Annexin Ⅰ在α粒子转化细胞及肺癌组织中高表达

目的：探讨Ａｎｎｅｘｉｎ Ⅰ表达与肺癌及细胞转化的关系。方法：Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹、Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹检测永生化 人支气管上皮 ＢＥＰ２Ｄ细胞及α粒子照射转化后 ＢＥＰ２Ｄ细胞中 Ａｎｎｅｘｎｉ Ⅰ在 ｍＲＮＡ和蛋白质水平的表达，细胞免疫 化学检测 Ａｎｎｅｘｉｎ Ⅰ在 ＢＥＰ２Ｄ细胞中的分布。Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹检测肺癌病人正常组织与肿瘤组织中 Ａｎｎｅｘｉｎ Ⅰ蛋白质的 表达。结果： Ａｎｎｅｘｉｎ Ⅰ在α粒子照射转化后 ＢＥＰ２Ｄ细胞中 ｍＲＮＡ和蛋白质水平上的表达光密度均为永生化人支气 管上皮 ＢＥＰ２Ｄ细胞的 １.５倍； Ａｎｎｅｘｉｎ Ⅰ在 ＢＥＰ２Ｄ细胞中分布于胞浆及细胞膜。本研究收集了 ８例肺鳞癌、４例肺腺 癌病人的肺肿瘤组织及正常组织，Ａｎｎｅｘｉｎ Ⅰ在肺癌组织中的表达明显高于正常组织（Ｐ＜０.０１），Ａｎｎｅｘｉｎ Ⅰ在肿瘤 组织中表达的光密度与正常肺组织之比为 ２．７。结论： Ａｎｎｅｘｉｎ Ⅰ在肺癌组织过表达，表明 Ａｎｎｅｘｉｎ Ⅰ可能与肺癌及 细胞恶性转化的发生发展有关。永生化及α粒子照射恶转 ＢＥＰ２Ｄ细胞为进一步研究 Ａｎｎｅｘｉｎ Ⅰ在恶性转化中的作 用提供了良好的模型。

Annexin Ⅰ基因转染对BEP2D细胞生长的影响

目的：研究AnnexinⅠ基因cDNA转染对永生化人支气管细胞系BEP2D生长的影响。方法：pT7T3D质粒经NotⅠ和XhoⅠ双酶切获得人AnnexinⅠ基因cDNA片段，亚克隆至真核表达载体pCI－neo，构建人AnnexinⅠ基因其核表达载体pCI－AXI。通过采用脂质体介导转染技术，将AnnexinⅠ的真核表达重组质粒和空载体质粒分别导入永生化人支气管细胞系BEP2D；合成AnnexinⅠ反义寡核苷酸，观察AnnexinⅠ基因对细胞生长的影响。结果：pCI－AXI转染永生化BEP2D细胞后，AnnexinⅠ的表达比永生化BEP2D细胞和空载体转染细胞提高了1．5倍。pCI－AXI转染细胞倍增时间为27h，较永生化细胞（37h）、空载体转染细胞（33h）明显缩短，流式细胞仪分析表明，AnnexinⅠ表达升高后促进G0／G1期细胞进入S期和G2／M期。永生化细胞、pCI－neo和pCI－AXI转染三种BEP2D细胞的接种效率分别为49．4％，57．87％，82．53％，pCI－AXI转染细胞形成的集落数明显高于其它两种细胞（P＜0．002），并且细胞呈复层生长趋势；pCI－AXI转染细胞在软琼脂中的克隆形成率为0．01％，永生化细胞和空载体转染细胞在软琼脂中不能形成克隆。反义寡核苷酸（50mol／L）能显著抑制BEP2D细胞的生长（P＜0．05）。结论：AnnexinⅠ具有促进BEP2D细胞增殖。

EGFR和Annexin-Ⅰ在子宫内膜异位症异位内膜的表达及意义

目的:检测表皮生长因子受体(EGFR)和膜联蛋白-I(Annexin-Ⅰ)在子宫内膜异位症(EMT)异位内膜的表达,探讨二者表达的变化与EMT的关系。方法:选取32例EMT患者(研究组)异位内膜及在位内膜,其中轻度组(Ⅰ、Ⅱ期)16例(增殖期8例,分泌期8例),重度组(Ⅲ、Ⅳ期)16例(增殖期8例,分泌期8例)。同时获取16例非EMT患者的子宫内膜标本作为对照组(增殖期8例,分泌期8例)。采用实时荧光定量PCR方法检测EGFR和Annexin-Ⅰ在各内膜组织中的表达,并比较其表达水平。结果:研究组异位内膜中EGFR的表达水平明显高于研究组在位内膜,研究组异位内膜Annexin-I的表达水平明显低于研究组在位内膜,二者差异均有高度统计学意义(P<0.01)。EMT重度组在位内膜及异位内膜中EGFR和Annexin-Ⅰ的表达水平与EMT轻度组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。对照组在位内膜组织及研究组在位内膜和异位内膜组织EGFR和Annexin-Ⅰ在分泌期和增殖期的表达水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:EGFR和Annexin-Ⅰ在EMT异位内膜表达水平的变化与EMT的发生、发展有关,而与子宫内膜的周期性变化无关。

大肠癌组织中annexinⅠ mRNA及蛋白的表达和意义

目的探讨大肠癌组织中annexinⅠ(AnxⅠ)的表达及意义。方法应用原位杂交和免疫组化方法,从mRNA及蛋白两个水平上检测95例大肠癌及35例正常大肠黏膜组织AnxⅠ的表达情况。结果大肠癌组AnxⅠmRNA表达较正常组下调,而大肠癌组AnxⅠ蛋白表达较正常组上调,两组差异极显著(P<0.01)。在mRNA水平,表达与肿瘤分化程度呈正相关(P<0.05),与有无淋巴结转移和组织学类型无关。在蛋白水平,表达与淋巴结转移呈正相关(P<0.05),与组织学类型和分化程度无关。原发癌与淋巴结转移癌两个水平表达差异均不显著(P>0.05)。结论AnxⅠ与大肠癌发生发展和转移密切相关,可作为反映大肠癌生物学行为和判断预后的重要指征。

AnnexinⅠ在鼻咽癌中的表达及意义

目的:AnnexinⅠ是钙磷脂结合蛋白家族的一员,探讨AnnexinⅠ在慢性鼻咽炎、鼻咽癌组织中的表达及与鼻咽癌多项临床病理特征的关系。方法:采用免疫组织化学SABC法检测Annexin I在慢性鼻咽炎、鼻咽癌组织中的表达。结果:①Annexin I在鼻咽癌组织中的阳性表达率为29.55%,明显低于其在慢性鼻咽炎组织中的阳性表达率93.33%,差异具有显著性(P<0.01)。②Annexin Ⅰ的表达与鼻咽癌的组织分化程度有关(P<0.01),与临床分期、颅神经侵犯、颈淋巴结转移无相关性(P>0.05)。结论:AnnexinⅠ在鼻咽癌中的表达明显下调,鼻咽癌中Annexin I的表达与组织分化程度密切相关,Annexin I可能与鼻咽癌的发生发展有关。

大肠癌组织中AnnexinⅠ蛋白的表达及意义

目的探讨AnnexinⅠ(AnxⅠ)蛋白在大肠癌组织中的表达及其与大肠癌发生、发展和转移的关系。方法应用SP免疫组化法检测95例大肠癌及35例正常大肠黏膜组织中AnxⅠ蛋白的表达情况。结果正常组AnxⅠ蛋白不表达,大肠癌无淋巴结转移组和淋巴结转移组AnxⅠ蛋白表达率分别为28·6%(10/35)和53·3%(32/60),三组间表达差异具有显著性(P<0·01);其中,转移组表达率高于无转移组(P<0·05),无转移组表达率高于正常组(P<0·01)。其表达与淋巴结转移呈正相关(P<0·05),但与组织学分型及病理分级无关(P>0·05)。大肠癌转移组淋巴结转移癌AnxⅠ蛋白表达率(42·9%,15/35)较原发癌(51·4%,18/35)低,但二者差异无显著性(P>0·05)。结论AnxⅠ蛋白表达上调与大肠癌发生发展和转移密切相关,可作为反映大肠癌生物学行为和判断预后的重要指征。

AnnexinⅠ蛋白在人前列腺癌中的表达及临床意义

目的:探讨AnnexinⅠ蛋白在前列腺癌组织中的表达及其与前列腺癌发生、发展、转移及预后的关系。方法:回顾性分析110例前列腺癌及40例前列腺增生组织中AnnexinⅠ蛋白的表达与前列腺癌Gleason分级、年龄、临床分期、转移及预后的相关性。结果:前列腺癌患者的AnnexinⅠ表达水平显著地低于良性前列腺增生症患者(P<0.05);AnnexinⅠ在低分化癌中表达较高,与高、中分化癌相比有显著性差异(P<0.05);而高、中分化癌之间AnnexinⅠ表达均较低,两者之间无显著性差异(P>0.05)。前列腺癌AnnexinⅠ蛋白表达与年龄无关,而与临床分期、淋巴结转移及预后有关(P<0.05)。结论:AnnexinⅠ蛋白表达下调与前列腺癌发生发展和预后密切相关,可作为反映前列腺癌生物学行为和判断预后的生物标记物。

膜联蛋白Ⅰ的结构和功能

膜联蛋白Ⅰ (annexinⅠ )是annexins蛋白超家族中的一员 ,是结构相关钙离子依赖的磷脂结合蛋白 .具有annexins超家族所共有的中心结构域和承担各自独特功能的N端结构域 .通过调控细胞内磷脂囊泡的聚集、炎症反应和磷脂酶A2的活性而参与细胞信号传导、细胞分化和细胞凋亡等细胞重要的生命过程 .

食管癌早期癌变的研究和annexin I表达的意义

目的 检查annexin Ⅰ在食管癌前病变到食管鳞癌不同病变过程中的表达。方法 按照研究食管癌早期病变的病理学取材方法取材,选择含有不同程度癌前病变的食管鳞癌标本11例,经连续取材制片和免疫组化分析,比较同一病例由食管癌前病变发展到食管鳞癌的全过程中annexin Ⅰ的表达改变。结果 Annexin Ⅰ表达水平在食管正常鳞状上皮中呈强阳性(11/11,100％),低度癌前病变(轻度不典型增生和中度不典型增生)减弱(3/8,37.5％),高度癌前病变(重度不典型增生和原位癌)明显减弱(12/14,85.7/％),食管浸润癌和淋巴结转移癌中阴性或显著减弱(15/15和3/3,100％)。Annex.in Ⅰ在食管低度癌前病变中的改变具有显著意义(P=0.002)。结论 Annexin Ⅰ是食管鳞癌早期侯选标志蛋白,在食管低度癌前病变时表达异常。

草鱼Annexin A4基因克隆、表达特性及进化

草鱼(Ctenopharyngodon idellus)Annexin A4基因克隆于肝肾cDNA文库,该cDNA全长为1307bp,其中,5′非编码区为104bp,3′非编码区为237bp,开放阅读框为966bp,编码321个氨基酸。草鱼Annexin A4编码的蛋白质N端由15个氨基酸残基组成,C端具有4个重复序列,每个重复序列都有一个Ⅱ型钙结合位点,在第4个钙结合位点中包含一个"KGD"序列。Annexin A4在草鱼肝、肾、脾、心、鳃、肠中的表达量均较高,而肌肉和脑中不表达;PolyⅠ:C诱导后,其表达均有所下调。系统发育树显示,草鱼Annexin A4与斑马鱼(Danio rerio)的进化距离最近。适应性进化分析没有检测到正选择位点,表明Annexin A4非常保守,受到强烈的功能约束。

膜联蛋白Ⅰ在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的探讨膜联蛋白Ⅰ(AnnexinⅠ)在非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及临床意义。方法应用免疫组化法检测79例非小细胞肺癌中AnnexinⅠ蛋白表达水平。结果在79例非小细胞肺癌组织中,有40例为AnnexinⅠ高表达(50.6%),鳞癌为包膜表达,腺癌为包膜表达或包膜与胞浆均有表达,但以包膜表达为主。AnnexinⅠ表达水平与非小细胞肺癌患者的淋巴结受侵相关(P=0.022,P<0.05),而与性别、年龄、病理类型、分期均无明显相关性(P>0.05)。AnnexinⅠ阳性表达患者和阴性表达患者的疾病进展时间(time to progression,TTP)差异有统计学意义(P<0.05)。结论AnnexinⅠ在肺鳞癌,肺腺癌中的表达均上调,可能与肺癌的发生、发展及转移相关,有望成为肺癌早期诊治的理论依据。

annexinⅠ基因在胰腺癌中的表达及其对胰腺癌细胞生物学行为的影响

目的探讨annexinⅠ基因在胰腺癌发生过程中的作用。方法通过免疫组化方法确认annexinⅠ基因在胰腺癌组织中的高表达,合成annexinⅠ基因的小分子RNA干扰片断(siRNA)及无关序列,并构建RNA干扰片断的重组真核表达载体,将重组真核载体稳定转染胰腺癌细胞。通过RNA干扰(RNAi)的方法,敲低annexinⅠ基因在mRNA水平的表达。通过逆转录聚合酶链反应(RT- PCR)、免疫细胞化学、流式细胞技术和二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)法,证实annexinⅠ基因的表达被敲低后,对胰腺癌细胞的生长速度、细胞形态、细胞周期、凋亡情况进行观察和检测。结果敲低annexinⅠ基因的表达后,胰腺癌细胞形态发生了显著的变化,呈多形性、空泡样变性以及脂滴形成等,G1期明显延长,出现了明显的凋亡,凋亡率分别为29.8%和18.8%,胰腺癌细胞的恶性表型被抑制。结论annexinⅠ基因在胰腺癌的发生过程中起到了调控肿瘤细胞周期、促进肿瘤细胞生长增殖和抑制凋亡的重要作用。

地塞米松诱发小鼠腭裂时AnnexinⅠ、cPLA_2和PCNA表达的研究

目的 检测膜联蛋白 (AnnexinⅠ )、胞质磷脂酶A2 (cytosolicphospholipaseA2 ,cPLA2 )、增殖细胞核抗原 (proliferatingcellmuclearantigen ,PCNA)在地塞米松诱导小鼠腭裂腭胚突中的表达变化情况。探讨腭裂的发生机制和预防方法。方法 A/J和C5 7BL/ 6 j受孕小鼠随机分为正常对照组、地塞米松致畸组 (DEX组 )、VitB12 致畸拮抗组 (DE +Vit组 )和VitB12 组。应用蛋白质免疫印迹的方法检测AnnexinⅠ、cPLA2 和PCNA的相对含量。结果 A/J小鼠中 ,在正常对照组中 ,随着腭胚突的发育 ,AnnexinⅠ表达逐渐升高 ,其余各实验组也呈相似变化。在DEX组和DEX +VitB12 组中 ,AnnexinⅠ的表达明显较对照组和VitB12 组高 ,对照组与VitB12 组间差异无显著性。而cPLA2 则和PCNA呈相反表达趋势 ,在正常小鼠腭胚突中表达随小鼠发育逐渐下降。在C5 7BL/ 6 j小鼠中 ,正常对照组与DEX组间在AnnexinⅠ和cPLA2 测量差异无显著性。结论 AnnexinⅠ和cPLA2 介导了糖皮质激素诱发腭裂的过程。VitB12 未能阻遇DEX上调AnnexinⅠ的表达 ,但可以对抗DEX抑制cPLA2 的作用 ,这可能是VitB12

annexinⅠ对胰腺癌细胞生物学行为影响的体内研究

目的探讨annexinⅠ在胰腺癌发生过程中的作用。方法应用RNA干扰技术，敲低annexinⅠ基因在mRNA水平的表达，并经Western blot检测证实。分别接种人胰腺癌Suit-Ⅱ细胞及转染annexinⅠ—siRNA2、annexinⅠ—siRNA3、annexinⅠ—siRNAN的Suit-Ⅱ细胞，建立裸鼠胰腺癌移植瘤模型，观察胰腺癌细胞的成瘤能力、肿瘤生长速度的变化，测定肿瘤体积和瘤重。结果（1）Western blot检测结果显示，转染pSilencer—annexinⅠ—siRNA1的Suit-Ⅱ细胞annexinⅠ表达显著降低，转染pSilencer—annexinⅠ—siRNA2和pSilencer—annexinⅠ—siRNA3的Suit—Ⅱ细胞annexinⅠ的表达几乎被完全抑制。（2）接种转染annexinⅠ—siRNA2、annexinⅠ-siRNA3细胞组的肿瘤生长速度较接种亲本Suit-Ⅱ细胞组明显减慢，肿瘤生长被抑制，抑制率分别达76．6％和68．4％。接种肿瘤细胞后44d，接种转染annexinⅠ-siRNA2细胞组、接种转染annexinⅠ-siRNA3细胞组的瘤重分别为0．8987和0．8992g，显著低于接种亲本Suit-Ⅱ细胞组和接种转染annexinⅠ—siRNAN细胞组（分别为2．5866和2．4070g，P〈0．001）。结论annexinⅠ基因在胰腺癌发生过程中起到了促进胰腺癌细胞生长增殖、增强胰腺癌细胞成瘤能力的重要作用，可作为基因治疗的潜在靶点。

AnnexinⅠ蛋白在胰腺癌中的表达及其临床意义

目的探讨AnnexinⅠ蛋白在胰腺癌组织中的表达其临床意义。方法采用免疫组织化学及免疫印迹方法检测40例胰腺癌组织及其相应的癌旁组织、20例正常胰腺组织中AnnexinⅠ蛋白的表达,并分析胰腺癌组织中AnnexinⅠ蛋白的表达与临床病理特征尤其是病理分级、临床分期及转移的关系。结果胰腺癌AnnexinⅠ蛋白阳性表达率为72.5%,癌旁组织为37.5%,正常胰腺组织为20%,三者呈递减趋势,各组之间差异有统计学意义(P<0.05)。胰腺癌AnnexinⅠ蛋白的表达与肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关。Western blot检测结果与免疫检测方法结果一致。结论 AnnexinⅠ在胰腺癌组织中高表达,且其表达与肿瘤分级有关,提示AnnexinⅠ可能通过免疫机制参与胰腺癌的发生、发展过程。

膜联蛋白-1在膀胱移行细胞癌发生发展中的表达

目的:探讨AnnexinⅠ在膀胱移行细胞癌、不典型增生及正常膀胱移行上皮组织中的表达,为膀胱移行细胞癌的早期诊断、治疗提供实验和理论依据。方法:应用免疫组化SABC法检测67例膀胱移行细胞癌、22例不典型增生和10例正常膀胱移行上皮组织中AnnexinⅠ的表达。结果:膀胱移行细胞癌、不典型增生和正常膀胱移行上皮组织中AnnexinⅠ的表达率分别为29.85%、31.82%及100%。结论:AnnexinⅠ在正常膀胱移行上皮组织中呈强阳性表达,而在不典型增生及膀胱移行细胞癌中表达明显下降或丢失,提示与移行上皮癌变有关,有望作为膀胱移行细胞癌早期诊断的指标。

成束蛋白和膜联蛋白I在食管鳞状细胞癌癌前病变中的表达

背景与目的:研究食管鳞状细胞癌癌变早期异常改变的蛋白质以发现与食管癌早期病变相关的特征性标志分子。探讨了成束蛋白和膜联蛋白I在食管癌癌前病变中的表达情况。方法:应用免疫组化方法分析食管癌高发现场癌前病变样本中成束蛋白和膜联蛋白I的表达水平,用χ2检验对比成束蛋白和膜联蛋白I在不同程度癌前病变和食管癌中的表达差异。其中包括,食管鳞状细胞癌癌前病变54例、正常食管上皮8例和中晚期食管癌9例成束蛋白的表达水平;以及食管鳞状细胞癌前病变52例、正常食管上皮11例和中晚期食管癌7例的膜联蛋白I表达水平。结果:与正常食管鳞状上皮相比,成束蛋白在食管癌及其癌前病变中表达增强,其表达阳性率为低度癌前病变(轻度和中度不典型增生)85.7%(24/28)、高度癌前病变(重度不典型增生和原位癌)84.6%(22/26)和中晚期食管癌88.9%(8/9)。然而,膜联蛋白I在食管癌及其癌前病变中表达降低或丢失,其表达阳性率分别为低度癌前病变14.3%(4/28)、高度癌前病变8.3%(2/24)和中晚期食管癌0%(0/7)。与正常食管上皮相比,成束蛋白和膜联蛋白I在食管低度癌前病变中表达程度的异常均具有显著意义,P值分别为0.003和0.000。结论:成束蛋白异常增强和膜联蛋白I的丢失与食管癌癌前病变相关。

膜联蛋白Ⅰ在多种癌组织中的表达

目的检测分析多种癌组织中膜联蛋白(annexin)Ⅰ的表达情况,探讨其表达变化规律与不同器官的相同和不同组织学类型癌的发生发展的相关性。方法构建的628例癌组织芯片中,食管鳞癌208例,其他14种器官的相同或不同组织学类型癌组织420例。以相应正常组织作对照。用免疫组化方法检测annexinⅠ的表达情况。结果annexinⅠ在多器官(食管、肺、喉、宫颈)的鳞癌表达下降,分化差者表达更低;在多种腺癌(胃和结直肠腺癌、胰腺导管腺癌、甲状腺乳头状癌和肾透明细胞癌)中表达上调,分化差者表达更高。结论annexinⅠ在多种癌组织中的表达有明显差异,并与组织学类型和分化程度明显相关。annexinⅠ在多种癌的发生中可能有重要作用。

钙磷脂结合蛋白Ⅰ及其相关基因蛋白在子宫内膜增殖症、不典型增生和子宫内膜腺癌中的表达和意义

目的 研究钙磷脂结合蛋白Ⅰ (Annexin Ⅰ ,AX Ⅰ )在子宫内膜病变中的表达及在交界病变鉴别诊断中的意义。方法 收集 3 7份子宫内膜不同病变标本 ,经HE染色 ,在光镜下按国内及国际妇产科联合会 (FIGO)标准分类 ,AX Ⅰ、雌激素受体、孕激素受体、表皮生长因子受体、胰岛素样生长因子 Ⅰ受体与c erbB 2的免疫组织化学染色采用LSAB法。结果 腺囊性子宫内膜增殖症 12例、子宫内膜不典型增生 (ATH) 10例、子宫内膜癌 (EC) 15例。免疫组织化学AX Ⅰ在腺囊性增殖症中 ,除 1例弱阳性外 ,均为阴性 ;在不典型增生组 9例为强阳性 ,1例弱阳性 ;内膜癌则 7例弱阳性 ,8例阴性 ;内膜鳞化或鳞癌区呈强阳性。c erbB 2蛋白在不典型增生组 9例为阳性 ,1例阴性。表皮生长因子受体 (EGFR)均呈强阳性 ,胰岛素样生长因子受体 Ⅰ受体的表达弱且无规律。p5 3表达在EC组较ATH组略强。结论 AX Ⅰ基因蛋白可能在肿瘤的发病初期起作用 ,癌变后其表达下降 ,甚至消失 ;AX Ⅰ强阳性对ATH与EC鉴别具有一定价值。另外 ,c erbB 2与AX Ⅰ的表达似乎存在一种平行的关系。