳
严明
机构
南京工业大学生物与制药工程学院
出处
《生物加工过程》
CAS
2016年第2期33-40,共8页
基金
国家重点基础研究发展计划(973计划)(2011CBA00804)
国家高技术研究发展计划(863计划)(2012AA022101)
江苏高校优势学科建设工程
文摘
为开发催化4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)制备(R)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯((R)-CHBE)的新型催化剂,挖掘到了来自白色念珠菌SC5314中的一种NADPH辅酶依赖型醛酮还原酶CAK基因(cak),并将该基因在大肠杆菌中表达。将重组酶进行纯化后,测定其酶学性质,并构建了以葡萄糖为辅底物的双酶偶联辅酶再生系统,考察其不对称转化制备(R)-CHBE的能力。结果表明:CAK对多种醛酮类化合物有催化活性,其催化COBE的最适反应温度为40℃,最适p H为5。CAK在40℃下以及酸性条件中能保持较好的稳定性。Mg2+、Na+、K+对酶活有一定的激活作用,而Cu2+存在条件下酶会彻底失活。乙酸乙酯、邻苯二甲酸二丁酯对酶活的抑制作用较小。利用双酶偶联辅酶再生系统不对称转化制备(R)-CHBE。在合适的条件下,转化600 mmol/L的底物,产率达80.6%,产物对映体过量值(e.e.值)>99%。
关键词
醛酮还原酶
NADPH再生
蛋白纯化
酶学性质
(
r
)-4-氯-
3
-羟基丁酸乙酯
Keywords
aldo-keto
r
eductase
NADPH
regeneration
p
r
otein pu
r
ifying
enzyme p
r
ope
r
ty
(
r
)-4-chlo
r
o-
3
-hyd
r
oxybutanoic acid ethyl este
r
分类号
Q815 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
某黄金冶炼公司含氰贫液综合治理技术研究
被引量:
5
2
作者
迟崇哲
叶锦娟
吴铃
吕春玲
王晓伟
机构
长春黄金研究院
出处
《黄金》
CAS
2015年第2期73-77,共5页
文摘
针对某黄金冶炼公司的含氰贫液特点,以达标排放为主要目的,采用长春黄金研究院自主研发的3R-O净化回收系统、Colt’s酸法再生回收系统、除砷系统以及深度治理系统进行了综合治理技术研究。研究结果表明:3R-O净化回收系统可回收贫液中98%以上的氰化物;Colt’s酸法再生回收系统可去除95%的硫氰酸盐,再生回收75%的氰化物;除砷系统中砷的去除率可达99%;深度处理系统可使处理后的尾液中各污染物质量浓度稳定达到GB 8978—1996《污水综合排放标准》中的一级标准。
关键词
3
r
-O净化回收
Colt’s酸法
再生回收
除砷
深度治理
达标
Keywords
3
r
- O pu
r
ification and
r
ecove
r
y
Colt's acid method
regeneration
and
r
ecycling
r
emoval of a
r
senic
intensive t
r
eatment
compliance
分类号
TD926.5 [矿业工程—选矿]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
一种新型醛酮还原酶的克隆表达、性质研究以及在不对称合成(R)-CHBE中的应用
张瑾成
魏淼
许琳
严明
《生物加工过程》
CAS
2016
0
下载PDF
职称材料
2
某黄金冶炼公司含氰贫液综合治理技术研究
迟崇哲
叶锦娟
吴铃
吕春玲
王晓伟
《黄金》
CAS
2015
5
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
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