抗人绒毛膜促性腺激素避孕疫苗的研制

一、研制避孕疫苗的童义: 计划生育是我国的一项基本国策,它关系到我国各族人民的健康和繁荣。我国现有11亿多人口,占世界人口的1/4,而国土面积只占全世界的1/7,人口增长速度过快已经制约了国民经济的发展。为了依法推行计划生育,控制人口数量,提高人口素质,使人口增长与国民经济发展相适应,必须研究有效的避孕方法。

经阴道子宫输卵管四维超声造影联合抗HCG抗体评估不孕症输卵管通畅程度的临床研究

目的分析经阴道子宫输卵管四维超声造影(TVS4D-HyCoSy)联合抗人绒膜促性腺激素(HCG)抗体评估不孕症输卵管通畅程度的效果。方法选取2019年1月—2021年3月就诊于阜阳市人民医院的98例不孕症患者。患者接受TVS4D-HyCoSy检查,造影3个月后接受腹腔镜通液术,使用酶联免疫吸附试验测定血清抗HCG抗体水平。不同输卵管系统检测患者血清抗HCG抗体阳性率,将腹腔镜通液术结果作为金标准,评估TVS4D-HyCoSy、抗HCG抗体及两者联合检测不孕症输卵管通畅的诊断效能。结果不同输卵管系统评分患者血清抗HCG抗体阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05),Ⅲ度抗HCG抗体阳性率高于Ⅱ度,Ⅰ度最低。98例不孕症患者共检查193条输卵管(其中1例单角子宫,2例一侧输卵管切除),其中通畅40条,通而不畅73条,阻塞80条。联合诊断的敏感性、特异性、准确率高于TVS4D-HyCoSy、抗HCG抗体(P<0.05)。结论TVS4D-HyCoSy联合抗HCG抗体在评估不孕症输卵管通畅程度中具有较高的敏感性、特异度及准确率,可指导临床诊治。

不孕症患者的自身免疫抗体分析

目的:探讨不孕症与患者自身免疫抗体的相关性。方法:采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测516例不孕症患者的血清抗精子抗体(ASAb)、抗卵巢抗体(AOAb)、抗子宫内膜抗体(EMAb)、抗绒毛膜促性腺激素抗体(hCGAb)及抗心磷脂抗体(ACAb)。选择125例正常妊娠妇女作为对照组,比较不孕症组与对照组5项抗体的阳性率。结果:不孕症组ASAb,AOAb,EMAb,hCGAb和ACAb的阳性率分别为26.7%,24.8%,25.2%,21.7%和21.3%,明显高于正常对照组4.8%,2.4%,1.6%,3.2%和1.6%(P均﹤0.001);5种抗体联合检测阳性率为38.2%,与分别单独检测这5项抗体的阳性率相比,差异均有统计学意义(P均﹤0.05)。结论:ASAb,AOAb,EMAb,hCGAb和ACAb与不孕症有密切相关性,是引起不孕的重要原因。检测这5项抗体可作为不孕症病因诊断的一项指标。

绒癌细胞靶向微泡造影剂结合特性研究

目的探索体外靶向SonoVue微泡与绒癌细胞的结合特性、结合率及靶向微泡的稳定性,为临床进行滋养细胞肿瘤的超声定位提供依据。方法用SonoVue微泡与兔抗人HCG抗体作用制成靶向造影剂,然后分别与绒癌细胞及子宫内膜间质细胞作用,比较各自的结合率及冲洗前后的结合率。结果SonoVue微泡与兔抗人HCG抗体的结合率为77.6%;绒癌细胞与靶向SonoVue微泡的花环形成率为(87.8±6.3)%,明显高于子宫内膜间质细胞花环形成率的(9.4±1.7)%(P<0.05);靶向SonoVue微泡与贴壁生长的绒癌细胞结合率为(85.4±4.7)%,冲洗后结合率为(83.1±3.8)%(P>0.05);流式细胞仪检测绒癌细胞与靶向SonoVue微泡的结合率为81.0%。结论在体外靶向SonoVue微泡与绒癌细胞可特异性结合,其结合力具有一定的强度,可望能抵抗毛细血管内血流生理性冲洗的破坏,实现靶向显影。

雌二醇、孕酮、抗HCG抗体联合检测对女性不孕症的诊断意义

目的探讨抗HCG抗体、雌二醇和孕酮联合检测在女性不孕症诊断中的临床应用。方法选择2008年1月～2009年12月来我院妇科门诊就诊的168例女性不孕症患者(不孕症组),选择60例婚检健康女性为正常对照(对照组)。采用电化学发光法(罗氏ELECSY2010)检测2组患者血清雌二醇(E2)和孕酮(P)水平,用ELISA间接法定性检测抗HCG抗体。结果不孕症组血清E2、P水平明显低于对照组。抗HCG抗体阳性者雌二醇(E2)和孕酮(P)水平明显低于抗HCG抗体阴性者,差异有统计学意义(P<0.01)。结论抗HCG抗体阳性,可引起雌二醇和孕酮水平低下,导致不孕,抗HCG抗体、E2、P联合检测在女性不孕症诊断中有重要意义。

抗HCG抗体、雌二醇和孕酮联合检测在女性不孕症中的临床意义

目的探讨抗HCG抗体、雌二醇和孕酮联合检测在女性不孕症诊断中的临床应用。方法采用电化学发光法测定女性不孕症患者血清雌二醇(E2)和孕酮(P)水平,用ELISA间接法定性检测抗HCG抗体。结果抗HCG抗体阳性组雌二醇(E2)和孕酮(P)水平明显低于抗HCG抗体阴性组。结论抗HCG抗体、雌二醇和孕酮联合检测在女性不孕症诊断中有重要意义。

自然流产的免疫学因素分析与探讨

目的为探讨自然流产与免疫学因素的关系。方法采用酶联免疫吸咐试验(ELISA)对612例自然流产妇女进行血清抗子宫内膜抗体(EMAb)、抗心磷脂抗体(ACA)、抗人绒毛膜促性腺激素抗体(HCGAb)测定。结果流产组132例HCGAb阳性,阳性率为21.5%;150例EMAb阳性,阳性率为24.5%;184例ACA阳性,阳性率为30.1%;63.2%的患者体内有两种以上抗体并存,与对照组比较,有高度显著性差异。结论抗心磷脂抗体、抗人绒毛膜促性腺激素抗体、抗子宫内膜抗体是造成自然流产的不可忽视的免疫学因素。

纸纤维固定木瓜蛋白酶的研究及应用

利用纸纤维为载体,制备高活性的固定化木瓜蛋白酶并应用于抗HCG抗体的水解.利用戊二醛交联法,制备固定化木瓜蛋白酶,并通过一系列优化,得到最佳固定化条件,包括pH﹑给酶量﹑温度﹑戊二醛体积分数,将制备的固定化木瓜蛋白酶应用于抗HCG抗体水解并制备F(ab′)2片段.研究表明:反应温度为40℃时,固定化酶在pH 5.0,0.01mol/L的醋酸缓冲液条件下,给酶量为46mg/g载体,戊二醛体积分数为0.01%时,固定化酶的酶活达到最高19 250U/g,相对于优化前1 940U/g提高了近10倍,成功应用于抗HCG抗体水解制备F(ab′)2片段:经SDS-PAGE电泳检测,F(ab′)2片段达到电泳纯.ELISA反应检测表明:片段仍保留较高的活性,效价为1∶12 000.

滋阴抑抗汤联合地塞米松治疗不孕症临床研究

目的观察滋阴抑抗汤联合地塞米松治疗抗人绒毛膜促性腺激素抗体(HCG-Ab)阳性继发性不孕症患者的临床疗效及对HCG-Ab滴度的影响。方法将60例HCG-Ab阳性的继发性不孕症患者随机分为2组,每组30例。治疗组予滋阴抑抗汤联合地塞米松治疗,对照组予单纯地塞米松治疗。观察治疗前后中医临床症状积分、HCG-Ab滴度变化,并比较2组临床疗效。结果 2组中医症状积分均较治疗前显著降低(P<0.01),治疗组优于对照组(P<0.01);2组HCG-Ab滴度均较治疗前显著降低(P<0.05,P<0.01),治疗后2组比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗组总有效率为63.33%(19/30),对照组为47.66%(14/30),治疗组优于对照组(P<0.05)。结论滋阴抑抗方联合地塞米松能改善HCG-Ab阳性继发性不孕患者的临床症状,促进妊娠。

继发性女性不育病人血清免疫学相关指标的检测

目的通过对360例继发性女性不育病人抗精子抗体(AsAb)、抗子宫内膜抗体(EmAb)、抗卵巢抗体(AoAb)和抗促绒毛膜性腺激素抗体(HCGAb)检测,进一步弄清继发性不育病人的免疫学相关指标变化。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中的AsAb、EmAb、AoAb和HCGAb。结果360例病人中有190例(占52.77%)病人不同抗体阳性,分别为:AsAb阳性91例(占25.3%),HCGAb阳性80例(占22.2%),AoAb阳性25例(占6.5%),EmAb阳性43例(占11.9%);其中107例仅单项阳性,另有83例表现为多项阳性。结论继发性不育和反复流产病人存在免疫功能异常,对该类病人进行相关免疫学指标检测是非常必要的。

The Study on Immuno-response and Antisera Properties of Recombinant β-subunit of Human Chorionic Gonadotropin in C57 Black Mouse

In this study, the immuno-response of recombinant hCG-β and natural hCGβ was comparatively investigated by using Freund's adjuvant. The results showed that, the properties and merits of the antibodies elicited by both kinds of hCG-β were similar. The antisera had high affinity for binding with hCG (Kαγβ≈5.86×108/mol/L, Kαβ≈8.18×108/mol/L), and were found to be effective in inhibiting the binding of 125I-hCG to receptors in rat testes. Results also indicated that, similar to the antisera induced by natural hCG-β, the recombinant hCG-β induced antisera had capacity of neutralizing the biological activities of hCG. Recombinant hCG-β could be used as an immunogen for contraceptive vaccine.

CT、经阴道超声造影结合抗HCG抗体联合诊断输卵管性不孕的价值

目的评价输卵管性不孕应用CT、经阴道超声造影、抗人绒膜促性腺激素(HCG)抗体联合诊断的价值。方法选取2016年3月至2019年3月北京世纪坛医院收治的120例输卵管性不孕患者作为研究对象。术前均接受CT、经阴道超声造影检查,并测定其血清抗HCG抗体水平,以腹腔镜下通液术诊断结果为金标准,评估CT、经阴道超声造影、抗HCG抗体水平三者单项及联合检查输卵管通畅性的诊断效能,并对比CT、经阴道超声造影的图像质量。结果腹腔镜下通液术诊断结果显示,120例患者(240条输卵管)中输卵管通畅138条(57.5%),不通畅102条(42.5%)。120例患者中血清抗HCG抗体阳性率为42.50%(51/120)。CT、经阴道超声造影、抗HCG抗体水平联合诊断输卵管通畅性的灵敏度(93.14%)、特异度(91.30%)及准确度(92.08%)均比三者单项诊断高,差异具有统计学意义(P<0.05);经阴道超声造影图像质量的优良率(89.17%)比CT(75.83%)高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论相比CT,经阴道超声造影用于输卵管性不孕诊断具有图像质量清晰、可重复性强等优势,若将CT、经阴道超声造影、抗HCG抗体水平三者联合诊断利于判断输卵管通畅程度,可为临床诊治提供科学依据。

应用脾直接免疫法制备HCG单克隆抗体

应用脾直接免疫方法制备HCC单克隆抗体,获得了高效价BALB/c小鼠抗血清。稀释到1:150倍仍为强阳性(ELISA法)。采用上述方法用HCG免疫小鼠的脾细胞与NS-1细胞融合生成的杂交瘤细胞所分泌的抗体效价为1:6000以上(ELISA法)。脾直接免疫方法与传统免疫方法相比较,操作简便,免疫时间短,节省抗原。利用此方法获得分泌特异性抗体的杂交瘤与同一抗原,按传统方法免疫动物获得的杂交瘤所分泌的抗体,在效价上和抗体特异性上没有差别。是一种很实用的免疫方法。

α-苦瓜籽蛋白对体外培养人胚泡滋养层和蜕膜细胞的影响

通过观察α-苦瓜籽蛋白对体外培养的人胚泡滋养层细胞形态、HCG分泌功能的影响,以及对人蜕膜细胞形态改变,探讨了α-苦瓜籽蛋白抗早孕的细胞学作用机理。0.13,0.50,2.00,8.00 μg/mlα-苦瓜籽蛋白对滋养层细胞形态有不同程度的损伤,时间越长、浓度越大则损伤越重;滋养层细胞分泌HCG功能受到明显抑制,同时对蜕膜细胞也有一定的毒性作用。实验证明:α-苦瓜籽蛋白具有直接损伤滋养层细胞以及毒害蜕膜细胞而达到抗早孕的作用。

重组人绒毛膜促性腺激素β-亚基(hCGβ)抗血清对hCG生物活性能力的影响

该文将重组hCGβ免疫C57BL小鼠，观察了抗hCG抗血清对hCG诱发的睾丸间质细胞分泌睾酮和雌幼SD大鼠子宫增重的影响。结果表明：重组hCGβ抗血清可不同程度抑制hCG诱发的睾丸间质细胞分泌睾酮和雌幼sn大鼠子宫增重，提示重组hCGβ抗血清与hCG形成的复合物缺乏生物活性，重组hCGβ抗血清具有中和hCG的生物活性能力。

对BQV早早孕酶免测定盒的评价

对北京太平洋生物技术中心生产的应用特异单克隆抗体的早早孕酶免目力测定盒进行综合性评定.结果表明,该测定盒方法简单,迅速,特异性和灵敏度均很高,适于临床应用.

重组人绒毛膜促性腺激素β-亚基对C57BL小鼠免疫应答反应及抗血清特征的研究

采用福氏性剂，对C57BL小鼠进行重组hCGβ和天然hCGβ免疫应签反应的比较研究，结果表明：两者引发的抗血清性质相似，与hCG有较高的亲和力（K（γβ）≈5．86×108／mol／L，Kaβ≈8．18×108／mol／L）；抗血清能有效地抑制（125）I－hCG与睾丸受体的结合，结果提示重组hCGβ抗血清与天然hCGβ抗血清相似，具有中和hCG的生物活性能力，重组hCGβ可作为免疫避孕疫苗的抗原。

人绒毛膜促性腺激素抗独特型抗体在小鼠中的免疫反应

我室制备了人绒毛膜促性腺激素(hCG)的抗独特型抗体,它们与hCG有相似的抗体和受体结合位点,因而认为它们可能具有hCG内镜像结构。如果这些抗独特型抗体也具有与hCG类似的免疫原性,可望利用它们来配合或代替hCG制备更好的免疫避孕疫苗。我们用一种hCG抗独特型抗体(Anti-BAH_1)免疫小鼠可得到抗hCG抗体,这些抗体占所产生的Anti-Anti-BAH_1抗体的1—2％,最高滴度可达1:2万左右。这个滴度可保持2个月左右,以后逐步下降,在停止免疫半年后抗体滴度降到最高滴度的15.6％。用Anti-BAH_1与hCG同时免疫,对hCG的免疫反应有一定抑制作用,但先用Anti-BAH_1免疫对随后的hCG免疫反应有一定增强作用。表明利用抗独特型抗体可能调控对hCG的免疫反应。这种调控作用与所采用的免疫方式及抗原剂量有关。

术前血清抗HCG和E2表达水平与宫腔镜子宫内膜微创术治疗不孕预后的关联分析

目的:分析讨论术前血清抗HCG和E2表达水平在判断不孕患者治疗预后中的临床价值。方法:分别使用酶联免疫吸附法和电化学发光法测定不孕症患者治疗前HCG和E2表达水平,讨论其与不孕症的宫腔镜子宫内膜微创术治疗后受孕率的关联。结果:在抗HCG抗体阳性患者中术前E2水平高于抗体阴性的不孕患者。抗HCG抗体阳性不孕女性中随访受孕率为20.00%,低于抗体阴性者。宫腔镜子宫内膜微创术治疗后抗HCG抗体阳性和阴性的不孕女性均表现出E2水平减低,但抗体阳性者水平相对更高。多因素回归分析提示,术前E2水平异常增高、术前抗HCG抗体(+)、术前BMI异常以及年龄超过35岁为随访1年仍然不孕的危险因素。结论:术前血清E2水平异常、抗HCG抗体呈阳性、BMI水平异常以及年龄超过35岁与治疗后受孕率低有关,值得临床关注。