Dynamic changes of renal cytosol glucocorticoid receptors in rats with passive Heymann nephritis

Renal and hepatic cytosol glucocorticoid receptors (GR) were measured by radio-Ligand binding assay at different stages in rats with passive Heymann nephritis(PHN) induced by the injection of antiserum against renal tubular antigen. The content of renal G

补肾活血汤对膜性肾病大鼠足细胞的保护作用

目的:利用被动型Heymann肾炎(passive Heymann nephritis,PHN)模型探讨补肾活血汤对血清IL-6、TNF-α的影响及对大鼠足细胞损伤的保护作用。方法:利用兔抗大鼠Fx1A抗血清建立PHN模型,30只SD大鼠随机分为对照组、模型组和中药组。中药组PHN大鼠予补肾活血汤,1次/d,共28 d。治疗前后检测24 h尿蛋白定量;ELISA检测血清IL-6和TNF-α水平;光镜碘酸六胺银染色(periodic acid-silver metheramine,PASM)及电镜观察肾脏病理改变,实时定量PCR(real time quantitative PCR,RT-qPCR)及免疫荧光检测肾组织Podocin的mRNA及蛋白表达。结果:模型组肾小球足细胞足突广泛融合,基底膜增厚伴上皮侧电子致密物沉积,中药组上述病理损伤减轻。与对照组相比,模型组24 h尿蛋白上升,肾脏Podocin的mRNA及蛋白表达下降,血清IL-6、TNF-α水平升高(P<0.01)。与模型组相比,中药治疗后24 h尿蛋白、IL-6、TNF-α水平下调,足细胞Podocin表达得到部分恢复(P<0.05)。结论:补肾活血汤可降低PHN大鼠24 h尿蛋白,减轻肾脏病理损伤,恢复足细胞Podocin的表达,补肾活血汤的治疗机制可能与下调血清IL-6和TNF-α的水平相关。

柴胡皂甙-d治疗抗肾小球基膜型肾炎的实验研究

目的：探讨柴胡皂甙－ｄ（ＳＳｄ）治疗抗肾小球基膜型（ＧＢＭ）肾炎的疗效及其机制。方法：采用抗ＧＢＭ肾炎大鼠模型，用ＳＳｄ在疾病早期和晚期两个阶段给药，观察ＳＳｄ对其的疗效。结果：ＳＳｄ治疗可减轻尿蛋白，降低血脂和减轻肾小球病理变化。同时，血清促肾上腺皮质激素（ＡＣＴＨ）、皮质酮、肾组织糖皮质激素受体（ＧＲ）、活性氧（ＲＯ）清除剂活性和红细胞免疫功能均增强。其中早期治疗效果尤为显著。结论：ＳＳｄ对抗ＧＢＭ肾炎大鼠有良好的治疗作用。其机制可能系ＳＳｄ通过下丘脑－垂体－肾上腺（ＨＰＡ）轴促进内源性糖皮质激素（ＧＣ）分泌，从而增强ＧＣ－ＧＲ系统的抗炎和免疫抑制作用。另外也与提高红细胞免疫、ＲＯ清除剂活性及改善异常脂质代谢等有关。

肾炎益气液对大鼠肾毒血清性肾炎肾功能、肾组织病理学的影响

目的 :观察肾炎益气液对肾毒血清性肾炎大鼠肾功能及肾组织学变化的影响。方法 :应用大鼠肾毒血清性肾炎模型 ,以尿蛋白定量 ,血清肌酐、尿素氮测定反映肾功能的改变。肾组织分别进行常规苏木素伊红(HE)、磷钨酸苏木素 (PTAH)、六胺银 -苏木素伊红复合染色 (PAM -HE) ,免疫荧光、光镜观察。结果 :静脉注射肾毒血清 (NTS)后 ,模型组大鼠肾功能有明显损伤 ,表现为血肌酐、尿素氮明显升高 ,尿蛋白阳性。 2周时 ,取肾组织活检 ,免疫荧光染色 ,可见IgG沿肾小球毛细血管壁呈连续线形沉积。 7周时 ,光镜观察可见肾小球系膜细胞增生 ,肾小球硬化和新月体形成 ,并有蛋白和红细胞管形。肾炎益气液组上述改变明显轻于模型组。结论 :肾炎益气液有不同程度的改善肾功能和减轻肾小球病变的作用。

大鼠抗GBM肾炎模型的建立及不同病期的生化指标和肾组织病理学观察

目的 为研究人类新月体性肾炎的发病机制 ,建立大鼠抗肾小球基底膜 (GBM)肾炎的动物模型。方法提取S -D大鼠GBM抗原 ,将此抗原免疫新西兰白兔获得抗血清 ,再将此抗血清从尾静脉一次性注射给S -D大鼠。实验分 2组 :肾炎模型组及正常对照组 ,定期于第 4天、第 14天和第 2 1天检测大鼠 2 4h尿蛋白、血肌酐及血尿素的含量和肾组织病理学改变。结果 大鼠肾炎模型组 :大鼠注射抗血清后于第 4天出现大量蛋白尿 ;第 14天血肌酐、血尿素显著升高 ,并持续上升 ;肾组织病理表现为肾小球内细胞数明显增加 ,大量新月体形成及蛋白管型 ,GBM呈不规则增厚 ,足突融合 ,内皮细胞脱落、坏死 ;免疫荧光检查见兔IgG、鼠IgG沿GBM线形分布。大鼠正常对照组以上指标均无明显改变。结论 通过动态观察大鼠抗GBM肾炎的病变变化 ,证实该模型病变与人类新月体性肾炎的病变较为一致 。

姜黄素在肾毒血清肾炎中防治作用的初步研究

目的:探讨姜黄素对大鼠肾毒血清肾炎的防治作用,为将其应用于临床治疗肾小球肾炎提供实验依据。方法:将雄性SD大鼠随机分成3组:①正常对照组:从尾静脉注射0.5ml/d生理盐水,连用2日;②模型组:从尾静脉注射免抗鼠肾毒血清0.5ml/d,连用2日;③姜黄素组:于尾静脉注射免抗鼠肾毒血清0.5ml/d,连用2日,同时腹腔注射姜黄素50mg·kg^(-1)·d^(-1)。3组大鼠分别于第3、7、14、28天处死,测定各批次大鼠24h尿蛋白,并观察肾脏病理组织学改变。结果:姜黄素组24h尿蛋白明显低于模型组(P<0.01),半定量分析显示,姜黄素组肾小球细胞数明显低于模型组(P<0.01);间质炎细胞浸润亦少于模型组(P<0.01);14天后肾小管间质损伤指数姜黄素组也明显好于模型组(P<0.01)。结论:姜黄素能明显减轻肾毒血清肾炎蛋白尿程度,抑制肾小球内细胞增殖,减轻肾小管间质损伤及炎细胞浸润,具有肾脏保护作用。

核因子-κB在急性百草枯中毒大鼠肾脏中的表达及其意义

目的:观察急性百草枯(PQ)中毒大鼠肾组织NF-κB表达及对TNF-α的调节,以期发现NF-κB调控炎性因子在肾损害中的作用。方法:将SD大鼠60只,随机分为对照组(A组)、轻度中毒组(B组)、重度中毒组(C组),免疫组化法观察12h、24h、72h、120h肾组织NF-κB的表达。结果:A组大鼠NF-κB不表达或很少表达;B组大鼠NF-κB在24h后表达增多,较A组有统计学差异;C组大鼠NF-κB在12h即升高,72h左右达到高峰,12h较A组及B组均有统计学差异,24h、72h、120h较A组有显著的统计学差异,24h、72h、120h较B组有统计学差异。结论:NF-κB调控TNF-α参与百草枯中毒后肾损害的过程,抑制NF–κB的过度活化可能成为干预治疗的重要靶点。

被动型Heymann肾炎模型的建立及其发病机制的探讨

从正常大鼠肾小管刷状缘微绒毛上提取致病的小管抗原(Tub-Ag)免疫白兔可获得相应的抗血清。给大鼠被动注射此种抗血清后5分钟荧光检测即可见鼠肾小球毛细血管壁上出现兔抗体IgG。约1周后,实验鼠便产生了典型的膜性肾炎样的临床及病理学改变。应用小管抗体(Tub-Ab)进行鼠肾动脉灌注实验,结果表明:在缺乏CIC的情况下,灌注的抗体能与GBM上皮侧、裂隙孔等处结合,IC出现的部位与PHN大鼠IC的位置基本相似。上述实验均提示:PHN的发病机制乃是Tub-Ab与肾小球中固定的抗原直接结合,进而导致上皮下IC原位形成。

4种肾炎模型大鼠尿液中补体C5b-9复合物排泄的比较研究

目的 :探讨不同类型的免疫复合物肾炎大鼠尿液中补体C5b - 9复合物检出的意义。方法 :复制大鼠被动型Heymann肾炎 (PHN)、抗胸腺细胞血清性肾炎 (ATSN)、抗肾小球基底膜性肾炎(AGBMN)及慢性血清病肾炎 (CSDN) 4种动物模型。用双抗体夹心ELISA法定期检测各种肾炎大鼠血液及尿液中补体C5b - 9的含量 ,同时观察大鼠肾小球中C5b - 9的沉积情况。结果 :4种肾炎模型鼠血浆C5b - 9复合物均见上升 ,肾小球内也有C5b - 9复合物的沉积 ,但尿液中C5b - 9含量升高仅见于罹患PHN的大鼠。此外 ,尿液中C5b - 9复合物的升高先于PHN大鼠尿蛋白的升高。结论 :尿液中C5b -

普乐可复防治大鼠抗肾小球基底膜肾炎的实验研究

目的 :观察普乐可复 (FK5 0 6 )防治大鼠抗肾小球基底膜 (GBM)肾炎的疗效。方法 :复制大鼠抗GBM肾炎模型。实验分 3组 :肾炎 +FK5 0 6组、肾炎对照组及正常对照组。大鼠一次性尾静脉注射抗GBM抗血清后 6h内皮下注射FK5 0 6注射液 (0 5mg·kg-1·d-1) ,至第 2 1d。对照组则给予等量的生理盐水。定期于第 4d、第 14d和第2 1d ,检测大鼠尿蛋白、血清肌酐和尿素氮水平 ,观察肾组织病理学改变 ,以及检测T淋巴细胞转化功能。结果 :肾炎对照组大鼠注射抗血清后于第 4d即出现异常蛋白尿 ,血清肌酐和尿素氮亦持续上升 ;肾小球内可见细胞数增加和新月体形成 ,肾小管内大量蛋白管型 ,GBM呈不规则增厚 ,足突大片融合 ;T淋巴细胞转化功能异常。而肾炎 +FK5 0 6组大鼠上述病变均明显较轻。结论 :FK5 0 6能够明显改善大鼠抗GBM肾炎的肾功能。

抗胸腺细胞血清性肾炎模型大鼠肾小球中C5b-9的沉积及NO、TNFα含量分析

目的 :探讨抗胸腺细胞血清性肾炎 (ATSN)大鼠肾小球内C5b -9复合物的沉积与某些炎症介质和细胞因子如 :一氧化氮 (NO)和肿瘤坏死因子α(TNFα)的含量情况。方法 :大鼠一次性静脉注射抗胸腺细胞抗血清(ATS)建立ATSN模型 ,定期对ATSN大鼠肾小球中的补体C5b -9复合物进行免疫组化染色定位、显微图像扫描半定量分析 ;并对有C5b -9包绕的肾小球系膜细胞 (MC)进行计数。测定ATSN大鼠肾中诱生型NO合酶 (iNOS)mRNA的表达、尿液中NO的代谢产物 (NO-2 /NO-3 )及TNFα的排泄量。结果 :ATSN模型大鼠肾小球MC先溶解坏死后继发增生 ,病变早期 (溶解时相 )补体C5b -9复合物主要定位于肾小球系膜区及MC表面 ;随着病程的进展 ,被C5b -9包绕的MC逐渐减少 ,病程初期ATSN大鼠肾小球MC有明显的iNOSmRNA表达 ,尿液中NO-2 /NO-3 和TNFα的排泄量也明显增加。在ATSN病变的增生阶段 (一般 7d后 ) ,上述指标的变化逐渐趋缓。结论 :ATSN模型大鼠肾小球中MC逐渐溶解与补体C5b

肾炎灵片生殖毒性试验

目的:研究江苏康缘药业股份有限公司提供的治疗肾小球疾病纯中药制剂肾炎灵片的生殖毒性。该剂是对传统中药组方创新和剂型改造,为其临床应用和新药审批提供安全性资料。方法:①雄性大鼠生殖毒性试验:成年雄性大鼠连续灌服肾炎灵片剂2个月,与正常雌性大鼠1∶1合笼。雌鼠第2天起做阴道涂片,见到精子日为妊娠第1天(D1),于妊娠第19天(D19)剖杀,记录孕鼠数、胎仔数、活胎数、死胎数、吸收胎仔数及胎鼠的外观检查(性别、体质量、尾长、胎盘质量等)。将1/2胎鼠用茜苏红骨骼染色检查骨骼有否畸形;其余1/2胎鼠用Bouin氏液固定,观察内脏发育情况。②雌性大鼠生殖毒性试验:成年雌鼠连续灌服肾炎灵片剂14d,14d后与正常雄鼠1:1合笼交配,第2天起做阴道涂片,见到精子日为D1。妊娠后继续灌药,其中10只孕鼠再灌药第13天停药,D19剖杀,观察指标同上;另10只孕鼠连续给药至整个妊娠期(21d)和哺乳期(21d),观察其受孕、分娩、哺乳和仔鼠存活情况。结果:高剂量6.25g/kg和低剂量1.25g/kg的上述雌、雄大鼠生殖毒性试验结果,分别与雌、雄大鼠对照组比较,孕鼠数、胎仔数、活胎数、死胎数、吸收胎仔数及胎仔内脏等各项观察指标均无明显差异,哺乳和仔鼠存活也无明显差异。结论:在本实验条件下,肾炎灵片剂的生殖毒性试验为阴性。

青藤碱对Heymann肾炎大鼠足细胞损伤的干预作用及机制研究

目的探讨青藤碱对Heymann肾炎大鼠足细胞损伤的干预作用及机制。方法采用往大鼠尾静脉注射0.4 ml/100 g体重羊抗大鼠Fx1A血清的方法建立被动型Heymann肾炎(PHN)大鼠模型,随机分为6组,每组17只。青藤碱低、中、高(20、40、60 mg/kg体重)剂量组(青藤碱干预组)予腹腔注射青藤碱注射液,雷米普利组(5 mg/kg体重)予雷米普利混悬液灌胃,模型组和对照组按雷米普利组等体积0.9%氯化钠溶液灌胃。给药第10、20、30天末收集大鼠尿液,腹主动脉取血后,每组分别在第10、20天处死5只大鼠,第30天全部处死,测定24 h尿蛋白水平,检测血常规、血生化;处死后剥取肾脏组织,行免疫病理学检查。结果与模型组及对照组相比,青藤碱干预组的24 h尿蛋白水平降低(均P<0.05),且呈青藤碱高剂量组<青藤碱中剂量组<青藤碱低剂量组的趋势;青藤碱干预组的血清白蛋白水平,肾脏组织podocin、nephrin阳性区平均积分光密度均升高(均P<0.05),且呈青藤碱高剂量组>青藤碱中剂量组>青藤碱低剂量组的趋势;青藤碱低、中、高剂量组的血清肌酐、WBC、ALT、AST及IgG阳性区平均积分光密度比较均无统计学差异(均P>0.05)。结论青藤碱可呈剂量依赖性减少PHN大鼠尿蛋白排泄,但不能减少PHN大鼠肾脏组织IgG沉积。青藤碱或通过上调PHN大鼠肾脏组织podocin、nephrin表达,修复足细胞损伤,且对肝功能及骨髓无明显不良影响。

济生肾气丸治疗大鼠实验性肾炎的试验研究

观察济生肾气丸对大鼠实验性肾炎的药理作用。结果表明 ,阿霉素肾炎及小牛血清白蛋白性肾炎均能引起大鼠尿蛋白排出增加 ,血清尿素氮及血清肌酐含量升高 ,而给药组动物上述指标明显改善。表明本方对大鼠实验性肾炎有明显的治疗作用。

Heymann肾炎(HN)发病机制的实验研究

从SD 大鼠肾小管刷状缘提取了致肾炎性的肾小管上皮抗原(Tub-Ag)。用此抗原免疫白兔获得的抗血清注入大鼠,复制出被动型Heymann 肾炎(PHN)动物模型。此后,应用兔抗Tub-Ag 的抗体进行鼠肾动脉灌注研究,并用免疫电镜观察了大鼠肾中Tub-Ag 的存在部位。结果发现:灌注的抗体能与肾小球基底膜(GBM)上皮侧及裂隙膜结合。致肾炎性的Tub-Ag 主要定位在足突基都细胞膜、裂隙膜、近曲小管上皮细胞顶部凹褶及微绒毛基部。

15-甲基-脂氧素A_4对大鼠系膜增殖性肾炎干预作用的研究

目的已发现脂氧素A4（LXA4）可抑制肾小球系膜细胞的体外增殖，该研究旨在了解LXA4同系物15-甲基-LXA4是否抑制大鼠系膜增殖性肾炎的病理进展，并探讨其作用的信号转导分子机制。方法使用小鼠抗大鼠Thy1．1单克隆抗体静脉内1次性注射制备大鼠系膜增殖性肾炎。使用15-甲基-LXA4静脉内注射干预大鼠系膜增殖性肾炎。检测尿蛋白、肾小球白细胞浸润、系膜细胞增生评分、增殖性细胞核抗原（PCNA）表达。应用RT—PCR方法检测肾小球白介素（IL）-1β，IL-6的mRNA表达，应用放免法测定肾小球IL-1β，IL-6水平。应用Western Blot测定肾小球磷酸化的磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3-K）、Akt1与p27^kip1表达，应用凝胶电泳迁移率试验（EMSA）测定肾小球核因子-κB（NF—κB）及信号转导及转录活化子-3（STAT3）活性。结果大鼠系膜增殖性肾炎发病后第1～4天，肾小球白细胞计数、IL-1β、IL-6的mRNA与蛋白表达、NF—κB活性升高；第4天尿蛋白、肾小球系膜细胞增生评分、PCNA表达、肾小球PI3-K、Akt1与STAT3活性升高，p27^kip1表达减低。应用15-甲基-LXA4干预，可减少肾炎大鼠尿蛋白、肾小球白细胞计数、系膜细胞增生评分、PCNA表达、IL-1β、IL-6的mRNA与蛋白表达（均P〈0．05），减低PI3-K、Akt1、NF—κB、STAT3活性，阻止p27^kip1表达减低。结论15-甲基-LXA4可有效地抑制大鼠系膜增殖性肾炎的尿蛋白、肾小球炎性反应，系膜细胞增殖，其机制与抑制PI3-K／Akt1／p27^kip1／cyclin途径、STAT3、NF—κB活性有关。

201A中药合剂对大鼠抗肾小球基底膜肾炎病变的影响

目的 观察 2 0 1A中药合剂防治大鼠抗肾小球基底膜 (GBM)肾炎的疗效。方法 建立大鼠抗GBM肾炎模型。实验分 3组 :2 0 1A处理组、肾炎对照组及正常对照组。 2 0 1A处理组大鼠一次性尾静脉注射抗GBM抗血清后即刻给予 2 0 1A合剂 (0 .42g/kg ,灌胃 ) ,至第 2 1天。对照组则给予等量的生理盐水。定期于第 4天、第 14天和第 2 1天 ,检测大鼠尿蛋白 ,观察肾组织病理学改变。结果 肾炎对照组大鼠注射抗血清后于第 4天即出现异常蛋白尿 ,肾小球内可见细胞数增加和新月体形成 ,肾小管内大量蛋白管型 ,GBM呈不规则增厚。而 2 0 1A处理组鼠上述病变均明显好转。结论 2 0

肾复康对大鼠实验性慢性肾炎的作用

为寻求可消除肾性蛋白尿及维护肾功能的有效制剂 ,观察了广州中医药大学第一附属医院的临床经验方肾复康 (由雷公藤、黄芪、三七、益母草等组成 )对大鼠实验性慢性肾炎的药理作用。结果表明 :高( 10 .8g kg )、中 ( 5 .4g kg )、低 ( 2 .7g kg )剂量肾复康治疗组对阿霉素肾炎和小牛血清白蛋白性肾炎引起的尿蛋白排出增加 ,血清总蛋白 ( ρ总昼白)、白蛋白 ( ρ白昼白)、ρ白昼白 ρ总昼白 的降低 ,血清胆固醇、肌酐、尿素氮的升高 ,均有明显的抑制作用。

长期中等强度运动训练及依那普利对Thy-1肾炎慢性肾功能衰竭大鼠模型肾功能的影响

目的探讨运动训练及其与依那普利联合应用对肾功能的影响。方法将Wistar大鼠在5周龄时摘除一侧肾脏后,每周1次静脉注射Thy1抗体共4次,制备Thy1肾炎模型。于6周龄时随机分为非运动组、中等强度运动训练组和运动训练加依那普利组。其中运动训练组所有动物进行跑台训练,速度20m/mim,60min/d,5d/周。依那普利2mg/kg.d腹腔内持续给药。结果非运动组的血压和尿蛋白分泌明显增加。运动训练并没有抑制尿蛋白分泌和血肌酐的增加,肾小球硬化指数也有增大倾向。而运动训练加依那普利使血压明显下降和尿蛋白分泌明显减少,完全抑制运动对尿蛋白、血肌酐以及肾小球硬化指数的影响。结论对于Thy1肾炎模型,中等强度运动训练保护肾功能的作用不明显。由于形成慢性肾功能衰竭的原发病不同,长期运动对肾功能的影响可能也不同,提示运动训练时与依那普利并用可能扩大运动的范围。