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Contribution of Anti-p63 Antibodies in the Interpretation of Benign Label Prostatic Biopsies
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作者 Ibou Thiam Fabrice Senghor +2 位作者 Frenette Codja Kor Ndiaye Mohamed Moustapha Cherif Dial 《Open Journal of Pathology》 2024年第2期31-44,共14页
Introduction: Prostate cancer is the second most common cancer in men. The diagnosis is most often based on the prostate biopsies’ analysis and on histological criteria recognizable on standard coloring. In some case... Introduction: Prostate cancer is the second most common cancer in men. The diagnosis is most often based on the prostate biopsies’ analysis and on histological criteria recognizable on standard coloring. In some cases, the use of immunohistochemistry is important. Objectives: This paper aims to specify the p63 phenotypic profile of lesions diagnosed benign, with minimal suspect foci, difficult to interpret, HGPIN (high grade intraepithelial neoplasia) and LGPIN (low-grade prostatic intraepithelial neoplasia) and evaluate the manual technique of p63 immunohistochemistry. Patients and Method: This was a retrospective, descriptive study of prostate biopsies recorded in the PAC service of the HALD from January 1st, 2018 to December 31st, 2018. It was completed by a manual immunohistochemical study of the blocks enrolled from November 19th to December 4th, 2020 in the PAC department of the HPD. The studied parameters were: registry number, age, clinical stage, prostate volume, PSA level, microscopic appearance and p63 immunohistochemical profile. Results: Our study included 60 prostate biopsies. The ages of our patients varied from 45 to 77 years, with an average of 64.2 years and a standard deviation of 6.2. The majority of patients were at clinical stage cT2b (33%) with a prostate volume varying between 33.15 and 169.4 cc. The minimum value of PSA in our series is 5 ng/ml, the maximum being 100 ng/ml with an average level of 24.1 ng/ml and a standard deviation of 21.2. Our series included 50 adenomyomatous hyperplasias, 7 adenomyomatous hyperplasias associated with chronic prostatitis, 2 HGPIN and 1 LGPIN. After re-reading we found 5 discordant cases, which corresponded to minimal suspect foci (kappa = 0.5098). The p63 marking was informative in 53 cases, i.e. 88%, and non-informative in 7 cases, i.e. 12%. Among the uninformative markings, 2 were due to lack of tissue adhesion to the slides. Among the informative markings, 11 were negative. p63 immunohistochemistry was useful in all suspected foci and detected 6 other minimal foci of adenocarcinoma. Conclusion: The immunostaining with the anti-p63 antibody in the prostate cancer diagnosis is of considerable benefit. It made it possible to correct 11.3% of benign diagnosis in minimal malignant focus in our context. Despite the difficulties associated with the manual technique, it is possible to have an informative rate, similar to the automatic technique. 展开更多
关键词 Prostate Cancer Diagnosis anti-p6 antibody
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求解多目标0/1背包问题的克隆选择算法 被引量:2
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作者 尚荣华 焦李成 +1 位作者 马文萍 张伟 《西安交通大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第2期156-160,共5页
提出一种用于求解多目标0/1背包问题的新算法.新算法将抗体群中的抗体分为支配抗体和非支配抗体代替传统算法中对所有个体分配适应度值,解决了多目标优化问题中解的多样性的问题.先通过克隆操作实现全局择优,得到分布较广的Pareto-前端... 提出一种用于求解多目标0/1背包问题的新算法.新算法将抗体群中的抗体分为支配抗体和非支配抗体代替传统算法中对所有个体分配适应度值,解决了多目标优化问题中解的多样性的问题.先通过克隆操作实现全局择优,得到分布较广的Pareto-前端,接着采用免疫基因操作提高算法的局部搜索能力,同时采用抗体修正操作对由免疫基因等操作产生的不可行解进行修正,保证抗体在可行解范围内,并实现局部搜索.该算法与已有算法相比能更好地保持解的多样性、均匀性以及收敛性.仿真实验表明,新算法所得的Pareto-前端分布最广,所得的解能较好地收敛到Pareto-前端,并且将均匀性评价指标降低到1%以下. 展开更多
关键词 多目标0/1背包问题 支配抗体 克隆选择 抗体修正
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抗体修正免疫算法对高维0/1背包问题的应用 被引量:11
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作者 庄中文 钱淑渠 《计算机应用研究》 CSCD 北大核心 2009年第8期2921-2923,2930,共4页
遗传算法极难处理高维约束优化问题,故借鉴免疫系统机理,提出一种抗体修正免疫算法解决一类高维约束优化问题。该算法设计的关键在于抗体亲和力由抗体浓度及群体状态决定;可行抗体被克隆、突变;非可行抗体的基因按价值密度由小到大逐一... 遗传算法极难处理高维约束优化问题,故借鉴免疫系统机理,提出一种抗体修正免疫算法解决一类高维约束优化问题。该算法设计的关键在于抗体亲和力由抗体浓度及群体状态决定;可行抗体被克隆、突变;非可行抗体的基因按价值密度由小到大逐一修正。选取两种已有的智能算法(ETGA、ISGA),通过不同约束条件下的高维0/1背包问题的仿真比较。结果表明,该算法较其他算法能更快地跟踪最优值,具有较强的勘测和开采能力。 展开更多
关键词 高维0/1背包问题 约束优化 抗体修正 免疫算法
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《欧洲药典》6.0版与7.5版单克隆抗体总论的介绍与比较 被引量:2
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作者 郭玮 王兰 高凯 《中国药事》 CAS 2013年第7期697-702,共6页
目的介绍《欧洲药典》7.5版在6.0版基础上单克隆抗体总论所做的修订和变化,为2015年版《中国药典》三部中单克隆抗体总论的起草和完善提供参考。方法对《欧洲药典》6.0版和7.5版单克隆抗体总论进行列表比对分析,了解《欧洲药典》对于单... 目的介绍《欧洲药典》7.5版在6.0版基础上单克隆抗体总论所做的修订和变化,为2015年版《中国药典》三部中单克隆抗体总论的起草和完善提供参考。方法对《欧洲药典》6.0版和7.5版单克隆抗体总论进行列表比对分析,了解《欧洲药典》对于单克隆抗体产品安全性、有效性和质量可控性的新的关注点和要求,并对2015年版《中国药典》三部单克隆抗体总论的起草提出几点建议。结果与结论《欧洲药典》7.5版比6.0版表述更加严谨,对于生产过程的控制和要求更为合理,充分体现了质量源于设计以及质量风险控制的理念。 展开更多
关键词 单克隆抗体总论 《欧洲药典》7 5版 《欧洲药典》6 0 《中国药典》
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一种新的求解0-1背包问题的混合算法 被引量:4
5
作者 赵朝卿 胡小兵 《计算机工程与应用》 CSCD 北大核心 2008年第18期61-63,共3页
该文汲取了蚁群算法(ACA)和抗体免疫克隆算法(AICA)的优点,提出了一种求解0-1背包问题的混合型算法,该算法充分利用了前者的搜索能力和后者的种群多样性。仿真实验对算法的部分参数进行了分析,并与其他文献的算法进行比较,结果表明,该... 该文汲取了蚁群算法(ACA)和抗体免疫克隆算法(AICA)的优点,提出了一种求解0-1背包问题的混合型算法,该算法充分利用了前者的搜索能力和后者的种群多样性。仿真实验对算法的部分参数进行了分析,并与其他文献的算法进行比较,结果表明,该算法是一种具有较高性能的混合优化算法。 展开更多
关键词 0—1背包问题 蚁群算法 抗体免疫克隆算法
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青光眼睫状体炎综合征患者5种常见病原微生物相关血清抗体的测定及分析 被引量:14
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作者 陈文杰 赵军 +4 位作者 祝天辉 彭诗茗 黄晓生 梅韶仪 王燕 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1115-1119,共5页
背景青光眼睫状体炎综合征(PSS)常反复发作,最终可致盲,目前病因尚未完全阐明。研究认为一些病原微生物感染引起的免疫炎症反应与PSS的发病有一定的关联性,但大样本的临床研究鲜见报道。目的探讨PSS患者血清中巨细胞病毒(CMV)、... 背景青光眼睫状体炎综合征(PSS)常反复发作,最终可致盲,目前病因尚未完全阐明。研究认为一些病原微生物感染引起的免疫炎症反应与PSS的发病有一定的关联性,但大样本的临床研究鲜见报道。目的探讨PSS患者血清中巨细胞病毒(CMV)、单纯疱疹病毒(HSV)、风疹病毒(RV)、幽门螺旋杆菌(HP)及抗链球菌溶血素0(ASO)相关抗体水平,为PSS发病的影响因素及其防治研究提供依据。方法采用前瞻性病例对照研究方法,于2014年12月至2016年12月收集在深圳市眼科医院确诊的82例PSS患者的外周血各4ml,同期采集100名性别和年龄匹配的健康献血志愿者外周血作为对照。采用间接ELISA法测定各组受检者血清中CMV、HSV、RV和HP的特异性IgG及IgM阳性率;采用免疫散射比浊法检测各组受检者血清中ASO抗体的阳性率。结果PSS组受检者血清CMV-IgG、CMV.IgM、HP-IgG、HP-IgM和ASO抗体阳性率分别为22.0%、17.1%、22.0%、17.1%和17.1%,均明显高于正常对照组的5.O%、0.O%、10.0%、2.0%和7.O%,差异均有统计学意义(X^2=11.726、18.496、4.943、12.766、4.479,均P〈0.05)。PSS组受检者血清HSV-IgG、HSV-IgM、RV·IgG和RV-IgM的阳性率与正常对照组比较差异均无统计学意义(x^2=3.305、0.986、0.898、0.503,均P〉0.05)。结论CMV、HP和溶血性链球菌感染在PSS的发生和发展中可能起到一定的作用。 展开更多
关键词 青光眼睫状体炎综合征 病原学 巨细胞病毒 单纯疱疹病毒 风疹病毒 幽门螺旋杆 抗链球菌溶血素0 抗体
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羊布鲁菌O链M抗原提纯及其单克隆抗体的研制 被引量:2
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作者 梅建军 王兴龙 +4 位作者 万忠海 李晓燕 马云志 张辉 崔丽瑾 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2007年第10期771-774,共4页
目的研制羊布鲁菌O链M纯化抗原及其单克隆抗体。方法采用冷酚法提纯羊布鲁菌16M的O链抗原,并经琼脂糖凝胶免疫扩散和SDS-PAGE鉴定,用灭活的该抗原免疫BALB/c小鼠,制备单克隆抗体,并进行鉴定。结果建立3株分泌单克隆抗体的细胞株2D10、3C... 目的研制羊布鲁菌O链M纯化抗原及其单克隆抗体。方法采用冷酚法提纯羊布鲁菌16M的O链抗原,并经琼脂糖凝胶免疫扩散和SDS-PAGE鉴定,用灭活的该抗原免疫BALB/c小鼠,制备单克隆抗体,并进行鉴定。结果建立3株分泌单克隆抗体的细胞株2D10、3C6和1E10,ELISA效价分别为1.380、1.109和1.048,与大肠杆菌0:157、小肠结肠炎耶尔森菌0:9、鼠伤寒沙门菌和猪胸膜肺炎放线杆菌均无交叉反应。3C6和1E10与牛布鲁菌544A发生交叉反应,2D10的亲和常数达5.30×10~7M^(-1)。结论已制备出纯化的羊布鲁菌O链M抗原及其单抗。 展开更多
关键词 羊布鲁菌 O链 M抗原 单克隆抗体
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应用活体骨髓瘤细胞制备单克隆抗体 被引量:4
8
作者 李永亮 田美娜 +2 位作者 卢曾军 杨苏珍 刘在新 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期63-66,共4页
目的:用活体骨髓瘤细胞SP2/0做融合提高融合率制备单克隆抗体,并与常规方法比较效果。方法:将SP2/0细胞打到8周龄的SPF级BALB/c小鼠皮下,待实体瘤生长到直径达2~3cm时无菌解剖取实体瘤,分离出骨髓瘤细胞进行融合。同时用培养基培养SP2/... 目的:用活体骨髓瘤细胞SP2/0做融合提高融合率制备单克隆抗体,并与常规方法比较效果。方法:将SP2/0细胞打到8周龄的SPF级BALB/c小鼠皮下,待实体瘤生长到直径达2~3cm时无菌解剖取实体瘤,分离出骨髓瘤细胞进行融合。同时用培养基培养SP2/0细胞进行融合做比较,分两组进行。比较两种方法的融合率以及两种方法制备出来的单克隆抗体的相对亲和力。结果:做了6次融合,实体瘤融合组融合率为70.4%,常规法融合组44.6%,两种方法制备单抗的相对亲和力均达到1∶100000以上。结论:利用活体实体瘤细胞进行融合能明显提高细胞融合率。 展开更多
关键词 单克隆抗体(MAb)SP2/0细胞 活体骨髓瘤细胞 融合
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抗体固定在尼龙网上用于EIA 被引量:1
9
作者 尹立志 王曦 +3 位作者 缪慧 邢克礼 都红 李元明 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1993年第3期199-202,共4页
本文报道将抗体固定在尼龙网上制作免疫吸附剂用于酶联免疫测定(EIA)。用抗HBsAg作为模型化合物。用硫酸二甲酯,1,6-已二胺和戊二醛共价键将抗HBsAg固定在尼龙网上制作抗体膜,所制得的抗体膜具有机械强度高、抗体结合容量大和空间位阻... 本文报道将抗体固定在尼龙网上制作免疫吸附剂用于酶联免疫测定(EIA)。用抗HBsAg作为模型化合物。用硫酸二甲酯,1,6-已二胺和戊二醛共价键将抗HBsAg固定在尼龙网上制作抗体膜,所制得的抗体膜具有机械强度高、抗体结合容量大和空间位阻小的特点。因抗体在尼龙网上结合牢固,所以可消除在传统的聚苯乙烯板上作EIA时所存在的抗体解吸的现象。用抗体膜进行EIA,其灵敏度优于抗体被动吸附于聚苯乙烯多孔板EIA者。本文介绍的抗体膜由于其多孔性,极适合与电化学气敏电极组装成酶免疫传感器。 展开更多
关键词 尼龙网 抗体膜 过氧化物酶 ELISA
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风疹病毒单克隆抗体的研究
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作者 赵丽 韩世杰 +1 位作者 范桂香 房益兰 《山东医科大学学报》 1991年第4期311-315,共5页
用风疹病毒(RV)Gos-10株免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与Sp2/0细胞融合,用ELISA法筛选分泌RV McAb的杂交瘤细胞6株,经克隆培养后发现其中的1A_9株能稳定分泌高效价特异性McAb,经鉴定为IgG2a,经ELISA检测、抗原吸收试验、中和试验及HI试验... 用风疹病毒(RV)Gos-10株免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与Sp2/0细胞融合,用ELISA法筛选分泌RV McAb的杂交瘤细胞6株,经克隆培养后发现其中的1A_9株能稳定分泌高效价特异性McAb,经鉴定为IgG2a,经ELISA检测、抗原吸收试验、中和试验及HI试验征明该McAb是种特异性的,能与各株RV发生交叉反应,而与其它种病毒不发生反应,证明此McAb对RV抗原有高度特异性与敏感性,可用以制备诊断试剂,实现风疹的早期、快速诊断和基础理论研究。 展开更多
关键词 风疹病毒 单克隆抗体 酶联免疫吸附测定 Sp2/0细胞 纯系 BALBC
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不同方法检测猪O型口蹄疫疫苗抗体效价与攻毒保护相关性研究 被引量:4
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作者 赵建东 项朝荣 +8 位作者 卫陆梅 王路 李静 董振虎 李春贤 卫一新 孙冰洁 孟春萍 付云云 《中国兽药杂志》 2013年第9期8-13,共6页
为评价不同检测方法检测的口蹄疫疫苗抗体效价与免疫保护率的相关性,使用O型液相阻断ELISA、正向间接血凝试验、VP1结构蛋白抗体ELISA三种检测方法对免疫不同类型O型口蹄疫疫苗的60头猪进行血清抗体跟踪测定,免疫21 d后,分别用OZK/93和O... 为评价不同检测方法检测的口蹄疫疫苗抗体效价与免疫保护率的相关性,使用O型液相阻断ELISA、正向间接血凝试验、VP1结构蛋白抗体ELISA三种检测方法对免疫不同类型O型口蹄疫疫苗的60头猪进行血清抗体跟踪测定,免疫21 d后,分别用OZK/93和O/(XJ/10-11/MYA/98)毒株进行攻毒保护实验。数据统计和分析结果显示,O型液相阻断ELISA试验测定的抗体效价与攻毒保护率存在着极显著的正相关性(P<0.01),相关系数为0.75;正向间接血凝试验测定的抗体效价以及VP1结构蛋白抗体ELISA法测定的S/P值与攻毒保护率之间均不存在线性相关关系(P>0.05)。试验表明,O型液相阻断ELISA抗体检测方法可作为田间猪O型口蹄疫疫苗免疫效果的评价方法。 展开更多
关键词 口蹄疫 抗体水平 免疫保护 0型液相阻断ELISA 正向间接血凝试验 VP1结构蛋白抗体ELISA
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分泌人源性抗链球菌溶血素O单克隆抗体人—人杂交瘤细胞株的建立
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作者 张和君 傅家忠 +2 位作者 庄俊英 林伟池 郭仁 《Zoological Research》 SCIE CAS 1985年第2期188-188,共1页
自从淋巴细胞杂交瘤1975年创立以来(Kohler et al.,1975)越来越显示其优越性,(Sikora et al.,1982),从其发展看来,前景广阔,针对恶性肿瘤,白血病和组织移植等提出了崭新的疗法。由于鼠源性单克隆抗体在临床应用上往往引起过敏反应和形... 自从淋巴细胞杂交瘤1975年创立以来(Kohler et al.,1975)越来越显示其优越性,(Sikora et al.,1982),从其发展看来,前景广阔,针对恶性肿瘤,白血病和组织移植等提出了崭新的疗法。由于鼠源性单克隆抗体在临床应用上往往引起过敏反应和形成免疫复合物的危险性,激励着科学家们去开拓人—人杂交瘤,尽管前进的道路上还存在着许多困难,但人们还是不屈不挠地前进。目前,世界上共有三个人—人杂交瘤系统。(1)0lsson和Kaplan等培育的SKO—007人骨髓瘤细胞系统。(2)Croce等培育的GM 1500细胞系统。(3)Clark等的RPMI8226细胞系统。并且都进行了人—人杂交瘤的研究,但是多数杂交瘤阳性率低和分泌抗体量少。国内北京、上海、西安和昆明等都正在开展本项研究。我们从1984年8月,开始人单抗的研究,也碰到许多困难,深深体会到建立一个具有我国特色的人—人杂交瘤系统是十分重要的,现将我们的工作简要报告如下。 展开更多
关键词 链球菌溶血素 O 单克隆抗体 杂交瘤细胞株
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猪口蹄疫○型合成肽疫苗诱导的免疫抗体的监测
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作者 李儒曙 伍时达 +3 位作者 冷和平 赵庆文 游淼 张健騑 《广东畜牧兽医科技》 2012年第4期27-29,共3页
设3组猪群,首免和二免分别注射生理盐水1 mL、猪口蹄疫0型合成肽疫苗1 mL(说明书推荐免疫剂量)及猪口蹄疫0型合成肽疫苗3 mL(说明书推荐免疫剂量3倍量),二免28天后检测猪群的口蹄疫抗体,结果显示3组猪群的抗体合格率分别为33%、78%和10... 设3组猪群,首免和二免分别注射生理盐水1 mL、猪口蹄疫0型合成肽疫苗1 mL(说明书推荐免疫剂量)及猪口蹄疫0型合成肽疫苗3 mL(说明书推荐免疫剂量3倍量),二免28天后检测猪群的口蹄疫抗体,结果显示3组猪群的抗体合格率分别为33%、78%和100%,疫苗诱导的抗体水平达到农业部规定的动物强制免疫标准。 展开更多
关键词 猪口蹄疫0型合成肽疫苗 抗体 监测
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广西壮族自治区四个县0~15岁人群肠道病毒71型中和抗体水平调查 被引量:3
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作者 李燕 祝双利 +11 位作者 刘燕敏 李荣成 殷大鹏 夏伟 李艳萍 萁兆军 王东艳 李晓嫘 严冬梅 王慧玲 许文波 王华庆 《中国疫苗和免疫》 CAS 北大核心 2015年第3期273-277,共5页
目的了解广西壮族自治区(广西)4个县0~15岁人群的肠道病毒71型(Enterovirus Type 71,EV71)中和抗体(Neutralizing Antibody,NA)水平,为制定EV71疫苗免疫程序提供参考。方法选取广西4个县作为研究现场,在每个县选取2个乡,对调查现... 目的了解广西壮族自治区(广西)4个县0~15岁人群的肠道病毒71型(Enterovirus Type 71,EV71)中和抗体(Neutralizing Antibody,NA)水平,为制定EV71疫苗免疫程序提供参考。方法选取广西4个县作为研究现场,在每个县选取2个乡,对调查现场的0~15岁人群采集静脉血标本。结果≤6月龄各月龄组研究对象血清EV71 NA阳性率随年龄的增长而迅速下降;直到9~11月龄仍维持在较低水平(20.0%),≥1岁各年龄组NA阳性率迅速上升,其中5岁组的EV71 NA阳性率最高(87.0%)。0~15岁人群的EV71 NA几何平均滴度(Geometric Mean Titer,GMT)为1∶18.24,新生儿EV71 NA GMT较高(1∶23.12),随着月龄增长,EV71 NA GMT逐渐下降,至5月龄降至最低(1∶5.46),≥1岁各年龄组的NA GMT迅速上升,5岁组最高(1∶95.68)。4个县及不同性别的分年龄组EV71 NA阳性率及GMT与EV71总的NA阳性率及GMT相似。结论 5~6月龄婴儿EV71 NA阳性率及GMT均降至最低水平,为确定EV71疫苗接种起始月龄提供参考。 展开更多
关键词 0~15岁人群 肠道病毒71型 中和抗体
原文传递
六个县0~15岁人群柯萨奇病毒A组16型中和抗体水平调查
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作者 李燕 刘燕敏 +3 位作者 殷大鹏 夏伟 王华庆 梁晓峰 《中国疫苗和免疫》 CAS 2012年第3期217-221,共5页
目的了解六个县0~15岁人群柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus Group A Type16,CVA16)中和抗体(Neutralizing Antibody,NA)水平。方法选取广西壮族自治区和江苏省的3个手足口病(Hand,Foot and MouthDisease,HFMD)高发县和3个HFMD低发县... 目的了解六个县0~15岁人群柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus Group A Type16,CVA16)中和抗体(Neutralizing Antibody,NA)水平。方法选取广西壮族自治区和江苏省的3个手足口病(Hand,Foot and MouthDisease,HFMD)高发县和3个HFMD低发县作为研究现场,在每个县选取一个HFMD高发乡和一个HFMD低发乡,对调查现场的0~15岁人群及新生儿母亲采集静脉血标本,并对他们(或其家长)进行问卷调查。结果 <1岁各月龄组调查对象的CVA16血清NA阳性率随年龄的增长而下降;≥1岁各年龄组NA阳性率逐渐上升,其中6~10岁的CVA16NA阳性率最高。不同年龄、不同县调查对象CVA_(16)NA的阳性率差异均有统计学意义,但男、女性CVA_(16)NA的阳性率差异无统计学意义。0~15岁人群的CVA_(16)NA几何平均滴度(Geometric Mean Titer,GMT)为1∶8.44,<1岁各月龄和1岁的NA GMT均<1∶10,>1岁各年龄组NA的GMT上升,最高至1∶22.97。各县及不同性别的分年龄组NA GMT曲线与总NA的GMT曲线相似。结论六个县调查对象的CVA_(16)NA阳性率及GMT均较低,该六县0~15岁人群有发生CVA_(16)引起的HFMD爆发的风险。 展开更多
关键词 0~15岁人群 柯萨奇病毒A组16型 中和抗体水平
原文传递
单克隆抗体制品中残余SP2/0细胞蛋白含量ELISA检测试剂盒的验证 被引量:1
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作者 陈英 徐燕华 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2010年第2期211-213,共3页
目的对单克隆抗体制品中残余SP2/0细胞蛋白含量ELISA检测试剂盒进行验证。方法对Cygnus Technologies公司制备的SP2/0Host Cell Protein(sHCPs)ELISA试剂盒进行灵敏度、精密性验证及基质干扰试验和样品稀释回收试验,并采用该试剂盒对本... 目的对单克隆抗体制品中残余SP2/0细胞蛋白含量ELISA检测试剂盒进行验证。方法对Cygnus Technologies公司制备的SP2/0Host Cell Protein(sHCPs)ELISA试剂盒进行灵敏度、精密性验证及基质干扰试验和样品稀释回收试验,并采用该试剂盒对本公司制备的10批单抗制品原液及冻干品进行检测。结果标准蛋白含量的对数与相应的光吸收值的对数,在2~200ng/ml范围内呈线性关系;该试剂盒检测限可达0.6ng/ml,定量限可达2ng/ml,灵敏度符合要求;检测低、中、高3个浓度的SP2/0HCPs样品试验内及试验间变异系数分别为15.4%、3.0%、2.1%及12.0%、3.3%、1.5%;样品基质对检测无明显干扰;单抗样品检测不存在Hook效应;检测本公司10批单抗制品原液和冻干品中SP2/0细胞蛋白残留率均小于0.01%。结论该试剂盒灵敏度高,精密性好,可用于单抗制品中残余SP2/0细胞蛋白含量的测定。 展开更多
关键词 单克隆抗体 SP2/0细胞 宿主细胞蛋白 ELISA 验证
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肥胖及2型糖尿病患者脂肪组织视黄醇结合蛋白4 mRNA的表达及调控 被引量:8
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作者 刘晓华 魏丽 +3 位作者 王玲艳 祝超瑜 包玉倩 贾伟平 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第18期1251-1254,共4页
目的 研究肥胖及2型糖尿病患者皮下和腹内脂肪组织视黄醇结合蛋白4(RBP4)mRNA的表达差异,并探讨影响其表达调控的因素.方法 选取2007年1-6月因非代谢性疾病而接受腹部择期手术的正常体重正常糖调节、单纯肥胖、2型糖尿病患者各9例,取... 目的 研究肥胖及2型糖尿病患者皮下和腹内脂肪组织视黄醇结合蛋白4(RBP4)mRNA的表达差异,并探讨影响其表达调控的因素.方法 选取2007年1-6月因非代谢性疾病而接受腹部择期手术的正常体重正常糖调节、单纯肥胖、2型糖尿病患者各9例,取皮下和腹内脂肪组织,用RT-PCR法检测RBP4 mRNA的表达,并在体外对正常体重正常糖调节者腹内脂肪组织分别与一定浓度的胰岛素、地塞米松、棕榈酸、肿瘤坏死因子-α、吡咯列酮共培养,用RT-PCR法检测药物对腹内脂肪组织RBP4 mRNA表达的变化.结果 肥胖和2型糖尿病患者腹内脂肪RBP4 mRNA的表达均显著高于正常体重正常糖调节者(分别为2.10±1.84和1.54±0.46比0.75±0.28,P<0.01和P<0.05),并明显高于相应的皮下脂肪组织;3组人群间皮下脂肪组织RBP4 mRNA的表达差异无统计学意义(1.05±0.15比0.99±0.14比1.13±0.07,P>0.05);药物胰岛素、地塞米松、吡咯列酮、棕榈酸能显著上调RBP4 mRNA的表达,与对照组相比,分别上升了2.13、0.84、2.04、4.88倍;肿瘤坏死因子-α显著下调RBP4 mRNA的表达,较对照组下降了38%.结论 肥胖和2型糖尿病患者腹内脂肪组织RBP4 mRNA的表达显著上升,正常体重正常糖调节者腹内脂肪组织RBP4 mRNA的表达受胰岛素、地塞米松等多种参与糖脂代谢及胰岛素抵抗因素的调控. 展开更多
关键词 脂肪组织 胰岛素抗体 视黄醇结合蛋白4
原文传递
甲型副伤寒沙门菌菌体抗原单克隆抗体的制备及其初步应用
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作者 梁昊宇 董思国 +1 位作者 曾明 王斌 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2017年第6期628-632,共5页
目的制备甲型副伤寒沙门菌菌体抗原单克隆抗体,并对其进行鉴定及初步应用。方法用甲醛灭活的甲型副伤寒沙门菌免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,筛选出稳定分泌甲型副伤寒沙门菌特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株,对克隆纯... 目的制备甲型副伤寒沙门菌菌体抗原单克隆抗体,并对其进行鉴定及初步应用。方法用甲醛灭活的甲型副伤寒沙门菌免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,筛选出稳定分泌甲型副伤寒沙门菌特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株,对克隆纯化后的阳性细胞扩大培养后,免疫BALB/c小鼠,收获腹水,间接ELISA法检测抗体效价,并进行Ig类和亚类鉴定;腹水经辛酸-硫酸铵盐析法纯化后,采用间接ELISA法、玻片凝集试验、SDSPAGE法、免疫扩散试验进行检测。将纯化后的2株单克隆抗体用于双抗体夹心ELISA法的建立,并用自制配对抗体检测甲型副伤寒患者血浆、乙型副伤寒患者血浆、伤寒患者血浆和正常人血浆。结果共筛选出2株持续分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为1H4和2A9,腹水抗体效价为1∶10~7和1∶10~6,分别为IgG_1和Ig G_3亚类,轻链均为κ型。纯化后的单克隆抗体1H4、2A9效价分别为1∶10~7和1∶10~3,1H4纯度大于85%,2A9纯度小于60%。2株单克隆抗体与甲型副伤寒沙门菌50503、50973可产生凝集反应,与伤寒沙门菌50096不产生反应;1H4在稀释度为1∶8时可与甲型副伤寒沙门菌菌体特异多糖(organism specific polysaccharide,OSP)产生凝集反应,而2A9在每个稀释度与OSP均不发生反应。将1H4和2A9用于双抗体夹心ELISA检测法建立,确定1H4/HRP-2A9的组合为最佳配对,用该配对抗体检测阳性样本检出率为100%,正常人血浆样本检出率为0。结论获得2株甲型副伤寒沙门菌菌体抗原单克隆抗体,可用于甲型副伤寒沙门菌的快速鉴定。 展开更多
关键词 甲型副伤寒沙门菌 单克隆抗体 Sp2/0骨髓瘤细胞 脾细胞
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抗人T淋巴细胞CD4人-鼠嵌合抗体的真核表达
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作者 张雪 张爱华 +3 位作者 闭兰 赵亚杰 孙可芳 方志正 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2009年第10期945-948,952,共5页
目的在小鼠骨髓瘤细胞SP2/0中表达抗人T淋巴细胞CD4人-鼠嵌合抗体。方法真核表达质粒PAG4622+CD4VL和PAH4604+CD4VH经酶切和序列测定后,采用电穿孔转染技术将二者共转染SP2/0细胞,经组胺醇和霉酚酸联合筛选阳性克隆,通过ELISA、流式细... 目的在小鼠骨髓瘤细胞SP2/0中表达抗人T淋巴细胞CD4人-鼠嵌合抗体。方法真核表达质粒PAG4622+CD4VL和PAH4604+CD4VH经酶切和序列测定后,采用电穿孔转染技术将二者共转染SP2/0细胞,经组胺醇和霉酚酸联合筛选阳性克隆,通过ELISA、流式细胞术、RT-PCR和DNA测序的方法进行初步鉴定。结果真核表达质粒经酶切和测序鉴定证明构建正确。获得2株分泌抗人T淋巴细胞CD4人-鼠嵌合抗体的阳性SP2/0细胞克隆0925CASP2/0和1107CASP2/0,嵌合抗体表达量为0.5~2ng/ml。结论已成功地在SP2/0细胞中表达了抗人T淋巴细胞CD4人-鼠嵌合抗体,为该抗体在其他真核细胞中的高效表达及临床应用奠定了基础。 展开更多
关键词 CD4 嵌合抗体 电穿孔 SP2/0细胞 真核表达
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