隔药饼灸对环磷酰胺诱导免疫抑制兔共刺激分子CTLA-4、4-1BB、CD28的影响

目的探讨隔药饼灸对环磷酰胺诱导免疫抑制兔共刺激分子细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)、4-1BB、CD28的影响。方法选择大耳白兔32只,随机分为空白组、模型组、艾条灸组和隔药饼灸组,每组8只。模型组、艾条灸组和隔药饼灸组予环磷酰胺诱导免疫抑制模型。模型制备成功次日,艾条灸组和隔药饼灸组分别予艾条灸和隔药饼灸,隔日1次,共10次。空白组和模型组不予艾灸。艾条灸组和隔药饼灸组末次干预次日,空白组和模型组同时间,采集腹腔静脉血,离心留取血清,采用ELISA法检测血清CTLA-4、4-1BB、CD28;腹腔静脉取血后,摘取脾脏和肝脏,免疫组化法检测脾脏和肝脏组织CTLA-4、4-1BB蛋白表达。结果模型组血清CTLA-4、CD28水平均高于空白组,血清4-1BB水平低于空白组(P均<0.05);与模型组比较,艾条灸组和隔药饼灸组血清CTLA-4、CD28水平均降低,血清4-1BB水平均升高(P均<0.05);与艾条灸组比较,隔药饼灸组血清CTLA-4、CD28水平均降低,血清4-1BB水平升高(P均<0.05)。模型组脾脏和肝脏组织CTLA-4阳性表达均高于空白组,4-1BB阳性表达均低于空白组(P均<0.05)。与模型组比较,艾条灸组脾脏和肝脏组织CTLA-4阳性表达均降低(P均<0.05),肝脏组织4-1BB阳性表达升高(P<0.05),而脾脏组织4-1BB阳性表达升高不明显(P>0.05);隔药饼灸组脾脏和肝脏组织CTLA-4阳性表达均降低(P均<0.05),4-1BB阳性表达均升高(P均<0.05)。艾条灸组与隔药饼灸组脾脏和肝脏组织CTLA-4、4-1BB阳性表达比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论隔药饼灸能够通过调节共刺激分子CTLA-4、4-1BB、CD28而改善环磷酰胺诱导免疫抑制兔的免疫功能,其效果优于艾条灸。

人外周血CD8^+T细胞CD28、CD56及CD57表达水平的老年性改变

目的 :通过对健康老年人与青年人外周血CD8+T细胞CD2 8、CD5 6及CD5 7表达水平的比较性研究 ,探讨免疫衰老的细胞学机制。方法 :采用三色免疫荧光标记流式细胞术分析青年组 ( 2 0 - 35岁 )与老年组 ( 6 0 - 75岁 )外周血CD8+CD2 8+、CD8+CD5 6 +及CD8+CD5 7+T细胞水平。结果 :老年组外周血CD8+CD2 8+T细胞明显低于青年组 ,阳性百分率分别为 34 0 7± 5 2 9和 49 84± 7 43(P <0 0 5 ) ;而老年组CD8+CD5 6 +T细胞及CD8+CD5 7+T细胞均明显高于青年组 ,前者阳性百分率分别为 6 6 0± 2 40和 2 10± 0 35 ,后者阳性百分率分别为 41 82± 6 0 1和2 2 89± 2 80 (P <0 0 5 )。结论 :老年人CD8+T细胞CD2 8、CD5 6及CD5 7的表达率均随年龄增长有明显改变 ;CD2 8表达下降可能是引起免疫系统功能降低的重要原因 ,而CD5 6、CD5 7表达水平的增加则可能是机体对细胞免疫功能下降的一种代偿性适应。

老年肺癌患者血清T淋巴细胞亚群CD28的检测及临床意义

目的:探讨老年肺癌患者淋巴细胞免疫功能状态、临床意义及与肺癌病理类型、临床分期的关系。方法:采用三色免疫荧光标记流式细胞术检测35名正常老年人及32例老年肺癌患者外周血的总T淋巴细胞(CD3+)、辅助/诱导T淋巴细胞(CD4+)、抑制/细胞毒T淋巴细胞(CD8+)、细胞毒T细胞(CD8+CD28+)和抑制T细胞(CD8+CD28-)。结果:老年肺癌组CD4+Tz细胞(t=2.01,P<0.05)和CD3+、CD8+T细胞及CD8+CD28+T细胞亚群明显低于老年正常对照组,t=2.01,P<0.01;CD8+CD28-T细胞亚群明显高于老年正常对照组,t=2.01,P<0.01;老年肺癌患者中,T淋巴细胞及亚群CD28的表达在TNM临床分期及病理类型间差异均无统计学意义,t=2.11,P值均>0.05。结论:老年肺癌患者存在明显的T淋巴细胞亚群免疫功能紊乱,抗肿瘤能力明显下降,并导致病情恶化更严重,且与病理类型及临床分期无关。

急性脑梗死患者外周血CD4CD25 T细胞和CD4CD28^- T细胞的变化

目的探讨急性脑梗死患者外周血CD4CD25T细胞和CD4CD28-T细胞亚群的变化及意义。方法选择急性脑梗死患者22例(脑梗死组),另选取健康体检者18例(对照组);均采用流式细胞仪检测外周血CD4CD25T细胞和CD4CD28-T细胞占CD4T细胞比例。结果脑梗死组外周血CD4CD25T细胞/CD4T细胞比例明显低于对照组[(41.14±9.92)%vs(49.01±12.19)%,P<0.05],而CD4CD28-T细胞/CD4T细胞比例明显高于对照组[(19.93±15.60)%vs(11.96±8.60)%,P<0.05]。结论急性脑梗死患者外周血CD4CD25T细胞比例减少,而CD4CD28-T细胞升高,两者共同作用,可能在脑梗死发生、发展中起重要作用。调节T淋巴细胞亚群可能是脑梗死的潜在治疗靶点。

子痫前期患者外周血淋巴细胞CD28/CTLA-4的表达水平及意义

目的:探讨子痫前期外周血淋巴细胞CD28/CTLA-4的表达水平与子痫前期发病的相关性。方法:选择住院确诊的子痫前期孕妇35例为实验组,以30例正常妊娠晚期孕妇为对照组,应用流式细胞术检测两组外周血CD28和CTLA-4在CD3+T细胞上的表达水平并比较。结果:实验组孕妇外周血CD28的表达水平较对照组差异无统计学意义(P>0.05);CTLA-4表达水平显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);实验组中外周血CD28/CTLA-4值较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:子痫前期患者外周血CD28/CTLA-4表达异常,从而使T细胞亚群分类异常,免疫调节功能紊乱,免疫耐受失衡,导致子痫前期的发生。

老年人外周血淋巴细胞的凋亡及CD28和CD95的表达

目的通过对健康老年人与健康成年人外周血淋巴细胞的凋亡率及CD28和CD95表达水平的比较性研究,观察衰老对淋巴细胞凋亡的影响,以及CD28和CD95与淋巴细胞凋亡的关系。方法将实验对象分为2组:成年组(25～59岁)与老年组(60～90岁)各20例,采用免疫荧光标记流式细胞术检测外周血淋巴细胞CD28和CD95的水平;Annexin-V-FITC/PI双染色流式细胞术测定地塞米松诱导的淋巴细胞凋亡。结果老年组:淋巴细胞凋亡率〔(14.90±4.12)%〕显著高于成年组〔(8.12±3.12)%〕;CD28+CD95-〔(8.80±4.86)%〕及CD28+〔(36.31±10.38)%〕均明显低于成年组〔(23.09±3.48)%、(52.29±4.90)%〕,而CD28-CD95+〔(53.23±8.28)%〕、CD95+〔(80.25±7.19)%〕及CD28-〔(63.69±10.38)%〕明显高于成年组〔(33.58±4.72)%、(63.18±4.12)%、(47.71±4.90)%〕;CD28+CD95+在两组间差异无统计学意义。淋巴细胞凋亡率与CD28(CD28+)呈负相关,与CD95(CD95+)呈正相关。结论老年人淋巴细胞凋亡率上升;CD28+表达下降,CD28-、CD95+表达上升;淋巴细胞的凋亡率与CD28+、CD95+有相关性。提示老化导致老年人淋巴细胞凋亡增加,CD28和CD95的变化与淋巴细胞凋亡密切相关。

共刺激分子CD28和B7在关节炎发病中的作用

目的：探讨Ｂ７：ＣＤ２８共刺激信号在关节炎发病机制中的作用。方法：经牛Ⅱ型胶原（ＢⅡＣ）诱导ＳＤ大鼠建立关节炎动物模型；分析抗Ｂ７－１和抗Ｂ７－２抗体对关节炎大鼠临床症状和特异性免疫反应的影响。结果：抗Ｂ７－１抗体可阻止ＳＤ大鼠发生胶原诱发性关节炎，降低大鼠对ＢⅡＣ的体液免疫反应。结论：Ｂ７：ＣＤ２８共刺激信号在诱发 Ｔ细胞介导的自身免疫疾病中起作用，抗Ｂ７－１抗体具有潜在的治疗作用。

早发型重度子痫前期分娩前后CD28/CTLA-4的相关研究

目的:探讨白细胞分化抗原28/细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CD28/CTLA-4)与早发型重度子痫前期发病的关系。方法:采用流式细胞技术分别测定30例早发型重度子痫前期患者分娩前后的CD28、CTLA-4、CD28/CTLA-4表达水平,同时测量各组受试者血压及肝肾功能。结果:早发型重度子痫前期患者分娩前CD3+CD4+CTLA-4+、CD3+CD8+CTLA-4+高于分娩后,CD3+CD4+CD28+/CD3+CD4+CTLA-4+、CD3+CD8+CD28+/CD3+CD8+CTLA-4+低于分娩后,差异有统计学意义(均P<0.05)。CD3+CD4+CD28+/CD3+CD4+CTLA-4+、CD3+CD8+CD28/CD3+CD8+CTLA-4+两者无直线相关性(r=-0.037,P=0.844)。结论:早发型重度子痫前期患者分娩后较分娩前CTLA-4的表达下降,CD28/CTLA-4上升,可能提示CD28/CTLA-4免疫偏移与子痫前期的发生有关。

CD28在多发性硬化患者CD8^+淋巴细胞的表达

目的 探讨CD2 8在多发性硬化 (MS)患者CD8+ 淋巴细胞的表达水平。方法 流式细胞仪测定 16例复发期MS患者和 2 0例对照组外周血淋巴细胞CD2 8+ 、CD8+ CD2 8- 和CD8+ CD2 8+ 的百分率。结果 复发期MS患者淋巴细胞CD8+CD2 8- 百分率低于对照组 ,CD2 8+ 和CD8+ CD2 8+ 的百分率与对照组无明显差异 ;甲基强的松龙治疗对CD2 8+ 、CD8+ CD2 8- 和CD8+ CD2 8+ 的百分率无影响。结论 参与MS的发病的CD8细胞是CD8+ CD2 8-

多发性骨髓瘤患者T细胞亚群CD28表达及其临床意义

目的通过检测多发性骨髓瘤(MM)患者T细胞亚群CD28表达,探讨其T细胞免疫功能状态及临床意义。方法采用流式细胞术检测38例MM患者及20例健康对照外周血T细胞亚群CD28表达。结果①Ⅲ期MM患者CD4+T细胞较对照组及Ⅰ、Ⅱ期患者降低,为(29.1±7.7)%vs(37.2±5.9)%(、36.7±7.6)%、(36.4±6.4)%(P<0.05或<0.01);Ⅱ、Ⅲ期患者CD8+T细胞均高于对照组,为(38.0±6.4)%、(37.1±9.7)%vs(31.8±5.4)%(均P<0.05);Ⅲ期患者CD4+/CD8+比值较对照组及Ⅰ期患者降低,为0.8±0.3 vs 1.2±0.3、1.2±0.3(P<0.05或<0.01);CD4+CD28+、CD8+CD28+细胞在Ⅲ期患者均显著低于对照组及Ⅰ、Ⅱ期患者,分别为(25.0±8.2)%vs(35.3±5.6)%、(35.1±8.0)%(、33.8±5.7)%;(10.8±4.1)%vs(17.0±4.3)%、(18.3±4.8)%(、18.2±4.6)%(均P<0.01)。②进展期MM患者CD4+T细胞及CD4+/CD8+比值均低于对照组,分别为(32.0±8.3)%vs(37.2±5.9)%;0.9±0.3 vs 1.2±0.3(P<0.05或<0.01);CD8+T细胞比对照组增高,为(36.8±8.6)%vs(31.8±5.4)%(P<0.05),而其CD4+CD28+、CD8+CD28+细胞在进展期MM患者均低于对照组和稳定期,分别为(28.3±8.6)%vs(35.3±5.6)%(、35.6±7.4)%;(13.1±4.9)%vs(17.0±4.3)%(、20.5±5.9)%(P<0.05或<0.01)。③CD4+CD28+细胞百分率与β2微球蛋白水平呈负相关(r=-0.401,P<0.05)。结论MM患者存在T细胞亚群CD28表达缺陷,并与临床分期、病情进展及预后相关。

共刺激分子CD28和B7在胃肠道肿瘤的表达

目的检测胃肠道肿瘤患者外周血中CD28+T细胞数量及原代细胞表面B7表达水平,以探讨胃肠道肿瘤患者共刺激通路是否异常。方法采用流式细胞术检测胃肠道肿瘤患者外周血中CD28+T细胞与胃肠道肿瘤患者原代细胞B7分子表达,并与胃肠道良性疾病进行比较。结果胃肠道肿瘤患者CD28+T细胞数明显低于对照组(P<0.01);其原代细胞表面B7-1、B7-2表达水平低于对照组(P<0.01)。结论胃肠道肿瘤患者外周血T细胞低表达CD28分子,胃肠道肿瘤细胞低表达B7分子,从而影响B7-CD28共刺激通路,使T细胞不能有效地清除肿瘤。

共刺激分子CD28、CD137在喉癌患者T淋巴细胞中的表达及其与细胞免疫功能失调的关系

目的探讨共刺激分子CD28、CD137与喉癌患者细胞免疫功能状况的关系。方法应用梯度离心法分离并纯化外周血和肿瘤浸润淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocyte,TIL),流式细胞术检测喉癌患者外周血T细胞CD8+、CD8+CD28+、CD8+CD28-、CD28+细胞亚群分布和双香豆素(phytohemagglutinin,PHA)刺激前后患者外周血T细胞及TIL中CD137的表达。结果喉癌患者CD8+T细胞比率为(32.11±5.07)%,CD8+CD28-T细胞比率为(21.03±5.69)%,均明显高于正常对照组(均P<0.01);CD28+T细胞比率为(45.53±4.51)%,CD8+CD28+T细胞比率为(12.70±3.41)%,均明显低于正常对照组(P均<0.01)。CD137+T细胞活化增殖能力与CD28的阳性表达呈明显的正相关,喉癌患者外周血T细胞和TIL在未受PHA刺激时CD137+T细胞比率分别为(1.90±0.71)%和(3.52±1.64)%,明显高于正常对照组(P均<0.01)。但经PHA刺激48小时后,外周血和TIL中CD137+-48h/CD137+-0h值为分11.48±4.03和10.39±3.02,均明显低于正常对照组,P均<0.01。结论共刺激分子CD28在CD8+T细胞亚群中的表达失调使免疫效应性CD137+T细胞活化增殖能力下降,是引起喉癌患者细胞免疫功能紊乱的重要原因之一。

高碳酸因素对大鼠活化T淋巴细胞CD28/B7和CD2/CD48(LFA-3)信号转导通路的影响

目的：探讨高碳酸因素对大鼠活化T淋巴细胞CD28／B7和CD2／CD48（LFA－3）信号转导通路的影响。方法采集体重200～250 g的健康Wistar大鼠外周静脉血样，分离T淋巴细胞，培养于含有植物血凝素（ PHA）的无菌16孔培养板中。采用随机数字表法，将其分为3组：对照组常规培养；高碳酸组和缓冲液组于O2－N2－CO2混合气体培养箱中培养，维持培养液PaCO280～100 mmHg；缓冲液组用NaH－CO3缓冲液调节，维持培养液pH值7．2～7．4。分别于给予植物血凝素前和给予植物血凝素细胞培养1、2、4 h（ T0～3）时，随机取4孔，收集细胞和培养液，采用流式细胞仪测定T淋巴细胞坏死率、凋亡率、CD28和CD2阳性率；采用ELISA法测定培养液IL－2、IFN－γ、IL－4和IL－10的浓度。结果3组T细胞T0～3时坏死率和凋亡率比较差异无统计学意义（P＞0．05）。与对照组比较，高碳酸组和缓冲液组T1～3时培养液IL－2和FN－γ的浓度降低，IL－4和IL－10的浓度升高，T2，3时T淋巴细胞CD28和CD2阳性率降低（P＜0．05或P＜0．01）；与高碳酸组比较，缓冲液组T1～3时培养液IL－2和IFN－γ的浓度升高，IL－4和IL－10的浓度降低（ P＜0．05或P＜0．01），各时点T淋巴细胞CD28和CD2阳性率差异无统计学意义（ P＞0．05）。结论高碳酸因素可能通过抑制CD28／B7和CD2／CD48（LFA－3）信号转导通路，减少T淋巴细胞的活化，这是CO2直接作用和其酸性环境共同完成的。

对一个CDR区发生突变的改形抗CD28重链单域抗体的研究

在构建改形抗CD2 8重链单域抗体时 ,得到一个具有较高免疫学活性的改形抗CD2 8重链单域抗体基因序列。其推导氨基酸序列与改形构建时所选的人源抗体的FRs同源性最高 ;其推导氨基酸序列与鼠源抗CD2 8单克隆抗体重链可变区氨基酸序列比较发现 ,该改形抗体在CDR2区 53位缺失Ala氨基酸残基 ;而在 65a位上插入一个Arg氨基酸残基。在CDR3区缺少Asp95,Lys96,Gly97,Tyr98氨基酸残基。在FR3区缺少Lys82a ,Ser82b ,Leu82c氨基酸残基。由于该序列发生的突变较大 ,作者进一步对其进行了研究。该改形抗CD2 8VH 单域抗体基因与人c myc及人IgG3’CL绞链区基因在大肠杆菌中融合表达。融合表达包涵体经复性 ,纯化处理后 ,仍具有较高与人CD2 8分子结合活性。

CD28超竞争单抗对大鼠原位气管移植术后早期免疫炎性损伤的影响

目的:研究大鼠原位气管移植术后应用CD28超竞争单抗对在体扩增CD4+CD25+FoxP3+调节性T细胞的效果及对移植气管早期免疫排斥炎性反应的影响。方法:采用大鼠同种异体原位气管移植模型,分2组。治疗组受体移植当天经腹腔注射CD28超竞争单抗JJ316(0.5 mg);对照组注射同型抗体mIgG(0.5 mg)。于术后第5天采用流式细胞仪检测颈部引流淋巴结、脾及外周血单个核细胞中CD4+CD25+FoxP3+T细胞的比率;移植气管进行病理形态学检查。结果:CD28超竞争单抗治疗组较同型抗体mIgG对照组气管闭塞程度、炎症反应细胞浸润及呼吸道上皮损伤情况明显减轻;外周血、脾脏及颈部淋巴结中CD4+CD25+FoxP3+T细胞的比率[(16.9±4.2)%、(14.8±3.6)%、(5.8±1.2)%]高于同型抗体mIgG对照组[(2.8±1.4)%、(3.3±1.3)%、(2.9±0.9)%,P<0.05]。结论:大鼠原位气管移植后在体应用CD28超竞争单抗可减轻术后早期的免疫排斥损伤。

靶向性肿瘤相关抗原TAG-72的scFv-CD28融合基因的真核表达载体的构建

目的 构建含抗肿瘤相关抗原TAG 72单链抗体及CD2 8胞内区及跨膜区融合基因的哺乳细胞表达载体 ,为制备消化道肿瘤靶向性嵌合锚定T细胞 ,并探讨其对消化道肿瘤的杀伤活性。方法 应用PCR法 ,将抗TAG 72单链抗体 (singlechainvariablefragment ,scFv)克隆入哺乳细胞表达载体pcDNA3 .0 ,在 5′端及 3′端分别引入相应酶切位点 ;用RT PCR法从正常人外周血T细胞克隆CD2 8胞内区及跨膜区的cDNA ,然后将其克隆于scFv的下游 ,并在 5′端及 3′端引入相应的酶切位点。结果 抗TAG 72scFvcDNA片段为 72 9bp ,与已知的序列相符 ;CD2 8胞内区及跨膜区的cDNA片段为 2 40bp ,与Genebank公布的序列一致。重组的表达载体经酶切琼脂糖电泳测序加以证实。结论 完成了抗肿瘤相关抗原TAG 72scFv及CD2 8胞内区及跨膜区融合基因scFv CD2 8 pcDNA3 .0的构建 ,为制备消化道肿瘤靶向性嵌合锚定T细胞奠定了实验基础。

SLE患者Th1/Th2平衡状态及与外周血淋巴细胞CD28及CTLA-4分子表达的关系

目的:了解SLE患者Th1/Th2平衡状态以及共刺激分子CD28/CTLA-4与Th1/Th2平衡状态的关系。方法:研究对象为18例SLE患者(活跃期12例、缓解期6例)。对照组14例,为健康体检者。外周血单个核细胞(PBMCs)经梯度密度离心法分离后置于含PMA(5μg/L)及ionomycin(500μg/L)培养液中培养72 h。采用ELISA方法检测培养的PBMCs上清液中IFN-γ及IL-10的含量。应用流式细胞技术检测培养的淋巴细胞CD28及CTLA-4分子的表达。结果:活跃期SLE患者培养的PBMCs分泌IL-10的量(351.29 ng/L±153.31 ng/L)较对照组(254.48 ng/L±120.69 ng/L)有一定程度的升高,但差异无显著(P>0.05),IFN-γ的分泌量(25.76 ng/L±16.09 ng/L)明显低于对照组(50.71 ng/L±27.92 ng/L,P<0.05),IL-10/IFN-γ比值(18.74±13.77)明显高于对照组(6.66±4.95,P<0.05)。培养前、后SLE患者CD3+及CD8+T细胞CD28分子表达量与对照组比较均无显著差异。培养前活跃期SLE患者CD3+T细胞CTLA-4分子表达量(0.79%+0.37%)较对照组(1.31%+0.61%)明显降低(P<0.05)。培养后SLE患者CD3+T细胞及CD8+T细胞CTLA-4分子表达量仍低于对照组,但差异无显著(P>0.05)。活跃期SLE患者培养的PBMCs中CD3+T细胞CTLA-4分子的表达量与上清液中IFN-γ含量呈明显的直线正相关关系(r=0.681,P<0.05)、与上清液中IL-10及IL-10/IFN-γ比值呈明显的直线负相关关系(r=-0.624,P<0.05;r=-0.738,P<0.01)。结论:SLE患者存在Th1/Th2平衡向Th2方向偏移,即Th2优势状态。CTLA-4分子可能通过抑制CD28的信号转导参与Th2优势状态的形成。

免疫介导再生障碍性贫血小鼠骨髓T细胞表面CD28、CTLA4水平检测及其意义

目的研究免疫介导再障小鼠骨髓T细胞CD28、CTLA4的表达及其意义。方法建立免疫介导再障小鼠模型,取再障和正常组小鼠骨髓单个核细胞(BMNC),在终浓度为15μg/mL植物血凝素(PHA)条件下培养,于0h和48h分别用双色免疫荧光标记流式细胞术对T细胞CD28、CTLA4的表达进行分析。结果PHA刺激培养48h后正常组和再障组T细胞CD28、CT-LA4的表达较刺激前均明显升高(P<0.01);而且再障组刺激培养前后T细胞CD28的表达均显著高于同期正常组(P<0.01),但CTLA4的表达与同期正常组相比虽略有升高,但差异无显著性(P>0.05)。结论再障T细胞激活及其激活潜能增强,免疫分子CD28、CTLA4在骨髓中的表达异常可能参与了再障T细胞的免疫功能紊乱。

共刺激分子CD28单克隆抗体制备的新策略

目的发展一种制备抗人ＣＤ２８单克隆抗体的新方法。方法构建编码人ＣＤ２８基因的逆转录病毒表达系统，感染 ＢＡＬＢ／ｃ小鼠骨髓瘤细胞ＮＳ－ｌ，使其细胞膜表达ＣＤ２８抗原并用于免疫小鼠，制备单克隆抗体。结果获得分泌抗人 ＣＤ２８单克隆抗体的杂交瘤细胞株，命名为Ｅ６６－３Ｓ，ＩｇＧ亚类鉴定为ＩｇＧ１。该株单抗能够特异性识别ＣＤ２８阳性的Ｔ细 胞，并完全阻断标准ＣＤ２８抗体与细胞表面ＣＤ２８抗原结合。在亚剂量分裂原的共刺激下，具有促进Ｔ淋巴细胞活化和 增殖作用。结论Ｅ６６－３Ｓ具有高度特异性和共刺激活性，为临床免疫治疗奠定了基础，同时，也为进一步制备其它膜抗 原的单克隆抗体提供了一种新途径．

CD28噬菌体展示载体的构建及鉴定

目的:构建CD28分子胞外区噬菌体展示载体,并对其展示的CD28抗原性进行检测。方法:采用RT-PCR方法扩增CD28胞外区,将其重组于噬菌粒载体pComb3HSS,构建的重组载体与辅助噬菌体VCSM13共转染受体菌,使CD28胞外区展示在噬菌体表面。用ELISA和流式细胞仪检测展示在噬菌体上CD28的抗原性。结果:成功构建了CD28的重组噬菌体展示载体pComb3HSS-CD28。噬菌体展示的CD28可与抗CD28抗体结合,也可与JurkatT细胞表面的CD28竞争性结合抗CD28的抗体。结论:噬菌体展示的CD28具有抗原性。