家蝇幼虫抗菌肽MDL-1的分离纯化及其对大肠杆菌超微结构的影响

通过体壁损伤和大肠杆菌同时诱导家蝇幼虫产生免疫血淋巴 ,经沸水浴热变性 ,透析浓缩处理 ,然后经Tricine SDS PAGE得到诱导前后家蝇幼虫血淋巴中蛋白差异表达条带 ,将该条带电泳回收、复性、抗菌活性检测等步骤 ,分离纯化得到抗菌肽MDL 1,其分子中富含Gly和碱性氨基酸 ,分子量为 62 0 0D ,对革兰氏阴性菌Escherichiacoli有较强抗性。通过MDL 1对大肠杆菌通透性分析和透射电镜超微结构观察表明 ,MDL 1首先可能与细菌的外膜结合 ,然后与细胞内膜作用 ,扰乱膜脂分子的排列 ,改变细胞膜的通透性 ,从而影响细胞膜的结构和功能 ,使细胞膜形成的许多孔道 ,造成细胞内的原生质扩散 ,并从孔道向胞外渗漏 ,影响了细菌的代谢系统 ,最终引起细胞膜破碎 ,细胞完全解体 。

开口箭多糖含量测定及生物学活性研究

采用水提醇沉法提取开口箭多糖,三氯乙酸法除蛋白,蒽酮-硫酸法测定多糖含量。在体外抗氧化模拟条件下研究开口箭粗多糖对羟自由基(.OH)、过氧化氢(H2O2)和二苯代苦味酰肼基自由基(DPPH.)的清除作用,细胞培养板液体稀释法测定开口箭多糖的抑菌作用。研究结果表明:开口箭多糖含量为3.7%,粗多糖具有一定的清除.OH、H2O2和DPPH.能力,其中对H2O2具有较强的清除作用。与Vc为对照,开口箭多糖的抗氧化能力不同程度的弱于Vc。开口箭多糖对金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、枯草芽胞杆菌和白假丝酵母菌4种供试菌株均有较好的抑制作用,且粗多糖的抑菌杀菌作用强于去蛋白多糖。研究表明,开口箭多糖具有很好的抗氧化活性和较强的抑菌杀菌活性。