锚定引物扩增多态性DNA分子标记鉴别番茄抗根结线虫病品种的研究

以抗病材料Ryau96172I和感病材料Rutagus以及所需鉴定的番茄品种为试验材料,根据Mi-1.2和Mi-1.1设计引物,利用改良SDS法提取番茄基因组DNA,用锚定引物扩增多态性DNA分子标记法标记不同番茄品种。同时利用爪哇根结线虫虫卵以5 000粒/株,接种苗龄为25 d,室内人工接种不同番茄品种。接种结果得到抗病材料2份、中抗材料2份、高感材料5份。本试验对APAPD分子标记反应体系的退火温度进行了优化,适宜退火温度为38℃。应用该体系筛选得到特异性引物1条,命名为SF30,特异片段长度为408 bp。综合以上两者结果表明,APAPD分子标记的结果与接种爪哇根结线虫鉴别番茄品种抗性结果相吻合。

23个云南八角品种的指纹图谱构建

运用RAPD-PCR分子标记技术从22条扩增效果好的RAPD引物中筛选出两条具有扩增效果好、多态性高、条带清晰的特征引物:G11(TGC CCG TCGT)和M18(CAC CAT CCGT)。这两条特征引物能够将23个云南八角品种完全区分开,从而建立了23个云南八角品种的指纹图谱,为云南八角的物种亲缘关系鉴定和遗传多样性分析提供科学参考。

不同产地和不同环境生长的金线莲的ISSR遗传特性分析

目的研究不同产地及生长方式的金线莲样本间遗传多样性和亲缘关系。方法以20份福建金线莲新鲜叶片为实验材料,采用ISSR-PCR分子标记技术,筛选出15条多态性好、扩增条带清晰的ISSR引物。经琼脂糖凝胶电泳成像后,统计其扩增条带数,运用NTSYS-Pc 2.1和POPGENE 32软件进行UPGMA聚类分析。结果共扩增出130条清晰可见的条带,多态性比率达100%,遗传相似系数分布在0.647 6～0.971 4,遗传距离分布在0.029 0～0.434 5,其中编号为3和4的样本具有较近的亲缘关系。聚类分析结果显示,当相似系数取0.78时,20份样本被分为3类,可以区分不同的产地和种类。结论运用ISSR标记技术,可以从分子水平上揭示福建省内金线莲的遗传多样性。