基于3,5-二溴水杨醛席夫碱镍配合物-氧化石墨烯电化学免疫传感器检测Anti-IgG含量的研究

应用物理吸附法将羊抗人IgG抗原直接固定于3,5-二溴水杨醛席夫碱镍配合物-氧化石墨烯修饰的金电极表面,制备电化学免疫传感器。采用循环伏安法和交流阻抗法对传感器进行表征,结果表明该传感器适合检测Anti-IgG浓度。同时探讨了缓冲液pH值、扫描速度、免疫反应温度、抗原与抗体配比对循环伏安峰电流的影响,结果表明在5-100mV/s扫速范围内,峰电流与扫速呈线性。孵育最优条件为25℃,h-IgG与Anti-IgG配比为1∶1。循环伏安法研究还表明Anti-IgG浓度在0.01-260μg/L范围内,线性关系良好,相关系数r^2=0.993,检出限（S/N=3）为0.006μg/L,据此建立了检测Anti-IgG浓度的新方法。

非竞争ELISA法测定抗DR5单克隆抗体功能性亲和常数

目的:测定抗DR5单克隆抗体功能性亲和常数。方法:采用非竞争性ELISA固相法,经确定最佳抗原包板浓度、最佳抗原包板时间及最佳抗原与抗体结合反应时间后,得到DR5与抗DR5的两株单克隆抗体的抗原抗体结合反应曲线,计算抗DR5两株单抗的亲和常数。结果:抗DR5(366EC)的功能性亲和常数在2.63×109M-1水平,抗DR5(mDRA-6)的功能性亲和常数在1.004×109。结论:抗DR5与DR5结合能力较强,为今后进行免疫学检测和开发进行肿瘤靶向治疗提供了理论基础。

抗死亡受体DR5抗体对大鼠佐剂型关节炎的作用机理探讨

目的研究抗-DR5 McAb对大鼠佐剂型关节炎(AA)的作用及其免疫机理。方法注射弗式完全佐剂建立AA大鼠模型,尾静脉注射抗-DR5 McAb,观察大鼠关节肿胀度、血清和滑膜液中炎症细胞因子IL-1β、TNF-α、IFN-γ水平的变化。RT-PCR检测各组织器官、滑膜和淋巴细胞中DR5 mRNA水平的表达,Western blot分析各组织器官中凋亡相关因子caspase-8、Bcl-2蛋白的表达。结果抗-DR5 McAb能缓解AA病情,使关节肿胀度降低;血液和滑膜组织细胞产生IL-1β、TNF-α、IFN-γ水平下降,抑制滑膜细胞和淋巴细胞的过度增殖。各组织器官中caspase-8蛋白水平上升,Bcl-2蛋白水平下调。结论抗-DR5 McAb能用于大鼠AA的治疗,其治疗机制与细胞表面DR5 mRNA的表达、细胞因子IL-1β、TNF-α、IFN-γ水平和caspase-8、Bcl-2蛋白表达相关。