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枯草芽孢杆菌ANSB01G对采食玉米赤霉烯酮污染日粮仔猪中毒症状的缓解效果 被引量:1
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作者 雷元培 王利通 +3 位作者 王国水 路则庆 计成 汪以真 《饲料工业》 CAS 北大核心 2021年第12期22-27,共6页
试验研究了枯草芽孢杆菌ANSB01G对采食玉米赤霉烯酮(ZEA)污染日粮仔猪中毒症状的缓解效果。试验选取体重均匀的杜×长×大三元杂交断奶母仔猪40头,分为3个试验组和1个对照组,每组10个重复,每个重复1头猪。对照组饲喂正常玉米型... 试验研究了枯草芽孢杆菌ANSB01G对采食玉米赤霉烯酮(ZEA)污染日粮仔猪中毒症状的缓解效果。试验选取体重均匀的杜×长×大三元杂交断奶母仔猪40头,分为3个试验组和1个对照组,每组10个重复,每个重复1头猪。对照组饲喂正常玉米型日粮,试验组1饲喂正常玉米型日粮+枯草芽孢杆菌ANSB01G 1 kg/t(活菌数为1×10^(9)CFU/g),试验组2饲喂玉米赤霉烯酮污染型日粮(ZEA含量为350μg/kg),试验组3在试验组2的基础上添加1 kg/t的枯草芽孢杆菌ANSB01G。试验时间为28 d,试验结果表明,对照组和各试验组之间平均日增重、平均日采食量及料重比之间均无显著差异(P>0.05);随着饲喂天数增加,试验组2仔猪阴户面积明显高于对照组和试验组1,试验组3在试验组2基础上添加枯草芽孢杆菌ANSB01G后仔猪阴户面积明显小于试验组2,使仔猪外阴肿大得到显著改善;对照组与各试验组间心脏指数、脾脏指数、肝脏指数、肾脏指数均无显著差异,试验组2繁殖器官指数显著高于对照组,试验组3在试验组2基础上添加枯草芽孢杆菌ANSB01G后,繁殖器官指数明显小于试验组2,与对照组无显著差异,使仔猪繁殖器官得到改善;与对照组相比,各试验组之间仔猪血清抗氧化指标MDA含量和SOD、GSH-Px活性及仔猪血清中LH、FSH、PT、Prog、E2水平均没有显著差异(P>0.05),试验组2中PRL水平显著高于对照组(P<0.05),试验组3在试验组2基础上添加枯草芽孢杆菌ANSB01G后,可以维持血清PRL水平达到正常对照水平。 展开更多
关键词 断奶母仔猪 玉米赤霉烯酮 枯草芽孢杆菌ansb01G 中毒症状 缓解效果
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Bacillus subtilis ANSB01G culture alleviates oxidative stress and cell apoptosis induced by dietary zearalenone in first-parity gestation sows 被引量:6
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作者 Jianchuan Zhou Xiang Ao +2 位作者 Yuanpei Lei Cheng Ji Qiugang Ma 《Animal Nutrition》 SCIE 2020年第3期372-378,共7页
This study was conducted to evaluate the alleviation of Bacillus subtilis ANSB01G culture as zearalenone(ZEA)biodegradation agent on oxidative stress,cell apoptosis and fecal ZEA residue in the first parity gestation ... This study was conducted to evaluate the alleviation of Bacillus subtilis ANSB01G culture as zearalenone(ZEA)biodegradation agent on oxidative stress,cell apoptosis and fecal ZEA residue in the first parity gestation sows during the gestation.A total of 80 first-parity gilts(Yorkshire×Landrace)were randomly allocated to 4 dietary treatments with 20 replications per treatment and one gilt per replicate.The dietary treatments were as follows:CO(positive control);MO(negative control,ZEA level at 246μg/kg diet);COA(CO+B.subtilis ANSB01G culture with 2×10^9 CFU/kg diet);MOA(MO+ZEA level at 260μg/kg diet+B.subtilis ANSB01G culture with 2×10^9 CFU/kg diet).The experiment lasted for the whole gestation period of sows.Results showed that feeding the diet naturally contaminated with low-dose ZEA caused an increase of cell apoptosis in organ and the residual ZEA in feces as well as a decrease of antioxidant function in serum.The addition of B.subtilis ANSB01G culture in the diets can effectively alleviate the status of oxidative stress and cell apoptosis induced by ZEA in diets of gestation sows,as well as decrease the content of residual ZEA in feces. 展开更多
关键词 ZEARALENONE Gestation sow Bacillus subtilis ansb01G culture Mycotoxin biodegradation agent Oxidative stress Cell apoptosis
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大肠杆菌天门冬酰胺酶Ⅱ的基因克隆与表达 被引量:14
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作者 李晶 刘景晶 +1 位作者 吴梧桐 胡梅清 《药物生物技术》 CAS CSCD 1995年第4期8-15,共8页
本文报道用一对与大肠杆菌编码L-天门冬酰胺酶Ⅱ(L-AsPsⅡ)的基因ansB两侧序列互补的寡核苷酸L1、L2作引物,以L-ASPsⅡ的野生型生产菌cPU210009染色体为模板,经PCR扩增得到长约1.6Kb的DN... 本文报道用一对与大肠杆菌编码L-天门冬酰胺酶Ⅱ(L-AsPsⅡ)的基因ansB两侧序列互补的寡核苷酸L1、L2作引物,以L-ASPsⅡ的野生型生产菌cPU210009染色体为模板,经PCR扩增得到长约1.6Kb的DNA片段。该片段通过以LP1、LP2为内引物的PCK反应,证明包含了ansB基因的编码序列。将此片段经xba1、HindⅡ消化,插入质粒PUC18、PUC19上构建重组质粒PUA18、PUA19,分别转化As1.1187,As1.1193,HB101,9637,JM107,71/18,CPU210009等宿主菌,筛选得到L-ASPsⅡ酶活力明显提高的8株阳性转化子。在1L生物反应器中,LB培养基37℃下培养24h,其酶活在6.2~31.81U。ml之间。其中CTA8表达L-ASPsⅡ水平最高,达到31.81U/ml.各基因工程菌株较之野生型生产菌体CPU210009,其生产L-ASPsⅡ水平提高了5~26倍。而且IPTG诱导对工程菌表达L-ASPsⅡ的水平几无影响。SDS-PAGE测得工程菌表达的L-ASPsⅡ分子量约为140Kd.薄层扫描结果显示:CTA7、CTB8、CTA9所产生的L-ASPs? 展开更多
关键词 大肠杆菌 ansb L-天门冬酰胺酶Ⅱ 基因克隆 基因表达
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一种新的融合表达载体的构建 被引量:3
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作者 陈正兰 刘景晶 +1 位作者 胡卓逸 丁敏 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期143-147,共5页
利用 L-ans B基因片段构建了融合表达载体 p EC,其中 L-ans B基因中编码唯一酸水解位点的序列已通过定点突变消除 ,并在它的 3′端引入了新的酸水解位点编码序列和方便外源基因插入的克隆位点 Bam H 和 Hind ,外源基因可从克隆位点 Bam... 利用 L-ans B基因片段构建了融合表达载体 p EC,其中 L-ans B基因中编码唯一酸水解位点的序列已通过定点突变消除 ,并在它的 3′端引入了新的酸水解位点编码序列和方便外源基因插入的克隆位点 Bam H 和 Hind ,外源基因可从克隆位点 Bam H 和 Hind 处插入 p EC中 ,表达的融合蛋白用酸水解法加工后仅被切割成一大一小两个片段 ,不会导致产物混杂。 h GRF对它进行验证的结果显示 h GRF基因不仅能按正确的读码框插入 ,而且表达的融合蛋白与预期大小一致 ,说明 p 展开更多
关键词 融合表达载体 L-ansb hGRF
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重组E.coli L-天冬酰胺酶的克隆及表达与纯化 被引量:2
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作者 陈浩然 王增鑫 +1 位作者 王雅君 谷劲松 《济南大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2015年第1期22-25,共4页
以大肠杆菌菌株(E.coli AS 1.357)基因组为模板,PCR扩增L-天门冬酰胺酶Ⅱ基因(ans B),构建p MD18-Tans B重组克隆载体和p ET-22b-ans B重组表达载体,转化大肠杆菌BL21宿主菌株,重组工程菌经IPTG诱导表达Ans B蛋白,利用重组His-tag,通过N... 以大肠杆菌菌株(E.coli AS 1.357)基因组为模板,PCR扩增L-天门冬酰胺酶Ⅱ基因(ans B),构建p MD18-Tans B重组克隆载体和p ET-22b-ans B重组表达载体,转化大肠杆菌BL21宿主菌株,重组工程菌经IPTG诱导表达Ans B蛋白,利用重组His-tag,通过Ni-NTA亲和层析纯化Ans B蛋白,利用SDS-PAGE定性分析Ans B蛋白,考马斯亮蓝法测定Ans B蛋白含量,获得纯化的质量浓度为62.7 mg/L的Ans B表达蛋白。重组L-天门冬酰胺酶的纯化收率为42.28%,酶活达137 IU/m L,较原始菌株的(6.87 IU/m L)提高近20倍,并排除大肠杆菌自身L-天门冬酰胺酶本底表达背景。 展开更多
关键词 L-天冬酰胺酶 ansb 克隆 纯化 亲和层析
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Zearalenone toxicosis on reproduction as estrogen receptor selective modulator and alleviation of zearalenone biodegradative agent in pregnant sows 被引量:2
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作者 Jianchuan Zhou Lihong Zhao +5 位作者 Shimeng Huang Qingxiu Liu Xiang Ao Yuanpei Lei Cheng Ji Qiugang Ma 《Journal of Animal Science and Biotechnology》 SCIE CAS CSCD 2022年第4期1222-1232,共11页
Background:Zearalenone(ZEA)is a resorcylic acid lactone derivative derived from various Fusarium species that are widely found in food and feeds.The molecular structure of ZEA resembles that of the mammalian hormone 1... Background:Zearalenone(ZEA)is a resorcylic acid lactone derivative derived from various Fusarium species that are widely found in food and feeds.The molecular structure of ZEA resembles that of the mammalian hormone 17β-oestradiol,thus zearalenone and its metabolites are known to compete with endogenous hormones for estrogen receptors binding sites and to activate transcription of oestrogen-responsive genes.However,the effect of long-term low-dose ZEA exposure on the reproductive response to Bacillus subtilis ANSB01G culture for first-parity gilts has not yet been investigated.This study was conducted to investigate the toxic effects of ZEA as an estrogen receptor selective modulator and the alleviating effects of Bacillus subtilis ANSB01G cultures as ZEA biodegraders in pregnant sows during their first parity.Results:A total of 80 first-parity gilts(Yorkshire×Landrace)were randomly assigned to four dietary treatments during gestation:CO(positive control);MO(negative control,246μg ZEA/kg diet);COA(CO+B.subtilis ANSB01G culture with 2×10^(9)CFU/kg diet);MOA(MO+B.subtilis ANSB01G culture with 2×10^(9)CFU/kg diet).There were 20 replications per treatment with one gilt per replicate.Feeding low-dose ZEA naturally contaminated diets disordered most of reproductive hormones secretion and affected estrogen receptor-αand estrogen receptor-βconcentrations in serum and specific organs and led to moderate histopathological changes of gilts,but did not cause significant detrimental effects on reproductive performance.The addition of Bacillus subtilis ANSB01G culture to the diet can effectively relieve the competence of ZEA to estrogen receptor and the disturbance of reproductive hormones secretion,and then ameliorate toxicosis of ZEA in gilts.Conclusions:Collectively,our study investigated the effects of feeding low-dose ZEA on reproduction in pregnant sows during their first parity.Feeding low-dose ZEA could modulate estrogen receptor-αand-βconcentrations in specific organs,cause disturbance of reproductive hormones and vulva swelling,and damage organ histopathology and up-regulate apoptosis in sow models.Diet with Bacillus subtilis ANSB01G alleviated negative effects of the ZEA on gilts to some extent. 展开更多
关键词 Bacillus subtilis ansb01G Estrogen receptor Mycotoxin biodegradation Pregnant sows Reproductive performance ZEA
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人生长激素释放因子基因的高效表达
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作者 陈正兰 刘景晶 +1 位作者 胡卓逸 丁敏 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期466-470,共5页
将人生长激素释放因子 ( h GRF)基因和编码 L-天门冬酰胺酶 ( L- ans B) C-末端 12 6个氨基酸残基的基因片断进行融合表达 ,融合蛋白在菌体总蛋白中的比率达到 30 %左右 ,比和 L- ans B全基因融合表达时高得多 ,表达条件优化后 ,比率可... 将人生长激素释放因子 ( h GRF)基因和编码 L-天门冬酰胺酶 ( L- ans B) C-末端 12 6个氨基酸残基的基因片断进行融合表达 ,融合蛋白在菌体总蛋白中的比率达到 30 %左右 ,比和 L- ans B全基因融合表达时高得多 ,表达条件优化后 ,比率可增加到 4 5%。融合蛋白以不溶性的包含体形式存在。包含体的尿素抽提液经乙醇分级沉淀后得到较纯的融合蛋白 ,60 mmol/ L的盐酸水解融合蛋白 ,通过 SDS- PAGE和电喷雾质谱分析 ,融合蛋白释放出一分子量为 52 35.59Da的物质 ,而 GRF的分子量是 52 35.4 8Da,也就是说融合蛋白酸水解释放出了 展开更多
关键词 生长激素 释放因子 天门冬酰胺酶 hGRF 融合表达
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