Annexin Ⅱ在肺鳞癌、腺癌中的表达及意义

背景与目的AnnexinⅡ是一类钙依赖性磷脂结合蛋白,在许多的细胞功能中发挥作用,已有研究显示annexinⅡ参与肿瘤的发生发展。本研究通过检测膜联蛋白Ⅱ(annexinⅡ)在肺癌组织中的表达情况,分析annexinⅡ与各临床病理因素间的关系。方法应用免疫组组织化学(SP法)检测110例肺鳞癌和肺腺癌组织中annexinⅡ的表达;应用WesternBlot方法检测40例肺鳞癌和肺腺癌组织及相应癌旁正常肺组织中annexinⅡ蛋白的表达。结果在110例肺癌组织中,有67例为annexinⅡ高表达(60.9%),鳞癌为胞膜表达,腺癌为胞膜表达或胞膜与胞浆均有表达,但以胞膜表达为主。AnnexinⅡ的表达情况与肺癌患者的淋巴结转移(P=0.008)及TNM分期(P=0.002)相关。AnnexinⅡ蛋白在肺鳞癌、腺癌和癌旁组织中均有表达,在癌组织中的表达明显高于癌旁正常肺组织(P<0.001)。结论AnnexinⅡ蛋白的表达与肺鳞癌及腺癌的发展密切相关。

特异性小干扰RNA沉默Annexin Ⅱ基因表达对人乳腺癌细胞MDA-MB-231侵袭迁移力的影响

目的:探讨RNA干扰技术沉默Annexin Ⅱ基因表达对人乳腺癌细胞MDA-MB-231侵袭迁移力的影响。方法:体外化学合成Annexin Ⅱ基因序列特异性双链小干扰RNA(Annexin Ⅱ-siRNA),转染高转移人乳腺癌细胞株MDA-MB-231,用荧光显微镜观察转染效率,逆转录-聚合酶链反应和蛋白印迹检测Annexin Ⅱ mRNA和蛋白表达水平;通过生长曲线和体外侵袭迁移实验,观察乳腺癌细胞恶性生物学行为的改变。结果:Annexin Ⅱ-siRNA能有效抑制Annexin Ⅱ mRNA和蛋白表达(P<0.05);经siRNA处理的细胞,细胞生长速度明显降低(P<0.05),侵袭迁移力显著下降(P<0.05)。结论:沉默Annexin Ⅱ基因表达可抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的侵袭迁移力。

MMP-9和Annexin Ⅱ蛋白在乳腺癌组织中的表达及意义

目的:探讨乳腺癌浸润性导管癌组织中MMP-9及AnnexinⅡ蛋白的表达及其意义。方法:应用免疫组织化学SP法检测60例乳腺纤维腺瘤组织及60例乳腺浸润性导管癌组织中MMP-9和AnnexinⅡ蛋白的表达,并分析二者与乳腺癌临床病理特征的关系。结果:MMP-9和AnnexinⅡ蛋白在浸润性导管癌中的表达率分别是86.67%(52/60)及90.00%(54/60),明显高于在乳腺纤维腺瘤组织中的表达率,且差异均有统计学意义(P<0.001);在伴有淋巴结转移的浸润性导管癌组织中MMP-9和AnnexinⅡ蛋白的表达率明显高于无淋巴结转移组,差异均有统计学意义(P=0.003;P=0.023),组织学分级越低二者蛋白的表达越高(P=0.003;P=0.023)。结论:人乳腺浸润性导管癌组织中MMP-9和AnnexinⅡ蛋白的异常表达与肿瘤的浸润转移密切相关。

Annexin Ⅱ、钙卫蛋白在胃癌中的表达及临床意义

目的研究AnnexinⅡ、钙卫蛋白在胃癌中的表达及意义。方法用SP法检测正常胃组织、胃溃疡组织、胃癌组织中AnnexinⅡ,钙卫蛋白表达情况,以及与性别、年龄、肿瘤浸润深度和淋巴结转移的关系。数据分析采用SPSS13.0统计软件包处理。结果 AnnexinⅡ在胃癌组织中阳性表达率明显高于胃溃疡组和正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。钙卫蛋白在胃癌组织中的阳性表达率明显高于正常胃组织的阳性表达率(P<0.05),胃癌组织和胃溃疡组织之间的阳性表达率无统计学意义(P>0.05)。AnnexinⅡ和钙卫蛋白与胃癌的浸润深度、淋巴结转移情况有显著性差异,差异有统计学意义(P<0.05),而与患者的年龄及性别无明显差异(P>0.05)。结论AnnexinⅡ和钙卫蛋白可能参与了胃癌的形成,并且在胃癌形成后的肿瘤生长、浸润、转移过程中起促进作用。

Annexin Ⅱ蛋白在胃癌组织中的表达及临床意义

目的探讨膜联蛋白Ⅱ(AnnexinⅡ)在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学S-P法检测52例胃癌组织及癌旁正常胃组织中AnnexinⅡ蛋白的表达,分析在不同临床病理指标下AnnexinⅡ蛋白的表达情况。结果胃癌组织中AnnexinⅡ蛋白的阳性表达率高于胃正常组织,两者有显著性差异;癌组织中AnnexinⅡ蛋白表达率与患者性别、组织病理分化程度及浸润深度无关,但却与临床分期及淋巴结转移与否有关。结论胃癌组织中AnnexinⅡ蛋白过度表达,可能在胃癌发生发展及侵袭转移中起重要作用。

Annexin Ⅱ在人胃腺癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨AnnexinⅡ在人胃腺癌及其癌旁组织中的表达及临床意义。方法:采用以Tagman探针为基础的实时定量PCR方法检测36例胃腺癌及其配对癌旁组中AnnexinⅡmRNA的表达。结果:实时定量PCR检测结果显示胃腺癌组织中AnnexinⅡmRNA表达量较癌旁组织明显增加,且差异具有统计学意义(P=0.008)。胃腺癌组织中AnnexinⅡmRNA上调表达与病理分化程度相关,低分化癌组织表达量较中分化癌组织明显增加,且差异具有统计学意义(P=0.028),但与患者的性别、年龄、淋巴结转移与否、TNM分期、远处转移与否无关(P均大于0.05)。结论:AnnexinⅡmRNA在人胃腺癌组织过表达,且其表达量随腺癌的病理分化程度降低而增加,表明AnnexinⅡ可能与胃腺癌的生物学行为相关。

膜联蛋白Ⅱ(Annexin Ⅱ)在白血病细胞中表达的研究

目的观察膜联蛋白Ⅱ(Annexin Ⅱ)在不同类型白血病细胞中的表达。方法研究组白血病40例,对照组20例。流式细胞仪检测白血病细胞表面膜联蛋白Ⅱ(Annexin Ⅱ)的表达。采用半定量逆转录聚合酶链反应(semi-quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)方法测定白血病患者骨髓单个核细胞中Annexin ⅡmRNA的含量。结果与对照组相比,白血病患者骨髓中白血病细胞表面Annexin Ⅱ的表达显著升高(P<0.05)。白血病患者骨髓中单个核细胞Annexin ⅡmRNA的表达与对照组相比显著升高(P均<0.05)。初发白血病中AML组细胞表面Annexin Ⅱ的表达及骨髓中单个核细胞Annexin ⅡmRNA的含量高于CML、CLL、ALL组(P均<0.05)。结论白血病细胞中Annexin Ⅱ表达增高;不同类型白血病表达水平不同,急性白血病,尤其是AML表达更加明显。

Annexin Ⅱ在人胃腺癌组织中的表达及临床意义

目的探讨AnnexinⅡ在人胃腺癌及其癌旁组织中的表达及临床意义。方法采用以Tagman探讨为基础的实时定量PCR方法检测36例胃腺癌及其配对癌旁组中AnnexinⅡmRNA的表达。结果实时定量PCR检测结果显示胃腺癌组织中AnnexinⅡmRNA表达量较癌旁组织明显增加，且差异具有统计学意义（p=0．008）。胃腺癌组织中AnnexinⅡmRNA上调表达与病理分化程度相关，低分化胃癌组织表达量较中分化癌组织明显增加，且差异具有统计学意义（P=0．028），但与患者的性别、年龄、淋巴结转移、TNM分期、远处转移无关（p均〉0．05）。结论AnnexinⅡmRNA在人胃腺癌组织过度表达，且其表达量随腺癌的病理分化程度降低而增加，表明AnnexinⅡ可能与胃腺癌的生物学行为密切相关。

The receptor for β2GPⅠon membrane of hepatocellular carcinoma cell line SMMC-7721 is annexin Ⅱ

AIM: To evaluate the receptor protein which can specifically bind to β2GPⅠon the membrane of hepatocellular carcinoma (HCC) cell line SMMC-7721, and to study the biological function of the receptor.METHODS: Through β2GPⅠ-affinity chromatography column, the peptid-polysome-mRNA complex, which can specially bind to β2GPⅠ, stayed with the column and was separated from the whole polysome of liver cells, and then eluted and collected. Using cDNA synthesis kit and cDNA PCR kit, the corresponding cDNA was obtained and sequenced. RT-PCR was used to amplify annexinⅡ, and flow cytometry was used to study the competitive binding of annexinⅡ with β2GPⅠto SMMC-7721.RESULTS: A total of 1.1 kb of the cDNA fragment of the specific binding protein of β2GPⅠon liver cell membrane was obtained. The sequence of cDNA shared high homology with human annexinⅡ (98%). AnnexinⅡ was expressed on the membrane of SMMC-7721, and could compete with β2GPⅠfor combining with SMMC-7721.CONCLUSION: The receptor for β2GPⅠon membrane of SMMC-7721 cells is annexinⅡ, which might bridge HBV to infect hepatocytes.

甲状腺乳头状癌组织CD_(147)、MMP-2、Annexin Ⅱ的检验价值

目的分析甲状腺乳头状癌组织CD147、MMP-2、AnnexinII的检验价值。方法选择67例甲状腺乳头状癌组织,甲状腺良性疾病组织60例为实验对象,对所有患者均检查CD147、MMP-2、AnnexinⅡ,使用统计学比较两组检查结果。结果甲状腺乳头状癌患者的CD147阳性率更高,MMP-2蛋白阳性率较高,AnnexinⅡ的阳性率更高,与甲状腺良性疾病患者比较差异明显,P<0.05,差异有统计学意义。结论甲状腺乳头状癌组织CD147、MMP-2、AnnexinⅡ的阳性率高,提示可能参与到了甲状腺乳头状癌的发生中。

河南食管癌高发区食管癌及癌旁组织AnnexinⅡ表达失调变化

背景与目的:作者对河南食管癌高发区正常人和食管癌患者蛋白质组差异蛋白分析发现AnnexinⅡ是主要差异候选蛋白之一。本研究通过分析该地区食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)及癌旁形态学正常食管上皮(normal epithelium,NOR)、基底细胞过度增生(basal cell hyperplasia,BCH)、不典型增生(dysplasia,DYS)和原位癌(carcinoma in situ,CIS)中AnnexinⅡ动态表达状况,探讨AnnexinⅡ在ESCC癌变过程中的作用及机制。方法:采用ABC免疫组织化学法分析了河南食管癌高发区33例ESCC手术标本和癌旁NOR,以及BCH、DYS和CIS中AnnexinⅡ蛋白表达变化;另应用RT-PCR方法检测了ESCC手术标本和癌旁NOR中AnnexinⅡ mRNA差异表达情况。结果:在90.6%的NOR中有AnnexinⅡ蛋白表达,免疫染色评分≥4,随着病变加重其表达下降,CIS时AnnexinⅡ蛋白完全失表达的比例达到了50.0%。高分化SCC时AnnexinⅡ蛋白表达又升高,而后随着SCC失分化表达逐渐降低,低分化SCC中45.4%病灶AnnexinⅡ失表达。但RT-PCR并没有检测到NOR和SCC中AnnexinⅡ mRNA的差异表达。结论:AnnexinⅡ表达增强或降低可能与癌前病变逆转或进展相关,并有可能成为高危人群筛查及食管癌早期诊断的分子指标。

肾透明细胞癌中AnnexinⅡ的表达及其临床意义

目的:探讨AnnexinⅡ在人肾透明细胞癌和癌旁组织样本中的表达情况及其临床意义。方法:采用Western blot方法检测29例新鲜肾透明细胞癌及相应癌旁组织中AnnexinⅡ蛋白的表达;采用免疫组织化学方法检测120例肾透明细胞癌及相应癌旁组织中AnnexinⅡ的表达情况,并将结果与患者的临床病理参数及预后进行相关性分析。结果:AnnexinⅡ在肾透明细胞癌及相应癌旁组织中均有表达,前者的表达水平较后者显著升高(P<0.01);免疫组织化学显示肾透明细胞癌组织中,AnnexinⅡ的阳性表达率高达67.5%,与癌旁组织存在明显差异(P<0.01);AnnexinⅡ在肾透明细胞癌组织中以胞膜表达为主,其表达状况与肾透明细胞癌患者的临床分期(P<0.05),组织学分级(P<0.05),肾被膜受侵(P<0.01)和远地转移(P<0.01)紧密相关;并且AnnexinⅡ的表达状况与肾透明细胞癌患者的5年生存率显著相关。结论:AnnexinⅡ在肾透明细胞癌组织中过表达,其与肾癌的发展密切相关,在肾癌的侵袭及转移过程中可能发挥重要作用。

AnnexinⅡ、Caspase-3蛋白在卵巢癌组织中的表达及意义

目的进一步探讨卵巢癌的发生机制。方法选择同期手术切除的组织标本,卵巢癌52份(观察组)、卵巢良性上皮性肿瘤18份(对照组),采用免疫组化SP法检测其AnnexinⅡ、凋亡蛋白酶(Caspase)-3蛋白表达情况,采用Spearman相关分析法分析两指标间及其与卵巢癌临床病理特征的关系。结果观察组与对照组AnnexinⅡ蛋白阳性表达率分别为80.77%(42/52)、44.45%(8/18),Caspase-3蛋白阳性表达率分别为48.08%(25/52)、94.44%(17/18),两两比较P均<0.05;AnnexinⅡ蛋白表达与卵巢癌组织学类型、组织学分级无关,与临床分期和淋巴结转移有关(P<0.05),Caspase-3蛋白表达与卵巢癌组织类型、病理学分级、淋巴结转移无关,与卵巢癌临床分期有显著相关性(P<0.05);AnnexinⅡ和Caspase-3蛋白在卵巢癌组织中的表达呈负相关(r=-0.409,P<0.05)。结论AnnexinⅡ、Caspase-3蛋白异常表达在卵巢癌发生、发展中起重要作用,且两者存在协同性。

乳腺浸润性导管癌组织中CD147、MMP-9和AnnexinⅡ蛋白的表达

目的:检测乳腺浸润性导管癌组织中CD147、MMP-9及AnnexinⅡ蛋白的表达。方法:应用免疫组织化学SP法检测60例乳腺浸润性导管癌组织及60例乳腺纤维腺瘤组织中CD147、MMP-9和AnnexinⅡ蛋白的表达,并分析3者与乳腺浸润性导管癌临床病理特征的关系。结果:乳腺浸润性导管癌组织中CD147、MMP-9和AnnexinⅡ蛋白的阳性表达率分别是91.7%、86.7%及90.0%,明显高于各自在乳腺纤维腺瘤组织中的表达率(6.7%、6.7%及3.3%,P<0.001);伴有淋巴结转移的浸润性导管癌组织中CD147、MMP-9和AnnexinⅡ蛋白的表达率明显高于无淋巴结转移组(P<0.05);组织学分级越高,以上3种蛋白的表达率越高(P<0.05)。结论:CD147、MMP-9和AnnexinⅡ蛋白的异常高表达可能促进了乳腺浸润性导管癌的发展。

反义annexinⅡ对人肺腺癌细胞系SPC-A-1裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的 分析annexinⅡ基因反义表达载体对裸鼠移植瘤生长的影响。方法 在裸鼠皮下分别接种SPC A 1(亲代组 )和SPC A 1 annexinⅡ(反义组 )细胞 ,测定成瘤时间、肿瘤体积及重量 ,显微镜下观察肿瘤细胞及其对周围组织的影响。结果 成瘤时间反义组明显晚于亲代组。反义组接种后形成的肿瘤体积、重量均显著低于亲代组 ,且无一例出现局部侵犯 ,而亲代组则有 2例侵犯周围组织。结论 annexinⅡ基因在促进肿瘤细胞生长及对周围组织的侵袭方面具有重要作用。

AnnexinⅡ基因反义表达载体对肺癌细胞生长的影响

目的 研究annexinⅡ基因反义表达载体 (annexinⅡ pLXSN)对人肺腺癌细胞株SPC A 1生长的影响。方法 ①提取SPC A 1细胞总RNA ,应用RT PCR法扩增目的片断 ,通过双酶切定向克隆的方法构建annexinⅡ基因反义表达载体。②应用脂质体将annexinⅡ pLXSN导入SPC A 1细胞 (SPC A 1 annexinⅡ )。半定量RT PCR法分析转染细胞中annexinⅡmRNA的表达。③观察反义RNA对SPC A 1细胞生物学行为的影响。结果 ①反义表达载体成功导入SPC A 1细胞 ;半定量RT PCR证实SPC A 1 annexinⅡ细胞中annexinⅡmRNA表达量较亲代细胞下降约 2 /3。②对转染前后的细胞观察表明 ,SPC A 1 annexinⅡ细胞生长减慢 ,克隆形成率降低 ,3 H TdR掺入率下降 ,细胞增殖被阻滞于G0 ～G1 期。结论 annexinⅡ具有促进肺癌细胞增殖的作用 。

韧带样型纤维瘤病中AnnexinⅡ、TGF-β_1和TGF-βRI的表达

目的探讨AnnexinⅡ、TGF-β1和TGF-βRI在韧带样型纤维瘤病(desmoid-type fibromatosis,DTF)组织中的表达及意义。方法采用免疫组化PV-9000两步法检测34例DTF和周围正常组织中AnnexinⅡ、TGF-β1和TGF-βRI的表达及分布。结果(1)AnnexinⅡ在DTF中的阳性率为85.3%(29/34),明显高于周围正常组织(P<0.05),阳性表达在浸润区尤为突出。An-nexinⅡ在DTF中的平均阳性细胞率明显高于周围组织(P<0.05);在浸润区平均阳性细胞率明显高于非浸润区(P<0.05)。(2)DTF肿瘤组织中TGF-β1和TGF-βRI的阳性率分别为79.4%(27/34)和82.4%(28/34),明显高于周围正常组织(P<0.05);TGF-β1与TGF-βRI表达呈正相关(P<0.05)。结论 (1)AnnexinⅡ可能参与DTF的发病及浸润性生长。DTF中An-nexinⅡ呈弥漫强阳性,为进一步尝试应用血管抑素靶向治疗DTF提供实验依据。(2)DTF肿瘤中可能存在TGF-β1自分泌环。

AnnexinⅡ在4株人乳腺癌细胞中的表达及意义

目的:研究人乳腺癌细胞中AnnexinⅡ基因的表达情况,阐明AnnexinⅡ基因与乳腺癌细胞侵袭力的关系.方法:采用SYBR实时荧光定量PCR,Western Blot技术分别检测MDA-MB-435S,MDA-MB-231,ZR-75-30和MCF-7共4株人乳腺癌细胞AnnexinⅡ mRNA和蛋白的表达情况;免疫细胞化学检测AnnexinⅡ蛋白在4株人乳腺癌细胞中的定位;Millicell小室测定4株人乳腺癌细胞体外侵袭能力.结果:MDA-MB-435S,MDA-MB-231,ZR-75-30和MCF-7的AnnexinⅡ mRNA表达量分别为0.67±0.21,0.38±0.03,0.05±0.03,(4.06±0.81)×10-5,任两组细胞间AnnexinⅡ mRNA的表达量差异均有统计学意义(P<0.05);MDA-MB-435S,MDA-MB-231,ZR-75-30和MCF-7的AnnexinⅡ蛋白表达量:WesternBlot结果分别为1.47±0.06,1.10±0.05,0.70±0.03,0.09±0.01;免疫细胞化学结果分别为3423±312,2767±147,2001±245,353±128;任两组细胞间AnnexinⅡ蛋白表达量差异均有统计学意义(P<0.05);MDA-MB-435S,MDA-MB-231,ZR-75-30和MCF-7的体外侵袭力分别为135.3±7.6,147.2±8.9,79.4±2.9,15.3±4.4,除MDA-MB-435S细胞与MDA-MB-231细胞无显著差异外,其余两组细胞侵袭力有显著性差异(P<0.05).结论:在所检测的4株人乳腺癌细胞中,AnnexinⅡ表达量与细胞体外侵袭力呈正相关.

亚砷酸和柔红霉素对NB4细胞Annexin Ⅱ表达及纤溶活性的影响

目的 观察亚砷酸（ATO）和柔红霉素（DNR）对急性早幼粒细胞白血病细胞系NB4细胞膜联蛋白（Annexin,Ann）Ⅱ的表达及其促纤溶活性的影响.方法 用ATO和DNR分别处理NB4细胞24～72 h,用流式细胞术和实时定量PCR方法检测细胞表面Ann Ⅱ的表达及其mRNA的水平;用发色底物法测定其促纤溶活性.结果 与其他白血病细胞系相比,NB4细胞高表达AnnⅡ,NB4、HL-60、K562和A3细胞Ann Ⅱ阳性细胞率分别为（94.5±1.6）%、（40.1±2.1）%、（36.3±1.5）%和（11.8±2.5）%,其促纤溶活性也最强,代表纤溶活性的吸光度（A）值为0.68±0.02.与ATO、DNR及抗Ann Ⅱ单抗作用后NB4细胞促纤溶活性明显下降,分别下降至原来的60.4%、35.8%和26.0%.经ATO和DNR处理48 h均能下调NB4细胞AnnⅡ[Ann Ⅱ阳性细胞率分别为（55.46±4.72）%和（27.00±6.18）%]及其mRNA的表达.结论 ATO和DNR可通过下调NB4细胞Ann Ⅱ蛋白及其mRNA的表达,纠正NB4细胞的高纤溶状态.

AnnexinⅡ在已分化人表皮角质形成细胞中表达的研究

目的探讨annexinⅡ在已分化人表皮角质形成细胞(keratinocyte,KC)中的表达。方法采用免疫组织化学(immunoh istochem istry,IHC)技术检测早、中、晚期人胚胎表皮KC及成人表皮KC中annexinⅡ蛋白的表达。结果①annexinⅡ在人胚胎期表皮KC中的表达随胚胎的发育逐渐增强,在成人期表皮KC中的表达明显高于胚胎期。②annexinⅡ呈胞膜方式表达,主要分布于基底上层的分化KC中。结论annexinⅡ可能参与表皮KC分化的调控。